禽類繁殖生物技術(shù)

禽類繁殖生物技術(shù)演示文稿第一頁，共三十八頁。（優(yōu)選）禽類繁殖生物技術(shù)第二頁，共三十八頁。第一節(jié)禽類的生殖生理

一、公禽的生殖器官（一）睪丸

公禽睪丸位于腹腔脊柱腹側(cè)，由短的睪丸系膜懸吊于腹腔體，前接胸腹膈和肺，背部接腎前部。

睪丸由睪丸間質(zhì)和睪丸實質(zhì)組成。

公禽睪丸精細(xì)管壁由生精細(xì)胞和支持細(xì)胞組成。

第三頁，共三十八頁。第一節(jié)禽類的生殖生理

一、公禽的生殖器官（二）附睪

禽類附睪是一長紡錘形的管狀膨大物，位于睪丸背內(nèi)側(cè)凹緣，與睪丸一起包在被膜內(nèi)，由睪丸網(wǎng)、睪丸輸出小管、附睪小管和附睪管共同組成。

禽類附睪管短，向后與長而彎曲的輸精管相接。禽類附睪不發(fā)達(dá)，較小，僅在睪丸活動期才明顯擴大，且附睪內(nèi)不貯存精子。

第四頁，共三十八頁。第一節(jié)禽類的生殖生理

一、公禽的生殖器官（三）輸精管

輸精管左右兩側(cè)各一條，與輸尿管平行，為極彎曲的白色細(xì)管，長約10cm。

輸精管上皮能分泌酸性磷酸酶，精子最后在此成熟，其囊狀部常有大量成熟精子，精子也可被輸精管上皮所吸收。第五頁，共三十八頁。第一節(jié)禽類的生殖生理

一、公禽的生殖器官（四）交媾器公雞的交媾器：公雞沒有真正的陰莖，但有一套完整的突起，稱交媾器，位于泄殖腔后端腹側(cè)，一般情況下隱匿在泄殖腔內(nèi)，由輸精管乳頭、脈管體、陰莖和淋巴褶四部分組成。水禽的交媾器：水禽（鴨和鵝）的交媾器由一對輸精管乳頭和陰莖組成。水禽的交媾器較發(fā)達(dá)，為螺旋錐狀體，其表面有螺旋形的輸精溝。

第六頁，共三十八頁。第一節(jié)禽類的生殖生理

二、公禽的精子與精液（一）精子的形態(tài)特點禽類的精子有一個很長的頭部，頭的前端有尖形的頂體，有一個短的中段連接著一個長長的尾部。（二）精液性狀

禽類的精液為乳白色或略帶黃色，是不透明的乳狀液體，略帶腥味。若混有血液，則精液呈粉紅色，被糞便污染的精液則呈黃褐色。禽類的精液由精子和精清組成。禽類精液的密度大，其粘度高。

禽類新鮮精液一般呈弱堿性。第七頁，共三十八頁。第一節(jié)禽類的生殖生理

二、公禽的精子與精液（三）禽類精液的化學(xué)成分

1、禽類精子本身含酯類和糖蛋白，也含有各種酶，因此精子在無氧或有氧條件下都可分解糖類為精子提供能量，而精清則是鹽類和若干氨基酸組成的水溶液。

2、精液中含有粘多糖、葡萄糖、甘油等。另外，禽類精液中谷氨酸和鉀含量高，而氯化物的含量低。雞精液中堿性磷酸酶活性較高。第八頁，共三十八頁。第一節(jié)禽類的生殖生理

三、母禽的生殖器官（一）卵巢

1、禽類的左側(cè)卵巢以短的卵巢系膜韌帶懸吊于腹腔背側(cè)，前端與左肺緊接，腹側(cè)接腺胃和脾，彼此被腹氣囊隔開，背側(cè)與左腎前部相接，向后以腹膜褶與輸卵管相連。

2、卵巢實質(zhì)含皮質(zhì)和髓質(zhì)，髓質(zhì)與皮質(zhì)之間為致密結(jié)締組織性的白膜，白膜伸入皮質(zhì)和髓質(zhì)內(nèi)，形成卵巢基質(zhì)。

