生殖免疫與生殖疾病課件

生殖免疫與生殖疾病生殖免疫與生殖疾病一、男性生殖免疫生物學的組織學基礎一、男性生殖免疫生物學的組織學基礎男性生殖免疫生物學的組織學基礎男性內生殖器由生殖腺（睪丸）、輸精管道（附睪、輸精管、射精管、男性尿道）、附屬腺（精囊、前列腺和尿道球腺）組成。外生殖器為陰莖和陰囊，陰莖是男性的交接器官，陰囊容納睪丸和附睪。男性生殖系統(tǒng)概觀男性生殖免疫生物學的組織學基礎男性內生殖器由生殖腺（睪丸）、男性生殖免疫生物學的組織學基礎睪丸產(chǎn)生精子和分泌男性激素，精子先貯存于附睪內，射精時經(jīng)輸精管和尿道排出體外。精囊、前列腺和尿道球腺的分泌物參與精液的形成，并供給精子營養(yǎng)，利于精子的活動。睪丸、附睪的結構及排精途徑男性生殖免疫生物學的組織學基礎睪丸產(chǎn)生精子和分泌男性激素，精男性生殖免疫生物學的組織學基礎生精小管與睪丸間質模式圖生精細胞與支持細胞關系模式圖男性生殖免疫生物學的組織學基礎生精小管與睪丸間質模式圖生精細精子發(fā)生示意圖睪丸功能內分泌調節(jié)示意圖男性生殖免疫生物學的組織學基礎精子發(fā)生示意圖睪丸功能內分泌調節(jié)示意圖男性生殖免陰莖的海綿體陰莖中部的橫斷面男性生殖免疫生物學的組織學基礎陰莖的海綿體陰莖中部的橫斷面男性生殖免疫生物學的組織學基礎二、男性生殖系統(tǒng)的免疫學調節(jié)二、男性生殖系統(tǒng)的免疫學調節(jié)1.男性生殖系統(tǒng)的淋巴管及淋巴引流（一）睪丸和附睪的淋巴管及淋巴引流（二）精囊腺的淋巴管及淋巴引流（三）前列腺的淋巴管及淋巴引流（四）輸精管的淋巴管及淋巴引流（五）陰莖的淋巴管及淋巴引流（六）陰囊的淋巴管及淋巴引流男性生殖系統(tǒng)的免疫學調節(jié)1.男性生殖系統(tǒng)的淋巴管及淋巴引流男性生殖系統(tǒng)的免疫學調節(jié)男性生殖系統(tǒng)的淋巴管及淋巴引流睪丸的淋巴引流1.髂外淋巴結；2.髂總淋巴結；3.主動脈腔靜脈淋巴結；4.腔靜脈前淋巴結；5.腔靜脈外側淋巴結；6.主動脈外側淋巴結睪丸和附睪中均有毛細血管，其集合淋巴管沿睪丸動、靜脈上行，通過腹股溝管至盆腔，伴睪丸血管走行，越過輸尿管的前方注入腰淋巴結群。右側集合淋巴管主要注入腔靜脈前淋巴結、外測淋巴結和后淋巴結。左側主要注入主動脈左側淋巴結。左、右兩側的部分淋巴結也可注入主動脈、腔靜脈間淋巴結及主動脈前淋巴結。左側睪丸的部分淋巴管也可注入骼總淋巴結。睪丸額附睪的淋巴管在行進中也可相互吻合。男性生殖系統(tǒng)的免疫學調節(jié)男性生殖系統(tǒng)的淋巴管及淋巴引流2.神經(jīng)-生殖內分泌-免疫調節(jié)（一）神經(jīng)系統(tǒng)與免疫系統(tǒng)的相互作用正常機體內存在激素、神經(jīng)遞質和神經(jīng)肽對免疫系統(tǒng)的控制，免疫活動同樣影響神經(jīng)和內分泌活動，神經(jīng)細胞和免疫細胞都可以合成并釋放神經(jīng)遞質、激素和細胞因子，這些信號成為神經(jīng)系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)對話的共同生物語言。（1）神經(jīng)纖維直接支配免疫器官（2）神經(jīng)系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)具有共同生化語言（3）神經(jīng)系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)相互作用男性生殖系統(tǒng)的免疫學調節(jié)2.神經(jīng)-生殖內分泌-免疫調節(jié)（一）神經(jīng)系統(tǒng)與免疫系統(tǒng)的相互（二）神經(jīng)-生殖內分泌-免疫間的相互調節(jié)神經(jīng)-生殖內分泌-免疫間相互作用的分子基礎是存在神經(jīng)內分泌和免疫系統(tǒng)共同的一些化學信號分子及其受體，在3大系統(tǒng)的協(xié)同作用中發(fā)揮關鍵性作用。（1）免疫系統(tǒng)產(chǎn)生肽類生殖神經(jīng)內分泌激素男性生殖系統(tǒng)的免疫學調節(jié)神經(jīng)-生殖內分泌-免疫調節(jié)來源神經(jīng)遞質、肽類激素T細胞ACTH,PRL,TSH,GH,CG,EP,IGF-1，LHRH,5-HTB細胞ACTH,GH,EP,IGF-1巨噬細胞ACTH,GH,EP,IGF-1，P物質脾細胞LH,FSH,CR胸腺細胞LHRH,CR注：ACTH：促腎上腺皮質激素，PRL：催乳素，TSH：促甲狀腺激素，GH：生長激素，CG：絨毛膜促性腺激素，LH：促黃體素，F(xiàn)SH：促卵泡素，LHRH：促黃體素釋放素，CRF：促腎上腺皮質激素釋放因子，IGF：胰島素樣生長因子，5-TH：5-羥色胺。（二）神經(jīng)-生殖內分泌-免疫間的相互調節(jié)男性生殖系統(tǒng)的免疫學（2）免疫系統(tǒng)的神經(jīng)內分泌激素受體免疫系統(tǒng)細胞尤其淋巴細胞和巨噬細胞具有特異及高親和力的生殖神經(jīng)內分泌激素的結合位點，其免疫功能受神經(jīng)內分泌激素的影響。（3）細胞因子免疫系統(tǒng)通過淋巴細胞及其他免疫細胞所釋放的各種細胞因子，與其相應受體結合而發(fā)揮免疫調節(jié)作用。近年來發(fā)現(xiàn)，這些細胞因子還能調節(jié)神經(jīng)內分泌系統(tǒng)的功能，而且神經(jīng)內分泌系統(tǒng)也能以自分泌或旁分泌的形式產(chǎn)生這些細胞因子，調節(jié)局部的生殖內分泌功能。