2023年云南省昆明市師大附中生物高二下期末綜合測(cè)試模擬試題（含解析）

2023學(xué)年高二年級(jí)下學(xué)期生物模擬測(cè)試卷注意事項(xiàng)1．考生要認(rèn)真填寫(xiě)考場(chǎng)號(hào)和座位序號(hào)。2．試題所有答案必須填涂或書(shū)寫(xiě)在答題卡上，在試卷上作答無(wú)效。第一部分必須用2B鉛筆作答；第二部分必須用黑色字跡的簽字筆作答。3．考試結(jié)束后，考生須將試卷和答題卡放在桌面上，待監(jiān)考員收回。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1．在植物生長(zhǎng)素的早期研究中，達(dá)爾文父子做出下列實(shí)驗(yàn)，如下圖所示。下列屬于該實(shí)驗(yàn)的結(jié)論是（）A．頂端合成生長(zhǎng)素不需要光，光影響分布B．苗尖端下面背光面的細(xì)胞要多，長(zhǎng)得快C．頂端接受光的刺激使胚芽鞘向光彎曲生長(zhǎng)D．該實(shí)驗(yàn)揭示了植物向光性現(xiàn)象的原理2．下列的哪一種物質(zhì)的跨膜運(yùn)輸方式與其他三種方式不同（）A．根吸收礦質(zhì)元素B．紅細(xì)胞吸收鉀離子，排出鈉離子C．小腸對(duì)鈣的吸收D．漿細(xì)胞分泌抗體3．利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)將白菜和甘藍(lán)(均為二倍體)培育成“白菜—甘藍(lán)”雜種植株(如圖所示)，下列說(shuō)法正確的是(

)A．圖示“白菜—甘藍(lán)”植株不能結(jié)子B．植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的目的是獲得雜種細(xì)胞C．上述過(guò)程中包含著有絲分裂、細(xì)胞分化和減數(shù)分裂等過(guò)程D．“白菜—甘藍(lán)”雜種植株所具有的性狀是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果4．有關(guān)倒平板的操作錯(cuò)誤的是（）A．將滅過(guò)菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上B．使打開(kāi)的錐形瓶瓶口迅速通過(guò)火焰C．將培養(yǎng)皿打開(kāi)，培養(yǎng)皿蓋倒放在桌子上D．等待平板冷卻凝固后需要倒過(guò)來(lái)放置5．下圖是胚胎發(fā)育過(guò)程中某階段示意圖，下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是A．圖中②將發(fā)育為胎膜和胎盤(pán)等結(jié)構(gòu)B．圖中③可發(fā)育成胎兒的各種組織C．高等哺乳動(dòng)物細(xì)胞分化開(kāi)始于桑椹胚期D．胚胎從①中伸展出來(lái)的過(guò)程叫做孵化6．內(nèi)環(huán)境是體內(nèi)細(xì)胞與外界環(huán)境進(jìn)行物質(zhì)交換的媒介。據(jù)圖分析判斷下列說(shuō)法正確的是A．若③為胰島B細(xì)胞，飯后半小時(shí)⑤處的胰島素濃度高于①處B．若③為腦細(xì)胞，⑤處的氧氣濃度高于①處，而C02的濃度相反C．若③為骨骼肌細(xì)胞，飯后五小時(shí)⑤處的血糖濃度低于①處D．若③為肝臟細(xì)胞，合成的血紅蛋白通過(guò)胞吐運(yùn)送到⑤處二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）應(yīng)用生物工程技術(shù)獲得人們需要的生物新品種或新產(chǎn)品。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題：（1）在培育轉(zhuǎn)人生長(zhǎng)激素基因牛過(guò)程中，②過(guò)程常用的方法是_________________，采用___________技術(shù)可以獲得多頭基因型相同的轉(zhuǎn)基因牛。（2）轉(zhuǎn)人生長(zhǎng)激素基因牛可通過(guò)乳腺細(xì)胞分泌乳汁來(lái)生產(chǎn)人生長(zhǎng)激素，在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，人生長(zhǎng)激素基因的首端必須含有_______________。（3）prG能激發(fā)細(xì)胞不斷分裂，通過(guò)基因工程導(dǎo)入該調(diào)控基因來(lái)制備單克隆抗體，Ⅲ代表的細(xì)胞具有________________________的特點(diǎn)。（4）在抗蟲(chóng)棉培育過(guò)程中，④過(guò)程常采用的方法是_______________；⑤過(guò)程采用的技術(shù)是____________________；在分子水平上可采用__________________方法來(lái)檢測(cè)轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉的抗蟲(chóng)基因是否成功表達(dá)。（5）下面是獲取目的基因的幾種方法，其中需要模板的是______________。①?gòu)幕蚪M文庫(kù)中獲取目的基因

