低氧誘導因子

低氧誘導因子（HIF-1）及相關因子在缺血性卒中的作用摘要：低氧是腦血管疾病發(fā)病過程中一個重要的病理生理因素，尤其在缺血性卒中過程中起著非常重要的作用。低氧是在卒中過程中低氧應答時基因表達和恢復內環(huán)境平衡的調節(jié)中心。低氧誘導因子（HIF-1）對缺血壞死后新生血管的形成和低氧誘導的細胞凋亡過程都是非常關鍵的因素。調控低氧誘導因子（HIF-1）水平將為缺血性疾病的治療開辟新的途徑。關鍵詞：低氧低氧誘導因子（HIF-1）卒中Abstract:lowoxygeniscerebrovasculardiseaseprocessisanimportantpathophysiologicalfactors,especiallyintheprocessofischemicstrokeplaysaveryimportantrole.Intheprocessoflowoxygenislowoxygenwhenansweringstrokegeneexpressionandrestorethebalanceinenvironmentalregulationcenter.Hypoxia-induciblefactor（HIF-1）forischemiaaftertheformationofnewbloodvesselsnecrosiswithlowoxygenapoptosisinducedprocessisverycrucialfactors.ControlHIF（HIF-1）levelforthetreatmentofischemicdiseaseswillopenanewway.Keywords:lowoxygenHIF（HIF-1）stroke1992年semenza在人的HEP3B細胞株的核提取物中發(fā)現(xiàn)一種蛋白質，這種蛋白能特異性地結合于紅細胞生成物（EPO）基因增強子的寡核苷酸序列，這種蛋白即被命名為低氧誘導因子（HIF-1），隨著對其研究的不斷深入，在實驗中發(fā)現(xiàn)其與缺血/低氧狀態(tài)下機體的各種應答機制關系密切。【1】但目前由于受實驗條件等各種原因的限制，低氧誘導因子（HIF-1）在缺血性腦血管卒中的研究中還處于起步階段。本文即對其和其他相關因子在缺血性腦血管卒中的發(fā)病機制中的作用作一概括總結。低氧誘導因子（HIF-1）的結構基礎與低氧應答的相關機制HIF-1的結構HIF-1是由一個120KD的a亞單位和一個91-94KD的8亞單位構成，特點是一個異構二聚體，兩個亞單位均為堿性螺旋-環(huán)-螺旋蛋白，且含有PAS結構域【2】，屬于bHLH-PAS超家族的成員。其中HIF-1a是HIF-1的特異性蛋白，HIF-18是ARNT的基因產物，HIF-1的活性分以下幾個層次:HIF-1mRNA表達水平調節(jié)，蛋白表達水平調節(jié)，HIF-1的二聚化，以及DNA結合活性調節(jié)，HIF-1a的轉錄活性調節(jié)。常氧下HIF-1無DNA結合活性，但低氧可誘導HIF-1a蛋白水平和HIF-1DNA結合活性的增加，但HIF-18不受低氧誘導。HIF-1活性的調控HIF-1和HIF-1a是受細胞氧濃度的精確調節(jié)，HIF-1a是HIF-1的活性亞基，又是氧調節(jié)亞基。在非低氧條件下HIF-1a被泛素-蛋白酶體所降解，而低氧可使HIF-1a迅速積累，然后與HIF-18結合，形成二聚體【3,4】。HIF-18的蛋白表達是非氧依賴性的，可以在細胞內持續(xù)表達。此外HIF-1的活性還受多種因子的調節(jié)，如白細胞介素18，腫瘤壞死因子（TNF）,NO等因子的調節(jié)。Bergeron等通過對新生大鼠腦缺氧預處理3h發(fā)現(xiàn)，缺氧預處理可明顯提高HIF-1a和HIF-18的表達水平，從而保護新生大鼠腦組織免受缺血/缺氧損傷【】，提示這種腦保護的機制可能是通過缺氧處理后導致腦組織HIF-1表達增高而實現(xiàn)。