肺部感染的實(shí)驗(yàn)室檢查演示教學(xué)課件

肺部感染的實(shí)驗(yàn)室檢查第二軍醫(yī)大學(xué)長(zhǎng)征醫(yī)院全軍臨床免疫研究所仲人前1肺部感染的實(shí)驗(yàn)室檢查第二軍醫(yī)大學(xué)長(zhǎng)征醫(yī)院仲人前1肺部感染的臨床特點(diǎn)

肺部感染的發(fā)生過(guò)程

肺部感染實(shí)驗(yàn)室檢查

實(shí)驗(yàn)室檢查質(zhì)量保證報(bào)告提綱2肺部感染的臨床特點(diǎn)

肺部感染的發(fā)生過(guò)程

肺部感染實(shí)驗(yàn)室檢查

肺部感染的臨床特點(diǎn)肺部感染臨床癥狀相似，以咳嗽、咳痰為主感染的病原體繁多，不同年齡，不同季節(jié)，不同環(huán)境，不同基礎(chǔ)疾病感染的病原體不同針對(duì)不同的病原體應(yīng)采取針對(duì)性的治療方法3肺部感染的臨床特點(diǎn)肺部感染臨床癥狀相似，以咳嗽、咳痰為主3肺部感染的發(fā)生過(guò)程遺傳因素環(huán)境因素免疫因素肺部感染病原體4肺部感染的發(fā)生過(guò)程遺傳因素環(huán)境因素免疫因素肺部感染病原體4病原體感染的易感基因AdrianVSHill,

PhilTransRSocB(2012)367,840–8495病原體感染的易感基因AdrianVSHill,Phil肺部感染的環(huán)境因素生物燃料吸煙空氣污染濫用抗生素免疫抑制劑氣候變化RobertJ.Laumbach,JAllergyClinImmunol.2012January;129(1):3–13JoonYoungSong.JKoreanMedSci2013;28:4-156肺部感染的環(huán)境因素生物燃料RobertJ.LaumbaEffectofcigarettesmokeoninflammationJ.Lee,JDentRes.2012;91(2):142–1497Effectofcigarettesmokeoni肺部感染的免疫因素TLRonairwayepithelialcellsYongLi,ClinDevImmunol.2012;2012:7913928肺部感染的免疫因素TLRonairwayepithel肺部感染的免疫因素EpithelialcellproducedchemokinesandcytokinesagainstbacteriainfectionsYongLi,ClinDevImmunol.2012;2012:7913929肺部感染的免疫因素Epithelialcellprodu肺部感染常見(jiàn)病原體類型細(xì)菌性肺炎如肺炎鏈球菌、甲型溶血性鏈球菌、金黃色葡萄球菌、肺炎克雷白桿菌、流感嗜血桿菌、銅綠假單胞菌、埃希大腸桿菌、結(jié)核桿菌等真菌性肺炎如白念珠菌、曲霉菌、放射菌等病毒性肺炎如冠狀病毒、腺病毒、流感病毒、巨細(xì)胞病毒、單純皰疹病毒等非典型性肺炎如軍團(tuán)菌、支原體和衣原體等其它病原體所致的肺炎如立克次體、弓形蟲、原蟲、寄生蟲如肺包蟲、肺吸蟲、肺血吸蟲）等10肺部感染常見(jiàn)病原體類型細(xì)菌性肺炎如肺炎鏈球菌、甲型溶血性鏈英國(guó)肺炎病原體病原體占肺炎病因%臨床表現(xiàn)肺炎鏈球菌50社區(qū)、既往健康肺炎支原體6同上流感病毒A5同上流感嗜血桿菌5基礎(chǔ)肺?。篊OPD肺炎衣原體5社區(qū)獲得性肺炎鸚鵡熱衣原體3接觸鳥(niǎo)類金黃色葡萄球菌2兒童、毒品、流感病毒相關(guān)軍團(tuán)菌2公共場(chǎng)所爆發(fā)、散發(fā)、地方流行伯納特立克次體1屠宰場(chǎng)和皮革工人銅綠<1囊性纖維化卡氏肺孢子菌<1AIDS、淋巴瘤、白血病、使用細(xì)胞毒藥物及糖皮質(zhì)激素衣氏放線菌星型諾卡菌CMV、煙曲霉、厭氧菌<1吸入性肺炎、酗酒、手術(shù)后未分離到病原菌2011英國(guó)肺炎病原體病原體占肺炎病因%臨床表現(xiàn)肺炎鏈球菌50社區(qū)、肺部感染的實(shí)驗(yàn)室檢查1、根據(jù)檢驗(yàn)常規(guī)初步判定是否感染2、根據(jù)感染部位推測(cè)可能的病原體3、根據(jù)感染人群推測(cè)可能的病原體4、根據(jù)可能的病原體選擇檢測(cè)方法12肺部感染的實(shí)驗(yàn)室檢查1、根據(jù)檢驗(yàn)常規(guī)初步判定是否感染12肺部感染的實(shí)驗(yàn)室檢查1、根據(jù)檢驗(yàn)常規(guī)初步判定是否感染血常規(guī)CRPPCT內(nèi)毒素G試驗(yàn)，GM試驗(yàn)13肺部感染的實(shí)驗(yàn)室檢查1、根據(jù)檢驗(yàn)常規(guī)初步判定是否感染13血常規(guī)檢查14血常規(guī)檢查14CRP（CreactiveProtein）與肺炎鏈球菌C多糖體反應(yīng)是一種重要的急性時(shí)相反應(yīng)蛋白血清CRP由肝臟合成,半衰期19小時(shí)IL-1、IL-6、TNF是其最重要的調(diào)節(jié)因子15CRP（CreactiveProtein）與肺炎鏈球菌DiagnosticaccuracyofCRPincombinationwithIL-6andIL-8NoraHofer,Neonatology2012;102:25–3616DiagnosticaccuracyofCRPinPCT（procalcitonin）Procalcitonin（降鈣素原）由細(xì)菌內(nèi)毒素誘導(dǎo)產(chǎn)生升高：嚴(yán)重細(xì)菌、真菌、寄生蟲感染以及膿毒癥和多臟器功能衰竭不升高：自身免疫、過(guò)敏和病毒感染不升高：局部有限的細(xì)菌感染、輕微感染和慢性炎癥17PCT（procalcitonin）ProcalcitoPCTastoGuideAntibioticTherapyin