②利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因③構(gòu)建cDNA文庫(kù)

④通過(guò)DNA合成儀利用化學(xué)方法人工合成目的基因A．①②B．②③C．①③D．①④（6）當(dāng)獲能后的精子與卵子相遇時(shí)，首先發(fā)生________，釋放出有關(guān)的酶直接溶解卵丘細(xì)胞間的物質(zhì)，形成精子穿越放射冠的通路．防止多精入卵的生理反應(yīng)依次有透明帶反應(yīng)、_____________。8．（10分）某種熒光蛋白（GFP）在紫外光或藍(lán)光激發(fā)下會(huì)發(fā)出綠色熒光，這一特性可用于檢測(cè)細(xì)胞中目的基因的表達(dá)。某科研團(tuán)隊(duì)將某種病毒的外殼蛋白（L1）基因連接在GFP基因的5′末端，獲得了L1-GFP融合基因（簡(jiǎn)稱(chēng)為甲），并將其插入質(zhì)粒P0，構(gòu)建了真核表達(dá)載體P1，其部分結(jié)構(gòu)和酶切位點(diǎn)的示意圖如下，圖中E1~E4四種限制酶產(chǎn)生的黏性末端各不相同。回答下列問(wèn)題：（1）據(jù)圖推斷，該團(tuán)隊(duì)在將甲插入質(zhì)粒P0時(shí)，使用了兩種限制酶，這兩種酶是_________。使用這兩種酶進(jìn)行酶切是為了保證_______________，也是為了保證__________________。（2）將P1轉(zhuǎn)入體外培養(yǎng)的牛皮膚細(xì)胞后，若在該細(xì)胞中觀察到了綠色熒光，則說(shuō)明L1基因在牛的皮膚細(xì)胞中完成了________和_________過(guò)程。（3）為了獲得含有甲的牛，該團(tuán)隊(duì)需要做的工作包括：將能夠產(chǎn)生綠色熒光細(xì)胞的_____________移入牛的____________中、體外培養(yǎng)、胚胎移植等。（4）為了檢測(cè)甲是否存在于克隆牛的不同組織細(xì)胞中，某同學(xué)用PCR方法進(jìn)行鑒定。在鑒定時(shí)應(yīng)分別以該牛不同組織細(xì)胞中的____________（填“mRNA”“總RNA”或“核DNA”）作為PCR模板。9．（10分）野生黑芥具有黑腐病的抗性基因，而花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病。利用相關(guān)工程技術(shù)可以獲得抗黑腐病雜種黑芥一花椰菜植株。用一定劑量的紫外線處理黑芥原生質(zhì)體可使其染色體片段化，并喪失再生能力，再利用此原生質(zhì)體作為部分遺傳物質(zhì)的供體與完整的花椰菜原生質(zhì)體融合，流程如下圖。據(jù)圖回答：（1）該過(guò)程用到的細(xì)胞工程技術(shù)有_____________、_____________。（2）過(guò)程①所需的酶是_____________，過(guò)程②中PEG的作用是_____________，經(jīng)過(guò)②操作后，需篩選出融合的雜種細(xì)胞，顯微鏡下觀察融合的活細(xì)胞中有黑芥葉肉組胞的_____________（填寫(xiě)細(xì)胞器名稱(chēng)）存在可作為初步篩選雜種細(xì)胞的標(biāo)志。（3）原生質(zhì)體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇以保持一定的_____________以維持原生質(zhì)體的形態(tài)和活性。原生質(zhì)體經(jīng)過(guò)細(xì)胞壁再生，進(jìn)而脫分化形成_____________。（4）若分析再生植株的染色體變異類(lèi)型，應(yīng)剪取再生植株和雙親植株的根尖，制成裝片，在顯微鏡下觀察并比較染色體的_____________。將雜種植株栽培在含有_____________的環(huán)境中，可篩選出具有高抗性的雜種植株。10．（10分）許多大腸桿菌的質(zhì)粒上含有l(wèi)acZ′基因（內(nèi)含EcoRⅠ的酶切位點(diǎn)），其編碼的產(chǎn)物β—半乳糖苷酶在X—gal和IPTG存在下，可以產(chǎn)生藍(lán)色沉淀，使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色，否則菌落呈現(xiàn)白色?；蚬こ讨谐＠迷撛韽膶?dǎo)入質(zhì)粒的受體細(xì)胞中篩選出真正導(dǎo)入重組質(zhì)粒的細(xì)胞，過(guò)程如下圖所示。請(qǐng)據(jù)圖回答：（1）獲取目的基因時(shí)，可以從____________中直接提取。（2）限制酶EcoRⅠ的識(shí)別序列和酶切位點(diǎn)是-G↓AATTC-，SmaⅠ的識(shí)別序列和酶切位點(diǎn)是-CCC↓GGG-。圖中目的基因被切割下來(lái)和質(zhì)粒連接之前，需在目的基因的右側(cè)連接相成的末端，連接的末端序列是______。（3）在構(gòu)建基因表達(dá)載體的過(guò)程中，除了目的基因外，還必須有_________和_________、復(fù)制原點(diǎn)和標(biāo)記基因等。（4）轉(zhuǎn)化過(guò)程中，大腸桿菌應(yīng)先用____________處理，使其成為_(kāi)___________細(xì)胞。（5）菌落①②③中顏色為白色的是____________（填序號(hào)），原因是_______________。（6）菌落③中的目的基因是否表達(dá)，可采用的分子檢測(cè)辦法是____________。11．（15分）核糖體普遍存在于真核細(xì)胞和原核細(xì)胞中。請(qǐng)回答下列相關(guān)問(wèn)題：（1）在真核細(xì)胞中，核糖體的形成和_____________（細(xì)胞結(jié)構(gòu)）有關(guān)。（2）將核糖體徹底水解，除蛋白質(zhì)的水解產(chǎn)物外，還包括_____________種小分子物質(zhì)。（3）在核糖體上可以完成中心法則的_____________過(guò)程，該過(guò)程中遺傳信息的流向是_____________。（4）請(qǐng)從細(xì)胞生命活動(dòng)的角度分析，真核細(xì)胞和原核細(xì)胞中都含有核糖體的原因。