Ran等在成年大鼠持續(xù)性腦局灶缺血前24h給予正常壓力缺氧3h,可迅速提高HIF的含量及其靶基因EPO、血管內皮細胞生長因子（vascularendothelialgrowthfactors,VEGF）、誘生型一氧化氮合酶（induciblenitriosynthesizeenzyme,iNOS）、糖酵解酶的mRNA水平;持續(xù)6h缺氧,24h后可上調EPO和VEGF在蛋白水平的表達【】。1.3靶基因及其生物學效應HIF-1可與含有低氧反應元件和順式作用轉錄調節(jié)序列的靶基因結合，從而激活靶基因的轉錄。迄今發(fā)現(xiàn)HIF-1的靶基因有幾十個，可以誘導多種酶的表達，每種酶分別在器官、組織、細胞水平的低氧適應反應過程中起重要作用：如EPO刺激紅細胞再生以提高機體血液攜氧能力；轉鐵蛋白為血紅素合成提供鐵原料；VEGF、FLT-1、ANGII等影響血管新生。iNOS、血紅素氧合酶(HO1)用于合成NO和CO,從而影響血管緊張度或參與缺血預適應第二窗口期的組織保護作用；Clutl、Glut3、LDH-A、醛縮酶、烯醇化酶、胰島素樣生長因子結合蛋白3(IGFBP3)等多種酶可促進糖酵解從而增加ATP產量；凋亡前基因NiP3【5】影響細胞凋亡因子P53；銅藍蛋白參與應急炎性反應等。1.4低氧誘導因子(HIF-1a)與腦缺氧損傷大腦對低氧十分敏感，任何氧濃度降低的情況均可能誘導HIF-1的快速大量表達，HIF-1a神經元的出現(xiàn)在時間上要早于神經元形態(tài)改變。急性缺氧后4小時開始出現(xiàn)HIF-a的表達，8小時后逐漸減少，24小時后不能檢測到。慢性缺養(yǎng)狀態(tài)下，3?4周后出現(xiàn)大量HIF-1a缺血再灌注陽性的神經元。在大鼠短暫性全腦缺血模型中，用免疫印跡(Westernblot)法和免疫細化學分析方法監(jiān)測發(fā)現(xiàn)，缺血 15分鐘后，大腦皮質和海馬有HIF-1mRNA和VEGFmRNA在同一神經元的表達，在4?72小時再灌注期間持續(xù)表達【6】。在線栓大腦中動脈(multi-conjugateadaptiveoptics，MCAO)局灶腦缺血模型中發(fā)現(xiàn)HIF-1在梗死邊緣和扣帶區(qū)皮質表達，其靶基因也在此區(qū)域表達，包括葡萄糖轉運體蛋白1(glucosetransporterin-1，GLUT-1)、乳酸脫氫酶(1actatedehydrogenase，LDH)、磷酸果糖激酶等。梗死區(qū)外凡有血流量下降的區(qū)域均出現(xiàn)HIF-1表達，提示腦缺血后HIF-1a表達區(qū)域可認為是梗死區(qū)周圍慢性缺氧的區(qū)域?？梢奌IF-1在缺血性卒中過程中起著一定的負反應作用。低氧誘導因子(HIF-1)的腦保護作用機制2.1低氧誘導因子(HIF-1)對血管內皮生長因子的生物學調節(jié)VEGF是一種由二硫鍵連接的、相對分子質量為36X10?42X10的糖蛋白二聚體，其對缺血再灌注組織的保護作用主要通過以下幾個途徑：2.1.1促進內皮細胞的增殖和血管的生成VEGF是一種內皮細胞特有的有絲分裂原，VEGF及其受體在HIF-1的刺激下表達增多。VEGF可以通過其特異性受體Flt-1與flk-1/KDR直接作用于血管內皮細胞刺激其增殖，促使血管形成，改善局部血供。在這里VEGF促進血管生成的方式為血管新生，有別于胚胎發(fā)育時的血管發(fā)生。VEGF不僅貫穿血管新生的整個過程,而且它還能在內皮細胞中誘導抗凋亡蛋白Bcl-2的表達，抑制凋亡蛋白caspase-3的表達，維持內皮細胞的生存。此外VEGF還能刺激內皮細胞的遷移，對減輕內皮增厚，防止血管再狹窄有重要意義。2.1.2增加血管通透性VEGF又被稱為血管通透因子，它增加血管通透性的作用十分強烈，尤其是微小血管。使血漿大分子外滲沉積在血管外的基質中，為細胞的生長和新生毛細管的建立提供營養(yǎng)。