AdultPatientswithRespiratoryTractInfectionsDavidN.Gilbert,ClinicalInfectiousDiseases2011;52(S4):S346–S35018PCTastoGuideAntibioticTheG試驗(yàn)G試驗(yàn)檢測(cè)的是真菌的細(xì)胞壁成分---(1,3)-β-D-葡聚糖，人體的吞噬細(xì)胞吞噬真菌后，能持續(xù)釋放該物質(zhì)，使血液及體液中含量增高（淺部真菌感染無(wú)類似現(xiàn)象）。

1-3-β-D-葡聚糖可特異性激活鱟（Limulus）變形細(xì)胞裂解物中的G因子，引起裂解物凝固，故稱G試驗(yàn)。適用于除隱球菌和接合菌（包括毛霉菌、根霉菌等）外的所有深部真菌感染的早期診斷，尤其是念珠菌和曲霉菌，但不能確定菌種。以下情況可出現(xiàn)假陽(yáng)性：（1）使用纖維素膜進(jìn)行血透，標(biāo)本或患者暴露于紗布或其他含有葡聚糖的材料；（2）靜脈輸注免疫球蛋白、白蛋白、凝血因子或血液制品；（3）鏈球菌血癥；（4）操作者處理標(biāo)本時(shí)存在污染。（5）另外，使用多糖類抗癌藥物、放化療造成的粘膜損傷導(dǎo)致食物中的葡聚糖或定植的念珠菌經(jīng)胃腸道進(jìn)入血液等也可能造成假陽(yáng)性，食用菌類，如蘑菇等食物可以導(dǎo)致假陽(yáng)性。19G試驗(yàn)G試驗(yàn)檢測(cè)的是真菌的細(xì)胞壁成分---(1,3)-β-DGM試驗(yàn)GM試驗(yàn)檢測(cè)的是半乳甘露聚糖（galactomannan)，曲霉菌特有的細(xì)胞壁多糖成分是β（1-5）呋喃半乳糖殘基，菌絲生長(zhǎng)時(shí)，半乳甘露聚糖從薄弱的菌絲頂端釋放，是最早釋放的抗原。主要適于侵襲性曲霉菌感染的早期診斷，GM釋放量與菌量成正比，可以反映感染程度。連續(xù)檢測(cè)GM可作為治療療效的監(jiān)測(cè)。在造血干細(xì)胞移植患者中的診斷敏感性高。以下情況可出現(xiàn)假陽(yáng)性：（1）使用使用半合成青霉素尤其是哌拉西林/他唑巴坦；（2）新生兒和兒童；（3）血液透析；（4）自身免疫性肝炎等；（5）食用可能含有GM的牛奶等高蛋白食物和污染的大米等。以下情況可出現(xiàn)假陰性：（1）釋放入血循環(huán)中的曲霉GM（包括甘露聚糖）并不持續(xù)存在而是會(huì)很快清除；（2）以前使用了抗真菌藥物；（3）病情不嚴(yán)重；（4）非粒細(xì)胞缺乏的患者。20GM試驗(yàn)GM試驗(yàn)檢測(cè)的是半乳甘露聚糖（galactomann病原學(xué)診斷2、根據(jù)感染部位推測(cè)可能的病原體感染類型病原菌類別咽炎/扁桃體炎A群C群和G群鏈球菌★，壞死梭桿菌，淋病奈瑟菌，肺炎衣原體，白喉棒狀桿菌，潰瘍棒狀桿菌，肺炎支原體，溶血性隱秘桿菌鼻竇炎肺炎鏈球菌★，流感嗜血桿菌★，金黃色葡萄球菌，卡他莫拉菌，混合厭氧菌和嗜氧菌感染，A群鏈球菌，肺炎嗜披衣菌，綠膿桿菌及其他革蘭陰性桿菌會(huì)厭炎化膿性鏈球菌★，肺炎鏈球菌★，金黃色葡萄球菌，流感嗜血桿菌支氣管炎百日咳鮑特菌★，肺炎支原體，肺炎衣原體，卡他莫拉菌，流感嗜血桿菌，銅綠假單胞菌，肺炎鏈球菌膿胸金黃色葡萄球菌★，肺炎鏈球菌★，A群鏈球菌，脆弱擬桿菌，肺炎克雷伯菌及其它腸桿菌菌，放線菌，奴卡氏菌，結(jié)核分枝桿菌及其它菌種肺炎肺炎鏈球菌★，肺炎克雷伯菌★，大腸埃希菌★，銅綠假單胞菌★，鮑曼不動(dòng)桿菌★，耐甲氧西林金黃色葡萄球菌★，卡氏肺孢子菌★，流感嗜血桿菌，卡他莫拉菌，軍團(tuán)菌，肺炎支原體，沙眼衣原體，肺炎衣原體，金黃色葡萄球菌，嗜麥芽窄食單胞菌，結(jié)核分支桿菌，奴卡菌，曲霉菌4．