3、禽類卵巢的成熟卵泡完全突出于卵巢表面，成熟卵泡從內(nèi)向外由卵黃膜、放射帶、卵黃周膜、顆粒層和卵泡膜組成，借卵泡柄與卵巢相連。

第九頁，共三十八頁。第一節(jié)禽類的生殖生理

三、母禽的生殖器官（一）卵巢

4、卵帶:卵泡上與柄相對的中央有一條無結(jié)締組織而且血管較少的灰白色狹帶。

5、體積和外形：隨年齡的增長和機能狀態(tài)的發(fā)展而有很大的變化。

（二）輸卵管

1、位置：前端開口于卵巢正后方，沿腹腔的左背側(cè)壁后行，后端開口于泄殖腔。

2、主要功能:完成卵細(xì)胞的受精和完成胚胎的早期發(fā)育，是保證胚胎體外發(fā)育并形成蛋的重要器官。

第十頁，共三十八頁。第一節(jié)禽類的生殖生理

三、母禽的生殖器官（二）輸卵管

3、輸卵管的長度和形態(tài)隨著年齡和不同生理階段而有差異。

4、輸卵管分為漏斗部、蛋白分泌部、峽部、子宮部和陰道部五個部分。

①漏斗部：位于卵巢正后方，是精子和卵子受精的場所，分為漏斗部本身與漏斗頸部。

②蛋白分泌部：前端與漏斗部界限不明顯，后端有明顯窄環(huán)與峽部區(qū)分，其基本功能是分泌蛋白。第十一頁，共三十八頁。第一節(jié)禽類的生殖生理

三、母禽的生殖器官（二）輸卵管

③峽部：位于蛋白分泌部和子宮之間，峽部分泌物形成蛋的內(nèi)外兩層蛋殼膜，并補充蛋白的水分。

④子宮部：分泌子宮液、蛋殼、殼上的膠護(hù)膜和蛋殼色素。

⑤陰道：開口于泄殖腔背壁左側(cè)，子宮與陰道以括約肌為界限，陰道位于子宮與泄殖腔之間的厚壁窄管。第十二頁，共三十八頁。第一節(jié)禽類的生殖生理

四、母禽的卵泡發(fā)育、排卵與蛋的形成（一）卵子的發(fā)生與卵泡的發(fā)育

1、卵子的發(fā)生可分為增殖期、生長期和成熟期。

2、在生長期內(nèi)，卵原細(xì)胞停止增殖開始生長，稱為初級卵母細(xì)胞。

3、在卵母細(xì)胞生長和發(fā)育的整個過程中，卵泡的滲透性及膜的厚度發(fā)生改變，并參與卵母細(xì)胞的形成、生長和成熟過程。

第十三頁，共三十八頁。第一節(jié)禽類的生殖生理

四、母禽的卵泡發(fā)育、排卵與蛋的形成（二）排卵

1、卵泡成熟后，在激素和神經(jīng)系統(tǒng)的控制下，使卵泡表面無血管的“卵帶區(qū)”破裂，釋放出卵母細(xì)胞的過程稱排卵。

2、卵巢分泌孕酮，孕酮水平達(dá)到激發(fā)垂體釋放促黃體素的反應(yīng)閾值,于是垂體開始釋放促黃體素，該激素作用于卵泡，使卵帶處的微血管消失或變色，縫痕擴大，在卵泡膜肌纖維作用下，卵帶區(qū)破裂，卵子排出。

第十四頁，共三十八頁。第一節(jié)禽類的生殖生理

四、母禽的卵泡發(fā)育、排卵與蛋的形成（三）蛋的形成與產(chǎn)出

1、成熟卵泡在促性腺激素的作用下破裂排出卵黃進(jìn)入漏斗部，雞卵黃從排出至全部納入漏斗部約需13分鐘，此時若與精子相遇，在15～18分鐘內(nèi)便發(fā)生受精。

2、卵黃通過漏斗部進(jìn)入輸卵管的膨大部后，首先被腺體分泌的濃蛋白包圍，由于輸卵管的蠕動作用，使卵黃在輸卵管內(nèi)沿長軸做被動性的機械旋轉(zhuǎn)，使這層濃蛋白扭轉(zhuǎn)而形成系帶和系帶層濃蛋白，然后被分泌的稀蛋白包圍形成內(nèi)稀蛋白層，而后又形成外濃蛋白層。