參考答案（含答案詳細(xì)解析）一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1、C【答案解析】

由圖可知，甲和乙說(shuō)明向光彎曲生長(zhǎng)與尖端是否存在有關(guān)；丙丁戊說(shuō)明感光部位在尖端。【題目詳解】A、該實(shí)驗(yàn)不能說(shuō)明尖端可以產(chǎn)生生長(zhǎng)素，A錯(cuò)誤；B、該實(shí)驗(yàn)不能說(shuō)明背光面的細(xì)胞數(shù)目多，B錯(cuò)誤；C、由圖可知，頂端接受光的刺激使胚芽鞘向光彎曲生長(zhǎng)，C正確；D、該實(shí)驗(yàn)未揭示植物向光性現(xiàn)象的原理，D錯(cuò)誤。故選C。2、D【答案解析】試題分析：根吸收礦質(zhì)元素以離子形式吸收，屬于主動(dòng)運(yùn)輸；紅細(xì)胞吸收鉀離子和排出鈉離子屬于主動(dòng)運(yùn)輸，需要載體和能量；小腸對(duì)鈣的吸收都是主動(dòng)運(yùn)輸過(guò)程；漿細(xì)胞分泌抗體是胞吐過(guò)程，體現(xiàn)細(xì)胞膜的流動(dòng)性，與A、B、C三個(gè)選項(xiàng)不同；所以D項(xiàng)正確。考點(diǎn)：本題考查物質(zhì)跨膜運(yùn)輸?shù)南嚓P(guān)知識(shí)，考查了學(xué)生對(duì)基礎(chǔ)知識(shí)掌握和應(yīng)用能力，另外注意物質(zhì)跨膜運(yùn)輸?shù)挠绊懸蛩兀孩儆绊懽杂蓴U(kuò)散的因素：細(xì)胞膜內(nèi)外物質(zhì)的濃度差．②影響協(xié)助擴(kuò)散的因素：a．細(xì)胞膜內(nèi)外物質(zhì)的濃度差；b．細(xì)胞膜上載體的種類(lèi)和數(shù)量．③影響主動(dòng)運(yùn)輸?shù)囊蛩兀篴．載體（核糖體）；b．能量（細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)和線粒體）。3、D【答案解析】“白菜-甘藍(lán)”雜種植株具有2個(gè)親本的遺傳物質(zhì)，含有同源染色體，能正常結(jié)籽，A錯(cuò)誤；獲得融合細(xì)胞后需利用植物的組織培養(yǎng)技術(shù)將細(xì)胞培育成植株，故植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的最終目的是培育具有優(yōu)良性狀的植物新品種，B錯(cuò)誤；上述過(guò)程中包含著有絲分裂、細(xì)胞分化，沒(méi)有發(fā)生減數(shù)分裂，C錯(cuò)誤；“白菜-甘藍(lán)”雜種植株的形成是白菜-甘藍(lán)”雜種細(xì)胞進(jìn)行植物組織培養(yǎng)的結(jié)果，是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果，D正確。4、C【答案解析】

