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實(shí)驗(yàn)基本操作實(shí)驗(yàn)基本操作實(shí)驗(yàn)基本操作xxx公司實(shí)驗(yàn)基本操作文件編號(hào):文件日期:修訂次數(shù):第1.0次更改批準(zhǔn)審核制定方案設(shè)計(jì),管理制度實(shí)驗(yàn)基本操作一:容量瓶
凡要求準(zhǔn)確配制一定濃度的溶液時(shí)必須使用容量瓶。容量瓶的容量有大有小,均在瓶上標(biāo)出(如50ml、500ml等)。瓶頸上有一刻度線,表示當(dāng)液體加到此刻度時(shí)就相當(dāng)于瓶上所標(biāo)容量。瓶上并標(biāo)有溫度,通常為20℃,表示瓶上所標(biāo)容量是在20℃時(shí)的容量。室溫不在配制溶液時(shí),先將溶質(zhì)在燒杯中用少量溶劑溶解,再把溶液沿玻璃棒引入容量瓶;用少量溶劑沖液燒杯后倒入容量瓶,最后再添加溶劑到刻度線。加溶劑時(shí)在接近刻度線前,應(yīng)改用滴管吸取溶劑添加,以免超過刻度線。裝透明溶液時(shí)應(yīng)使液體凹面下線與瓶上刻度線重疊;非透明溶液則應(yīng)使液體凹面上線與刻度線重疊?;靹驎r(shí),一手握瓶頸并按住瓶塞;一手托瓶底,反復(fù)顛倒、搖動(dòng)數(shù)次。為了保證容量瓶的準(zhǔn)確度,容量瓶中所裝溶液溫度應(yīng)在20℃左右,不可過高或過低,切不可直接加熱;用后只能以水沖洗或用鉻酸洗液浸泡,切不可放入毛二:吸量管
是精密的卸量容器。實(shí)驗(yàn)室常用的分三種:1:刻度吸管
這類吸管的管壁上刻印有多個(gè)刻度??潭确譃榭痰郊舛说募翱潭炔坏郊舛说模豢潭茸x數(shù)有從上而下及從下而上的,用前必須分清楚。用刻度吸量管量取液體時(shí),若使用刻度不到尖端的,只要小心將液體放至下端最后刻度處即可。若使用刻度到尖端的吸管則要注意使用規(guī)則。北京等地生產(chǎn)的吸管規(guī)定:1ml(包括1ml)以上的刻度管,在放出液體后,尖端遺留的液體不應(yīng)吹出,只要使管尖緊靠容器內(nèi)壁轉(zhuǎn)動(dòng)幾秒鐘即可;1ml以下(不包括1ml)的刻度管則必須把尖端遺留的液體吹入容器內(nèi)。這類管上一般都印有“吹”字。若遇不明是否該吹的吸管,可作校正后(其校正法見附錄)再行使用,以免產(chǎn)生錯(cuò)誤。2:移液管
此類管中部有一圓柱狀空泡,只有一個(gè)刻度。由于卸出量已經(jīng)固定,所以準(zhǔn)確性比刻度吸管大。使用時(shí),將所量取的液體慢慢放出,尖端所余少量液體不應(yīng)吹出,只須在最后將管尖觸及容器內(nèi)壁轉(zhuǎn)動(dòng)幾秒鐘即可。這類管主要作量卸液體之用。3:奧氏(Ostwald)吸管
這是一類特殊吸管。管下端有一卵形空泡,上端有一容量刻度。量取液體時(shí),當(dāng)所量取的液體自行流出后,必須將遺留在管尖內(nèi)的少量液體吹入容器內(nèi)。該管的特點(diǎn)是每單位容器所占管壁的面積最小,而且管內(nèi)無凹凸處阻礙液體的流出,因此精確度較高。生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用它吸取血液、組織液和組織勻漿等黏度較大的樣品。三:吸量管的使用方法1:一般使用吸管是用拇指和中指握著管身,刻度數(shù)字對(duì)著自己,并使管與地面垂直;以食指堵塞吸管上端開口,用以控制液體的放出速度。2:吸取液體時(shí),應(yīng)用橡皮球(洗耳球)吸取,盡量不用嘴吸。特別是濃酸、濃堿及有毒物質(zhì),嚴(yán)禁用嘴吸。吸時(shí),應(yīng)把吸管插入液體的適當(dāng)深度,以免發(fā)生空吸現(xiàn)象。吸取液體的量應(yīng)超過最高刻度少許。3:當(dāng)吸管從所吸取的液體中取出后,均須用濾紙片將管外壁抹干凈(特別是吸取血液等粘性液體時(shí)更需要如此)以免影響取量。4:吸管用濾紙抹凈后,將液體放至起始刻度,棄去多余液體,然后再放至所需刻度。讀取刻度時(shí),眼睛要與所讀取的刻度平行??潭纫话銥閳A圈或弧形,平行時(shí)只能看到一條線,液體應(yīng)流至液體的凹面底部正好與該條線重疊。