肺部特殊病原體感染：鼠疫耶爾森菌，放線菌，炭疽桿菌，球孢子菌，組織胞漿菌，結(jié)核分支桿菌，奴卡菌，弗朗西斯菌，隱球菌，洋蔥伯克霍氏菌，馬紅球菌，立克次體21病原學(xué)診斷2、根據(jù)感染部位推測(cè)可能的病原體感染類型病原菌類別病原學(xué)診斷3、根據(jù)感染人群推測(cè)可能的病原體社區(qū)獲得性感染：肺炎鏈球菌★，流感嗜血桿菌，卡他莫拉菌，軍團(tuán)菌，肺炎支原體，沙眼衣原體，肺炎衣原體，金黃色葡萄球菌醫(yī)院獲得性感染：肺炎克雷伯菌★，大腸埃希菌★，銅綠假單胞菌★，鮑曼不動(dòng)桿菌★，嗜麥芽窄食單胞菌，耐甲氧西林金黃色葡萄球菌★免疫缺陷患者感染：卡氏肺孢子菌★，結(jié)核分支桿菌，奴卡菌，曲霉菌肺部特殊病原體感染：鼠疫耶爾森菌，放線菌，炭疽桿菌，球孢子菌，組織胞漿菌，結(jié)核分支桿菌，奴卡菌，弗朗西斯菌，隱球菌，洋蔥伯克霍氏菌，馬紅球菌，立克次體22病原學(xué)診斷3、根據(jù)感染人群推測(cè)可能的病原體22CAP、HAP的發(fā)病時(shí)間和病原體構(gòu)成48h≤HAP早期<5天肺炎鏈球菌流感嗜血桿菌HAP中期≥5天HAP晚期MSSAorMRSA腸桿菌屬肺炎克雷伯菌,大腸桿菌綠膿桿菌不動(dòng)桿菌屬嗜麥芽窄食假單胞菌35101520CAP<48h主要致病菌多為非多重耐藥菌，預(yù)后好肺炎支原體G＋菌為主,G－菌比例較早發(fā)性HAP低20入院時(shí)間（天）多為多重耐藥菌株ATS.AmJRespirCritCareMed.2005;171.388–41嗜肺軍團(tuán)菌23CAP、HAP的發(fā)病時(shí)間和病原體構(gòu)成48h≤HAP早期<5病原學(xué)診斷4、根據(jù)可能的病原體選擇檢測(cè)方法培養(yǎng)： 細(xì)菌、真菌染色鏡檢： 結(jié)核分枝桿菌、真菌、肺孢子菌病原體鑒定： 生化鑒定、質(zhì)譜分析（布魯克、梅里埃）抗原檢測(cè)： 肺炎鏈球菌（尿抗原）、軍團(tuán)菌（尿抗菌）、 病毒、支原體、衣原體、真菌抗體檢測(cè)： 立克次體、軍團(tuán)菌PCR： 所有病原菌，尤其是難培養(yǎng)的細(xì)菌和病毒細(xì)胞因子檢測(cè)：INF-γ24病原學(xué)診斷4、根據(jù)可能的病原體選擇檢測(cè)方法24培養(yǎng)基的選擇增菌培養(yǎng)基：肉湯、堿性蛋白胨水基礎(chǔ)培養(yǎng)基：營(yíng)養(yǎng)瓊脂、M-H瓊脂選擇培養(yǎng)基：麥康凱瓊脂、SS瓊脂鑒別培養(yǎng)基：膽汁七葉苷瓊脂厭氧培養(yǎng)基：厭氧血平板接種方法肉湯增菌：血液、腦脊液等蛋白胨水增菌：糞便（弧菌）平板劃線接種：其他標(biāo)本（四區(qū)劃線法）25培養(yǎng)基的選擇接種方法25染色鏡檢直接鏡檢：濕片法或懸滴法，觀察細(xì)菌動(dòng)力革蘭染色鏡檢：陽(yáng)性（紫色）、陰性（紅色）抗酸染色鏡檢：抗酸菌（紅色）其它染色鏡檢：a.莢膜