倒平板操作的步驟：1.將滅過(guò)菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上，右手拿裝有培養(yǎng)基的錐形瓶，左手拔出棉塞；2.右手拿錐形瓶，將瓶口迅速通過(guò)火焰；3.用左手的拇指和食指將培養(yǎng)皿打開(kāi)一條稍大于瓶口的縫隙，右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿，左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋；4.等待平板冷卻凝固后，將平板倒過(guò)來(lái)放置，使皿蓋在下、皿底在上，這樣可以防止皿蓋上的水分滴到培養(yǎng)基上造成培養(yǎng)基的污染。【題目詳解】A、將滅過(guò)菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上，防止雜菌污染，A正確；B、使打開(kāi)的錐形瓶瓶口迅速通過(guò)火焰，對(duì)瓶口進(jìn)行滅菌處理，B正確；C、倒平板時(shí)培養(yǎng)皿蓋打開(kāi)的開(kāi)口要盡量小，不能將培養(yǎng)皿完全打開(kāi)，C錯(cuò)誤；D、等待平板冷卻凝固后，將平板倒過(guò)來(lái)放置，D正確。故選C。5、C【答案解析】

分析題圖，圖示為囊胚階段示意圖，其中①是透明帶；②是滋養(yǎng)層，將來(lái)發(fā)育成胎盤(pán)或胎膜；③是內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，將來(lái)發(fā)育成胎兒的各種組織?！绢}目詳解】根據(jù)以上分析已知，圖中②是滋養(yǎng)層，將來(lái)發(fā)育成胎盤(pán)或胎膜，A正確；③是內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，將來(lái)發(fā)育成胎兒的各種組織，B正確；高等哺乳動(dòng)物細(xì)胞分化開(kāi)始于囊胚期，C錯(cuò)誤；①是透明帶，胚胎從透明帶中伸展出來(lái)的過(guò)程叫做孵化，D正確?！敬鸢更c(diǎn)睛】解答本題的關(guān)鍵是識(shí)記動(dòng)物胚胎發(fā)育的具體過(guò)程，能正確分析題圖，再結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)。6、B【答案解析】

