微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)新選修109的課件

專題2微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用微生物病毒細(xì)菌放線菌真菌原生動(dòng)物

是一切肉眼看不見或看不清楚的微小生物的總稱。一、微生物特點(diǎn)：小簡低病毒的結(jié)構(gòu)病毒病毒

SARS冠狀病毒、禽流感病毒朊病毒（蛋白質(zhì)病毒）吸附注入合成釋放組裝病毒的增殖病毒的增殖一般可分五個(gè)階段，即：吸附→注入核酸→合成核酸和蛋白質(zhì)→組裝→釋放病毒的營養(yǎng)方式：寄生細(xì)菌的外形與大小細(xì)菌

A.球菌B.桿菌C.弧菌常見的細(xì)菌三種典型形態(tài)ABC細(xì)菌的結(jié)構(gòu)

芽孢的壁很厚，對干旱、低溫、高溫等惡劣的環(huán)境有很強(qiáng)的抵抗力。芽孢又小又輕，可以隨風(fēng)飄散。當(dāng)環(huán)境適宜（如溫度、水分適宜）的時(shí)候，芽孢又可以萌發(fā)，形成一個(gè)細(xì)菌。芽孢：細(xì)菌形成的橢圓形的休眠體菌落

單個(gè)或少數(shù)細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上大量繁殖時(shí)，就會(huì)形成一個(gè)肉眼可見的，具有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群體，叫做菌落。菌落是鑒定菌種的

重要依據(jù)。菌落細(xì)菌的菌落特征因種而異放線菌⑴結(jié)構(gòu)：

單細(xì)胞原核生物分支狀的菌絲（基內(nèi)菌絲、氣生菌絲）（2）繁殖孢子絲

|孢子鏈霉素、土霉素、四環(huán)素、氯霉素、紅霉素、慶大霉素

微生物中發(fā)現(xiàn)了幾千種抗生素，其中2/3是由放線菌產(chǎn)生的⑶應(yīng)用:真菌酵母菌酵母菌和霉菌青霉生殖腐生生活孢子生殖微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)條件：（1）合適的營養(yǎng)和環(huán)境條件（2）確保其他微生物無法混入二.培養(yǎng)基

1.概念：按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基據(jù)物理性質(zhì)分天然培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基據(jù)化學(xué)成分分選擇培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基據(jù)用途分2.類型及應(yīng)用：常用于工業(yè)生產(chǎn)用于微生物的分離、鑒定、計(jì)數(shù)加瓊脂常用于工業(yè)生產(chǎn)常用于分類、鑒定培養(yǎng)、分離出特定微生物鑒別不同種類的微生物在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的微生物的生長，促進(jìn)所需要的微生物的生長。根據(jù)微生物的代謝特點(diǎn)，在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品配制而成。加入高濃度食鹽的培養(yǎng)基:不加氮源的無氮培養(yǎng)基:不加含碳有機(jī)物的無碳培養(yǎng)基:加入青霉素等抗生素的培養(yǎng)基:選擇培養(yǎng)基分離酵母菌、霉菌等真菌分離金黃色葡萄球菌分離固氮菌分離自養(yǎng)型微生物伊紅和美藍(lán),和大腸桿菌的代謝產(chǎn)物結(jié)合,使菌落呈深紫色,并帶有金屬光澤,可以用來鑒別大腸桿菌鑒別培養(yǎng)基大腸桿菌碳源氮源無機(jī)鹽

水3.營養(yǎng)要素還需滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。如:生長因子(即細(xì)菌生長必需，而自身不能合成的化合物,如維生素、某些氨基酸、堿基)牛肉膏

牛肉膏當(dāng)中含有多肽類、氨基酸類、核苷酸類、有機(jī)酸類、礦物質(zhì)類及維生素等物質(zhì)。該產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于生物制藥發(fā)酵及各種培養(yǎng)基的制備。牛肉膏是采用新鮮牛肉經(jīng)過消化、過濾、濃縮而得到的一種棕黃色至棕褐色的膏狀物。有牛肉自然香味，易溶于水，水溶液呈淡黃色。蛋白胨不同的生物體需要特定的氨基酸和多肽，因此存在著各種蛋白胨，一般來說，用于蛋白胨生產(chǎn)的蛋白包括動(dòng)物蛋白（肉類）和植物蛋白（豆類）等兩種。蛋白胨是一種外觀呈淡黃色的粉劑，具有肉香的特殊氣息。它可以作為微生物培養(yǎng)基的主要原料。三.無菌技術(shù)1.無菌技術(shù)的概念無菌操作泛指在培養(yǎng)微生物的操作中，所有防止雜菌污染的方法。2.消毒與滅菌的概念及兩者的區(qū)別吸管、培養(yǎng)皿等160~170℃、1～2h接種環(huán)、接種針等70~75℃、30min80℃、15min100℃、5~6min消毒滅菌定義方法較為溫和的理化方法，殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物（不包括芽孢、孢子）使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物。（包括芽孢、孢子）煮沸消毒法巴氏消毒法化學(xué)藥劑消毒灼燒滅菌干熱滅菌高壓蒸汽滅菌酒精、氯氣、石炭酸等紫外線培養(yǎng)基，100KPa、121℃、15～30min四.實(shí)驗(yàn)操作---大腸桿菌的純化培養(yǎng)（一）制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基計(jì)算－稱量－溶化－滅菌－倒平板（冷卻至50℃）倒平板操作（二）純化大腸桿菌最常用的方法：平板劃線法和稀釋涂布平板法接種環(huán)接種針平板劃線的操作方法平板劃線法一旦劃破，會(huì)造成劃線不均勻，難以達(dá)到分離單菌落的目的；二是存留在劃破處的單個(gè)細(xì)胞無法形成規(guī)矩的菌落，菌落會(huì)沿著劃破處生長，會(huì)形成一個(gè)條狀的菌落。一旦劃破，會(huì)造成劃線不均勻，難以達(dá)到分離單菌落的目的；二是存留在劃破處的單個(gè)細(xì)胞無法形成規(guī)矩的菌落，菌落會(huì)沿著劃破處生長，會(huì)形成一個(gè)條狀的菌落。稀釋涂布平板法涂布器菌落數(shù)在30～300間計(jì)數(shù)效果較好。實(shí)驗(yàn)結(jié)果菌種的保存1、臨時(shí)保藏法：對象：溫度：缺點(diǎn)：2、甘油管藏法：對象：溫度：結(jié)果分析與評價(jià)課題延伸（P20）頻繁使用的菌種4℃（冰箱）容易被污染或產(chǎn)生變異長期保存的菌種-20℃（冷凍箱）謝謝聆聽·學(xué)習(xí)就是為了達(dá)到一定目的而努力去干,是為一個(gè)目標(biāo)去戰(zhàn)勝各種困難的過程,這個(gè)過程