b.鞭毛

c.異染顆粒26染色鏡檢直接鏡檢：濕片法或懸滴法，觀察細(xì)菌動(dòng)力26流感嗜血桿菌肺炎克雷伯菌27流感嗜血桿菌肺炎克雷伯菌27六胺銀染色（肺孢子菌）PAS染色（肺諾卡菌）肺活檢組織抗酸桿菌28六胺銀染色（肺孢子菌）PAS染色（肺諾卡菌）肺活檢組織抗酸桿生化鑒定利用細(xì)菌可以分解、發(fā)酵不同的底物： 葡萄糖、乳糖等糖類，氨基酸、鹽類等產(chǎn)生不同的代謝產(chǎn)物的特性： 酸性、堿性、產(chǎn)氣等等29生化鑒定利用細(xì)菌可以分解、發(fā)酵不同的底物：29質(zhì)譜與傳統(tǒng)細(xì)菌鑒定儀的區(qū)別質(zhì)譜儀傳統(tǒng)細(xì)菌鑒定儀鑒定方法MALDI-TOF傳統(tǒng)微生物形態(tài)學(xué)、細(xì)菌生理生化特點(diǎn)操作流程直接細(xì)菌涂布標(biāo)本板上，加上基質(zhì)，上機(jī)細(xì)菌涂片、手工生化、比濁、上機(jī)鑒定板種類一種五種鑒定時(shí)間數(shù)分鐘12-24h菌種常見(jiàn)細(xì)菌、分支桿菌、絲狀真菌常見(jiàn)細(xì)菌成本25元55元30質(zhì)譜與傳統(tǒng)細(xì)菌鑒定儀的區(qū)別質(zhì)譜儀傳統(tǒng)細(xì)菌鑒定儀鑒定方法MAL抗原抗體檢測(cè)31抗原抗體檢測(cè)31分子診斷定性PCR