其作用機制為VEGF與Flt-1受體結合，可使NO產生增加，NO可激活環(huán)氧化酶進而可促進前列環(huán)素的產生，后者可使血管通透性增加，促進許多血漿蛋白滲出血管外，故有學者認為VEGF可能導致缺血再灌注組織水腫，導致組織損傷，但有實驗證明VEGF使血管通透性增加，促進血漿蛋白外滲的作用要早于缺血再灌注后的組織水腫，故可認為VEGF不直接導致組織水腫。相反，有研究表明VEGF可以通過保護內皮細胞進而保護血腦屏障來減輕腦水腫。2.1.3對神經系統(tǒng)的保護作用目前研究比較多的是關于VEGF在腦缺血再灌注中的保護作用，許多試驗表明VEGF對神經組織有直接的保護作用。VEGF還可以刺激神經元軸突生長，促進膠質細胞分裂、遷移、存活，另外還有促進神經再生的作用。綜上VEGF是HIF-1的一個重要靶基因，也是血管生成的主要調節(jié)因子。腦缺血后，HIF-1使VEGF表達增加，促進了微循環(huán)重建，增加缺血組織血流灌注和供氧量，加快腦缺血缺氧的恢復過程【7】。VEGF基因的表達雖受多種因子的調控，但缺氧是其最主要的調節(jié)因素。缺氧時HIF-1通過與VEGF基因5’端的缺氧反應元件(hypoxiaresponseelement，HRE)結合，提高其轉錄。缺氧時HIF-1a僅積聚，并且DNA結合活性增加，HIF-1a僅與VEGF基因的HRE結合后，促進了VEGF的轉錄和表達，并增加缺氧情況下VEGFmRNA的穩(wěn)定性，VEGF進而作用于存在血管內皮細胞表面的血管內皮生長因子受體1(VEGFR-1)和血管內皮生長因子受體-2(VEGFR-2)，從而激活了一系列的缺血轉導通路，誘導新生血管的生成。缺乏HRE啟動子的VEGF基因在低氧時表達并不增高，致使新生的血管減少，運動神經元變性增加，說明VEGF的上調是通過HIF-1作用實現(xiàn)的。在缺氧反應的過程中，VEGFmRNA的穩(wěn)定性起著關鍵作用。VEGFmRNA的半衰期在正常條件下較短，約為30分鐘，但在缺氧條件下可增加到6?8小時，這說明VEGF在缺氧條件下受HIF-1的調節(jié)不僅發(fā)生在轉錄水平，同時也發(fā)生在轉錄后的水平。激活的HIF-1促使VEGF和VEGF受體表達增加，刺激缺氧組織建立有效的側支循環(huán)，并恢復內皮細胞的完整性，發(fā)揮自身搭橋作用，誘導新生血管形成，并使新生血管從正常組織向半暗帶及缺血中心區(qū)延伸，增加受累腦組織再灌注及供氧量，從而減少腦的缺血再灌注損傷。通過基因或藥物手段調節(jié)HIF-1的活性，可防止腦缺血【8】。2.2低氧誘導因子(HIF-1)作用于促紅細胞生成素而發(fā)揮腦保護作用EPO是一種相對分子質量為30X10?39X10的糖蛋白，主要來源于腎小管問質細胞和肝實質細胞。HIF-1作用于EPO3'端的啟動子，促進EPO的轉錄。EPO對缺血再灌注組織的保護作用主要有以下幾個方面：2.2.1EPO經典的作用是作用于骨髓巨核前體細胞,刺激紅祖細胞及早幼紅細胞形成成熟的紅細胞集落并釋放進入血液，提高血液內紅細胞數量及攜氧量。2.2.2EPO與細胞凋亡：目前認為抗凋亡作用可能是EPO對組織器官缺血再灌注保護作用的重要機制，根據目前的研究，其機制為：EPO與其受體EPOR結合，并啟動細胞內的信號傳導機制，增加抗凋亡蛋白的表達，發(fā)揮抗凋亡作用。另外，EPO還可降低血中有促進凋亡作用的細胞因子。研究表明EPO-EPOR的細胞內信號傳導機制具有組織特異性，在不同的細胞及組織中不盡相同【21.22】。2.2.3EPO對血管的保護：EPO對血管的保護作用不僅是保持內皮細胞的完整性，更重要的是EPO還能促進血管新生。EPO在體內、體外都有促血管生成作用，且與VEGF有相似的成血管潛能。EPO能通過促進血管內皮細胞增生、分化、遷移，來介導血管生成從而對維持和重建血供，促進損傷修復有重要意義。另外，根據研究，EPO在體內促血管生成作用可能部分與促進骨髓內皮起源細胞(EPC)遷移至成血管處分化為血管有關.。2.2.4此外，EPO可以通過上調抗氧化酶的表達及下調氧自由基的生成發(fā)揮其抗氧化作用。