試劑的配制與使用

關(guān)于試劑的配制與使用第1頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六一、化學(xué)試劑的等級(jí)標(biāo)準(zhǔn)市場(chǎng)上供應(yīng)的化學(xué)試劑分國(guó)產(chǎn)和國(guó)外進(jìn)口兩種。由于各國(guó)對(duì)生產(chǎn)的化學(xué)試劑品級(jí)規(guī)格不一致，選用時(shí)應(yīng)特別注意。

(一)國(guó)產(chǎn)化學(xué)試劑

根據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)(GB)或部頒標(biāo)準(zhǔn)(HG)規(guī)定，國(guó)產(chǎn)試劑一般分四級(jí)，各級(jí)的名稱、符號(hào)及主要適用范圍見(jiàn)表2—4。(二)國(guó)外進(jìn)口化學(xué)試劑

國(guó)外生產(chǎn)化學(xué)試劑規(guī)格種類繁多，常見(jiàn)國(guó)外進(jìn)口化學(xué)試劑的國(guó)別和廠名有USA（美國(guó)）、E。Merek（德國(guó)）、Fluka（瑞士）、Jap（日本）Light（英國(guó)）等。第2頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六第3頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六二、生物試劑的種類和應(yīng)用生物試劑是用于生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、藥學(xué)等學(xué)科的科研與實(shí)踐的專用試劑，分氨基酸、糖、酶、輔酶、蛋白質(zhì)、核酸、植物堿、甾類化合物、生物染色素等幾大類。生物試劑是探索生命奧秘和生物化學(xué)檢驗(yàn)中的重要武器。以下僅介紹幾種與醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)有關(guān)的生物試劑。

第4頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六二、生物試劑的種類和應(yīng)用(一)氨基酸

作為試劑用的氨基酸要求含量不能小于98％，比旋光[α]D度應(yīng)符合要求，其它雜質(zhì)含量小。氨基酸有D和L構(gòu)型的區(qū)別，使用時(shí)應(yīng)注意選擇。

氨基酸的主要應(yīng)用：合成多肽和蛋白質(zhì)的原料，研究多肽和，蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)，某些酶促反應(yīng)的底物，制備培養(yǎng)基用的氮源，配制緩沖液等20第5頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六二、生物試劑的種類和應(yīng)用(二)、酶、輔酶酶和輔酶作為生物試劑，現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)、科學(xué)研究和衛(wèi)生事業(yè)的各個(gè)領(lǐng)域。在生物化學(xué)檢驗(yàn)中，酶作為分析試劑具有專一性高、反應(yīng)條件溫和、催化反應(yīng)速度快、無(wú)毒害等優(yōu)點(diǎn)。酶作為分析試劑，能測(cè)定標(biāo)本中用一般化學(xué)方法難于檢測(cè)的物質(zhì)。酶分析方法至今已建立了二百多種?？蓽y(cè)定一百多種臨床生化檢驗(yàn)項(xiàng)目，商品試劑盒亦有五、六十種之多。

在分子生物學(xué)技術(shù)中，限制性核酸內(nèi)切酶、聚合酶、DNA連接酶等工具酶的發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用，使人類重組DNA、探究基因的愿望得以實(shí)現(xiàn)，為基因工程這樣一門創(chuàng)造性科學(xué)提供了有效的工具。

酶是一種生物催化劑，其活性受許多因素的影響；要長(zhǎng)期保存而不失去活性是比較困難的。通常，結(jié)晶干燥的固體酶制劑比液態(tài)酶易于保存，酶試劑最好用深色瓶盛裝，置干燥器內(nèi)，再將干燥器放人低溫冰箱，這樣能做到低溫、干燥、避光的保存要求。第6頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六二、生物試劑的種類和應(yīng)用(三)、核苷酸

作為生物試劑的核苷酸，大多都以核苷酸的鈉(鉀、鋰)鹽形式存在，核苷酸的鹽類比較穩(wěn)定，便于保存，易溶解。在分子生物學(xué)技術(shù)中，核苷酸用作合成寡核苷酸的原料，制備核酸探針，廣泛應(yīng)用于基因研究和疾病的診斷。

第7頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六二、生物試劑的種類和應(yīng)用(四)、蛋白質(zhì)隨著人們對(duì)蛋白質(zhì)研究的不斷深入和發(fā)展，蛋白質(zhì)不僅作為被研究對(duì)象而且成為一種非常重要的生物試劑，廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域。如在臨床診斷試劑中，蛋白質(zhì)常用作為載體，利用其分子中具有的氨基、羧基、酚羥基、巰基、羥基、胍基等活潑基團(tuán)，既可與藥物、半抗原等一些小分子物質(zhì)也可與酶、蛋白毒素等大分子物質(zhì)以共價(jià)鍵的形式結(jié)合，以制備人工抗原、酶標(biāo)抗體、載體釋放藥物、抗體導(dǎo)向藥物和免疫毒素等，廣泛應(yīng)用于免疫診斷試劑和高效治療用的靶向藥物等。第8頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六三、化學(xué)試劑的保管