男性生殖系統(tǒng)的免疫學調節(jié)神經(jīng)-生殖內分泌-免疫調節(jié)（2）免疫系統(tǒng)的神經(jīng)內分泌激素受體男性生殖系統(tǒng)的免疫學調節(jié)神中樞神經(jīng)系統(tǒng)神經(jīng)遞質生殖內分泌激素細胞因子生殖內分泌系統(tǒng)免疫系統(tǒng)1.中樞神經(jīng)系統(tǒng)接受識別刺激，發(fā)出信號逐級傳給下丘腦-垂體-性腺，釋放各種神經(jīng)內分泌激素及細胞因子，調節(jié)性腺軸的功能；同時這些激素和細胞因子也能參與免疫系統(tǒng)的相應受體結合，將來自中樞神經(jīng)系統(tǒng)的信號傳給免疫系統(tǒng)，產(chǎn)生免疫反應。2.免疫系統(tǒng)接受非識別性刺激，淋巴細胞合成釋放各種細胞介質或其他有免疫活性的神經(jīng)內分泌肽，并向神經(jīng)-生殖內分泌系統(tǒng)傳送信息，調節(jié)機體的生殖生理功能的穩(wěn)定狀態(tài)，以適應新生的變化。（4）神經(jīng)-生殖內分泌-免疫調節(jié)環(huán)路男性生殖系統(tǒng)的免疫學調節(jié)神經(jīng)-生殖內分泌-免疫調節(jié)中樞神經(jīng)系統(tǒng)神經(jīng)遞質生殖內分泌系統(tǒng)免疫系統(tǒng)3.男性附性腺的內分泌-免疫調節(jié)（一）附睪的內分泌調節(jié)（二）附睪的免疫調節(jié)（三）前列腺的內分泌調節(jié)男性生殖系統(tǒng)的免疫學調節(jié)3.男性附性腺的內分泌-免疫調節(jié)男性生殖系統(tǒng)的免疫學調節(jié)（一）附睪的內分泌調節(jié)附睪是雄激素依賴器官，其各項功能都是激素通過與受體或受體結合蛋白相結合后，進行有關調控。調節(jié)因子包括：雌激素、催乳素、醛固酮、維生素A、維生素D等。（1）雄激素調控雄激素主要維持附睪上皮的結構和功能，對附睪精子成熟起調控作用。（2）雌激素調控雌激素對附睪結構功能的維持、附睪精子的成熟及睪丸精子的發(fā)生等均具有重要作用。（3）其他激素調控醛固醇參與調節(jié)附睪管腔的液體額離子流。催乳素可能參與調節(jié)附睪上皮的離子轉運功能。男性生殖系統(tǒng)的免疫學調節(jié)男性附性腺的內分泌-免疫調節(jié)（一）附睪的內分泌調節(jié)男性生殖系統(tǒng)的免疫學調節(jié)男性附性腺的內（二）附睪的免疫調節(jié)附睪屬于黏膜免疫系統(tǒng)，含有低水平的IgG和大量的局部抗體sIgA，同時附睪上皮細胞間的緊密連接形成血-附睪屏障，將生精細胞和精子與機體循環(huán)分離，上述因素能阻止病原微生物和抗原進入睪丸和附睪，從而保護了睪丸和附睪的正常生理功能。附睪上皮還可以產(chǎn)生唾液酸覆蓋精子抗原，保護精子免受自身抗體攻擊。附睪及附性腺中還存在免疫細胞（微褶細胞、巨噬細胞、T細胞）行使免疫調節(jié)功能。男性生殖系統(tǒng)的免疫學調節(jié)男性附性腺的內分泌-免疫調節(jié)（二）附睪的免疫調節(jié)男性生殖系統(tǒng)的免疫學調節(jié)男性附性腺的內分（三）前列腺的內分泌調節(jié)前列腺的內分泌調節(jié)指從別的器官分泌的激素通過血液長距離運送到前列腺，對前列腺的生長及其他功能起調節(jié)作用。這些激素包括雄激素、雌激素、催乳素等。前列腺本身為雄激素依賴器官，含有大量雄激素搜提（AR），這些受體終身具有對雄激素的反應能力。持續(xù)的雄激素刺激可以維持前列腺生長及分泌功能，這些雄激素包括睪酮、由睪酮在前列腺內轉化的更具有活性的雙氫睪酮、雄烯二醇、雄烯二酮、脫氫雄甾酮等。男性生殖系統(tǒng)的免疫學調節(jié)男性附性腺的內分泌-免疫調節(jié)（三）前列腺的內分泌調節(jié)男性生殖系統(tǒng)的免疫學調節(jié)男性附性腺的三、男性生殖功能的免疫調節(jié)三、男性生殖功能的免疫調節(jié)1.精子發(fā)生的免疫生物學（一）睪丸與胸腺發(fā)育胚胎第8周，原T細胞進入胸腺，成為無T細胞標志的前T細胞。第10周，前T細胞分化為雙陰性早期胸腺細胞，至第20周又分化為雙陽性的普通胸腺細胞。接著，通過陽性選擇，MHC-I類分子與CD8共受體，MHC-II類分子與CD4共受體，從而消除了所有非已MC限制性的T細胞克隆。在離開胸腺前，再通過關鍵性的陰性選擇，消除了所有針對自身抗原的T細胞克隆。胚胎第7~8周，生殖腺嵴的初級性索在睪丸決定因子（TDF）誘導下分化為睪丸索。睪丸索中的上皮細胞分化為支持細胞，原始生殖細胞（PGC）分化為精原細胞，睪丸索成為生精小管。此時的生精小管細胞產(chǎn)生的抗原都參與了免疫耐受形成。在青春期之前，精原細胞位于生精小管的中央，支持細胞位于外周。青春期始，精原細胞外移，抵達基底膜，并開始分化為精母細胞、精子細胞和精子，這些生精細胞產(chǎn)生的抗原性物質均未參與胚胎期的免疫耐受形成過程，因此是很強的自身抗原。男性生殖功能的免疫調節(jié)1.精子發(fā)生的免疫生物學（一）睪丸與胸腺發(fā)育男性生殖功能的免（二）精子的免疫原性精子不僅有很多抗原，而且還具有很強的同種異體和自身免疫原性。用精子對男性本人或女性皮下注射均能引起強烈的抗精子免疫反應，產(chǎn)生的抗精子抗體能導致精子制動、精子凝集和細胞毒性等。激發(fā)抗精子免疫反應的抗原主要是精子特異性抗原。在精子發(fā)生過程中，細線前期初級精母細胞以后的各級生精細胞能表達一系列特有的精子抗原，它們分布在精子的膜表面、頂體、細胞質、核內以及鞭毛近端，鞭毛的尾尖部分也有，但相對較少影響精子功能。男性生殖功能的免疫調節(jié)精子發(fā)生的免疫生物學（二）精子的免疫原性男性生殖功能的免疫調節(jié)精子發(fā)生的免疫生物2.