EPO還可以抑制許多致炎因子的釋放，從而減輕炎性細胞的浸潤，發(fā)揮對缺血再灌注組織的保護作用。另外，在神經組織中EPO還可抑制谷氨酸的釋放，減輕谷氨酸與N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受體結合，介導的鈣鈉通道開放，大量持續(xù)的鈣內流可以引起神經元壞死。根據目前的研究，EPO抑制谷氨酸釋放的機制可能為抑制谷氨酸的轉錄與翻譯。低氧條件下激活的HIF-1能誘導腦源性的EPO生成，其與血源性EPO比較，產生的量少，但具有更高的活性，腦源性EPO對缺血導致神經細胞損傷有重要的保護作用。其機制如下：①抗炎癥作用。小膠質細胞激活后可上調多種表面受體，釋放大量重要的促炎癥因子。EPO通過調節(jié)小膠質細胞激活以及控制細胞因子的釋放，從而維持細胞內環(huán)境的穩(wěn)定。此外，EPO通過抑制一些促炎因子，如白細胞介素_6(IL-6)、TNF-a和單核細胞化學趨化因子蛋白-1的產生以及抑制炎癥細胞聚集而直接參與細胞炎癥反應【9】。在腦和脊髓的創(chuàng)傷和缺血損傷以及多發(fā)性硬化模型中，EPO的抗炎作用已得到驗證。細胞死亡有炎性壞死和細胞凋亡兩種方式。EPO對神經的保護作用在于對這兩種方式的阻斷，神經細胞EPO受體被激活后通過干擾非受體型酪氨酸激酶(janus-aminotyrosinekinase-2，JAK-2)和核轉錄因子-KB(NF-KB)，能防止N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)和NO誘導的凋亡。EPO在體內和體外的多種神經細胞損傷模型中均有抗凋亡作用【10】；②維持血管完整性、促進血管生成。在損傷過程中EPO可阻止血腦屏障通透性的增加，維持細胞與細胞之間連接的建立。EPO對大腦血管內皮細胞提供直接保護，并可防止氧化應激下的核變性。EPO還能促成新的毛細血管生成，并向無血管區(qū)域延伸，EPO能誘導內皮細胞基質金屬蛋白酶-2的生成、細胞增殖和血管形成。由EPO誘導的血管生成也可在中樞神經系統(tǒng)提供間接的細胞保護作用。由EPO誘導的血管生成也可為中樞神經系統(tǒng)提供間接的細胞保護作用。EPO能促進缺氧腦組織中毛細血管內皮細胞的增殖和遷移，這樣會給缺血細胞提供更多的血流和營養(yǎng)；③促進神經祖系干細胞增殖與分化。EFO提高了胚胎皮質神經元的生存力，促細胞存活并可上調神經祖細胞的增殖反應。與其他造血因子一樣，EPO也充當著分化細胞的神經營養(yǎng)因子，例如EPO可以影響細胞的再生、分化和存活，并誘導干細胞分化為多巴胺能神經元或星形膠質【11】；④抗興奮性毒性作用和抗NO介導的損傷。腦缺氧時神經元產生大量HIF-1導致腦損傷，而同時HIF-1上調EPO基因的表達，激活的促紅細胞生成素受體(EPOR)阻止了NMDA導致的細胞凋亡。在大鼠海馬和大腦皮質神經元的原代培養(yǎng)中，EPO不能抑制NMDA受體介導的細胞內鈣離子濃度的升高，但可阻止NO誘導的神經元死亡。最近的研究顯示：NO能誘導神經細胞培養(yǎng)物中EPOR的表達，從而通過這種方式支持EPO的神經保護作用【12】。2.3血紅素氧合酶-1(HO-1)EdaTtiztiner等人的研究認為，HO-1對缺血再灌注組織的保護作用主要與其能降解亞鐵血紅素有關。亞鐵血紅素為HO-1的底物，是有毒的物質，能夠引起鐵的釋放、啟動Haber-Weiss或/和Fenton反應，導致細胞損傷。HO-1可以將亞鐵血紅素轉化為三種生物活性物質：一氧化碳、膽綠素、二價鐵離子。其中一氧化碳可以通過上調cGMP來調節(jié)血管的緊張度，使血管平滑肌松弛，抑制血小板凝聚，從而增加血流量和血管通透性，使缺氧組織得到充足的氧氣供應。目前已有實驗證明加入外源性的一氧化碳，可以模擬HO-1的保護作用；膽綠素可以被膽綠素還原酶進步轉化為膽紅素，而膽紅素是眾所周知的強抗氧化劑；二價鐵可以與鐵蛋白結合【13】。