3、由于膨大部的蠕動，促使卵黃進(jìn)入峽部，在此處形成內(nèi)外蛋殼膜，包圍整個蛋白和卵黃，

4、卵黃經(jīng)峽部進(jìn)入子宮部，在此停留約18～20小時或更長一些時間，形成蛋殼和外稀蛋白層。

第十五頁，共三十八頁。第一節(jié)禽類的生殖生理

五、禽類的胚胎發(fā)育（一）禽類胚胎的體內(nèi)發(fā)育

1、禽類的胚胎發(fā)育的營養(yǎng)物質(zhì)并不完全由母體直接提供，而主要來源于蛋。

2、禽類胚胎的體內(nèi)發(fā)育在蛋的形成過程中完成；雞蛋產(chǎn)出體外時，雞胚發(fā)育已達(dá)內(nèi)外兩個胚層的原腸期。

（二）禽類胚胎的體外發(fā)育

1、雞胚體外發(fā)育的臨界溫度為23.9℃。

2、受精蛋獲得孵化條件，胚胎繼續(xù)發(fā)育，在原有兩個胚層的基礎(chǔ)上形成中胚層，之后在內(nèi)、中、外三個胚層基礎(chǔ)上形成個體所有的組織和器官。

第十六頁，共三十八頁。第二節(jié)禽類的人工授精一、采精方法

（一）截取法

母禽是公禽天然的性刺激，以此為原理而采得精液的方法稱截取法，據(jù)有無假陰道又可分為臺禽法和假陰道法。（二）電刺激法

電刺激法用弱電流刺激公禽射精，可用于雞、鴨、鵝和火雞等公禽，生產(chǎn)中主要用于番鴨精液的采集，也常用此法選擇采精能力強的雞、鴨、鵝等種禽。

第十七頁，共三十八頁。第二節(jié)禽類的人工授精一、采精方法

（三）按摩法

1、按摩采精法分為背部按摩、腹部按摩和背腹式按摩三種方式。

2、背腹式按摩采精法多用于體型較大、重型品種的鴨與鵝的采精，有時也用于公雞采精的調(diào)教期，而雞與體型小的鴨和鵝的采精，多用背式按摩采精。第十八頁，共三十八頁。第二節(jié)禽類的人工授精二、精液品質(zhì)評定

1、精液的外觀

正常禽類精液為乳白色或略呈黃色，乳狀稠度，不透明液體。

2、采精量

用有刻度的集精杯上直接讀出。雞的采精量一般平均為0.2～0.5ml。

3、精子活力禽類精液中直線運動的精子才有受精能力，而呈圓周運動或擺動的精子則無受精能力。

4、精子密度

是每毫升精液中所含的精子總數(shù)，直接影響蛋的受精率。雞的精子密度一般為20～50億/ml。原精液目測法估計精子活力時，一般分為密、中等和稀三個等級。

5、精子畸形率畸形率越高，受精率越低，亦是精液品質(zhì)的重要指標(biāo)之一

6、PH值禽類新鮮精液呈弱堿性。第十九頁，共三十八頁。第二節(jié)禽類的人工授精三、精液的保存

（一）精液的液態(tài)保存

1、常溫保存

新鮮精液常用隔水降溫，在18～20℃保存1小時用于輸精，使用簡單的稀釋液，如生理鹽水或復(fù)方生理鹽水，稀釋比例為1：1或１:２。

2、低溫保存低溫保存時，將經(jīng)稀釋的精液置于30℃水浴，再放入2～5℃冰箱，在1～2小時內(nèi)完成降溫過程。第二十頁，共三十八頁。第二節(jié)禽類的人工授精三、精液的保存

（二）精液的冷凍保存

（1）采精：冷凍用精液無糞便和透明液污染。（2）稀釋：采精后盡快稀釋，在精液中按比例加入稀釋液，稀釋倍數(shù)視精子密度而定，但須確保陰道輸精時輸精量不超過0.4ml。（3）降溫：在5℃條件下放置2～4小時，使精液溫度由30℃以上降至5℃。（4）加防凍劑：一般添加量甘油為3～10%，二甲基亞砜為4～6%、乙烯二醇為4～10%。

第二十一頁，共三十八頁。第二節(jié)禽類的人工授精三、精液的保存

（二）精液的冷凍保存

（5）平衡：加入防凍劑后在5℃平衡15分鐘至2小時。（6）分裝冷凍：每分鐘降溫1℃至-20～-30℃，然后以每分鐘降溫50℃降溫至-150℃，再投入液氮保存。（7）解凍：在0～5℃緩慢解凍或30～40℃快速解凍。（8）輸精：在子宮部或膨大部輸精，若陰道部輸精則輸精深度2～4cm，且輸精時有效精子含量為7～10億。第二十二頁，共三十八頁。第二節(jié)禽類的人工授精四、母禽的輸精