精子的免疫性防護因為精子有很強的免疫原性，生精細胞和出睪丸后的精子受到了很好的免疫性防護。（一）血-睪屏障血-睪屏障是由支持細胞間的緊密連接所形成，其他結構如基膜和類肌細胞并不是屏障作用的形成者。注射大分子物質后，它們將被阻擋在緊密連接外而非基膜上。血-睪屏障位于精原細胞的下方和細線期初級精母細胞的上方，幾乎無抗原性的細線前期初級精母細胞也位于血-睪屏障。外側稱為基底小室，內側稱為連腔小室。精子抗原被集中在連腔小室內，很難溢出。而間質的巨噬細胞和淋巴細胞不能進入連腔小室。男性生殖功能的免疫調節(jié)2.精子的免疫性防護因為精子有很強的免疫原性，生精細胞和出睪（二）睪丸特殊微環(huán)境睪丸間質內最大的兩個免疫學特征是：特殊的淋巴細胞分布，睪丸間質內有大量巨噬細胞。此處巨噬細胞所要清除的屋子是漏出的精子抗原，這些巨噬細胞在清除精子抗原的同時并未呈現(xiàn)免疫激活狀態(tài)，而顯示Ia陰性。其機制可能與局部的細胞因子有關。局部高濃度雄激素也可能是重要因素之一。高濃度雄激素對整個免疫系統(tǒng)都有抑制作用。男性生殖功能的免疫調節(jié)精子的免疫性防護（二）睪丸特殊微環(huán)境男性生殖功能的免疫調節(jié)精子的免疫性防護（三）精子出睪丸后的防護精子進入附睪后，由于其所帶電荷與附睪上皮相同，精子總位于小管中央。附睪上皮細胞間也有緊密連接，但屏障作用不強。附睪淋巴細胞有兩個特征：CD8優(yōu)勢分布；單向移動通路。附睪上皮的大量分泌性物質可以吸附到精子表面，能覆蓋精子表面抗原，其中部分覆蓋物可能具有免疫抑制功能，成為精液免疫抑制因子(ISF)。另外，精子自身表達的MHC分子較少，這也是其在正常情況下不易激發(fā)免疫反應的原因之一。男性生殖功能的免疫調節(jié)精子的免疫性防護（三）精子出睪丸后的防護男性生殖功能的免疫調節(jié)精子的免疫性防3.精漿免疫抑制物質（一）精漿的免疫抑制功能精子的抗原性很強，但能在女性生殖道內運行并完成受精，其原因是有些因素阻止了局部免疫系統(tǒng)對精子抗原的免疫識別。參與其中的因素可能有多方面的，精漿免疫抑制物質起著非常重要的作用。（二）精漿免疫抑制物質1.精漿免疫抑制蛋白2.PGE2、IL-10和TGF-β3.前列腺小體4.其他精漿免疫抑制物質男性生殖功能的免疫調節(jié)3.精漿免疫抑制物質（一）精漿的免疫抑制功能男性生殖功能的免4.男性生殖道的免疫防御機制男性生殖道由附睪、輸精管、射精管和尿道組成，具有促進精子成熟、營養(yǎng)和存儲及運輸精子的作用。男性生殖道作為男性生殖系統(tǒng)的重要組成部分，具有重要的自身免疫防御功能。（一）睪丸與免疫豁免發(fā)育中的精母細胞、精子細胞、精子具有特異性的自身抗原。正常時這些自身抗原不會被免疫系統(tǒng)攻擊，這是由于受睪丸特殊的微環(huán)境即免疫豁免區(qū)的保護。參與維持睪丸這個免疫豁免區(qū)的因素有很多，現(xiàn)發(fā)現(xiàn)由精曲小管界膜和支持細胞組成的血-睪屏障、支持細胞以及間質中的免疫細胞在免疫豁免中發(fā)揮主要作用。（1）血-睪屏障血-睪屏障使精母細胞、精子細胞、精子免受免疫系統(tǒng)的攻擊及病原微生物的侵襲，從而起到了免疫屏障的作用。男性生殖功能的免疫調節(jié)4.男性生殖道的免疫防御機制男性生殖道由附睪、輸精管、射精管（2）睪丸支持細胞在維持免疫豁免中的重要作用支持細胞分泌多種免疫調節(jié)因子高表達FasL的支持細胞導致Fas陽性T細胞凋亡FasL與Fas所激發(fā)的細胞凋亡參與了幾項重要的效應作用：介導CTL和NK殺傷病毒感染的靶細胞或腫瘤細胞；通過激活誘導的細胞凋亡來調節(jié)淋巴細胞介導的特異性免疫應答；誘導免疫豁免。類型功能胰島素樣生長因子（IGFs）抑制淋巴細胞增殖白細胞介素-1（IL-1）刺激髓樣淋巴細胞的增殖，誘導IL-2受體，IL-2和其他淋巴因子的表達，胸腺細胞的增殖，淋巴細胞、單核細胞、中性粒細胞的趨化抑制素（inhibin）刺激胸腺細胞分裂活化素（activin）抑制胸腺細胞分裂轉化生長因子（TGF-β）抑制B細胞分化為漿細胞，抑制NK細胞功能，抑制IL-2的產(chǎn)生和下調T細胞上的IL-2受體轉鐵蛋白（transferrin）替代血清，使有絲分裂原刺激的T細胞在體外生長促性腺激素釋放激素（GnRH）誘導外周淋巴細胞產(chǎn)生L樣因子層粘連蛋白（Laminin）增加巨噬細胞的吞噬能力男性生殖功能的免疫調節(jié)男性生殖道的免疫防御機制（2）睪丸支持細胞在維持免疫豁免中的重要作用類型功能胰島素樣（二）附睪的免疫功能（1）附睪的分泌功能附睪上皮細胞合成和分泌的蛋白質直接參與了附睪管腔內精子成熟微環(huán)境的形成和精子質膜的變化過程，同時也具有一定免疫功能。（2）血-附睪屏障附睪的免疫功能是以血-附睪屏障和免疫屏障為特征的。附睪上皮細胞通過主細胞間的緊密連接構成血-附睪屏障。血-附睪屏障能有效阻止大分子和阻止血清蛋白等漏入附睪腔內，以免發(fā)生自身免疫反應。附睪還具有免疫屏障功能，其基本依據(jù)是上皮組織中的免疫細胞主要由巨噬細胞和T細胞組成，分布于整個附睪，預測它們在雄性生殖道的免疫屏障中，起保護附睪上皮組織和睪丸腔內精子不受病原體感染的防衛(wèi)作用。男性生殖功能的免疫調節(jié)男性生殖道的免疫防御機制（二）附睪的免疫功能男性生殖功能的免疫調節(jié)男性生殖道的免疫防四、抗精子免疫性不孕癥四、抗精子免疫性不孕癥1.抗精子免疫性不孕癥病因正常人精液中含有前列腺素E及其他糖蛋白，具有免疫抑制作用；精液沉淀素具有抗補體活性。這些免疫抑制因素在正常情況下可抑制女方免疫活性細胞針對精子抗原的免疫應答，誘導免疫耐受。針對精子表面包被的精漿抗原所產(chǎn)生的抗體對正常精子到達受精部位尚具有免疫保護作用。