此外HO-1還能增加細胞對NO的耐受性，這對細胞也有保護作用，因為小劑量的NO可作為細胞內的重要調節(jié)因子，但大劑量的NO對細胞有毒性作用【14】。2.4誘導型一氧化氦合成酶(iNoS)在生物體內存在三種亞型的一氧化氮合成酶，分別是神經元型(nNOS)、內皮細胞型(eNOS)和誘導型(iNOS)。前兩者在細胞內持續(xù)表達，其活性依賴于細胞內鈣離子的水平，而iNOS主要是在病理的情況下受許多細胞因子誘導才表達的【15】。它可以使缺血缺氧組織內NO生成增多，參與缺血再灌注損傷的保護作用。研究表明NO主要參與缺血預處理的延遲性保護作用，又稱第二窗保護作用(Secondwindowofprotection)，出現(xiàn)在組織短暫缺血24h后，并可延續(xù)至72h【16】。盡管有人認為，iNOS誘導產生大量NO對組織有損傷作用，但一氧化氮在缺血再灌注組織中的護作用也已證實【17】。NO可激活可溶性的鳥苷酸環(huán)化酶(sGC)、生成環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)，即通過NO-sGC-cGMP信號傳導途徑介導一系列反應，如促進血管舒張、減輕細間黏附分子(ICAM)的聚集、抑制白細胞和血小板黏附和聚集、抗血栓形成、減輕無復流現(xiàn)象等【18】。試驗也證明了無論內源性還是外源性的NO都可通過cGMP途徑誘導心肌細胞預適應延遲保護作用。NO可通過PKC-NF-kB途徑誘導HSP70蛋白表達而發(fā)揮對腦細胞的延遲保護作用。GangMinHur等人的研究表明核轉錄因子(NFkB)的激活可進一步促進iNOS的轉錄，使其蛋白表達增加，加速NO的生成，發(fā)揮持久的保護作用。NO可激活ATP依賴的鉀離子通道(KATP)KATP通道開放后促進Ca2細胞外流，從而減輕Ca超載，并且KATP活化可逆轉鈣超載，防止肌質網和線粒體在缺血/再灌注時ca超載造成后續(xù)的一系列損傷。另外KATP通道的開放，有助于維持細胞內外的鉀離子濃度，對保持細胞內外的離子平衡有重要作用°KATP通道的開放還可以引起血管平滑肌細胞超極化，阻礙肌肉收縮所必需的Ca內流，從而最終引起血管擴張，血流量增加。這對缺血再灌注損傷具有保護作用。2.5，目前,常氧條件下細胞因子IL-1對HIF-1的表達調控逐漸成為研究熱點，且對其分機制的研究取得了一定成果°Stiehl等［4］的實驗表明,常氧條件下胰島素和IL-lp通過磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)途徑對HIF-la進行調節(jié)。Hellwig-Burgel等［5］的研究進一步證實了這一點，他們發(fā)現(xiàn)抑制原代培養(yǎng)的人類腎臟近端小管細胞中的PI3K能夠阻斷IL-lp誘導的HIF-la蛋白蓄積。Haddad等［6］提出重組的人類IL-lp可參與調節(jié)HIF-la的穩(wěn)定性、核轉位，及其依賴于抗氧化劑/活性氧敏感機制的活化,可見非低氧途徑介導了細胞因子對HIF-la的調節(jié)作用。Jung等［7］在人肺腺癌細胞株A549中發(fā)現(xiàn),IL-lp通過兩條途徑提高細胞內HIF-la水平。首先,IL-lP促進HIF-la的生成需要通過依賴于PI3K/Akt(蛋白激酶B)/mTOR途徑NF-KB(nuclearfactor-KB)的活化。其次IL-lP抑制HIF-la的降解。同時證實了IL-lP介導HIF-la的上調是通過NF-kB/COX-2(環(huán)氧合酶-2)通路。NF-kB是調節(jié)基因編碼細胞因子的一個重要因子。進一步研究發(fā)現(xiàn),常氧下IL-lp通過ERKl/2途徑誘導正常人類滋養(yǎng)層細胞中HIF-la的表達［8］。IL-l調節(jié)HIF-la表達的具體分子機制及所依賴的信號途徑還有待于深入研究。6TNF-a對HIF-l的調節(jié)TNF-a與IL-lp類似，能夠增強HIF-l的DNA結合活性［l］。