釋放液體速度要慢,不可放開食指自由下落,以免液體在管壁內(nèi)附著過多而造成誤差。5:為減少誤差。要選用恰當(dāng)?shù)奈?,如量取時(shí)應(yīng)選用2ml的刻度吸管,而不可選用5ml或10ml的,以1ml吸管吸取兩次代替2ml也會(huì)產(chǎn)生誤差。6:吸管用畢,應(yīng)立即用水沖洗,特別吸血液、組織勻漿等含蛋白質(zhì)溶液的吸管,因蛋白質(zhì)干固后將堵塞吸管的尖端。水沖后,晾干,再泡入鉻酸洗液中1h以上,最后取出洗凈烘干。7:使用過程中要防止吸管尖端和上口碰破,尖端碰破殘缺,則吸量不準(zhǔn);上口破殘,則不易控制流量。均不能使用。四:玻璃儀器的洗滌方法玻璃儀器的清潔與否,直接影響實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,如因?yàn)閮x器的不清潔或污染引起蛋白質(zhì)變性或抑制酶的活性,造成錯(cuò)誤的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。因此玻璃儀器的洗滌清潔工作是非常重要的。在實(shí)驗(yàn)的過程中每個(gè)人都要逐步養(yǎng)成保持所用玻璃儀器清潔、放置整齊的良好習(xí)慣。其清洗方法如下:1:一般玻璃儀器
如試管、燒杯、量筒和錐形瓶等。先用自來水沖去污物,浸于洗衣粉或肥皂水內(nèi),用毛刷細(xì)心地刷洗內(nèi)外(也可用毛刷抹肥皂或洗衣粉刷洗)務(wù)使多生泡沫,再用自來水沖洗,察看器壁上是否沾有水珠,沾有小水球表示未洗干凈,應(yīng)重復(fù)洗滌,直至不沾水珠為止。最后用蒸餾水少量沖洗2~3次。洗凈后器皿倒置干凈處晾干或烘干(量筒不可烘烤)。2:量度玻璃儀器
如吸管、滴定管和容量瓶等。使用后,應(yīng)立即用清水沖洗除去血液、試劑等殘留物(千萬勿使干固),晾干后,再浸泡于鉻酸清潔液中4~6h或過夜。然后用水充分沖洗,并察看是否洗凈(方法同前),如已洗凈再用少量蒸餾水沖洗2~3次,除吸管可烘干外,其它只能倒置晾干。五:洗滌液實(shí)驗(yàn)室中除用水、洗衣粉和肥皂外,還使用一些化合物的溶液洗滌玻璃儀器。這些溶液稱為洗滌液,其種類很多。先介紹幾種:1:鉻酸洗液(重鉻酸鉀-硫酸洗液,簡(jiǎn)稱洗液)這是實(shí)驗(yàn)室中使用最廣泛的一種洗液。配方很多,可根據(jù)情況選用。如:(1)稱取重鉻酸鉀50g,溶于100ml水中,再慢慢邊加邊攪動(dòng)地加入濃硫酸(工業(yè)用)400ml,若中途溫度過高,則暫停待稍冷后再加。冷卻后即可使用。(2)稱取重鉻酸鉀5g,加水5ml,攪拌,使其溶解,慢慢加入濃硫酸(工業(yè)用)100ml。待冷卻后即可使用。鉻酸洗液具有強(qiáng)烈的腐蝕性。皮膚、衣物等要避免與之接觸。洗液應(yīng)保存在密閉容器中,以防吸水。良好的洗液應(yīng)呈褐紅色,如溶液變成黑綠色表示已失效,無氧化能力,應(yīng)更換。2:10%~20%尿素溶液,是蛋白質(zhì)的良好溶劑,用以洗滌盛過血液等含蛋白質(zhì)的器皿。3:硝酸洗滌液
用水和濃硝酸按1∶1配成的硝酸溶液,可用以洗滌二氧化碳測(cè)定儀等。六:實(shí)驗(yàn)室常用儀器的使用(一):電動(dòng)離心機(jī)
離心機(jī)是利用離心力把溶液中比重不同的物質(zhì)或?qū)⒐腆w和液體分離開的儀器。類型很多,有低速、高速、超速之分。一般實(shí)驗(yàn)室中常用低速離心機(jī),最高速度為4000r/min。分為小型臺(tái)式和落地式兩種?;静僮魅缦拢?:使用前先檢查離心管外套管,應(yīng)完整不漏,底部應(yīng)有皮墊。2:將待;離心溶液轉(zhuǎn)移到合適的離心管內(nèi)。盛量以不超過離心管的2/3為宜。再將離心管放入外套管內(nèi)。3:將裝有離心管的套管成對(duì)地放在已經(jīng)平衡好的臺(tái)秤上平衡,若不平衡,可在離心管與套管之間加水或調(diào)節(jié)離心管內(nèi)容物的量使之達(dá)到平衡。每次離心時(shí)一定要嚴(yán)格執(zhí)行此平衡操作。否則不能放入離心機(jī)內(nèi)離心。因?yàn)槿舨黄胶猓x心時(shí)將損傷離心機(jī)的軸以至造成嚴(yán)重事故。應(yīng)十分警惕。4:將已平衡好的離心管和套管成對(duì)地按對(duì)稱方向放入離心機(jī)中,并取出不用的空套管,蓋上離心機(jī)蓋。