男性機體免疫系統(tǒng)的發(fā)生與成熟先于精子發(fā)生與成熟，免疫系統(tǒng)可將精子抗原視為“異物”，產(chǎn)生免疫應答。然而血-睪屏障起著隔絕精子細胞暴露于免疫活性細胞的作用，因此精子不易刺激自身機體產(chǎn)生免疫應答。若血-睪屏障發(fā)育不完善，生殖系統(tǒng)損傷，炎癥致生殖阻塞或物理等因素致血-睪屏障受損，較多精子抗原外溢，將刺激機體產(chǎn)生自身抗精子免疫。男性同性戀者血清精子抗體發(fā)生率高達76%，提示精子對自身機體或同種機體確實具有抗原性?？咕用庖咝圆辉邪Y1.抗精子免疫性不孕癥病因抗精子免疫性不孕癥Omu等研究發(fā)現(xiàn)，精液中白細胞增加的不孕癥患者，46.2%精液中存在致病微生物，且精子參數(shù)明顯下降：如精子數(shù)下降，精子前行活動下降，精子形態(tài)異常，精子無力，精子膜完整性欠缺，并產(chǎn)生了精子抗體。精漿中TNF-ɑ與IL-4呈反比例關系。白細胞增加及含病原體的精液中TNF-ɑ水平上升，IL-4在正常生育組水平偏高。白細胞增加的精液中精子抗體發(fā)生率增加，抗氧化物、超氧化物歧化酶及鋅含量下降。因此，精液中白細胞增加通過降低氧化物濃度、TH1型免疫效應增加而損傷精子功能。抗精子免疫性不孕癥抗精子免疫性不孕癥病因Omu等研究發(fā)現(xiàn)，精液中白細胞增加的不孕癥患者，46.2%精2.抗精子免疫性不孕的發(fā)病機制精子抗體一旦產(chǎn)生，嚴重影響生育功能，其主要發(fā)病機制如下：（1）抗精子頂體的抗體可干預精子獲能或頭粒反應。Harrison等研究顯示，精漿中或血清中精子抗體能使頭粒過早丟失。這種頭粒過早丟失主要由生殖道局部免疫，特別是IgG類精子抗體所介導。由于頭粒過早丟失，則不能發(fā)生正常生理性頭粒反應而至不孕。（2）細胞毒抗體在補體協(xié)同作用下，致使精子膜受損，從而介導精子死亡。抗精子尾干的抗體直接抑制精子活力及前行性活動。（3）精子抗體的Fc段與宮頸黏液中一種糖蛋白結合，干擾精子通過排卵期宮頸黏液?？咕用庖咝圆辉邪Y2.抗精子免疫性不孕的發(fā)病機制精子抗體一旦產(chǎn)生，嚴重影響生育（4）精子抗體的調理作用，通過巨噬細胞膜表面的Fc受體，增強生殖道局部巨噬細胞對精子抗原的吞噬作用。巨噬細胞對精子抗原的加工處理，更增加了精子抗體的產(chǎn)生機會，從而造成免疫性不孕癥的惡性循環(huán)。（5）抗精子頭部赤道附近成分的精子抗體，將妨礙精子與卵透明帶及卵細胞膜的相互識別和結合，從而抑制受精造成不孕。雖然精子抗體可造成生殖生物學功能的以上障礙，然而，Nakagawa等觀察到精子抗體陽性患者的著床率非但不下降，反而有所上升，尤其在年齡較大的生育期婦女更是如此。因此，抗精子的體液及細胞免疫可能增強子宮內膜對孕卵及囊胚的可接受性?？咕用庖咝圆辉邪Y抗精子免疫性不孕的發(fā)病機制（4）精子抗體的調理作用，通過巨噬細胞膜表面的Fc受體，增強五、反復自然流產(chǎn)的免疫學五、反復自然流產(chǎn)的免疫學1.反復自然流產(chǎn)的免疫流行病學評價在所有反復自然流產(chǎn)病因中，封閉抗體缺乏占了病因構成的大部分，而且可能是原發(fā)性流產(chǎn)和繼發(fā)性流產(chǎn)的共同病因。（1）原發(fā)性流產(chǎn)的免疫病因組成在原發(fā)性流產(chǎn)中，封閉抗體缺乏占31.4%；透明帶抗體陽性占20.4%；磷脂抗體陽性占8.5%；ABO血型抗體陽性占8.4%；尚有31.3%的患者原因不明。（2）繼發(fā)性流產(chǎn)的免疫病因組成封閉抗體獨特型-抗獨特型抗體網(wǎng)絡紊亂占39.4%；磷脂抗體陽性占31.3%；ABO血型抗體陽性占22.4%；6.8%的患者原因不明。在反復自然流產(chǎn)病例中，原發(fā)性流產(chǎn)129例，繼發(fā)性流產(chǎn)16例，原發(fā)性流產(chǎn)占反復自然流產(chǎn)病例總數(shù)的89.0%。因此，占原發(fā)性流產(chǎn)病因組成比例較重的封閉抗體缺乏及透明帶抗體異常增高引起臨床足夠重視。反復自然流產(chǎn)的免疫學1.反復自然流產(chǎn)的免疫流行病學評價在所有反復自然流產(chǎn)病因中，2.反復自然流產(chǎn)的免疫病因分類（1）母-胎同種免疫識別低下型這種類型主要呈現(xiàn)封閉抗體缺乏，是反復自然流產(chǎn)的主要病因類型，原發(fā)性流產(chǎn)常表現(xiàn)為封閉抗體及封閉抗體的獨特型抗體共同缺乏；而繼發(fā)性流產(chǎn)僅表現(xiàn)為封閉抗體的抗獨特型抗體缺乏。此種類型宜采用白細胞免疫療法及靜脈免疫球蛋白被動免疫療法，旨在促使建立封閉抗體的獨特型-抗獨特型網(wǎng)絡。由于免疫抑制劑將抑制封閉抗體產(chǎn)生，因而削弱對胚胎的免疫保護作用，不適于這種類型的治療。（2）母-胎免疫識別過度型包括自身免疫異常型（如透明帶抗體、磷脂抗體等）及同種免疫異常型（母-胎ABO血型不合）兩類。治療以免疫抑制劑為主，進而降低母體對胎兒-胎盤單位的損傷作用。禁用像白細胞免疫等免疫增強療法，否則會導致母體對胚胎抗原的免疫過度識別，加速對胚胎的免疫排斥反應。（3）母-胎免疫識別紊亂型小部分反復自然流產(chǎn)患者一方面表現(xiàn)為封閉抗體缺乏，顯示母-胎同種免疫識別低下；另一方面亦表現(xiàn)出自身免疫及同種免疫損傷作用異常增高。這一類型在臨床上十分棘手，有待探索以誘導母體對胚胎免疫耐受為主導的治療方案。反復自然流產(chǎn)的免疫學2.反復自然流產(chǎn)的免疫病因分類（1）母-胎同種免疫識別低下型3.