生物化學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室所用的化學(xué)試劑種類很多，且規(guī)格要求較高，其中不少又屬于劇毒、易爆、易燃、腐蝕性試劑。為防止因儲(chǔ)存、使用不當(dāng)，造成危險(xiǎn)事故的發(fā)生，保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性不受試劑變質(zhì)的影響，了解有關(guān)化學(xué)試劑的正確保管是十分必要的。第9頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六三、化學(xué)試劑的保管1．儲(chǔ)存化學(xué)試劑的庫(kù)房應(yīng)通風(fēng)，干燥，冷暗。2．試劑須按液體、固體分類分開(kāi)存放，并按序排好，做好標(biāo)記，便于查找。3．易燃、易揮發(fā)試劑除應(yīng)蓋好內(nèi)塞瓶蓋外，還應(yīng)用膠粘帶密封，以防揮發(fā)和泄漏。4．劇毒藥品應(yīng)專人專柜保管存放，每次使用后要記錄用量。5．強(qiáng)酸、強(qiáng)堿試劑應(yīng)分開(kāi)存放。6．生物制品、酶類制劑均應(yīng)避光冰箱低溫保存。

第10頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六四、實(shí)驗(yàn)試劑的配制和使用(一)、試劑配制的一般原則1．生物化學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室配制試劑用水均應(yīng)用蒸餾水或去離子水。

2．根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求選用不同規(guī)格的試劑，一般情況下大多選用AR級(jí)（分析純），一般溶液如無(wú)特殊要求，可選用CP級(jí)（化學(xué)純）試劑。

3．正確合理的選用衡器和量器。配制標(biāo)準(zhǔn)液或緩沖液稱重應(yīng)選用1／10000的分析天平。量器應(yīng)選用一等容量瓶和吸管。一般試劑如顯色劑、終止劑等無(wú)特殊要求的，則選用粗天平和量筒即可。

4．試劑開(kāi)瓶后，如不能一次用完，應(yīng)及時(shí)予以封閉保存，特別是易吸潮試劑。對(duì)見(jiàn)光易變質(zhì)的試劑，外面要用黑紙包裹。

5．稱量或量取試劑用的器皿，取試劑用的藥勺均應(yīng)潔凈干燥。試劑一經(jīng)取出(特別是液體試劑)，不得放回原瓶，以免影響試劑純度。

6．配制好的試劑，應(yīng)貼標(biāo)簽，寫(xiě)上試劑名稱、濃度、配制日期。第11頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六四、實(shí)驗(yàn)試劑的配制和使用(二)、試劑的配制臨床生物化學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室試劑配制大致分兩種：

1．配制以一定質(zhì)量的溶劑中所含溶質(zhì)質(zhì)量表示濃度的試劑，如％(g／g)等，只要將一定質(zhì)量的溶劑和溶質(zhì)混合均勻即可得到。

2．配制以一定體積的溶液中所含溶質(zhì)的質(zhì)量或體積表示其濃度的試劑。如％(g／ml、％(ml／m1)、mol／L、mmol／L……。將一定量的溶質(zhì)先加人適量的溶劑使其完全溶解，然后，再準(zhǔn)確加人溶劑至所需的體積，混合均勻即可得到。第12頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六四、實(shí)驗(yàn)試劑的配制和使用(三)、溶液濃度的表示法及計(jì)算

1．百分濃度

(1)質(zhì)量—質(zhì)量百分濃度：用100g溶液中所含溶質(zhì)的克數(shù)來(lái)表示的濃度，稱質(zhì)量百分比濃度，符號(hào)%（g/g）。如：36%的鹽酸表示100g溶液中含36g鹽酸。

第13頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六四、實(shí)驗(yàn)試劑的配制和使用(2)體積—體積百分濃度：用100ml溶液中所含溶質(zhì)的毫升數(shù)來(lái)表示的濃度，符號(hào)%（ml/ml）。如：75%的乙醇溶液表示100ml溶液中含75ml的乙醇。(3)質(zhì)量—體積百分濃度：用100ml溶液中所含溶質(zhì)的克數(shù)來(lái)表示的濃度，符號(hào)%（g/ml）。如0.9%的生理鹽水表示100ml溶液中含有氯化鈉0.9g。第14頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六四、實(shí)驗(yàn)試劑的配制和使用2．物質(zhì)的量濃度指1000ml溶液中含有溶質(zhì)的物質(zhì)的量。溶質(zhì)的物質(zhì)的量可用pmol、mmol、mol等表示，故物質(zhì)的量濃度為pmol／L、mmol／L、moL／L。簡(jiǎn)稱濃度C。如：配制0.4mol/L的氫氧化鈉溶液1000ml，應(yīng)取氫氧化鈉多少克？如何配制？（NaOH的摩爾質(zhì)量為40g/mol）

