色譜分析的一般步驟

關(guān)于色譜分析的一般步驟第1頁，共27頁，2022年，5月20日，3點(diǎn)20分，星期六主要內(nèi)容色譜分析簡介、分類及特點(diǎn)色譜分析的一般流程常見色譜儀的主要部件第2頁，共27頁，2022年，5月20日，3點(diǎn)20分，星期六1.色譜分析簡介、分類及特點(diǎn)

色譜法（chromatography）又稱“色譜分析”、“色譜分析法”、“層析法”，是一種分離和分析方法。色譜原型裝置：俄國植物學(xué)家茨維特在1906年使用的裝置1.1簡介1.2分類第3頁，共27頁，2022年，5月20日，3點(diǎn)20分，星期六色譜法簡單分類第4頁，共27頁，2022年，5月20日，3點(diǎn)20分，星期六第5頁，共27頁，2022年，5月20日，3點(diǎn)20分，星期六高效液相色譜儀第6頁，共27頁，2022年，5月20日，3點(diǎn)20分，星期六平板色譜第7頁，共27頁，2022年，5月20日，3點(diǎn)20分，星期六色譜法的特點(diǎn)高分離度高速度高靈敏度高容量高靈活性高效率作為檢測手段作為制備手段分離方式眾多應(yīng)用范圍廣第8頁，共27頁，2022年，5月20日，3點(diǎn)20分，星期六2.色譜分析的一般流程樣品預(yù)處理前處理的目的都是一致的，就是提純目標(biāo)物，并使背景簡單，使樣品適合檢測儀器的要求，提高檢出限，避免污染。一般有溶劑萃取、熱解吸、頂空、洗脫、酯化、衍生等等。氣相色譜預(yù)處理：化學(xué)衍生化、裂解色譜技術(shù)、分離與富集

第9頁，共27頁，2022年，5月20日，3點(diǎn)20分，星期六氣相色譜法的一般流程

第10頁，共27頁，2022年，5月20日，3點(diǎn)20分，星期六高效液相色譜分析的流程第11頁，共27頁，2022年，5月20日，3點(diǎn)20分，星期六由泵將儲(chǔ)液瓶中的溶劑吸入色譜系統(tǒng)，然后輸出，經(jīng)流量與壓力測量之后，導(dǎo)入進(jìn)樣器。被測物由進(jìn)樣器注入，并隨流動(dòng)相通過色譜柱，在柱上進(jìn)行分離后進(jìn)入檢測器，檢測信號由數(shù)據(jù)處理設(shè)備采集與處理，并記錄色譜圖。廢液流入廢液瓶。遇到復(fù)雜的混合物分離（極性范圍比較寬）還可用梯度控制器作梯度洗脫。這和氣相色譜的程序升溫類似，不同的是氣相色譜改變溫度，而HPLC改變的是流動(dòng)相極性，使樣品各組分在最佳條件下得以分離。第12頁，共27頁，2022年，5月20日，3點(diǎn)20分，星期六3.常見色譜儀的主要部件進(jìn)樣系統(tǒng)檢測系統(tǒng)(色譜柱)檢測系統(tǒng)溫控系統(tǒng)記錄系統(tǒng)第13頁，共27頁，2022年，5月20日，3點(diǎn)20分，星期六氣相色譜儀的組成部分：載氣系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、溫度控制系統(tǒng)、檢測記錄系統(tǒng)。高效液相色譜儀組成部分：高壓輸液系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)、數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)及梯度洗脫等輔助裝置。第14頁，共27頁，2022年，5月20日，3點(diǎn)20分，星期六氣相色譜儀載氣系統(tǒng)包括氣源、凈化干燥管和載氣流速控制；常用的載氣有：氫氣、氮?dú)?、氦氣；凈化干燥管：去除載氣中的水、有機(jī)物等雜質(zhì)（依次通過分子篩、活性炭等）；載氣流速控制：壓力表、流量計(jì)、針形穩(wěn)壓閥，控制載氣流速恒定。第15頁，共27頁，2022年，5月20日，3點(diǎn)20分，星期六進(jìn)樣系統(tǒng)進(jìn)樣系統(tǒng)：進(jìn)樣器+氣化室；

氣體進(jìn)樣器（六通閥）：推拉式和旋轉(zhuǎn)式兩種。試樣首先充滿定量管，切入后，載氣攜帶定量管中的試樣氣體進(jìn)入分離柱；第16頁，共27頁，2022年，5月20日，3點(diǎn)20分，星期六液體進(jìn)樣器：

