玉米淀粉檢測(cè)作業(yè)指導(dǎo)書

--16-玉米淀粉檢測(cè)作業(yè)指導(dǎo)書目錄第一章玉米淀粉水分的測(cè)定其次章玉米淀粉酸度的測(cè)定第三章玉米淀粉灰分的測(cè)定第四章玉米淀粉斑點(diǎn)的測(cè)定

玉米淀粉細(xì)度的測(cè)定玉米淀粉脂肪的測(cè)定玉米淀粉白度的測(cè)定執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)：GB/T120872023GB/T12087-1989淀粉水分的測(cè)定烘箱法1.范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了在常壓條件下，承受烘箱在130℃烘干淀粉測(cè)定水分的方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于枯燥的自然淀粉和變性淀粉的水分測(cè)定。本標(biāo)準(zhǔn)不適用于某些特別淀粉的水分測(cè)定，如含有在130℃時(shí)不穩(wěn)定物質(zhì)的淀粉。2.原理將試樣放在溫度為130℃-133℃的恒溫烘箱內(nèi),于常壓下烘干90min，測(cè)定試樣損失的質(zhì)量。3.儀器試驗(yàn)室常用儀器和以下儀器。0.001g。烘盒:用在測(cè)試條件下不受淀粉影響的金屬(例如鋁)制作，并有大小適宜的盒蓋。其有效外表能使試樣均勻分布時(shí)質(zhì)量不超過(guò)0.3g/cm255mm-65mm，高度15mm-30mm0.5mm。恒溫烘箱:配有適當(dāng)?shù)目諝庋h(huán)裝置的電加熱器，能夠使得測(cè)試樣品四周的空氣溫度均勻保持在130℃-133℃范圍內(nèi)。烘箱的熱功率應(yīng)能保證在烘箱溫度調(diào)到131℃時(shí)，放入最大30min131℃，從而保證全部的樣品同時(shí)枯燥?？菰锲?內(nèi)置有效的枯燥劑和一個(gè)使烘盒快速冷卻的多孔厚隔板。4.試驗(yàn)樣品內(nèi)，測(cè)試樣品取出后，應(yīng)將剩余樣品儲(chǔ)存在一樣的容器中，以備下次測(cè)試時(shí)再用。分析步驟烘盒恒質(zhì)取干凈的空烘盒，放在130℃烘箱內(nèi)烘30min-60min，取出烘盒置于枯燥器內(nèi)冷卻至室溫，取出稱量;再烘30min，重復(fù)進(jìn)展冷卻、稱量至前后兩次質(zhì)量差不超過(guò)0.005g，即為恒質(zhì)(m0樣品及烘盒稱量5g0.25g外表上，蓋上盒蓋，馬上稱量烘盒和試樣的總質(zhì)量〔m1〕。在整個(gè)過(guò)程中，應(yīng)盡可能削減烘盒在空氣中的暴露時(shí)間。測(cè)定稱量完畢后，將盒蓋翻開(kāi)斜靠在烘盒旁，快速將盛有試樣的烘盒和盒蓋放入已預(yù)熱到130130130℃-133℃的條件下烘90min，然后取出，并快速蓋上盒蓋，放入枯燥器中，在枯燥器中，烘盒不行疊放。烘盒在30min-45min2min品和帶蓋烘盒的總質(zhì)量(m26.結(jié)果計(jì)算按式計(jì)算:X=(m

-m)100/(m-m〕1 2 1 0式中:X—試樣水分含量，%;mO—恒質(zhì)后的空烘盒和蓋的總質(zhì)量，單位為克(g)；ml—枯燥前帶有樣品的烘盒和蓋的總質(zhì)量，單位為克(g)；m2—枯燥后帶有樣品的烘盒和蓋的總質(zhì)量，單位為克(g)；假設(shè)兩次平行測(cè)定結(jié)果確實(shí)定差值沒(méi)有超過(guò)8.1果的算術(shù)平均值為最終測(cè)定結(jié)果。執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)：GB/T5009.53-2023淀粉類制品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的分析方法110.0g試樣消耗氧氧化鈉溶液(0.1000mol/L)的體積(mL)表示。2氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液[c(NaOH)=0.1000mol/L]。0.50g(95%50.Oml。35.0g250mL30.0mL～40.0mL50.5min色即為終點(diǎn)。