反復自然流產(chǎn)的免疫發(fā)病機制（1）母-胎同種免疫識別低下型反復自然流產(chǎn)的免疫發(fā)病機制封閉抗體生物學作用的靶標抗原是主要表達于滋養(yǎng)層細胞的TLX抗原。封閉抗體缺乏時反復自然流產(chǎn)的主要病因已得到普遍承認。然而，有關封閉抗體缺乏導致反復自然流產(chǎn)的發(fā)病機制的研究尚不夠完善。（2）母-胎免疫識別過度型反復自然流產(chǎn)的免疫發(fā)病機制磷脂抗體是引起反復自然流產(chǎn)的重要因素之一。磷脂成分與β2-糖蛋白結合，暴露了其與磷脂抗體作用的抗原位點。磷脂抗體與之結合后，可介導血小板與血管內皮細胞黏著，從而促使血栓形成。隨著胎盤血管血栓形成的加重，引起胎盤梗死導致流產(chǎn)。ABO血型抗體是反復自然流產(chǎn)的另一因素。異常增高的血型抗體，或作用于滋養(yǎng)層細胞，或通過胎盤進入胎兒體內，導致胎兒-胎盤單位多器官組織細胞的損傷。若胎兒-胎盤單位免疫損傷嚴重，則發(fā)生流產(chǎn)。透明帶自身抗體是不孕癥的重要原因之一。由于透明帶自身抗體對含透明帶的孕卵產(chǎn)生損傷作用。孕卵即使著床也因前期的損傷作用而不能正常發(fā)育。反復自然流產(chǎn)的免疫學3.反復自然流產(chǎn)的免疫發(fā)病機制（1）母-胎同種免疫識別低下型（3）母-胎免疫識別紊亂型反復自然流產(chǎn)的免疫發(fā)病機制免疫識別紊亂型反復自然流產(chǎn)一方面呈現(xiàn)母-胎免疫識別低下；另一方面呈現(xiàn)母體自身免疫及同種免疫功能異常增高。上述兩方面的變化實際上體現(xiàn)了母體對胚胎免疫保護作用的削弱，及母體對胚胎免疫損傷作用的增強。反復自然流產(chǎn)的免疫學反復自然流產(chǎn)的免疫發(fā)病機制（3）母-胎免疫識別紊亂型反復自然流產(chǎn)的免疫發(fā)病機制反復自然4.反復自然流產(chǎn)的免疫學診斷在進行反復自然流產(chǎn)的免疫病因診斷前，需首先除外非免疫性病因，如黃體功能不健、夫婦雙方染色體異常、生殖道畸形或生殖道占位性病變等。（1）補體依賴性細胞毒試驗（2）EA玫瑰花環(huán)抑制試驗（3）單向混合淋巴細胞反應封閉試驗（4）封閉抗體獨特型抗體活性分析（5）FCM分析封閉抗體對CD抗原的作用（6）透明帶抗體的測定（7）磷脂抗體的檢測（8）ABO血型抗體的檢測反復自然流產(chǎn)的免疫學4.反復自然流產(chǎn)的免疫學診斷在進行反復自然流產(chǎn)的免疫病因診斷5.反復自然流產(chǎn)的免疫治療1.母-胎同種免疫識別低下型反復自然流產(chǎn)的免疫治療（1）供者白細胞皮內免疫療法（2）配偶白細胞皮內免疫療法（3）白細胞免疫治療的作用機制：白細胞免疫療法能刺激反復自然流產(chǎn)患者產(chǎn)生足夠的封閉抗體，這是在隨后發(fā)生的妊娠能得以成功的主要理論依據(jù)。2.母-胎免疫識別過度型反復自然流產(chǎn)的免疫治療3.母-胎免疫識別紊亂型反復自然流產(chǎn)的免疫治療反復自然流產(chǎn)的免疫學5.反復自然流產(chǎn)的免疫治療1.母-胎同種免疫識別低下型反復自六、體外受精的免疫學六、體外受精的免疫學1.受精的基本過程（1）精卵識別與結合（2）頂體反應（3）精子穿過卵丘和透明帶（4）精卵質膜融合（5）多精受精的阻止（6）雌雄原核的形成和融合體外受精的免疫學1.受精的基本過程體外受精的免疫學2.抗精子抗體20世紀50年代首次發(fā)現(xiàn)不孕癥者血清中存在精子抗體，Landsteiner亦首次證實可實驗誘導抗精子抗體。人輸精管結扎術后精子凝集抗體、精子制動抗體及細胞毒抗體的發(fā)生率分別為50%~70%、31%和27%~35.5%。人們相繼對抗精子抗體與人類不孕之間的關系進行了大量研究，并發(fā)現(xiàn)精子抗體能干擾精子穿透宮頸黏液、透明到及卵細胞膜，使受孕力降低。近來研究結果表明，僅存在于生殖道局部或結合精子膜表面的精子抗體才能影響生育。隨著生殖免疫學的發(fā)展，有關免疫與生殖關系的研究及應用免疫手段控制生育的研究也進入了嶄新階段。同時，體外受精作為近年來發(fā)展起來的新的醫(yī)學研究手段，體外受精技術已成為評價免疫對于生殖功能影響的有效方式。體外受精干預試驗是評價抗生育免疫對于生育率影響的重要指標體外受精的免疫學2.抗精子抗體體外受精的免疫學許多研究以人精子與無透明帶蒼鼠卵子的結合能力評價男方精子的受精能力。Dor等研究發(fā)現(xiàn)，抗精子抗體能夠有效抑制人精子與無透明帶蒼鼠結合，表明免疫性因素有可能影響人精子的受精能力。此后Bronson等研究證實，抗人精子頭部的精子抗體，無論是IgG類還是IgA類均能抑制人精子與人透明帶的結合。Kamada等發(fā)現(xiàn)，抗精子抗體通過抑制精子穿過透明帶妨礙體外受精。Tsukui等研究表明，人精子抗體能明顯抑制人精子在人體外對人透明帶的穿透，如將洗滌過的精子吸附陽性血清后，能恢復正常精子在該血清中對透明帶的穿透能力。體外受精的免疫學抗精子抗體許多研究以人精子與無透明帶蒼鼠卵子的結合能力評價男方精子的受抗精子抗體干擾精卵相互作用、影響精子受精能力的可能作用機制包括：抗精子頭部的抗體可干擾精子獲能及頭粒反應；細胞毒抗體在補體參與下使精子細胞膜損傷，精子死亡，抗精子尾干的抗體抑制精子活動；精子抗體的Fc段與宮頸黏液糖蛋白結合，干擾精子穿過排卵期宮頸黏液；④精子抗體的調理作用增強生殖道局部吞噬細胞對精子的吞噬作用；⑤抗精子頭部的抗體能阻止精子與透明帶及卵細胞膜結合，抑制受精。體外受精的免疫學抗精子抗體抗精子抗體干擾精卵相互作用、影響精子受精能力的可能作用機制包3.抗精子抗體對于IVF-ET的影響抗精子抗體可以抑制生育過程的不同步驟?？咕涌贵w引起的不孕有很多機制，但大多數(shù)認為是通過損害卵子受精和胚胎發(fā)育的過程?？