第15頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六四、實(shí)驗(yàn)試劑的配制和使用3．百分濃度與物質(zhì)的量濃度間的換算市售硫酸、鹽酸、硝酸等采用％(g／g)表示物質(zhì)的濃度，而實(shí)驗(yàn)室常用物質(zhì)的量濃度，故兩者間常需換算。公式：如：96%（g/g）濃硫酸比重為1.84，其摩爾濃度是多少？（硫酸的摩爾質(zhì)量為98.08）第16頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六四、實(shí)驗(yàn)試劑的配制和使用4．溶液的稀釋溶液的稀釋指向濃溶液中加入溶劑使成稀溶液的操作。根據(jù)稀釋前后溶質(zhì)量保持不變，可得下式：

C濃V濃=C稀V稀

如：配制1mol/L硫酸溶液1000ml，需取濃硫酸（18mol/L）多少ml？第17頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六四、實(shí)驗(yàn)試劑的配制和使用5．溶液的混合當(dāng)兩種不同濃度的溶液混合時(shí)，混合后溶質(zhì)的量應(yīng)等于混合前兩溶液的溶質(zhì)的量之和。由此得計(jì)算式C總×(V1+V2)=C1V1+C2V2

如：現(xiàn)有5%（g/ml）葡萄糖溶液40ml，欲配10%（g/ml）葡萄糖溶液供患者使用，應(yīng)取50%（g/ml）葡萄糖溶液多少ml混合？第18頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六四、實(shí)驗(yàn)試劑的配制和使用(四)、實(shí)驗(yàn)試劑的使用規(guī)則1．使用實(shí)驗(yàn)試劑時(shí)，首先要看清楚試劑名稱、濃度及配制日期。應(yīng)注意觀察試劑的顏色、透明度、有無(wú)沉淀，以確定其是否變質(zhì)，變質(zhì)的試劑不可使用。2．瓶塞開(kāi)啟后，瓶塞心朝上，不可與任何物品接觸，擬免污染試劑，更不允許瓶塞張冠李戴。3．吸取試劑時(shí)，只能用橡皮球或用加液器移取。用試劑瓶直接傾倒試劑時(shí)，應(yīng)注意從瓶簽對(duì)側(cè)倒出溶液，避免溶液從瓶壁外流出，腐蝕瓶簽。4．吸取完試劑后，應(yīng)立即蓋好瓶蓋，以防灰塵及臟物落入瓶中污染試劑。并按規(guī)定位置放回原處，不能亂放，防止造成工作紊亂，加錯(cuò)試劑。5．對(duì)要求低溫存放的試劑，用畢后，應(yīng)立即放回冰箱。以防室溫中擺置過(guò)久，受溫度升高影響，導(dǎo)致試劑變質(zhì)。第19頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六五、試劑盒的選擇和評(píng)價(jià)所謂試劑盒，1979年國(guó)際臨床化學(xué)協(xié)會(huì)(IFCC)曾有如下定義“兩種或兩種以上的臨床或普通實(shí)驗(yàn)室使用的材料，附帶有操作所需的組份、說(shuō)明書(shū)組合而成的包裝”。第20頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六五、試劑盒的選擇和評(píng)價(jià)診斷試劑的商品化大規(guī)模生產(chǎn)，減少了因各個(gè)實(shí)驗(yàn)室自配試劑的麻煩和浪費(fèi)，更重要的是避免了各實(shí)驗(yàn)室自配試劑而造成的測(cè)定結(jié)果差異而無(wú)法比較。為測(cè)定方法的統(tǒng)一規(guī)范化，進(jìn)而開(kāi)展室間質(zhì)量控制提供了條件，為醫(yī)療衛(wèi)生事業(yè)做出了不可忽視的貢獻(xiàn)。

商品試劑盒的發(fā)展先后經(jīng)歷了凍干型、干粉型和液體型三種劑型。

凍干型試劑因存在瓶間和批間殘留水量的差異，導(dǎo)致瓶間差和批間差較大。于是采用粉型試劑，雖然粉型試劑較凍干型試劑瓶間差小，但仍需操作者加水復(fù)溶，由于實(shí)驗(yàn)室用水質(zhì)量和加水量的誤差，直接影響測(cè)定結(jié)果，于是診斷試劑盒向液體雙試劑發(fā)展。