5:開動(dòng)離心機(jī)前,應(yīng)檢查變速旋鈕,看是否在“0”位置。再打開電源開關(guān),并慢慢扭動(dòng)變速旋鈕,逐步增加速度。停止時(shí),將旋鈕慢慢回到“0”位置。待離心機(jī)自動(dòng)停止后,才能打開離心機(jī)蓋取出樣品,絕對(duì)不能用手阻止離心機(jī)轉(zhuǎn)動(dòng),以免發(fā)生事故。6:用畢,倒去套管中的水。取出皮墊,并倒置套管使其干燥。7:使用時(shí)還應(yīng)該注意:⑴在離心過程中,若聽到特殊響聲,應(yīng)立即停止離心。若是玻璃離心管破碎,應(yīng)更換新的,平衡后再行離心。⑵離心酸堿及腐蝕性溶液時(shí),應(yīng)避免灑落在套管內(nèi)。若遇此情況應(yīng)立即洗凈,以免腐蝕套管。⑶離心機(jī)不宜連續(xù)使用時(shí)間過長(zhǎng),約40min后應(yīng)休息約20min,以免過熱。⑷離心機(jī)應(yīng)定期檢修。每年檢查一次離心機(jī)內(nèi)電動(dòng)機(jī)的電刷與整流子磨損情況。若有損壞應(yīng)更換。(二)酸度計(jì)
酸度計(jì)是測(cè)定溶液pH的重要儀器。1:原理
當(dāng)把一玻璃電極浸入具有一定pH的溶液中時(shí),即產(chǎn)生一電極電位。其值大小與溶液的氫離子濃度有直接關(guān)系。但是無法測(cè)定出單一電極的電位。所以只能有兩個(gè)不同電位的電極組成一電池,測(cè)定出其電動(dòng)勢(shì),也就是兩極電位的差值。為此,人為地選擇一個(gè)電極作為標(biāo)準(zhǔn),與此電極的差值就是該電極的電極電位。在酸度計(jì)中,采用甘汞電極作為參比(標(biāo)準(zhǔn))電極,其電極電位不受被測(cè)溶液氫離子濃度的影響。另一電極是玻璃電極也稱指示電極。它由特殊玻璃膜制成,玻璃膜內(nèi)裝滿一種電解質(zhì)如L鹽酸。當(dāng)此玻璃浸入被測(cè)溶液時(shí),因膜兩邊氫離子濃度不同,則產(chǎn)生相應(yīng)的電極電位,在不同氫離子的溶液中,產(chǎn)生不同的電極電位。并與甘汞電極2組成電池,測(cè)定出電動(dòng)勢(shì),即可根據(jù)測(cè)得的電動(dòng)勢(shì)計(jì)算出被測(cè)溶液的pH。2:使用方法⑴安裝電極
甘汞電極要摘去兩個(gè)皮帽并擦凈再裝;玻璃電極極易碰壞,為防止測(cè)定過程中與燒杯底碰撞。因此,安裝時(shí)要裝在略高于甘汞電極的位置。⑵將“pH-mV”開關(guān)撥開到“pH”位置。打開電源,指示燈亮后預(yù)熱5min。⑶選用與被測(cè)溶液PH值近似的標(biāo)準(zhǔn)緩沖液,倒入小燒杯中并插入電極。溶液至少要淹沒過玻膜球部1/2處。⑷調(diào)節(jié)“溫度補(bǔ)償器”使之與標(biāo)準(zhǔn)緩沖液溫度相同(一般是將已配好貯存于冰箱的標(biāo)準(zhǔn)液取出后,平衡至室溫)。⑸根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)緩沖液的PH,將量程撥至“0~7”或“7~14”。⑹旋轉(zhuǎn)“零”點(diǎn)調(diào)節(jié)器,使指針指在處。⑺撳下“讀數(shù)開關(guān)”,指針偏轉(zhuǎn),調(diào)節(jié)“定位讀數(shù)”使指針恰好指在當(dāng)時(shí)溫度下標(biāo)準(zhǔn)溶液的PH處。重復(fù)此操作幾次,直至讀數(shù)值不變?yōu)橹埂2⑶形鹪賱?dòng)“定位調(diào)節(jié)”的旋鈕。⑻取下標(biāo)準(zhǔn)緩沖液,用蒸餾水沖洗電極,并用濾紙片輕輕吸干。⑼換上待測(cè)溶液,輕輕晃動(dòng)幾次,以便電極與溶液接觸均勻。待測(cè)液的溫度應(yīng)與標(biāo)準(zhǔn)溶液一致。⑽撳下“讀數(shù)開關(guān)”,指針?biāo)傅臄?shù)值即為待測(cè)溶液的PH。重復(fù)此操作幾次直至讀數(shù)不變?yōu)橹?。⑾測(cè)畢。將電極洗凈,玻璃電極浸泡入
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