咕涌贵w可能影響IVF的部位包括精子結合透明帶，精子穿入透明帶，透明帶反應，配子融合、分裂和胚胎發(fā)育。動物實驗證明，抗精子抗體對受精后早期胚胎的發(fā)育和種植的不利影響通過其他兩個途徑：與精子反應影響胚胎發(fā)育和受精后的存活，或直接影響胚胎的分裂。有研究提示，抗精子抗體陽性的孕婦比陰性孕婦的自然流產(chǎn)率高，抗精子抗體陽性的婦女進行IVF時，受精率低，受精卵質量差，分裂率低和妊娠率低?？咕涌贵w影響生育的確切機制還不清楚，不管在男性或女性生殖道，抗精子抗體可能對精子的成熟、功能或整體精液的質量均有不利影響。體外受精的免疫學3.抗精子抗體對于IVF-ET的影響抗精子抗體可以抑制生育過（1）同種精子抗體與IVF-ET同種精子抗體是女方不明原因不孕的重要因素，不孕婦女生殖道分泌的抗體主要是IgA和IgG的亞型，約70%的IgA是IgA1，而大部分的IgG是IgG4及部分IgG3的存在。因為IgA和IgG4不結合補體，大部分有抗精子抗體的宮頸黏液并不影響精子的活動力，但如果存在IgG3會產(chǎn)生補體激活和精子破壞。宮頸黏液分泌的抗精子抗體能通過多種方式影響生育，最常見的臨床表現(xiàn)是抑制精子移動及進入宮頸管。精子暴露在宮頸黏液或上生殖道的抗精子抗體中，也會因為補體激活而導致膜受損而不能活動。在宮頸黏液或其他生殖道液中的補體C3成分，足以和抗原抗體復合物反應而令精子損傷。因此，精子與補體結合的IgG抗體結合進入宮腔，將引起補體激活并積聚在精子頭部，導致精子破壞或死亡。體外受精的免疫學抗精子抗體對于IVF-ET的影響（1）同種精子抗體與IVF-ET體外受精的免疫學抗精子抗體對有些患者經(jīng)避孕套、免疫抑制劑及宮腔內人工受精等長期治療仍未受孕，IVF-ET顯然是有效的治療手段。很多研究者均發(fā)現(xiàn)用含有抗精子抗體的母親血清進行體外培養(yǎng)會減少成功率。因為在一些不孕婦女的卵泡液中含有抗精子抗體，卵丘復合物有可能帶有免疫成分而引起精子破壞和阻斷受精。接受IVF治療的女性血清抗精子抗體陽性的夫婦，其受精率明顯低于抗精子抗體陰性的夫婦。在IVF-ET時，應采用捐贈者的血清作為培養(yǎng)液的蛋白補充。檢查IVF婦女血清抗精子抗體的存在，有助于避免不可解釋的IVF失敗。體外受精的免疫學抗精子抗體對于IVF-ET的影響有些患者經(jīng)避孕套、免疫抑制劑及宮腔內人工受精等長期治療仍未受（2）自身精子與體外受精精液中或精子表面存在自身精子抗體的免疫性不孕癥患者，其他治療方法結果往往不理想，IVF-ET則是一種有效的治療手段Clarke等研究了體內存在精子抗體進行IVF-ET的男性患者，發(fā)現(xiàn)當體內存在高水平IgG及IgA類自身精子抗體時，受精明顯受到抑制。Junke等發(fā)現(xiàn)，僅在精液中同時存在IgG及IgA類精子抗體時，受精率才明顯降低；同時伴有精子減少時，受精率進一步降低。Elder等將含有自身精子抗體的精液收集至50%血清培養(yǎng)液中，然后行IVF-ET，結果證實，加入血清后明顯改善了卵子的受精率。當精子表面有抗精子抗體抑制或減少受精時，利用單精子卵胞漿內注射（ICSI）技術將受損精子注入卵胞漿可以提高受精率。在男性不育病人，ICSI后受精率和妊娠率在抗精子抗體陽性組和陰性組是相當?shù)?。體外受精的免疫學抗精子抗體對于IVF-ET的影響（2）自身精子與體外受精體外受精的免疫學抗精子抗體對于IVF七、精子相關抗原的免疫避孕七、精子相關抗原的免疫避孕生殖免疫學的研究發(fā)現(xiàn)，精子對男性為自身抗原，對女性而言是同種異體抗原。這是因為精子作為單倍體細胞，在男子青春期后發(fā)生，功能特異，其結構與體細胞明顯不同，具有組織特異性的抗原成分。據(jù)文獻報道，2%~30%的不孕病例與配偶雙方或任一方存在抗精子抗體(ASA)有關，且ASA在體內消失后可以重新獲得生育能力。宮頸黏液中的精子特異性抗體可以導致精子發(fā)生凝集現(xiàn)象，阻止精子進入上生殖道；輸卵管液中的抗體則能抑制精子和卵細胞的結合。因此，從理論上來說，用精子抗原作為免疫避孕疫苗是可行的。精子相關抗原的免疫避孕生殖免疫學的研究發(fā)現(xiàn)，精子對男性為自身抗原，對女性而言是同種1.精子相關抗原完整精子可能與其他多種體細胞具有多種相同抗原，為避免交叉反應產(chǎn)生不良反應，用于避孕疫苗的精子抗原必須是精子表面特有表達、與生育相關、能產(chǎn)生高水平抗體干擾不孕的關鍵抗原。此外，精子與卵透明帶結合位點的組成亦是免疫避孕最感興趣的靶點之一。目前已經(jīng)應用雜交瘤、重組DNA技術、各種蛋白組學和基因組學方法篩選出很多精子特異性抗原并用于避孕疫苗的研發(fā)。其中最突出的是受精抗原1（fertilizationantigen1，F(xiàn)A1）、透明質酸梅PH-20（hyaluronidasePH-20）、PH-30、精子蛋白-10（spermprotein10，SP-10）、SP-17、乳酸脫氫酶C4同工酶（lactatedehydrogenaseC4isoenzyme，LDH-C4）、蛋白激酶A錨定蛋白（A-kinaseanchorprotein，AKAP)和精子特異性相關抗原-9（specificspermassociatedantigen-9，SPAG-9）等。精子相關抗原的免疫避孕1.精子相關抗原完整精子可能與其他多種體細胞具有多種相同抗原（1）LDH-C4在眾多精子相關抗原中，LDH-C4是第一個被推薦進行Ⅰ期臨床試驗的精子抗原。用LDH-C4做主動或被動免疫后均可導致生育力下降，其抗生育機制可能有以下幾個方面：抗LDH-C4抗體抑制精子內LDH的活性，從而使能量供應發(fā)生障礙，精子活力下降；抗LDH-C4抗體也可作用于精子膜表面的LDH-C4，使精子發(fā)生凝集作用。