結(jié)果計(jì)算X=V×2×c/0.1000式中：—一試祥酸度y——試樣消耗氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的體積，單位為毫升(mL)；c——?dú)溲趸c標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液濃度，單位為摩爾每升(mol/L)；0.1000--氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液[c(NaOH)==O.1000mol/L]的濃度，單位為摩爾每升(mol/L)。計(jì)算結(jié)果保存三位有效數(shù)字。周密度在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果確實(shí)定差值不得超過(guò)算術(shù)平均值的10%。執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)：GBT22427.1-2023淀粉灰分測(cè)定玉米淀粉灰分的測(cè)定依據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的方法，將樣品進(jìn)展灰化后得到的殘留物。原理將樣品在900℃高溫下灰化，直到灰化樣品的碳完全消逝，得到樣品的殘留物。3.儀器坩堝:由鉑或在該測(cè)定條件下不受影響的材料制成，平底，容量為40mL，最小可用外表15cm2?？菰锲?內(nèi)有有效充分的枯燥劑和一個(gè)厚的多孔板?；一癄t:有把握和調(diào)整溫度的裝置，可供給900℃±25℃的灰化溫度。0.0001g。電熱板或本生燈。操作過(guò)程坩堝預(yù)處理用蒸餾水沖洗。900℃±2530min，并在枯燥器內(nèi)冷卻至室溫，0.0001g。稱樣依據(jù)對(duì)樣品灰分含量的估量，快速稱取樣品2g～10g，準(zhǔn)確至0.0001g，將樣品均勻分布在坩堝內(nèi)，不要壓緊。5g10g。炭化下完全炭化，直至無(wú)煙產(chǎn)生。燃燒會(huì)產(chǎn)生揮發(fā)性物質(zhì)，耍避開(kāi)自燃，自燃會(huì)使樣品從坩堝中濺出而導(dǎo)致?lián)p失?；一炕戤吅螅纯虒⒏痰湻湃嘶一癄t內(nèi)，將溫度上升至900℃±25℃，保持此溫度直至1h200℃左右，然后將坩堝放入枯燥器中使之冷卻至室溫，準(zhǔn)確稱重，準(zhǔn)確至0.0001g。每次放入枯燥器的坩堝不得超過(guò)四個(gè)。測(cè)定次數(shù)應(yīng)進(jìn)展平行試驗(yàn)。結(jié)果計(jì)算計(jì)算方法(1)。X=m

/m×100?????????〔1〕1 0(2)。X=m

×100×100/m1

/〔100-H〕???????〔2〕式中:Xm1一一灰化后殘留物的質(zhì)量，單位為克(g)；m0——樣品質(zhì)量，單位為克(g)；H一一樣品按GB/T22427.2取平行試驗(yàn)的算術(shù)平均值為結(jié)果。得到的結(jié)果之差應(yīng)符合7.2試驗(yàn)結(jié)果保存兩位小數(shù)。重復(fù)性在灰分含量(質(zhì)量分?jǐn)?shù))不大于1%時(shí)，平行試驗(yàn)結(jié)果確實(shí)定差值不應(yīng)超過(guò)0.02%;在灰分1%時(shí)，確定差值則不應(yīng)超過(guò)算術(shù)平均值的2%。假設(shè)重復(fù)性超出上述兩種限值，應(yīng)再重做兩次測(cè)定。試驗(yàn)報(bào)告試驗(yàn)報(bào)告應(yīng)列出:——試驗(yàn)方法;——試驗(yàn)得到的結(jié)果;——進(jìn)展重復(fù)性試驗(yàn)得到的兩種試驗(yàn)結(jié)果。還應(yīng)列出全部未列出的操作環(huán)節(jié)以及任何偶然可能影響試驗(yàn)結(jié)果的環(huán)節(jié)。試驗(yàn)報(bào)告應(yīng)包括完全測(cè)試試樣必需的全部信息。GB/T22427.4-20231.