實(shí)時(shí)熒光定量PCR

多指標(biāo)檢測(cè)平臺(tái)32分子診斷定性PCR32呼吸道感染常見(jiàn)病原體及檢測(cè)方法肺炎病原體分子診斷平臺(tái)BhatN，UseandEvaluationofMolecularDiagnosticsforPneumoniaEtiologyStudies.ClinicalInfectiousDiseases2012;54(S2):S153–833呼吸道感染常見(jiàn)病原體及檢測(cè)方法肺炎病原體分子診斷平臺(tái)Bhat肺炎病原體分子診斷平臺(tái)的條件可滿足條件必要條件可檢測(cè)到變異的目標(biāo)病原體可檢測(cè)到目標(biāo)病原體簡(jiǎn)易使用、流程和空間具有高分析敏感性和特異性報(bào)告時(shí)間快速具有高臨床敏感性和特異性整個(gè)處理過(guò)程包含核算抽提能處理不同呼吸道樣本小樣本量也可檢測(cè)明確樣本采集要求有效期長(zhǎng)且室溫保存內(nèi)含質(zhì)控品及質(zhì)控程序可提供定量或半定量結(jié)果提供必要的維護(hù)經(jīng)認(rèn)證機(jī)構(gòu)注冊(cè)具有可接收的發(fā)展時(shí)間框架有合理價(jià)格34肺炎病原體分子診斷平臺(tái)的條件可滿足條件必要條件可檢測(cè)到變異的Antigen-specificTcellsLiuHY,HepatobiliaryPancreatDisInt2006;5(1):129-13235Antigen-specificTcellsLiuHY3636實(shí)驗(yàn)室檢查的質(zhì)量保證分析前影響因素分析中影響因素分析后影響因素37實(shí)驗(yàn)室檢查的質(zhì)量保證分析前影響因素分析中影響因素分Reviewoflaboratoryerrors38Reviewoflaboratoryerrors38BoniniP，Errorsinlaboratorymedicine.ClinChem2002;48(5):69139BoniniP，Errorsinlaboratory溝通與合作非常重要正確的臨床思維是指導(dǎo)選擇適當(dāng)?shù)呐R床檢驗(yàn)方法的前提尋找病原體源頭所在、多方協(xié)作、傾力尋找“對(duì)癥”治療沒(méi)有最好的藥物，只有最正確的選擇臨床療效是最高的肯定和獎(jiǎng)勵(lì)病原菌越來(lái)越刁鉆，每一個(gè)患者都是一本書，我們從中學(xué)到知識(shí)，獲得樂(lè)趣40溝通與合作非常重要正確的臨床思維40謝謝!41謝謝!41肺部感染的實(shí)驗(yàn)室檢查第二軍醫(yī)大學(xué)長(zhǎng)征醫(yī)院全軍臨床免疫研究所仲人前42肺部感染的實(shí)驗(yàn)室檢查第二軍醫(yī)大學(xué)長(zhǎng)征醫(yī)院仲人前1肺部感染的臨床特點(diǎn)

肺部感染的發(fā)生過(guò)程

肺部感染實(shí)驗(yàn)室檢查

實(shí)驗(yàn)室檢查質(zhì)量保證報(bào)告提綱43肺部感染的臨床特點(diǎn)

肺部感染的發(fā)生過(guò)程

肺部感染實(shí)驗(yàn)室檢查

肺部感染的臨床特點(diǎn)肺部感染臨床癥狀相似，以咳嗽、咳痰為主感染的病原體繁多，不同年齡，不同季節(jié)，不同環(huán)境，不同基礎(chǔ)疾病感染的病原體不同針對(duì)不同的病原體應(yīng)采取針對(duì)性的治療方法44肺部感染的臨床特點(diǎn)肺部感染臨床癥狀相似，以咳嗽、咳痰為主3肺部感染的發(fā)生過(guò)程遺傳因素環(huán)境因素免疫因素肺部感染病原體45肺部感染的發(fā)生過(guò)程遺傳因素環(huán)境因素免疫因素肺部感染病原體4病原體感染的易感基因AdrianVSHill,