第21頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六五、試劑盒的選擇和評(píng)價(jià)(一)、液體雙試劑的優(yōu)點(diǎn)

1．排除瓶間差

2．減少了標(biāo)本中內(nèi)源性干擾物質(zhì)對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響

第22頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六五、試劑盒的選擇和評(píng)價(jià)(二)、試劑盒質(zhì)量評(píng)價(jià)1、試劑盒內(nèi)外檢查

第23頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六五、試劑盒的選擇和評(píng)價(jià)第24頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六五、試劑盒的選擇和評(píng)價(jià)(二)、試劑盒質(zhì)量的幾項(xiàng)指標(biāo)1．準(zhǔn)確性一般采用測(cè)定定值質(zhì)控血清和做回收實(shí)驗(yàn)，考查試劑盒的準(zhǔn)確性。

定值質(zhì)控血清(最好采用高、低值兩種定值血清)測(cè)定結(jié)果應(yīng)在定值±2SD之內(nèi)。2．精密度采用最佳條件下批內(nèi)變異系數(shù)作為考查指標(biāo)，即同一標(biāo)本在相同條件下，平行測(cè)定20次，求其結(jié)果的均值，計(jì)算變異系數(shù)CV％值，二般要求CV％<5％。3．線性及線性范圍可采用線性擬合試驗(yàn)方法，即取5種不同濃度，形成濃度梯度，每個(gè)濃度作4次平行重復(fù)測(cè)定，將其吸光度與相應(yīng)濃度作相關(guān)統(tǒng)計(jì)處理，以其相關(guān)系數(shù)r和截距b作為線性好壞的評(píng)價(jià)指標(biāo)。一般要求r≥0．995，b≤0．05。4．空白吸光度該項(xiàng)指標(biāo)主要是考查試劑中雜質(zhì)的污染情況。不同測(cè)定方法的試劑盒，國(guó)家臨床檢驗(yàn)中心對(duì)其試劑空白均有一定要求，如不符合要求，說(shuō)明試劑已受污染不能使用。如丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶測(cè)定試劑盒(NADH為指示系統(tǒng))，試劑空白吸光度A340nm>1.0，總蛋白測(cè)定試劑盒(雙縮脲法)，試劑空白吸光度A540nm<0.2。第25頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六五、試劑盒的選擇和評(píng)價(jià)(三)、試劑盒的選擇應(yīng)廣泛收集各個(gè)廠商提供的有關(guān)資料，考查其是否有批準(zhǔn)文號(hào)和生產(chǎn)許可文號(hào)。認(rèn)真閱讀其使用說(shuō)明書(shū)，了解方法的原理，試劑的組成，操作步驟，注意事項(xiàng)，試劑的穩(wěn)定性，有效期與貯存條件等內(nèi)容。結(jié)合調(diào)查使用單位對(duì)試劑盒使用情況，實(shí)驗(yàn)室可用定值血清，或病人標(biāo)本結(jié)合上述試劑盒的性能指標(biāo)做一些初步評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)。在充分調(diào)查和評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，即可作出選擇。第26頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六第四節(jié)、生物化學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室常規(guī)儀器使用臨床生物化學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)需各種儀器，如離心機(jī)、電熱恒溫水浴箱、電熱恒溫干燥箱、電熱攪拌儀、電冰箱和各種光學(xué)分析儀等，因此，了解這些儀器的正確使用和保養(yǎng)方法等知識(shí)，對(duì)保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，是非常必要的。第27頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六一、離心機(jī)離心分離原理就是利用離心機(jī)在高速旋轉(zhuǎn)時(shí)產(chǎn)生的強(qiáng)大離心力，使懸浮于溶液中密度不同的微粒依不同的速度沉降，從而達(dá)到分離、純化、制備的目的。在生物化學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室，離心機(jī)主要用來(lái)分離血清，沉淀蛋白質(zhì)，收集細(xì)胞和細(xì)胞器等。一臺(tái)離心機(jī)離心力的大小，可用相對(duì)離心力(RCF)和每分鐘轉(zhuǎn)速(rpm)表示，如10000g就表示離心力達(dá)10000個(gè)重力加速度。而轉(zhuǎn)速則指離心機(jī)轉(zhuǎn)子每分鐘旋轉(zhuǎn)的轉(zhuǎn)數(shù)。兩者的關(guān)系為：

RCF=1.118×10-5×(rpm)2×r(r為旋轉(zhuǎn)半徑)

離心機(jī)的種類很多，按其轉(zhuǎn)速的不同，分普通離心機(jī)(<6000rom)、高速離心機(jī)(6000~25000rpm)和超高速離心機(jī)(>30000rpm)。