范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了肉眼觀看測(cè)定淀粉斑點(diǎn)的方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于枯燥的粉末狀淀粉和變性淀粉。2.術(shù)語(yǔ)和定義以下術(shù)語(yǔ)和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。spot在規(guī)定條件下，用肉眼觀看到的雜色點(diǎn)。3.原理通過(guò)肉眼觀看樣品，讀出斑點(diǎn)的數(shù)量。儀器透亮板:刻有10個(gè)方形格(1cm×1cm)的無(wú)色透亮板口清潔，無(wú)污染。平板:白色，清潔，無(wú)污染，可均勻分布樣品。操作過(guò)程5.1樣品應(yīng)充分混勻。稱樣稱取樣品10g，均勻分布在平板上。計(jì)數(shù)保持30cm，用肉眼觀看樣品中的斑點(diǎn)，并進(jìn)展計(jì)數(shù)，登記10個(gè)空格內(nèi)樣品的斑點(diǎn)總數(shù)量。注:分析人員的裸眼視力或矯正視力應(yīng)在1.04應(yīng)進(jìn)展平行試驗(yàn)。結(jié)果計(jì)算計(jì)算方法結(jié)果以每平方厘米的斑點(diǎn)的數(shù)量表示，見(jiàn)式(1)。X=C/10 ???????????〔1〕式中:X——樣品的斑點(diǎn)，單位為個(gè)每平方厘米(個(gè)/cm2)；C——l0取平行試驗(yàn)的算術(shù)平均值為結(jié)果，結(jié)果保存一位有效數(shù)字。重復(fù)性平行試驗(yàn)結(jié)果確實(shí)定差值，不應(yīng)超過(guò)1.0。假設(shè)超出上述限值，應(yīng)重測(cè)定。7.試驗(yàn)報(bào)告試驗(yàn)報(bào)告應(yīng)列出:———試驗(yàn)方法;一——試驗(yàn)得到的結(jié)果;———進(jìn)展重復(fù)性試驗(yàn)而得到的兩種試驗(yàn)結(jié)果。還應(yīng)列出全部未列出的操作環(huán)節(jié)以及任何偶然可能影響試驗(yàn)結(jié)果的環(huán)節(jié)。試驗(yàn)報(bào)告應(yīng)包括完全測(cè)試試樣必需的全部信息。GB/T22427.5-20231.范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了篩分法測(cè)定淀粉細(xì)度的方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于枯燥的粉末狀淀粉和變性淀粉。2.術(shù)語(yǔ)和定義以下術(shù)語(yǔ)和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。2.1細(xì)度f(wàn)ineness用分樣篩篩分樣品，通過(guò)分樣篩得到的篩下物質(zhì)量與樣品總質(zhì)量的比值。原理用分樣篩進(jìn)展篩分，通過(guò)分樣篩得到樣品質(zhì)量的過(guò)程。儀器0.1g。分樣篩:金屬絲編織篩網(wǎng)，依據(jù)產(chǎn)品要求選用規(guī)定的孔徑。:1420次/min;振幅:2mm～5mm。5mm。5.操作過(guò)程人工篩分法樣品預(yù)處理樣品應(yīng)充分混勻。稱樣50g0.1g。篩分均勻搖動(dòng)分樣篩，直至篩分不下為止。稱量篩下物，準(zhǔn)確至0.1g。標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)篩篩分法(仲裁法)樣品預(yù)處理樣品應(yīng)充分混勻。稱樣50g0.1g。篩分510min0.1g。測(cè)定次數(shù)應(yīng)進(jìn)展平行試驗(yàn)。結(jié)果計(jì)算6.1細(xì)度以篩下物占樣品總質(zhì)量的百分比表示，計(jì)算公式見(jiàn)式(1)X=m/m×100????????????〔1〕1 0式中:X——樣品細(xì)度，%；M——樣品過(guò)篩的篩下物質(zhì)量，單位為克(g)；m0——樣品總質(zhì)量，單位為克(g)。取平行試驗(yàn)的算術(shù)平均值為結(jié)果，結(jié)果保存一位小數(shù)。