在補體介導下，引起細胞毒效應；血清中抗LDH-C4抗體可以轉送到雌性生殖道內，使精子運行減慢，并促使白細胞及吞噬細胞吞噬精子；④阻止精子與卵子的結合，或可使早期胚胎發(fā)育夭折。（2）SP-10近年來，SP-10也是抗精子抗原的一個研究熱點。它是一種精子頭部膜蛋白，具有透明質酸酶的作用，在精子穿過透明帶時扮演重要角色。（3）附睪蛋白抑制劑精子相關抗原的免疫避孕精子相關抗原（1）LDH-C4精子相關抗原的免疫避孕精子相關抗原2.精子多肽疫苗多肽疫苗比完整的重組抗原更具優(yōu)勢。許多精子多肽已合成并用于免疫研究。Lea等證實精子多肽疫苗在動物模型中引起了不同程度的避孕效應。近期在人類精子中發(fā)生了一種新多肽序列-YLPVGGLRRIGG，命名為YLP12，與結合人ZP3分子有關。人工合成的YLP12多肽連接重組霍亂霉素B亞基（recombinantcholeratoxinBsubunit，rCTB）的疫苗正在研制中。rCTB提供T細胞輔助從而提高疫苗的免疫原性。YLP12-rCTB通過各種免疫途徑接種雌性小鼠，出現(xiàn)精子特異性免疫反應，引起小鼠的生育力明顯降低。在血清和陰道沖洗液中存在高抗體滴度，提示為完全抑制。接種后第305~322天血清和陰道沖洗液中抗體完全消失，生育力正常恢復。陰道注射YLP12多肽可中和抗體，導致生育力恢復。精子相關抗原的免疫避孕2.精子多肽疫苗多肽疫苗比完整的重組抗原更具優(yōu)勢。許多精子多3.精子抗原的自身免疫途徑將精子特異性抗原注入男性體內引起自身免疫反應也是一種免疫避孕方法，但首先必須得到高度特異的自身抗原，其次需排除引起免疫復合物沉積的可能性。自身免疫性無精癥有兩種免疫機制：精曲小管內主要為細胞介導免疫應答，睪丸網(wǎng)、輸精管及附睪管內主要為抗體作用；引起對精子抗原自身免疫的方法是睪丸內注射卡介苗。用適當劑量的卡介苗做睪丸內一次性注射，可使多種動物在4~6周內出現(xiàn)不育，精液中即使有少量精子也已失去活力。組織學觀察表面：精曲小管受到嚴重損傷，但間質細胞形態(tài)正常，間質中有大量白細胞浸潤?？ń槊绲目股龣C制未明，估計是對精子抗原的細胞免疫應答，當卡介苗被清除以后精子發(fā)生可以恢復。精子相關抗原的免疫避孕3.精子抗原的自身免疫途徑將精子特異性抗原注入男性體內引起自八、性傳播疾病的免疫學八、性傳播疾病的免疫學1.淋病淋病疫苗研究的文獻報道較少，這可能與該病是容易治愈的細菌性疾病，而且也可以通過預防性用藥來防止淋球菌感染有關。淋病疫苗的研究尚處于早期階段，注重于淋病的免疫病理機制的探討，并對潛在的疫苗候選靶點進行篩選。2C7寡聚糖（OS）表位抗原能夠在淋球菌細胞膜上高表達而且保守。當機體自然感染和通過接種感染淋球菌后，OS表位抗原可誘導機體產(chǎn)生免疫反應以殺死細菌或對細菌有調理作用，因此這種抗原表位結構是預防性淋病疫苗的極好靶點。由于糖類抗原不依賴于T細胞誘導微弱的抗體反應，糖類抗原并非是好的免疫原。人感染淋球菌后，機體并不產(chǎn)生保護性免疫，患病期間生殖道黏膜免疫反應也很弱。在建康志愿者中進行的一期臨床試驗表明，現(xiàn)有的幾種實驗性淋病疫苗并不能為人體抵抗實驗性淋巴性尿道炎提供保護作用。性傳播疾病的免疫學1.淋病淋病疫苗研究的文獻報道較少，這可能與該病是容易治愈的2.梅毒（1）梅毒免疫學梅毒是由梅毒螺旋體（treponemapallidum，TP）引起的一種慢性傳染性疾病。梅毒的免疫性目前尚未完全了解，一般認為梅毒無先天免疫，后天免疫也很弱，故不能防止第二次再感染。梅毒患者血清中能產(chǎn)生對梅毒螺旋體的抗體，但目前為止尚不能施行被動免疫，梅毒即使完全治愈，若再次感染仍可發(fā)病。人類對梅毒螺旋體產(chǎn)生細胞免疫和體液免疫應答。性傳播疾病的免疫學2.梅毒（1）梅毒免疫學性傳播疾病的免疫學（2）梅毒的體液免疫①特異性抗體二期梅毒病人血清中產(chǎn)生特異性抗梅毒抗體，主要是IgM和IgG。②梅毒螺旋體制動抗體也是一種特異性抗體，能抑制活的梅毒螺旋體運動，并能殺死它。③抗心磷脂抗體僅能供梅毒血清學診斷，無保護作用。④血清中和因子實驗性梅毒免疫血清中含有一種能滅活梅毒螺旋體毒性的血清中和因子，對梅毒螺旋體再攻擊時出現(xiàn)抵抗力。⑤梅毒螺旋體多肽抗體梅毒病人有抗梅毒螺旋體多肽的抗體，從分子水平揭示了體液免疫與梅毒病期的關系。⑥免疫復合物及IgE與梅毒螺旋體結合梅毒患者血清中有免疫復合物，其中含有螺旋體抗原。性傳播疾病的免疫學梅毒（2）梅毒的體液免疫性傳播疾病的免疫學梅毒3.梅毒的細胞免疫細胞免疫在梅毒的感染中發(fā)揮著積極的作用。性傳播疾病的免疫學梅毒3.梅毒的細胞免疫性傳播疾病的免疫學梅毒3.尖銳濕疣引起尖銳濕疣的病因是人乳頭瘤病毒（humanpapillomavirus，HPV）。HPV廣泛存在于自然界，人類對HPV的易感性因個體差異而有所不同。尖銳濕疣患者細胞免疫和體液免疫都有不同程度的改變，目前研究最多的是尖銳濕疣的細胞免疫，認為其是尖銳濕疣重要的免疫學變化。（1）局部細胞免疫HPV感染機體組織細胞以及尖銳濕疣發(fā)生后，皮膚表皮與真皮內局部細胞免疫主要表現(xiàn)在角朊細胞、血管內皮細胞及T細胞浸潤和朗格漢斯細胞（LC）數(shù)量上的變化。（2）局部體液免疫有人檢測到尖銳濕疣損害局部分泌物中選擇性抗HPVIgA含量升高，并認為此可作為HPV感染的診斷指標之一。性傳播疾病的免疫學3.尖銳濕疣引起尖銳濕疣的病因是人乳頭瘤病毒（humanp（3）全身細胞免疫尖銳濕疣患者存在非特異性細胞免疫功能低下。尖銳濕疣患者全身細胞免疫異常主要有：輔助性T細胞下降，抑制性T細胞增高；IL水平下降；NK細胞活性降低；TNF水平升高等。