第28頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六一、離心機(jī)(一)、普通離心機(jī)的使用放置離心機(jī)的位置應(yīng)平穩(wěn)，堅(jiān)固，外接電源應(yīng)為三相插座，且地線接地良好。1．使用前應(yīng)先檢查調(diào)速旋鈕(手柄)是否在起點(diǎn)位置“0”處，外套筒應(yīng)無(wú)破損，有無(wú)離心后的破碎殘留物，如有應(yīng)清理干凈，其底部應(yīng)放有橡皮軟墊。2．將待離心溶液倒入容積大小適宜的離心管內(nèi)，盛液量不宜超過(guò)離心管的2／3，以免溢出。然后放入離心外套筒。3．將一對(duì)裝有離心管的外套筒置臺(tái)平上，于離心管與外套筒間用自來(lái)水加減法平衡至等重，然后對(duì)稱放人離心機(jī)，并將不用的離心外套筒取出，蓋好離心機(jī)蓋。4．接通電源，然后慢慢調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速旋鈕，使轉(zhuǎn)速逐漸增加至所需的離心轉(zhuǎn)速數(shù)。停機(jī)時(shí)，應(yīng)先將調(diào)速旋鈕撥回到起點(diǎn)?！?”處，斷電，待其停止離心后再打開(kāi)機(jī)蓋，輕輕取出離心管。用完后，倒立外套筒，使其干燥存放。第29頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六一、離心機(jī)(二)、高速離心機(jī)使用1．高速離心技術(shù)方法高速離心主要適用于分離、純化、制備、分析高分子化合物及亞細(xì)胞組分。依其原理不同，其方法分差速離心法、速率區(qū)帶離心法和等密度離心法三種。德國(guó)sigma高速冷凍離心機(jī)第30頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六一、離心機(jī)（1）、差速離心法：根據(jù)顆粒大小和密度的不同存在的沉降速度差別，分級(jí)增加離心力，從試樣中依次分離出不同組分的方法。該方法操作簡(jiǎn)便，適用于分離大小和密度相差較大的顆粒，對(duì)密度相差較小的顆粒分離效果不理想。第31頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六一、離心機(jī)第32頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六一、離心機(jī)（2）、速率區(qū)帶離心法：根據(jù)分離的粒子在梯度液中沉降速度的不同，使具有不同沉降速度的粒子處于不同的密度梯度層內(nèi)分成一系列區(qū)帶，達(dá)到彼此分離的目的。把樣品鋪放在一個(gè)密度變化范圍較小、梯度斜率變化比較平緩的密度梯度頂部，在離心力場(chǎng)作用下樣品中的顆粒按照各自的沉降速度移動(dòng)到梯度中不同位置而形成區(qū)帶，使不同沉降速度的顆粒得以分離。由于該方法是根據(jù)顆粒的沉降速度進(jìn)行分離，所以梯度的密度應(yīng)低于被分離顆粒的最小密度。第33頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六一、離心機(jī)第34頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六一、離心機(jī)（3）、等密度區(qū)帶離心法：當(dāng)不同顆粒存在浮力密度差時(shí)，在離心力場(chǎng)下，顆粒或向下沉降，或向上浮起，一直沿梯度移動(dòng)到它們密度恰好相等的位置上（即等密度點(diǎn)）形成區(qū)帶，稱為等密度區(qū)帶離心法。等密度區(qū)帶離心的有效分離取決于顆粒的浮力密度差，密度差越大，分離效果越好，與顆粒的大小和形狀無(wú)關(guān)，但后兩者決定著達(dá)到平衡的速率、時(shí)間和區(qū)帶的寬度。第35頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六一、離心機(jī)第36頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六一、離心機(jī)2．高速離心技術(shù)用的轉(zhuǎn)頭

高速和超高速離心技術(shù)的轉(zhuǎn)頭結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，但技術(shù)要求極高，因轉(zhuǎn)頭在高速旋轉(zhuǎn)時(shí)受到很大內(nèi)應(yīng)力和拉力，長(zhǎng)期使用會(huì)造成累積性塑性變形。內(nèi)部結(jié)構(gòu)細(xì)微缺陷，選擇喝使用不當(dāng)會(huì)導(dǎo)致轉(zhuǎn)頭斷裂或爆炸事故。使用轉(zhuǎn)頭時(shí)，必須根據(jù)分離要求，正確選用轉(zhuǎn)頭。轉(zhuǎn)頭一般用高強(qiáng)度的鋁合金(適用于<50000rpm)或鈦合金(適用于>50000rpm)制成，轉(zhuǎn)頭分以下幾種：