6.2平行試驗(yàn)結(jié)果確實(shí)定差值，不應(yīng)超過(guò)質(zhì)量分?jǐn)?shù)的0.5%。假設(shè)超出上述限值，應(yīng)再重測(cè)定。試驗(yàn)報(bào)告試驗(yàn)報(bào)告應(yīng)列出:——試驗(yàn)方法;——試驗(yàn)得到的結(jié)果;——進(jìn)展重復(fù)性試驗(yàn)而得到的兩種試驗(yàn)結(jié)果。還應(yīng)列出全部未列出的操作環(huán)節(jié)以及任何偶然可能影響試驗(yàn)結(jié)果的環(huán)節(jié)。試驗(yàn)報(bào)告應(yīng)包括完全測(cè)試試樣必需的全部信息。執(zhí)行：GB/T12309—19901.原理的百分率。儀器a.索氏提取器(Soxhlet);b.電水浴鍋;c.烘箱。3.試劑與材料無(wú)水乙醚;濾紙筒及脫脂濾紙。4.試驗(yàn)程序5g0.0001g入抽提筒內(nèi)至虹吸管高度上邊，使乙醚虹吸下去。兩次后，再倒入乙醚至虹吸管高度2/3處，裝上冷凝管，在65℃蒸餾水的水浴上回流抽提4h。取出濾紙筒，回收乙醚，至抽提瓶1～2mL105℃0.2mg，取較小稱量結(jié)果)。計(jì)算X=〔m-m〕×100/m7 1 2 0式中:X7mg；1mg；2mg。0允許差同一樣品兩次測(cè)定值之差應(yīng)小于0.5%，最終結(jié)果保存二位小數(shù)。執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)：GB/T12309—1990微量定氮法儀器設(shè)備微量定氮裝置如圖B1所示。蒸餾將消化好并冷卻至室溫的樣品溶液全部轉(zhuǎn)移到100mL100mL20mL210mL(5)中參與40mL400。氫氧化鈉溶液。提起玻璃塞，使氫氧化鈉溶液緩慢流入反響室(6密封。通入蒸氣蒸餾5min，降低接收瓶的位置，使冷凝管管口離開(kāi)液面，連續(xù)蒸餾1min，用少量水沖洗冷凝管管口，洗液并入接收瓶中，取下接收瓶。滴定用0.1mol/L同時(shí)做空白試驗(yàn)。計(jì)算X=(V-V)×0.014×C×6.25×100/(m×0.1)1 0式中:X——食品中蛋白質(zhì)含量，%；V1一一樣品試驗(yàn)消耗鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，mL；V0——空白試驗(yàn)消耗鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，mL；Cmol/L；0.014——1mLlmol/Lg;m——樣品質(zhì)量，g;6.25——氮換算為蛋白質(zhì)的系數(shù)。允許差0.1mL，計(jì)算結(jié)果保存二位小數(shù)。執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)：GB/T22427.6-20231.范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了用光反射式白度儀測(cè)定淀粉白度的方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于枯燥的粉末狀淀粉和變性淀粉。術(shù)語(yǔ)和定義以下術(shù)語(yǔ)和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。白度whiteness在規(guī)定條件下，樣品外表藍(lán)光反射率與標(biāo)準(zhǔn)白板外表光反射率的比值。原理通過(guò)樣品對(duì)藍(lán)光的反射率與標(biāo)準(zhǔn)白板對(duì)藍(lán)光的反射率進(jìn)展比照，得到樣品的白度。儀器白度儀:波長(zhǎng)可調(diào)至457nm，有適宜的樣品盒及標(biāo)準(zhǔn)白板，讀數(shù)須準(zhǔn)確至0.1。壓樣器。操作過(guò)程樣品預(yù)處理樣品應(yīng)充分混勻。樣品白板的制作按白度儀所供給的樣品盒裝樣，并依據(jù)白度儀所規(guī)定的方法制作樣品白板。