PhilTransRSocB(2012)367,840–84946病原體感染的易感基因AdrianVSHill,Phil肺部感染的環(huán)境因素生物燃料吸煙空氣污染濫用抗生素免疫抑制劑氣候變化RobertJ.Laumbach,JAllergyClinImmunol.2012January;129(1):3–13JoonYoungSong.JKoreanMedSci2013;28:4-1547肺部感染的環(huán)境因素生物燃料RobertJ.LaumbaEffectofcigarettesmokeoninflammationJ.Lee,JDentRes.2012;91(2):142–14948Effectofcigarettesmokeoni肺部感染的免疫因素TLRonairwayepithelialcellsYongLi,ClinDevImmunol.2012;2012:79139249肺部感染的免疫因素TLRonairwayepithel肺部感染的免疫因素EpithelialcellproducedchemokinesandcytokinesagainstbacteriainfectionsYongLi,ClinDevImmunol.2012;2012:79139250肺部感染的免疫因素Epithelialcellprodu肺部感染常見(jiàn)病原體類型細(xì)菌性肺炎如肺炎鏈球菌、甲型溶血性鏈球菌、金黃色葡萄球菌、肺炎克雷白桿菌、流感嗜血桿菌、銅綠假單胞菌、埃希大腸桿菌、結(jié)核桿菌等真菌性肺炎如白念珠菌、曲霉菌、放射菌等病毒性肺炎如冠狀病毒、腺病毒、流感病毒、巨細(xì)胞病毒、單純皰疹病毒等非典型性肺炎如軍團(tuán)菌、支原體和衣原體等其它病原體所致的肺炎如立克次體、弓形蟲、原蟲、寄生蟲如肺包蟲、肺吸蟲、肺血吸蟲）等51肺部感染常見(jiàn)病原體類型細(xì)菌性肺炎如肺炎鏈球菌、甲型溶血性鏈英國(guó)肺炎病原體病原體占肺炎病因%臨床表現(xiàn)肺炎鏈球菌50社區(qū)、既往健康肺炎支原體6同上流感病毒A5同上流感嗜血桿菌5基礎(chǔ)肺?。篊OPD肺炎衣原體5社區(qū)獲得性肺炎鸚鵡熱衣原體3接觸鳥(niǎo)類金黃色葡萄球菌2兒童、毒品、流感病毒相關(guān)軍團(tuán)菌2公共場(chǎng)所爆發(fā)、散發(fā)、地方流行伯納特立克次體1屠宰場(chǎng)和皮革工人銅綠<1囊性纖維化卡氏肺孢子菌<1AIDS、淋巴瘤、白血病、使用細(xì)胞毒藥物及糖皮質(zhì)激素衣氏放線菌星型諾卡菌CMV、煙曲霉、厭氧菌<1吸入性肺炎、酗酒、手術(shù)后未分離到病原菌2052英國(guó)肺炎病原體病原體占肺炎病因%臨床表現(xiàn)肺炎鏈球菌50社區(qū)、肺部感染的實(shí)驗(yàn)室檢查1、根據(jù)檢驗(yàn)常規(guī)初步判定是否感染2、根據(jù)感染部位推測(cè)可能的病原體3、根據(jù)感染人群推測(cè)可能的病原體4、根據(jù)可能的病原體選擇檢測(cè)方法53肺部感染的實(shí)驗(yàn)室檢查1、根據(jù)檢驗(yàn)常規(guī)初步判定是否感染12肺部感染的實(shí)驗(yàn)室檢查1、根據(jù)檢驗(yàn)常規(guī)初步判定是否感染血常規(guī)CRPPCT內(nèi)毒素G試驗(yàn)，GM試驗(yàn)54肺部感染的實(shí)驗(yàn)室檢查1、根據(jù)檢驗(yàn)常規(guī)初步判定是否感染13血常規(guī)檢查55血常規(guī)檢查14CRP（CreactiveProtein）與肺炎鏈球菌C多糖體反應(yīng)是一種重要的急性時(shí)相反應(yīng)蛋白血清CRP由肝臟合成,半衰期19小時(shí)IL-1、IL-6、TNF是其最重要的調(diào)節(jié)因子56CRP（CreactiveProtein）與肺炎鏈球菌DiagnosticaccuracyofCRPincombinationwithIL-6andIL-8NoraHofer,Neonatology2012;102:25–3657DiagnosticaccuracyofCRPinPCT（procalcitonin）Procalcitonin（降鈣素原）由細(xì)菌內(nèi)毒素誘導(dǎo)產(chǎn)生升高：嚴(yán)重細(xì)菌、真菌、寄生蟲感染以及膿毒癥和多臟器功能衰竭不升高：自身免疫、過(guò)敏和病毒感染不升高：局部有限的細(xì)菌感染、輕微感染和慢性炎癥58PCT（procalcitonin）ProcalcitoPCTastoGuideAntibioticTherapyin

AdultPatientswithRespiratoryTractInfectionsDavidN.Gilbert,ClinicalInfectiousDiseases2011;52(S4):S346–S35059PCTastoGuideAntibioticTheG試驗(yàn)G試驗(yàn)檢測(cè)的是真菌的細(xì)胞壁成分---(1,3)-β-D-葡聚糖，人體的吞噬細(xì)胞吞噬真菌后，能持續(xù)釋放該物質(zhì)，使血液及體液中含量增高（淺部真菌感染無(wú)類似現(xiàn)象）。