①固定角轉(zhuǎn)頭

②甩平式轉(zhuǎn)頭

③連續(xù)流動(dòng)轉(zhuǎn)頭

④區(qū)帶轉(zhuǎn)頭

⑤垂直轉(zhuǎn)頭。

第37頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六一、離心機(jī)4．高速離心機(jī)使用中注意事項(xiàng)高速離心機(jī)生產(chǎn)廠家、型號(hào)不同，操作方法亦不盡相同，使用前必須對(duì)照實(shí)物認(rèn)真閱讀操作說(shuō)明書(shū)，特別應(yīng)注意以下幾點(diǎn)。(1)兩管重量必須平衡等重至0.1g。(2)更換、取、放轉(zhuǎn)頭時(shí)，應(yīng)小心輕放，不能與硬物碰撞，必須反復(fù)檢查轉(zhuǎn)頭的卡口是否對(duì)準(zhǔn)。嚴(yán)格控制轉(zhuǎn)速在轉(zhuǎn)頭轉(zhuǎn)速限制的90％內(nèi)，不能滿速，甚至超速。(3)高速運(yùn)轉(zhuǎn)前，離心室內(nèi)一定要抽成真空，并降至規(guī)定溫度。(4)離心過(guò)程中增減速度不能過(guò)快。

第38頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六一、離心機(jī)超高速離心機(jī)第39頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六二、電熱恒溫水浴箱第40頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六二、電熱恒溫水浴箱電熱恒溫水浴箱簡(jiǎn)稱水浴箱，主要用于恒溫水熱，保持化學(xué)反應(yīng)所需恒溫條件。加熱裝置為浸入式電熱管，溫度控制為螺旋管式溫控器，靈敏度一般為±0.5℃。1)、關(guān)閉水浴箱底部放水開(kāi)關(guān)，注入水，水位不能低于電熱管。2)、接通電源，打開(kāi)開(kāi)關(guān)，此時(shí)若紅燈亮，表示電熱管開(kāi)始加熱。調(diào)節(jié)溫控旋鈕至適當(dāng)位置。3)、觀察溫度計(jì)，當(dāng)溫度升至距所需溫度約2℃時(shí)，逆時(shí)針?lè)较蛐D(zhuǎn)調(diào)溫旋鈕至紅燈剛好熄滅。此后紅燈不斷熄滅，表示恒溫控制器發(fā)揮作用，再繼續(xù)觀察一段時(shí)間溫度升降變化情況，若與所需溫度不符，只需略微調(diào)節(jié)溫控旋鈕直至達(dá)到所需恒定溫度。4)、調(diào)溫旋鈕刻度盤(pán)上的溫度標(biāo)示值與箱內(nèi)水的實(shí)際溫度不符，但可記錄水箱內(nèi)溫度計(jì)所指示的溫度與調(diào)溫旋鈕在刻度盤(pán)上的指示位置，并做好相應(yīng)記號(hào)，在多次使用的基礎(chǔ)上，就可比較迅速、準(zhǔn)確地得到需要恒定的水溫。5)、若長(zhǎng)時(shí)間不用，應(yīng)將溫控旋鈕退回零，打開(kāi)防水開(kāi)關(guān)，放盡水浴箱內(nèi)的水，保持箱內(nèi)干燥，以免生銹。第41頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六三、電熱恒溫干燥箱第42頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六三、電熱恒溫干燥箱電熱恒溫干燥箱又稱烤箱，其主要用途是加熱烘干洗凈的物品和干熱滅菌；恒溫范圍一般為50℃~300℃，溫控靈敏度為±1℃。1．將溫度計(jì)插人箱頂放氣調(diào)節(jié)器中部的插孔內(nèi)。2．將電源插頭插入接地良好的三相插座。3．開(kāi)啟電熱絲分組開(kāi)關(guān)，并視所需加熱溫度的高低，開(kāi)啟一組或多組電熱絲，此時(shí)紅燈亮，表示電熱絲開(kāi)始加熱，開(kāi)啟箱內(nèi)鼓風(fēng)機(jī)，可幫助箱內(nèi)熱空氣對(duì)流。4．觀察箱頂溫度計(jì)溫度指示，待溫度上升至所需溫度差。2℃~3℃時(shí)，調(diào)節(jié)自動(dòng)恒溫器旋鈕，使綠色指示燈剛好亮，此時(shí)表示電熱絲停止加熱。繼續(xù)觀察溫度計(jì)和紅綠指示燈，了解溫度變化及恒定情況，略微細(xì)調(diào)逼控器，直至溫度自動(dòng)控制在所需溫度土1℃為止。5．加熱干燥或干熱滅菌完畢后，不能立即開(kāi)烤箱取物品，須關(guān)閉電源待溫度降至50℃以下，再開(kāi)門取物，否則玻璃器皿會(huì)因驟冷而爆裂。6．烤箱內(nèi)不能烘烤易爆、易燃、易揮發(fā)的物品以免發(fā)生事故。