白度儀操作按所規(guī)定的操作方法進(jìn)展，用標(biāo)有白度的優(yōu)級(jí)純氧化鎂制成的標(biāo)準(zhǔn)白板進(jìn)展校正。測(cè)定用白度儀對(duì)樣品白板進(jìn)展測(cè)定，讀取白度值。測(cè)定次數(shù)應(yīng)進(jìn)展平行試驗(yàn)。結(jié)果表示表示方法白度以白度儀測(cè)得的樣品白度值表示。取平行試驗(yàn)的算術(shù)平均值為結(jié)果，保存一位小數(shù)。重復(fù)性平行試驗(yàn)結(jié)果確實(shí)定差值，不應(yīng)超過(guò)0.2。假設(shè)超出上述限值，應(yīng)重測(cè)定。7.試驗(yàn)報(bào)告試驗(yàn)報(bào)告應(yīng)列出：———試驗(yàn)方法；———試驗(yàn)得到的結(jié)果；———進(jìn)展重復(fù)性試驗(yàn)而得到的兩種試驗(yàn)結(jié)果。還應(yīng)列出全部未列出的操作環(huán)節(jié)以及任何偶然可能影響試驗(yàn)結(jié)果的環(huán)節(jié)。試驗(yàn)報(bào)告應(yīng)包括完全測(cè)試試樣必需的全部信息。執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)：GB4789.3—2023食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)大腸菌群計(jì)數(shù)設(shè)備和材料除微生物試驗(yàn)室常規(guī)滅菌及培育設(shè)備外，其他設(shè)備和材料如下：恒溫培育箱361℃、冰箱2℃5℃、恒溫水浴箱461℃、天平〔感量0.1[1m〔具0.01mL刻度、10m〔具0.1mL刻度〕或微量移液器及吸頭]、無(wú)菌錐形瓶〔容量500mL、無(wú)菌培育皿〔直徑90mm、pH計(jì)或pHpH培育基和試劑月桂基硫酸鹽胰蛋白胨〔LaurylSulfateTryptose，LST〕肉湯：見(jiàn)附錄AA.1?；途G乳糖膽鹽〔BrilliantGreenLactoseBile，BGLB〕肉湯：見(jiàn)附錄AA.2。結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂VioletRedBileAgaVRB：見(jiàn)附錄A中A.。磷酸鹽緩沖液：見(jiàn)附錄AA.4。無(wú)菌生理鹽水：見(jiàn)附錄AA.5。無(wú)菌1mol/LNaOH：見(jiàn)附錄AA.6。無(wú)菌1mol/LHCl：見(jiàn)附錄AA.7。第一法 大腸菌群MPN計(jì)數(shù)法檢驗(yàn)程序1大腸菌群MPN1大腸菌群MPN-14---19-操作步驟樣品的稀釋固體和半固體樣品：稱取25g樣品,放入盛有225mL磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無(wú)菌均質(zhì)杯內(nèi),8000r/min～10000r/min均質(zhì)1min～2min,或放入盛有225mL磷1min～2min，制成1:10的樣品勻液。液體樣品：以無(wú)菌吸管吸取25mL樣品置盛有225mL磷酸鹽緩沖液或生理鹽〔瓶?jī)?nèi)預(yù)置適當(dāng)數(shù)量的無(wú)菌玻璃珠1:10的樣品勻液。樣品勻液的pH6.5～7.51mol/LNaOH1mol/LHCl調(diào)整。用1mL無(wú)菌吸管或微量移液器吸取1:10樣品勻液1m9mL磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無(wú)菌試管中〔留意吸管或吸頭尖端不要觸及稀釋液面管或換用11mL1:100的樣品勻液。依據(jù)對(duì)樣品污染狀況的估量1次，換用1支1mL無(wú)菌吸管或吸頭。從制備樣品勻液至樣品接種完畢，全15min。初發(fā)酵試驗(yàn)每個(gè)樣品，選擇3個(gè)適宜的連續(xù)稀釋度的樣品勻液〔液體樣品可以選擇原液，每個(gè)稀3〔LST〕1mL〔1mL，則用雙料LST肉湯，361℃培育24±2242h產(chǎn)氣者進(jìn)展復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)，如未產(chǎn)氣則連續(xù)培育至48h±2h，產(chǎn)氣者進(jìn)展復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)。