1-3-β-D-葡聚糖可特異性激活鱟（Limulus）變形細(xì)胞裂解物中的G因子，引起裂解物凝固，故稱G試驗(yàn)。適用于除隱球菌和接合菌（包括毛霉菌、根霉菌等）外的所有深部真菌感染的早期診斷，尤其是念珠菌和曲霉菌，但不能確定菌種。以下情況可出現(xiàn)假陽(yáng)性：（1）使用纖維素膜進(jìn)行血透，標(biāo)本或患者暴露于紗布或其他含有葡聚糖的材料；（2）靜脈輸注免疫球蛋白、白蛋白、凝血因子或血液制品；（3）鏈球菌血癥；（4）操作者處理標(biāo)本時(shí)存在污染。（5）另外，使用多糖類抗癌藥物、放化療造成的粘膜損傷導(dǎo)致食物中的葡聚糖或定植的念珠菌經(jīng)胃腸道進(jìn)入血液等也可能造成假陽(yáng)性，食用菌類，如蘑菇等食物可以導(dǎo)致假陽(yáng)性。60G試驗(yàn)G試驗(yàn)檢測(cè)的是真菌的細(xì)胞壁成分---(1,3)-β-DGM試驗(yàn)GM試驗(yàn)檢測(cè)的是半乳甘露聚糖（galactomannan)，曲霉菌特有的細(xì)胞壁多糖成分是β（1-5）呋喃半乳糖殘基，菌絲生長(zhǎng)時(shí)，半乳甘露聚糖從薄弱的菌絲頂端釋放，是最早釋放的抗原。主要適于侵襲性曲霉菌感染的早期診斷，GM釋放量與菌量成正比，可以反映感染程度。連續(xù)檢測(cè)GM可作為治療療效的監(jiān)測(cè)。在造血干細(xì)胞移植患者中的診斷敏感性高。以下情況可出現(xiàn)假陽(yáng)性：（1）使用使用半合成青霉素尤其是哌拉西林/他唑巴坦；（2）新生兒和兒童；（3）血液透析；（4）自身免疫性肝炎等；（5）食用可能含有GM的牛奶等高蛋白食物和污染的大米等。以下情況可出現(xiàn)假陰性：（1）釋放入血循環(huán)中的曲霉GM（包括甘露聚糖）并不持續(xù)存在而是會(huì)很快清除；（2）以前使用了抗真菌藥物；（3）病情不嚴(yán)重；（4）非粒細(xì)胞缺乏的患者。61GM試驗(yàn)GM試驗(yàn)檢測(cè)的是半乳甘露聚糖（galactomann病原學(xué)診斷2、根據(jù)感染部位推測(cè)可能的病原體感染類型病原菌類別咽炎/扁桃體炎A群C群和G群鏈球菌★，壞死梭桿菌，淋病奈瑟菌，肺炎衣原體，白喉棒狀桿菌，潰瘍棒狀桿菌，肺炎支原體，溶血性隱秘桿菌鼻竇炎肺炎鏈球菌★，流感嗜血桿菌★，金黃色葡萄球菌，卡他莫拉菌，混合厭氧菌和嗜氧菌感染，A群鏈球菌，肺炎嗜披衣菌，綠膿桿菌及其他革蘭陰性桿菌會(huì)厭炎化膿性鏈球菌★，肺炎鏈球菌★，金黃色葡萄球菌，流感嗜血桿菌支氣管炎百日咳鮑特菌★，肺炎支原體，肺炎衣原體，卡他莫拉菌，流感嗜血桿菌，銅綠假單胞菌，肺炎鏈球菌膿胸金黃色葡萄球菌★，肺炎鏈球菌★，A群鏈球菌，脆弱擬桿菌，肺炎克雷伯菌及其它腸桿菌菌，放線菌，奴卡氏菌，結(jié)核分枝桿菌及其它菌種肺炎肺炎鏈球菌★，肺炎克雷伯菌★，大腸埃希菌★，銅綠假單胞菌★，鮑曼不動(dòng)桿菌★，耐甲氧西林金黃色葡萄球菌★，卡氏肺孢子菌★，流感嗜血桿菌，卡他莫拉菌，軍團(tuán)菌，肺炎支原體，沙眼衣原體，肺炎衣原體，金黃色葡萄球菌，嗜麥芽窄食單胞菌，結(jié)核分支桿菌，奴卡菌，曲霉菌4．