第43頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六四、電熱攪拌儀第44頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六四、電熱攪拌儀電熱攪拌儀是一種既可用于溶液加熱，又可攪拌溶液的儀器。儀器托盤(pán)下有夾在云母片中的電熱絲起加熱的作用。托盤(pán)下面還有一微型電機(jī)帶動(dòng)一塊磁鐵旋轉(zhuǎn)，以帶動(dòng)容器中攪拌子轉(zhuǎn)動(dòng)，達(dá)到攪拌溶液的目的；攪拌子是用一小段鐵絲密封在玻璃管或塑料管中而制成(避免鐵絲與溶液起化學(xué)反應(yīng))，攪拌子隨磁鐵的旋轉(zhuǎn)而轉(zhuǎn)動(dòng)。電熱攪拌儀面板上有電源開(kāi)關(guān)、加熱開(kāi)關(guān)、轉(zhuǎn)速調(diào)節(jié)旋鈕和指示燈。使用電熱攪拌儀前廠先將轉(zhuǎn)速調(diào)節(jié)旋鈕調(diào)至最??；接上電源，打開(kāi)電源開(kāi)關(guān)；指示燈亮。將需攪拌的容器置托盤(pán)中央；選擇合適的攪拌子放入溶液，并置容器的中央，然后調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速旋鈕至攪拌子旋轉(zhuǎn)速度適度。需加熱時(shí)，可打開(kāi)加熱開(kāi)關(guān)，并調(diào)節(jié)調(diào)溫旋鈕至合適的溫度。使用電熱攪拌儀時(shí)，應(yīng)保持容器外壁干燥，轉(zhuǎn)速不能太快，以免溶液外濺，腐蝕托盤(pán)。用完后應(yīng)及時(shí)切斷電源。第45頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六五、電冰箱電冰箱主要用于低溫保存待檢標(biāo)本，試劑、藥品等。其使用方法及注意事項(xiàng)如下：1．冰箱應(yīng)放置在干燥通風(fēng)處，遠(yuǎn)離高溫設(shè)備，不受陽(yáng)光直射，冰箱背面應(yīng)離墻壁10cm以上，兩邊留有一定空隙，便于空氣流通散熱。2．外接電源需接地良好的三相插座。3．冰箱內(nèi)溫度的高低由溫度控制器進(jìn)行調(diào)節(jié)。4．冰箱內(nèi)托架上的物品不能堆放過(guò)擠，應(yīng)留有空隙，使冷空氣對(duì)流，達(dá)到箱內(nèi)溫度均一。5．冰箱使用一段時(shí)間后，冷藏的物品揮發(fā)的水分及空氣中的水會(huì)凍結(jié)在蒸發(fā)器的表面成為冰霜。當(dāng)冰霜太厚時(shí)，會(huì)妨礙蒸發(fā)器表面的熱交換能力，降低冰箱的制冷效率，增大用電量，故必須除霜。6．定期對(duì)冰箱內(nèi)外進(jìn)行清潔，清潔前要斷電。用中性肥皂水擦洗，再用水擦洗，然后用布擦干。冰箱外冷凝器和壓縮機(jī)上的灰塵，可用毛刷清掃，以免冰箱制冷效率降低，冰箱門不應(yīng)經(jīng)常開(kāi)啟，開(kāi)門盡量不要全開(kāi)，取物要快，以免環(huán)境中空氣大量進(jìn)入冰箱內(nèi)，致冰箱連續(xù)運(yùn)行，同時(shí)不易達(dá)到要求溫度。第46頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六第五節(jié)、生物化學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)本采集與處理臨床生物化學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)本的正確采集和處理，是保證分析檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠的一個(gè)十分重要的環(huán)節(jié)。隨著科學(xué)技術(shù)的迅速發(fā)展，新技術(shù)、新儀器、新試劑盒在檢驗(yàn)工作中的大量應(yīng)用，檢測(cè)方法的靈敏度和特異性都有顯著的提高。在分析檢測(cè)過(guò)程所致的誤差已大大減少的今天，往往不易為檢測(cè)者發(fā)現(xiàn)和引起重視的一些非分析檢測(cè)過(guò)程所致的誤差，如標(biāo)本的采集與處理，則必須給予高度重視。第47頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六一、標(biāo)本采集前應(yīng)考慮的因素

體液中的化學(xué)成分，除受病理性因素影響外，還有許多非病理性因素影響體液中化學(xué)成分濃度的波動(dòng)或干擾其測(cè)定結(jié)果，導(dǎo)致測(cè)定結(jié)果不能客觀的反映病人的真實(shí)情況。常見(jiàn)的影響因素有標(biāo)本采集的時(shí)間、體位、年齡、性別、運(yùn)動(dòng)、情緒、食物和藥物等。(一)運(yùn)動(dòng)的影響