未產(chǎn)氣者為大腸菌群陰性。復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)用接種環(huán)從產(chǎn)氣的LST1〔BGLB〕管中，36℃±148h±2h，觀看產(chǎn)氣狀況。產(chǎn)氣者，計(jì)為大腸菌群陽(yáng)性管。大腸菌群最可能數(shù)〔MPN〕的報(bào)告按6.3確證的大腸菌群LST陽(yáng)性管數(shù)，檢索MPN表〔見(jiàn)附錄B，報(bào)告每〔m〕大腸菌群的MPN其次法大腸菌群平板計(jì)數(shù)法檢驗(yàn)程序大腸菌群平板計(jì)數(shù)法的檢驗(yàn)程序見(jiàn)圖2。8操作步驟8.1樣品的稀釋6.18.2平板計(jì)數(shù)2大腸菌群平板計(jì)數(shù)法檢驗(yàn)程序2～321mL。1mL15mL～20mL46℃的結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂〔VRBA〕約傾注于每個(gè)平皿中。留神旋轉(zhuǎn)平皿，將培育基與樣液充分混勻，待瓊脂凝固后，再加3mL～4mLVRBA36℃±118h～24h。平板菌落數(shù)的選擇選取菌落數(shù)在15CFU～150CFU之間的平板，分別計(jì)數(shù)平板上消滅的典型和可疑大腸0.5mm證明試驗(yàn)從VRBA10BGLB肉湯管內(nèi)，36℃±1℃培育24h～48h，觀看產(chǎn)氣狀況。凡BGLB肉湯管產(chǎn)氣，即可報(bào)告為大腸菌群陽(yáng)性。大腸菌群平板計(jì)數(shù)的報(bào)告經(jīng)最終證明為大腸菌群陽(yáng)性的試管比例乘以8.3中計(jì)數(shù)的平板菌落數(shù)，再乘以稀釋倍數(shù)，即為每g〔mL〕樣品中大腸菌群數(shù)。例：10-4樣品稀釋液1mL，在VRBA10010個(gè)接種BGLB610×6/1×104/mL=6.×105CFU/〔m。A〔標(biāo)準(zhǔn)性附錄〕培育基和試劑月桂基硫酸鹽胰蛋白胨〔LST〕肉湯成分胰蛋白胨或胰酪胨 20.0g氯化鈉 5.0g乳糖 5.0g磷酸氫二鉀〔K2HPO4〕 2.75g磷酸二氫鉀〔KH2PO4〕 2.75g月桂基硫酸鈉 0.1g蒸餾水 1000mLpH6.8±0.2制法將上述成分溶解于蒸餾水中，調(diào)整pH。分裝到有玻璃小倒管的試管中，每管10mL。12115min?；途G乳糖膽鹽〔BGLB〕肉湯成分蛋白胨 10.0g乳糖 10.0g牛膽粉〔oxgall或oxbile〕溶液 200mL0.1%煌綠水溶液 13.3mL蒸餾水 800mLpH7.2±0.1制法500mL200mL〔20.0g膽粉溶于200mL蒸餾水中，調(diào)整pH至7.～7.，用蒸餾水稀釋到975m，調(diào)整pH，0.113.3mL1000mL，用棉花過(guò)濾后，分裝到有玻璃10mL。12115min。結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂〔VRBA〕成分蛋白胨7.0g酵母膏3.0g乳糖10.0g氯化鈉5.0g31.5g中性紅0.03g結(jié)晶紫0.002g瓊脂15g～18g蒸餾水 1000mLpH7.4±0.1制法將上述成分溶于蒸餾水中，靜置幾分鐘，充分?jǐn)嚢?，調(diào)整pH。煮沸2min，將培育基冷45℃～50℃傾注平板。使用前臨時(shí)制備，不得超過(guò)3h。磷酸鹽緩沖液成分磷酸二氫鉀〔KH2PO4〕 34.0g蒸餾水 500mLpH7.2制法34.0g500mL175mL1mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)整pH1000mL1.25mL1000mL，分裝于適宜容器中，121℃高15min。無(wú)菌生理鹽水成分氯化鈉 8.5g蒸餾水 1 000mL制法8.5ｇ1000mL12115min。1mol/LNaOH成分NaOH 40.0g蒸餾水 1000mL制法40g1000mL12115min。