Haddad等［6,9］報道,在肺泡上皮細胞活性氧(ROS)敏感途徑介導了TNF-a對HIF-a的調節(jié)。在常氧下，TNF-a可促進HIF-la的轉位，并增強其轉錄活性。他們在分析TNF-a作用方式時觀察到H2O2,O2-?,?OH等氧自由基的積累。所有形式的活性氧均與HIF-la的活性成正相關。應用抗氧化劑清除過氧化氫和羥自由基可阻斷TNF-a對HIF-la的活化，通過清除氧自由基阻滯NADPH(reducedformofnicotin-amide-adeninedinucleotidephosphate,還原型輔酶II)-氧化酶也會降低HIF-la的活性。抑制線粒體復合物l可以消除TNF-a對HIF-la的活化作用，同時干擾呼吸鏈也會逆轉TNF-a對HIF-la的興奮作用。由此顯示，活性氧族在介導TNF-a對HIF-a的活化過程中有重要作用,至于其具體的作用途徑還不明確。Zhou等［l0］研究發(fā)現(xiàn),與經典的低氧誘導途徑不同,TNF-a通過NF-kB依賴途徑可誘導HIF-la泛素化，從而引起其與pVHL(腫瘤抑制蛋白)的相互作用。在HepG2細胞中,TNF-a能活化HIF-l,并且伴有經典低氧反應基因的表達上調，這說明泛素化的HIF-la也具有轉錄調節(jié)活性。該實驗結果與前面所述的活性氧族敏感途徑并不矛盾,因為活性氧能作用于IKB激酶，從而影響NF-KB的活性。并且，他們進一步研究發(fā)現(xiàn)，在近端小管LLC-PKl細胞中TNF-a通過NF-kB,PI3K,MAPK途徑增強Bcl-2的表達，而高度表達的Bcl-2能夠促進HIF-lamRNA翻譯，最終導致HIF-la蛋白表達增加［ll］。Jung等［l2］則表明常氧條件下，TNF-a誘導細胞內HIF-la蛋白的積聚依賴于RIP(receptor-interactingprotein)途徑。有趣的是，盡管TNF-a對HIF-la的mRNA水平沒有影響，但用轉錄抑制放線菌素D預先處理細胞后卻能阻斷TNF-a對HIF-la蛋白的上調作用，而且pVHL基因的缺失也會抑制該效應。綜上所述,TNF-a對常氧細胞內HIF-la的誘導是在蛋白水平，但還有賴于NF-KB的轉錄調節(jié)。相反地,Peyssonnaux等［l3］提出在膿毒血癥形成過程中,HIF-la能促進炎癥細胞因子TNF-a的分泌。TNF-a和HIF-l可能存在一個正反饋環(huán)，有著相互促進作用。可見闡明其內在的分子機制對炎癥的深入認識有重要的指導意義。展望HIF-l作為低氧信號轉導途徑中的關鍵因子，廣泛參與多種神經系統(tǒng)疾病的發(fā)生和發(fā)展【20】，尤其在缺血性卒中的過程中起著非常重要的作用。對于HIF-l在缺血性腦血管病中的信號轉導途徑及其活性調節(jié)機制的闡明為缺血性腦血管病的治療提供了新的靶點。對于HIF-l羥化過程中的酶如PHD,FHD,VHL等，以及底物如鐵離子、2一酮戊二酸等，以及HIF-l與DNA的結合活性等進行干預，均可以改變HIF-1的轉錄活性，誘導或抑制HIF-1的活性，發(fā)揮治療效果。由于HIF-1能夠調控一系列靶基因的表達，因此，針對HIF-1的治療可能遠比針對單個靶基因的治療可能會有更好的療效。但同時，HIF有神經保護和促神經細胞凋亡的作用，它既可以參與致病，也可以抑制疾病的進一步發(fā)展。因此，我們在針對HIF-1進行治療時，必須保持謹慎。對HIF-1進行干預的時間窗，以及進行干預的具體內容，誘導還是抑制，以及干預的持續(xù)時間、程度等都是有待進一步研究深入的問題。我們期待將HIF-1研究的成果盡快實施于臨床。