禽類的輸精是用一定的器具將精液注入母禽生殖道一定部位的技術(shù)。（一）輸精方法

1、陰道部輸精

2、子宮內(nèi)輸精

3、膨大部輸精

（二）輸精時間

雞和火雞的輸精在產(chǎn)完蛋的下午4點鐘以后進(jìn)行。鴨在夜間產(chǎn)蛋，輸精宜在上午10點以后進(jìn)行。鵝在上午產(chǎn)蛋，輸精可在白天12點以后進(jìn)行。

第二十三頁，共三十八頁。第二節(jié)禽類的人工授精四、母禽的輸精（三）輸精間隔和輸精量

生產(chǎn)實踐中，雞每次輸精時含原精液0.025～0.05ml，其中有效精子數(shù)為0.5～1億，在盛產(chǎn)期，輸入原精液0.025ml，輸精間隔5～7天，產(chǎn)蛋中后期輸入原精液0.05ml，輸精間隔4～5天。（四）輸精注意事項

1、在半小時內(nèi)輸精；

2、若著力于右側(cè)，則易引起母禽排糞；

3、斜插則不易輸入精液且易損傷輸卵管；

第二十四頁，共三十八頁。第二節(jié)禽類的人工授精四、母禽的輸精（四）輸精注意事項

4、放松對母禽腹部壓力，以免精液逆流出輸卵管，使精液全部輸入；

5、插入輸精管不要用力過大，以免驚嚇、損傷母禽和造成輸卵管損傷；

6、將輸精管偏向一側(cè)緩緩插入；

7、不輸入空氣或氣泡；

8、遵守?zé)o菌操作，防止相互感染。

第二十五頁，共三十八頁。第三節(jié)禽類繁殖生物技術(shù)一、禽類的性別控制

（一）雞的性別決定

1、性染色體決定學(xué)說性別由性染色體決定，即個體的性別取決于受精時雌雄配子所攜帶的性染色體的類型。把雌性異型性染色體稱為ZW型，雄性為ZZ型。

2、常染色體平衡學(xué)說生物的性別是受細(xì)胞核內(nèi)染色體上雄性化基因系統(tǒng)與雌性化基因系統(tǒng)的平衡決定的，哪一類基因系統(tǒng)占優(yōu)勢就會影響胚胎性別的發(fā)育。第二十六頁，共三十八頁。第三節(jié)禽類繁殖生物技術(shù)一、禽類的性別控制

（一）雞的性別決定

3、TDF學(xué)說哺乳動物雄性是由位于Y染色體上的一種稱之為睪丸決定因子（TDF）的基因所編碼的組織相容性抗原H-Y所決定的。

4、其它基因?qū)W說

SF1、SOX9、AMH等，且它們可能在性別決定的不同層次上發(fā)揮著不同的作用，但由于它們都不是性連鎖基因，一定程度上決定了它們不可能在性別決定中起決定作用。第二十七頁，共三十八頁。第三節(jié)禽類繁殖生物技術(shù)一、禽類的性別控制

（二）雞的性別分化

1、性別的分化就是由遺傳性別發(fā)育成表型性別的過程。

2、一般認(rèn)為引起哺乳動物性別分化的機制是雄性特異的Y染色體Sry的表達(dá)。

3、Lillve提出了胚胎分化的激素學(xué)說;Witsch等人提出了性腺分化的誘導(dǎo)學(xué)說。

4、性別分化是以性別決定機制為基礎(chǔ)，由激素類物質(zhì)誘導(dǎo)發(fā)生。

第二十八頁，共三十八頁。第三節(jié)禽類繁殖生物技術(shù)一、禽類的性別控制

（三）性別鑒定

1、一般形態(tài)性別鑒別方法哺乳動物最早的性別鑒定是對供體精子染色體的鑒別。

2、細(xì)胞水平上的性別鑒定用碘化丙錠對雌性和雄性細(xì)胞核進(jìn)行染色，再用流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測。

3、分子水平上的性別鑒定利用性連鎖DNA序列進(jìn)行家禽性別鑒定。

①通過DNA印跡雜交該方法是通過對雞W染色體上XhoI家族的重復(fù)序列進(jìn)行克隆和測序，用生物素標(biāo)記的0.7kb重復(fù)片段的重組質(zhì)粒為探針，利用雜交技術(shù)對雞進(jìn)行了性別鑒定，缺點是需要對DNA純化。