內(nèi)環(huán)境是細(xì)胞的直接環(huán)境，細(xì)胞與內(nèi)環(huán)境之間進(jìn)行物質(zhì)交換，彼此相互影響；根據(jù)不同細(xì)胞的生理特點(diǎn)分析它對(duì)血漿的影響?！绢}目詳解】若③為胰島B細(xì)胞，由于飯后半小時(shí)血糖濃度升高，胰島素向血液的分泌增多，根據(jù)血液流向，⑤處的胰島素濃度低于①處，A錯(cuò)誤；若③為腦細(xì)胞，細(xì)胞呼吸消耗氧氣，血漿中氧氣濃度降低，根據(jù)血液的流向，⑤處的氧氣濃度高于①處，而C02的濃度相反，B正確；若③為骨骼肌細(xì)胞，吸收并分解葡萄糖獲得能量，使血糖降低，根據(jù)血液流向，飯后五小時(shí)⑤處的血糖濃高于①處，C錯(cuò)誤；血紅蛋白位于紅細(xì)胞中，血漿蛋白分泌到血漿中，所以若③為肝臟細(xì)胞，通過(guò)胞吐運(yùn)送到⑤處的應(yīng)該是血漿蛋白，D錯(cuò)誤?！敬鸢更c(diǎn)睛】易錯(cuò)點(diǎn)：骨骼肌和血糖的關(guān)系，肌細(xì)胞可以把血糖合成肌糖原但不能分解糖原釋放葡萄糖，卻可以通過(guò)細(xì)胞呼吸消耗葡萄糖；易混點(diǎn)：血漿蛋白和血紅蛋白。二、綜合題：本大題共4小題7、（1）顯微注射法胚胎分割（2）牛乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子（只答啟動(dòng)子不得分）（3）既能無(wú)限增殖，又能產(chǎn)生特定抗體（4）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法植物組織培養(yǎng)抗原﹣﹣抗體雜交（5）B（6）頂體反應(yīng)卵細(xì)胞膜的封閉作用【答案解析】試題分析：⑴將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞的方法是顯微注射法；利用胚胎分割可以獲得遺傳物質(zhì)相同的胚胎。⑵利用乳腺生物發(fā)生器時(shí)，需要在啟動(dòng)子前加入乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子。⑶雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)是既能無(wú)限增殖，又能產(chǎn)生特定抗體。⑷在獲得轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉過(guò)程中，將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；若將目的基因?qū)氲街参锏捏w細(xì)胞中，需要經(jīng)過(guò)植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得轉(zhuǎn)基因個(gè)體；目的基因表達(dá)是指通過(guò)轉(zhuǎn)錄和翻譯合成相應(yīng)的蛋白質(zhì)，因此可以采用抗原——抗體雜交法檢測(cè)目的基因是否成功表達(dá)。⑸在獲取目的基因的方法中，PCR擴(kuò)增和構(gòu)建cDNA文庫(kù)，需要使用模板。⑹精子與卵細(xì)胞相遇時(shí)，首先發(fā)生頂體反應(yīng)；防止多精入卵的兩道屏障是透明帶反應(yīng)和卵細(xì)胞膜的封閉作用。考點(diǎn)：本題主要考查基因工程、細(xì)胞工程和胚胎工程的相關(guān)內(nèi)容，意在考查考生能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。8、E1和E4甲的完整甲與載體正確連接轉(zhuǎn)錄翻譯細(xì)胞核去核卵母細(xì)胞核DNA【答案解析】【分析】本題以圖文結(jié)合的形式綜合考查學(xué)生對(duì)基因工程、核移植等相關(guān)知識(shí)的識(shí)記和理解能力。解答本題需熟記并理解核移植技術(shù)的過(guò)程、基因工程的基本操作程序，特別是明確PCR技術(shù)的原理和過(guò)程、基因表達(dá)載體的組成及其作用、限制酶的作用等相關(guān)知識(shí)并形成清晰的知識(shí)網(wǎng)絡(luò)。在此基礎(chǔ)上，結(jié)合問(wèn)題情境，從題圖中提取有效信息進(jìn)行相關(guān)問(wèn)題的解答。【題目詳解】（1）要保證目的基因在受體細(xì)胞中能夠正確表達(dá)，目的基因的首端應(yīng)有啟動(dòng)子，尾端應(yīng)有終止子。甲是將某種病毒的外殼蛋白（L1）基因連接在GFP基因的5ˊ末端而獲得的L1-GFP融合基因，據(jù)此結(jié)合題意并分析圖示可知：該團(tuán)隊(duì)在將甲插入質(zhì)粒P0時(shí)，如果用E2或E3，則目的基因不完整，而使用E1和E4這兩種限制酶進(jìn)行酶切保證了甲的完整，而且也保證了甲與載體正確連接，因此，使用的兩種限制酶，是E1和E4。（2）構(gòu)建的真核表達(dá)載體P1中含有GFP基因，而GFP基因的表達(dá)產(chǎn)物“某種熒光蛋白（GFP）”在紫外光或藍(lán)光激發(fā)下會(huì)發(fā)出綠色熒光。若在導(dǎo)入P1的牛皮膚細(xì)胞中觀察到了綠色熒光，則說(shuō)明L1基因在牛的皮膚細(xì)胞中完成了表達(dá)?；虻谋磉_(dá)過(guò)程包括轉(zhuǎn)錄和翻譯。（3）若要獲得含有甲的牛，可采用核移植技術(shù)，即將能夠產(chǎn)生綠色熒光細(xì)胞的細(xì)胞核移入牛的去核卵母細(xì)胞中獲得重組細(xì)胞，并將該重組細(xì)胞在體外培養(yǎng)成重組胚胎，再經(jīng)過(guò)胚胎移植等獲得含有甲的牛。（4）PCR是多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的縮寫(xiě)，是一種在生物體外復(fù)制特定DNA片斷的核酸合成技術(shù)。若利用PCR方法檢測(cè)甲是否存在于克隆牛的不同組織細(xì)胞中，則應(yīng)分別以該牛不同組織細(xì)胞中的核DNA作為PCR模板?！敬鸢更c(diǎn)睛】本題的難點(diǎn)在于對(duì)（1）的解答。解題的關(guān)鍵是：以題意“獲得L1-GFP融合基因（簡(jiǎn)稱(chēng)為甲）”的過(guò)程為切入點(diǎn)，圍繞“基因表達(dá)載體的組成及其作用”和圖示呈現(xiàn)的“酶切位點(diǎn)的”信息進(jìn)行綜合分析。9、植物組織培養(yǎng)植物體細(xì)胞雜交纖維素酶（纖維素和果膠酶）促進(jìn)（或誘導(dǎo)）原生質(zhì)體的融合葉綠體滲透壓愈傷組織形態(tài)和數(shù)目黑腐病菌【答案解析】