參考文獻：1.GLsemenza，GL Wang .Anuclear factorinduced byhypoxia viadenovoproteinsynthesisbirdstothehumanerythopoitingeneenhancerata site requiredfortranscripticnal activation. MDcellBio1，1992，l2(12):5447-5454PughCW，0RoarkeJF，NagaoM,etal.Activationofhypoxia-inducible~factor-1:difinitionfofregulatorydormainswithintheasubunit.JBiol，1997，272(17):1205-11214SutterCH，LaughnerE.semenzaGL.HIF-1aProtein。expressioniscontrolledbyoxygen—regulatedubiquitinationthatisdisruptedbydeletionsandmissensemutations.Proc.Nat1.Acad. 2000，97(9)：4748~47534Kal1ioPJ，WjllsonWJ，0’Briens，etal.Regulationofthehypox-ia-inducibletranscripticnfactorlabytheubiquition—proteasomepathway.JBoilchem，1999，274(10):6519~6525RichardKB.ExpressionofthegeneencodingtheproapoptoticNip3proteinisinducedbyhypoxia.ProcNat1AcadSciUSA.2000，97(16):9082?9087NankaO，ValasekP，DvorakovaM，eta1.Experimentalhypoxiaandembryonicangiogenesis[J].DevelopmentalDynamics，2006，235(3):723-733.MatsudaT，AbeT.Hypoxiainducablefactor-1aDNAinducedangiogenesisinaratcerebralinchemiamodel「J」.NeurolRes，2005， 27(5): 503-508.SemenzaGL.DoughmanY.PartialrescueofdefectsinCited2-deficientembryosbyHIF-1alphaheterozygosity[J]．DevBiol， 2007．301(1):130—140.MaieseK，LIFang一qu.Erythropoietininthebraincanthepromisetoprotectbefulfilled[J]?TrendsPharmacolSci，2004，25(11):577-583．Arishima，SetoguchiY，Yamaura，eta1.Preventiveeffectoferythropoietinon spinalcordcell apoptosisfollowing acute traumaticinjuryinrats[J] .Spine，2006，31( 21):2432-2438.LeeSM，NguyenT H，ParkMH，et a1. EPOreceptor—mediatedERKkinaseandNF-kappaBactivationinerythropoietin—promoteddifferentiationofastocytea「J」.BiochemBiophyaCommun，2004，320(4):1087—1095．JelkmannW.Effectsoferythropoietinonbrainfunction『J].CurrPharmBiotechnol,2005,6(1):65-79.TznerE,LiuL, Shimada M,et al .Heme oxygenase-1protectshumanhepatocytesinvitro agains warm andcold hypoxia[J ].JHepatol,2004,41(5):764-772.BishopA, YetSF, Lee ME,et a1. Akey ro