不同規(guī)格的專用注射器，填充柱色譜常用10μL；毛細(xì)管色譜常用1μL；新型儀器帶有全自動(dòng)液體進(jìn)樣器，清洗、潤沖、取樣、進(jìn)樣、換樣等過程自動(dòng)完成，一次可放置數(shù)十個(gè)試樣。微量注射器

氣化室：將液體試樣瞬間氣化的裝置。無催化作用。第17頁，共27頁，2022年，5月20日，3點(diǎn)20分，星期六分離系統(tǒng)（色譜柱）

作用：將混合物中各組分在一定色譜條件下實(shí)現(xiàn)分離，是色譜儀的核心部件。包括填充柱和毛細(xì)管柱。柱材料：金屬、玻璃、融熔石英、Teflon等填充柱：多為U形或螺旋形，內(nèi)徑2~4mm，長1~6m，由柱管和固定相組成。毛細(xì)管柱：又叫開管柱。通常將固定液均勻地涂漬或交聯(lián)到內(nèi)徑0.1~0.5mm的毛細(xì)管內(nèi)壁，長達(dá)幾十至100m。通常彎成直徑10~30cm的螺旋狀。填充柱毛細(xì)管柱第18頁，共27頁，2022年，5月20日，3點(diǎn)20分，星期六

分離室：準(zhǔn)確控制分離需要的溫度。當(dāng)試樣復(fù)雜時(shí)，分離室溫度需要按一定程序控制溫度變化，各組分在最佳溫度下分離；溫控系統(tǒng)溫度是色譜分離條件的重要選擇參數(shù)；

氣化室、分離室、檢測器三部分在色譜儀操作時(shí)均需控制溫度；

氣化室：保證液體試樣瞬間氣化；

檢測器：保證被分離后的組分通過時(shí)不在此冷；第19頁，共27頁，2022年，5月20日，3點(diǎn)20分，星期六檢測系統(tǒng)色譜儀的眼睛，

通常由檢測元件、放大器、顯示記錄三部分組成；

被色譜柱分離后的組分依次進(jìn)入檢測器，按其濃度或質(zhì)量隨時(shí)間的變化，轉(zhuǎn)化成相應(yīng)電信號，經(jīng)放大后記錄和顯示，給出色譜圖；檢測器：濃度型——檢測信號值與組分的濃度成正比；質(zhì)量型——檢測信號值與單位時(shí)間內(nèi)進(jìn)入檢測器組分的質(zhì)量成正比；廣普型——對所有物質(zhì)均有響應(yīng)；專屬型——對特定物質(zhì)有高靈敏響應(yīng)；

常用的檢測器：熱導(dǎo)檢測器、氫火焰離子化檢測器；第20頁，共27頁，2022年，5月20日，3點(diǎn)20分，星期六熱導(dǎo)檢測器(TCD)單臂四臂柱前柱前柱后柱后第21頁，共27頁，2022年，5月20日，3點(diǎn)20分，星期六氫火焰電離檢測器（FID）第22頁，共27頁，2022年，5月20日，3點(diǎn)20分，星期六電子捕獲檢測器(ECD)63Ni或3HUU過高，電子速度快，不易捕獲通常為基流電壓的2/3第23頁，共27頁，2022年，5月20日，3點(diǎn)20分，星期六火焰光度檢測器（FPD）FPD結(jié)構(gòu)：

噴嘴+濾光片+光電管。>濾光片放大器記錄儀光電管石英窗H2Air載氣+組分出口第24頁，共27頁，2022年，5月20日，3點(diǎn)20分，星期六參考文獻(xiàn)[1]許增輝.色譜分析液氧中痕量總烴準(zhǔn)確度影響因素的研討[J]．中國高新技術(shù)企業(yè)，2011.02:44-45.[2]邊爽.色譜分析法在測定苯甲酸等物質(zhì)中的應(yīng)用[J]．化學(xué)工程與裝備，2011，1:161-162[3]趙清鐵.高效液相色譜分析[J]．技術(shù)論文，33[4]

冀曉磊，陳如春，黑均安.高效液相色譜分析應(yīng)用心得[J]．新疆化工，2006，4:23-24[5]

傅若農(nóng).色譜分析概論[M].

化學(xué)工業(yè)出版社,