肺部特殊病原體感染：鼠疫耶爾森菌，放線菌，炭疽桿菌，球孢子菌，組織胞漿菌，結(jié)核分支桿菌，奴卡菌，弗朗西斯菌，隱球菌，洋蔥伯克霍氏菌，馬紅球菌，立克次體62病原學(xué)診斷2、根據(jù)感染部位推測(cè)可能的病原體感染類型病原菌類別病原學(xué)診斷3、根據(jù)感染人群推測(cè)可能的病原體社區(qū)獲得性感染：肺炎鏈球菌★，流感嗜血桿菌，卡他莫拉菌，軍團(tuán)菌，肺炎支原體，沙眼衣原體，肺炎衣原體，金黃色葡萄球菌醫(yī)院獲得性感染：肺炎克雷伯菌★，大腸埃希菌★，銅綠假單胞菌★，鮑曼不動(dòng)桿菌★，嗜麥芽窄食單胞菌，耐甲氧西林金黃色葡萄球菌★免疫缺陷患者感染：卡氏肺孢子菌★，結(jié)核分支桿菌，奴卡菌，曲霉菌肺部特殊病原體感染：鼠疫耶爾森菌，放線菌，炭疽桿菌，球孢子菌，組織胞漿菌，結(jié)核分支桿菌，奴卡菌，弗朗西斯菌，隱球菌，洋蔥伯克霍氏菌，馬紅球菌，立克次體63病原學(xué)診斷3、根據(jù)感染人群推測(cè)可能的病原體22CAP、HAP的發(fā)病時(shí)間和病原體構(gòu)成48h≤HAP早期<5天肺炎鏈球菌流感嗜血桿菌HAP中期≥5天HAP晚期MSSAorMRSA腸桿菌屬肺炎克雷伯菌,大腸桿菌綠膿桿菌不動(dòng)桿菌屬嗜麥芽窄食假單胞菌35101520CAP<48h主要致病菌多為非多重耐藥菌，預(yù)后好肺炎支原體G＋菌為主,G－菌比例較早發(fā)性HAP低20入院時(shí)間（天）多為多重耐藥菌株ATS.AmJRespirCritCareMed.2005;171.388–41嗜肺軍團(tuán)菌64CAP、HAP的發(fā)病時(shí)間和病原體構(gòu)成48h≤HAP早期<5病原學(xué)診斷4、根據(jù)可能的病原體選擇檢測(cè)方法培養(yǎng)： 細(xì)菌、真菌染色鏡檢： 結(jié)核分枝桿菌、真菌、肺孢子菌病原體鑒定： 生化鑒定、質(zhì)譜分析（布魯克、梅里埃）抗原檢測(cè)： 肺炎鏈球菌（尿抗原）、軍團(tuán)菌（尿抗菌）、 病毒、支原體、衣原體、真菌抗體檢測(cè)： 立克次體、軍團(tuán)菌PCR： 所有病原菌，尤其是難培養(yǎng)的細(xì)菌和病毒細(xì)胞因子檢測(cè)：INF-γ65病原學(xué)診斷4、根據(jù)可能的病原體選擇檢測(cè)方法24培養(yǎng)基的選擇增菌培養(yǎng)基：肉湯、堿性蛋白胨水基礎(chǔ)培養(yǎng)基：營(yíng)養(yǎng)瓊脂、M-H瓊脂選擇培養(yǎng)基：麥康凱瓊脂、SS瓊脂鑒別培養(yǎng)基：膽汁七葉苷瓊脂厭氧培養(yǎng)基：厭氧血平板接種方法肉湯增菌：血液、腦脊液等蛋白胨水增菌：糞便（弧菌）平板劃線接種：其他標(biāo)本（四區(qū)劃線法）66培養(yǎng)基的選擇接種方法25染色鏡檢直接鏡檢：濕片法或懸滴法，觀察細(xì)菌動(dòng)力革蘭染色鏡檢：陽(yáng)性（紫色）、陰性（紅色）抗酸染色鏡檢：抗酸菌（紅色）其它染色鏡檢：a.莢膜

b.鞭毛

c.異染顆粒67染色鏡檢直接鏡檢：濕片法或懸滴法，觀察細(xì)菌動(dòng)力26流感嗜血桿菌肺炎克雷伯菌68流感嗜血桿菌肺炎克雷伯菌27六胺銀染色（肺孢子菌）PAS染色（肺諾卡菌）肺活檢組織抗酸桿菌69六胺銀染色（肺孢子菌）PAS染色（肺諾卡菌）肺活檢組織抗酸桿生化鑒定利用細(xì)菌可以分解、發(fā)酵不同的底物： 葡萄糖、乳糖等糖類，