1mol/LHCl成分HCl 90mL蒸餾水 1000mL制法90mL1000mL，12115min。B〔標(biāo)準(zhǔn)性附錄〕大腸菌群最可能數(shù)〔MPN〕檢索表B.1大腸菌群最可能數(shù)〔MPN〕檢索表g〔mL〕檢樣中大腸菌群最可能數(shù)〔MPN〕B.1。B.1大腸菌群最可能數(shù)〔MPN〕檢索表執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)：GB4789.2—2023食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)菌落總數(shù)測(cè)定1設(shè)備和材料除微生物試驗(yàn)室常規(guī)滅菌及培育設(shè)備外，其他設(shè)備和材料如下：36130℃±1℃〔2℃～5℃46±1℃、〔感量為0.1g[1m〔具0.01mL刻度10m〔具0.1mL刻度〕〔容量250m、500m、無(wú)菌培育皿〔直徑90m、pH計(jì)或pH比色管或周密pH和菌落計(jì)數(shù)器培育基和試劑平板計(jì)數(shù)瓊脂培育基：見(jiàn)附錄A中A.1。磷酸鹽緩沖液：見(jiàn)附錄AA.2。無(wú)菌生理鹽水：見(jiàn)附錄AA.3。檢驗(yàn)程序1。圖圖1菌落總數(shù)的檢驗(yàn)程序-19---23-操作步驟樣品的稀釋固體和半固體樣品：稱取25g樣品置盛有225mL磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無(wú)菌均質(zhì)杯內(nèi)，8000r/min～10000r/min均質(zhì)1min～2min，或放入盛有225mL稀釋液1min～2min，制成1:10的樣品勻液。液體樣品：以無(wú)菌吸管吸取25mL樣品置盛有225mL磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無(wú)菌錐形瓶〔瓶?jī)?nèi)預(yù)置適當(dāng)數(shù)量的無(wú)菌玻璃珠〕中，充分混勻，制成1:10的樣品勻液。用1mL1:101mL，沿管壁緩慢注于盛有9mL稀釋液的無(wú)菌試管中〔留意吸管或吸頭尖端不要觸及稀釋液面，振搖試管或換用11:100的樣品勻液。按6.1.3操作程序，制備10倍系列稀釋樣品勻液。每遞增稀釋一次，換用1次1mL無(wú)菌吸管或吸頭。2個(gè)～3〔液體樣品可包括原液，在進(jìn)展10倍遞增稀釋時(shí)，吸取1mL兩個(gè)平皿。同時(shí)，分別吸取1mL空白稀釋液參與兩個(gè)無(wú)菌平皿內(nèi)作空白比照。準(zhǔn)時(shí)將15mL～20mL冷卻至46〔可放置于46±1℃℃恒溫水浴箱中保溫〕傾注平皿，并轉(zhuǎn)動(dòng)平皿使其混合均勻。培育待瓊脂凝固后，將平板翻轉(zhuǎn)，36±148h±2h。水產(chǎn)品30±1℃℃培育72h±3h。假設(shè)樣品中可能含有在瓊脂培育基外表布滿生長(zhǎng)的菌落時(shí)，可在凝固后的瓊脂外表掩蓋一薄層瓊脂培育基〔約4m，凝固后翻轉(zhuǎn)平板，按6.2.1條件進(jìn)展培育。菌落計(jì)數(shù)以菌落形成單位〔colony-formingunits，CFU〕表示。選取菌落數(shù)在30CFU～300CFU30CFU300CFU應(yīng)承受兩個(gè)平板的平均數(shù)。其中一個(gè)平板有較大片狀菌落生長(zhǎng)時(shí)，則不宜承受，而應(yīng)以無(wú)片狀菌落生長(zhǎng)的平板2，代表一個(gè)平板菌落數(shù)。當(dāng)平板上消滅菌落間無(wú)明顯界限的鏈狀生長(zhǎng)時(shí)，則將每條單鏈作為一個(gè)菌落計(jì)數(shù)。結(jié)果與報(bào)告菌落總數(shù)的計(jì)算方法假設(shè)只有一個(gè)稀釋度平板上的菌落數(shù)在適宜計(jì)數(shù)范圍內(nèi)，計(jì)算兩個(gè)平板菌落數(shù)的平均g〔mL〕樣品中菌落總數(shù)結(jié)果。假設(shè)有兩個(gè)連續(xù)稀釋度的平板菌落數(shù)在適宜計(jì)數(shù)范圍內(nèi)時(shí)，按公式〔1〕計(jì)算：式中：N——