由圖可知，①用纖維素酶、果膠酶進(jìn)行去壁處理，②表示用物理或化學(xué)方法誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合?！绢}目詳解】（1）圖中培育抗黑腐病雜種黑芥一花椰菜植株的過(guò)程中，經(jīng)過(guò)了植物原生質(zhì)體的融合，經(jīng)過(guò)了脫分化、再分化等過(guò)程，故用到了植物體細(xì)胞雜交和植物組織培養(yǎng)。（2）過(guò)程①去壁用纖維素酶和果膠酶，過(guò)程②中PEG可以誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，經(jīng)過(guò)②原生質(zhì)體融合后，需要篩選出融合的雜種細(xì)胞，可以通過(guò)觀察雜種細(xì)胞是否含有黑芥葉肉組胞的綠色的葉綠體來(lái)進(jìn)行判斷。（3）原生質(zhì)體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇以保持一定的滲透壓以維持原生質(zhì)體的形態(tài)和活性，以避免原生質(zhì)體的失水或吸水。原生質(zhì)體再生細(xì)胞壁后，經(jīng)過(guò)脫分化形成愈傷組織，再經(jīng)過(guò)再分化雜種植株。（4）若分析再生植株的染色體變異類(lèi)型（包括結(jié)構(gòu)變異和數(shù)目變異），應(yīng)剪取再生植株和雙親植株的根尖，制成裝片，在顯微鏡下觀察并比較染色體的形態(tài)和數(shù)目。將雜種植株栽培在含有黑腐病菌的環(huán)境中，只有具有抗性的植株才能夠存活?！敬鸢更c(diǎn)睛】花椰菜幼根不含葉綠體，黑芥幼葉含葉綠體，經(jīng)過(guò)原生質(zhì)體融合處理后，雜種細(xì)胞--花椰菜-黑芥含葉綠體，故可以根據(jù)是否含葉綠體進(jìn)行初步篩選。10、基因文庫(kù)-TTAA啟動(dòng)子終止子Ca2+感受態(tài)③lacZ′標(biāo)記基因區(qū)插入外源基因后被破壞，不能表達(dá)出β-半乳糖苷酶，故菌落為白色抗原-抗體雜交【答案解析】

分析題圖，目的基因的左側(cè)有限制酶EcoRI的識(shí)別序列，右側(cè)是限制酶SmaI的識(shí)別序列，而質(zhì)粒上只有限制酶EcoRI的識(shí)別序列，則需要用限制酶EcoRI來(lái)切割質(zhì)粒，用限制酶EcoRI和SmaI來(lái)切割含有目的基因的外源DNA分子，而這樣會(huì)使目的基因右側(cè)無(wú)法與質(zhì)粒連接，所以目的基因被切割下來(lái)和質(zhì)粒連接之前，需在目的基因的右側(cè)連接限制酶EcoRI切割形成的末端，即-TTAA；用限制酶EcoRI切割質(zhì)粒時(shí)，會(huì)破壞質(zhì)粒上的lacZ'基因，但切割后的質(zhì)粒自身環(huán)化后，lacZ'基因又被修復(fù)，能表達(dá)產(chǎn)生B-半乳糖苷酶，在X-gal和IPTG存在下，可以產(chǎn)生藍(lán)色沉淀，使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色，所以菌落①②呈現(xiàn)藍(lán)色；菌落③導(dǎo)入的是重組質(zhì)粒，其lacZ'基因被破壞，不能表達(dá)產(chǎn)生B-半乳糖苷酶，在X-gal和IPTG存在下，菌落顏色為白色?！绢}目詳解】（1）基因工程中，目的基因可以從基因文庫(kù)中直接獲取。（2）根據(jù)以上分析可知，圖中目的基因被切割下來(lái)和質(zhì)粒連接之前，需在目的基因的右側(cè)連接限制酶EcoRI切割形成的末端，即-TTAA