第二十九頁，共三十八頁。第三節(jié)禽類繁殖生物技術(shù)一、禽類的性別控制

（三）性別鑒定

3、分子水平上的性別鑒定

②細(xì)胞原位雜交（ISH）利用原位雜交技術(shù)檢測核苷酸序列較方便，無論是用提純的DNA，還是細(xì)胞，甚至血液進(jìn)行原位雜交，雌性和雄性都能清楚地鑒定。

③聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)鑒定W染色體，PCR技術(shù)鑒定5～7天雞胚性別的方法。

（四）雞的性別反轉(zhuǎn)

人工誘導(dǎo)雞性別反轉(zhuǎn)的方法

（1）外源激素誘導(dǎo)：用雌激素或雄激素處理禽胚，調(diào)節(jié)皮質(zhì)部與髓質(zhì)部的發(fā)育，從而控制性別。

第三十頁，共三十八頁。第三節(jié)禽類繁殖生物技術(shù)一、禽類的性別控制

（四）雞的性別反轉(zhuǎn)

人工誘導(dǎo)雞性別反轉(zhuǎn)的方法

（2）免疫學(xué)方法誘導(dǎo)：用睪丸和卵巢制成的抗血清處理性別未分化的雞胚，可以誘導(dǎo)性反轉(zhuǎn)。

（3）芳香化酶抑制劑誘導(dǎo)：芳香化酶抑制劑抑制雌激素生成，睪酮濃度相對增加，使胚胎向雄性轉(zhuǎn)化。

第三十一頁，共三十八頁。第三節(jié)禽類繁殖生物技術(shù)二、禽類的胚胎操作

（一）禽類的體外受精和胚胎移植

1、體外受精

①母雞在產(chǎn)蛋后15分鐘或20分鐘回收排出的卵子，收集的卵子放在含有60～70ml改良的Ringer’s液中，取0.2～0.5ml稀釋的精液，放在胚珠上，并在410C的條件下培養(yǎng)15分鐘，使其體外受精，之后，在Ringer’s溶液中漂洗以除去精子。

②將母雞輸卵管喇叭口拉出，撐開，體外受精的卵從燒杯灌入張開的喇叭口，使卵移向輸卵管膨大部前部，放回卵巢囊中，縫合切口。

第三十二頁，共三十八頁。第三節(jié)禽類繁殖生物技術(shù)二、禽類的胚胎操作

（一）禽類的體外受精和胚胎移植

2、胚胎移植

Tanaka(1994)移植了76個體外受精獲得的受精卵產(chǎn)出53個正常蛋，31枚受精，孵出6只雛雞。

（二）禽類早期胚胎體外培養(yǎng)

1、人造材料蛋殼培養(yǎng)體系人造材料蛋殼培養(yǎng)是一種完全脫離天然蛋殼，采用人造材料容器等進(jìn)行的雞或鵪鶉胚胎體外培養(yǎng)方法。第三十三頁，共三十八頁。第三節(jié)禽類繁殖生物技術(shù)二、禽類的胚胎操作

（二）禽類早期胚胎體外培養(yǎng)

2、代用蛋殼體系

我國禽類胚胎體外培養(yǎng)技術(shù):

①胚胎發(fā)生階段的雞胚：從囊胚到孵化72小時（雞）或到60小時（鵪鶉），直接把新生雞胚在常規(guī)下孵化72小時，或以切去銳端的普通蛋殼作為代用殼,整個卵黃移入其中,注滿培養(yǎng)液,無毒薄膜密封,縱軸水平方向固定,繼續(xù)孵化。

②72小時到出雛：取切去鈍端的雙黃蛋殼作為代用殼,胚胎移入后注入單純稀蛋白至蛋殼切口下一定位置,無毒薄膜封口,繼續(xù)孵化。

第三十四頁，共三十八頁。第三節(jié)禽類繁殖生物技術(shù)二、禽類的胚胎操作

（二）禽類早期胚胎體外培養(yǎng)

3、三期培養(yǎng)體系

①

Ferry（1988）首先建立了受精卵－囊胚的體外培養(yǎng)方法：將卵裂前受精卵（連帶卵黃和部分濃蛋白）胚盤向上置于60ml的玻璃杯中，注入培養(yǎng)液至胚盤水平位置，無毒薄膜密封杯口，41～42℃培養(yǎng)24h。