運(yùn)動(dòng)對(duì)體液化學(xué)成分影響程度受運(yùn)動(dòng)時(shí)間、強(qiáng)度、及平時(shí)有無(wú)體育訓(xùn)練習(xí)慣有關(guān)。運(yùn)動(dòng)會(huì)致機(jī)體新陳代謝加快，細(xì)胞內(nèi)ATP減少，細(xì)胞膜通透性增加，導(dǎo)致許多胞內(nèi)酶如天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、乳酸脫氫酶、肌酸激酶、堿性磷酸酶等在血清中的活性增高，乳酸明顯增高，尿酸和血pH上升。第五節(jié)、生物化學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)本采集與處理第48頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六(二)飲食的影響

飲食對(duì)體液化學(xué)成分的影響與飲食量和食品性質(zhì)有關(guān)。一般飲食后可使血糖、鉀、鐵、三脂酰甘油、膽固醇等濃度升高。高蛋白飲食可使血清中尿素、尿酸及氨略升高，但對(duì)肌酐的影響不大。飲茶、咖啡可使體內(nèi)兒茶酚胺釋放增多，葡萄糖濃度略升高，飲咖啡可使血中游離脂肪酸明顯升高。飲酒可使血液中乳酸、尿酸、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、丁—谷氨酰升高，長(zhǎng)期飲酒者，往往伴高三脂酰甘油血癥及γ—谷氨?；茡Q酶不正常。第五節(jié)、生物化學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)本采集與處理第49頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六(三)藥物的影響

藥物對(duì)體液化學(xué)成分測(cè)定結(jié)果的影響主要有兩種原因，一種是由藥物引起的生理變化后，導(dǎo)致血中某些化學(xué)成分濃度的改變。如服用利尿藥，可使血鉀濃度降低；長(zhǎng)期服用避孕藥，可使丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、γ—谷氨?；茡Q酶活性升高。另一種是由于存在于體液中的藥物本身對(duì)分析方法的干擾，這種干擾由藥物本身的理化性質(zhì)，如顏色、熒光、氧化還原性及對(duì)酶抑制所致，如服用維生素C對(duì)Trinder反應(yīng)的干擾。由上可見(jiàn)，為了減少和排除上述因素的影響和干擾，最好在早餐前空腹采集血樣標(biāo)本，如服用了藥物，則必須在化驗(yàn)單上注明服用藥物的種類、時(shí)間和劑量。

第五節(jié)、生物化學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)本采集與處理第50頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六（四）、溶血的影響標(biāo)本溶血是臨床生化檢驗(yàn)中最常見(jiàn)的一種干擾和影響因素。溶血對(duì)相當(dāng)一部分生化檢測(cè)項(xiàng)目有影響，其中溶血后顯著升高的有總膽紅素（TBIL）、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶（AST）、總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）；溶血后顯著降低的項(xiàng)目有葡萄糖（GLU）、肌酐（CKEA）等。標(biāo)本溶血的原因：1、采血用器材部干燥、不清潔；2、穿刺不順利，淤血時(shí)間過(guò)長(zhǎng)；3、抽血速度太快；4、血液注入試管時(shí)未取下針頭或注入速度太快等。第五節(jié)、生物化學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)本采集與處理第51頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六一、血液標(biāo)本第52頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六一、血液標(biāo)本(一)、采集標(biāo)本前

要逐一核對(duì)病人姓名，床號(hào)，檢品聯(lián)號(hào)，要嚴(yán)防出現(xiàn)化驗(yàn)單上的編號(hào)與標(biāo)本號(hào)不一致，分離血清或加樣時(shí)吸錯(cuò)管號(hào)等過(guò)失錯(cuò)誤。

第53頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六一、血液標(biāo)本第54頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六一、血液標(biāo)本(二)、采血部位

一般從肘靜脈取血，若肘靜脈不明顯，可采手背靜脈血，幼兒可從頸外靜脈采血。

第55頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六一、血液標(biāo)本(三)、采血方法第56頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六一、血液標(biāo)本第57頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六第58頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六一、血液標(biāo)本第59頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六一、血液標(biāo)本第60頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六2、采集方法（1）毛細(xì)血管采血法：微量檢測(cè)

采血部位：耳垂或手指末梢第61頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六（2）靜脈采血法：

用于血沉、免疫、生化等檢測(cè)項(xiàng)目

部位：以肘部靜脈為主第62頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38分，星期六（3）動(dòng)脈采血法：血液氣體分析

部位：深部動(dòng)脈如股動(dòng)脈、橈動(dòng)脈等。第63頁(yè)，共72頁(yè)，2022年，5月20日，13點(diǎn)38