（4）全身體液免疫對HPV感染和尖銳濕疣患者的體液免疫變化的研究仍在深入進行。（5）人乳頭瘤病毒HPV疫苗設計主要針對HPV衣殼結構蛋白L1和癌蛋白E6、E7等特異性抗原。大多數(shù)預防性疫苗為L1結構蛋白的病毒樣顆粒（VLP），通過誘導機體產(chǎn)生高水平中和抗體來預防HPV感染。治療性疫苗有E6和E7疫苗，包括多肽、融合蛋白、帶衣殼的質粒DNA、復制不全腺病毒載體和重組牛痘病毒載體等疫苗，通過刺激機體產(chǎn)生特異性細胞免疫反應來治療已有的HPV感染，研究尚處于初始階段。性傳播疾病的免疫學尖銳濕疣（3）全身細胞免疫性傳播疾病的免疫學尖銳濕疣4.衣原體感染盡管衣原體感染可以通過抗生素治愈，但疫苗仍然是最大限度保護人們抵抗衣原體感染的最好方法。隨著對衣原體基因組和蛋白質組研究的進展，人們選擇其結構蛋白、膜蛋白和分泌蛋白為靶位設計亞單位疫苗。但目前衣原體疫苗的研究也還處于早期階段。（1）機體對衣原體的細胞免疫研究發(fā)現(xiàn)衣原體誘導的機體免疫主要由黏膜局部Th1細胞免疫反應介導，給衣原體疫苗設計帶來了曙光。沙眼衣原體主要外膜蛋白（MOMP）是至今最有希望的候選亞單位疫苗。但現(xiàn)有MOMP疫苗方案尚不能刺激機體產(chǎn)生令人滿意的保護性免疫，這可能表明單純MOMP不足以作為疫苗，或者需要更好的運載系統(tǒng)來優(yōu)化MOMP的免疫效果。性傳播疾病的免疫學4.衣原體感染盡管衣原體感染可以通過抗生素治愈，但疫苗仍然是（2）衣原體DNA疫苗用DNA疫苗刺激機體，使宿主內源性表達病原體基因產(chǎn)物，誘導機體產(chǎn)生特異性細胞介導免疫和體液介導免疫，從而使宿主獲得對該病原體的抵抗力。因此，衣原體DNA疫苗是一個很好的研究方向和前景。但目前存在一系列問題：有效性：衣原體MOPO基因存在等位基因多態(tài)性和突變性，造成免疫逃避，疫苗無效。安全性：DNA疫苗有可能使宿主細胞發(fā)生轉化，導致腫瘤的發(fā)生。性傳播疾病的免疫學衣原體感染（2）衣原體DNA疫苗性傳播疾病的免疫學衣原體感染5.艾滋病艾滋病是獲得性免疫缺陷綜合征（AIDS）的簡稱，由人類免疫缺陷病毒（HIV）引起的性傳播疾病。黏膜組織是HIV自然感染的最初部位，也是HIV復制的主要部位。針對黏膜入侵部位在病毒擴散之前的免疫應答能起到保護機體的作用并進一步清除病毒。近年來對黏膜HIV入侵以及對趨化因子和整合素在黏膜遷移中作用的理解，有助于設計增強AIDS疫苗效果的新策略。（1）HIV的黏膜傳播HIV的自然傳播是通過黏膜表面進行的，腸黏膜是HIV入侵的重要門戶。但在恒河猴的SIV研究中顯示HIV/SIV也可經(jīng)口咽部、宮頸、陰道及上消化道黏膜感染。性傳播疾病的免疫學5.艾滋病艾滋病是獲得性免疫缺陷綜合征（AIDS）的簡稱，由盡管所有的HIV-1株均利用CD4作為靶細胞受體，但根據(jù)其使用的供受體不同可分為兩類：“R5”型使用趨化因子受體CCR5作為共受體，最初感染的是巨噬細胞和DC；“X4”型使用CXCR4作為共受體，最先感染表達這種趨化因子受體的是CD4+T細胞。在HIV-1的黏膜傳播中，最初感染的通常是R5型而不是X4型。HIV經(jīng)黏膜傳播的第一個可檢測病毒復制的部位是上皮間及上皮下的DC、CD4+T細胞和巨噬細胞。但HIV復制的最初靶細胞依賴于感染的解剖部位。在系統(tǒng)性播散之前，當局部黏膜復制的局部病毒與黏膜細胞相互作用期間，是產(chǎn)生局部免疫應答（抗體和CD8+CTL）的關鍵。有人認為在病毒廣泛擴散之前，有幾天時間可以利用免疫清除機制消滅病毒。性傳播疾病的免疫學艾滋病盡管所有的HIV-1株均利用CD4作為靶細胞受體，但根據(jù)其使（2）HIV的黏膜免疫趨化因子受體對HIV-1傳播和AIDS的發(fā)病機制十分重要。兩個主要的趨化因子受體限制HIV-1的不同趨向性，CXCR4和CCR5也限制了不同亞群的細胞遷移：童貞、記憶性或效應T細胞?；罨办o息記憶性T細胞既表達CD4又表達CCR5，是最初的病毒靶點，而童貞和記憶性CD4+T細胞表達CXCR4作為病毒入侵的靶點。在趨化因子受體水平，CCR9與趨化因子CCL25結合，CCR9被證明是腸道歸巢趨化因子受體，是小腸中CD4+和CD8+記憶或效應性T細胞的標志；CCL25存在于人小腸上皮和血管上皮，發(fā)揮使淋巴細胞進入小腸作用。不同黏膜區(qū)域使用不用的歸巢受體，部分有交叉。效應性及記憶性T細胞歸巢至腸道隨消化道部位不同而不同。性傳播疾病的免疫學艾滋?。?）HIV的黏膜免疫性傳播疾病的免疫學艾滋病已發(fā)現(xiàn)HIV疫苗黏膜免疫可在黏膜和系統(tǒng)性淋巴組織中誘導CD8+CTL，其主要場所在系統(tǒng)性免疫部位。這種存在于濾膜和系統(tǒng)性免疫的中的不均衡說明：黏膜部位的抗原特異性T細胞不僅可以遷移到黏膜效應部位，而且也可以遷移至系統(tǒng)性的淋巴組織。盡管系統(tǒng)免疫通過誘導黏膜引流淋巴結的免疫應答產(chǎn)生有限的黏膜免疫應答，但疫苗經(jīng)黏膜免疫才能產(chǎn)生最有效的黏膜免疫應答。抗原引起有效的黏膜應答的另一個可能途徑是經(jīng)皮免疫。經(jīng)皮免疫后免疫應答可擴散至黏膜部位，這可被攜帶抗原的DC的遷移所解釋。性傳播疾病的免疫學艾滋病已發(fā)現(xiàn)HIV疫苗黏膜免疫可在黏膜和系統(tǒng)性淋巴組織中誘導CD8（3）HIV疫苗HIV—特異性的黏膜抗體和CD8+CTL存在于病毒入侵部位，可能在阻止黏膜傳播中起重要作用。CD8+CTL必須出現(xiàn)在黏膜部位才能阻止病毒在黏膜的傳播。對更有效的AIDS疫苗來說，黏膜接種是關鍵。黏膜免疫應答及保護很大程度上依賴于黏膜佐劑。目前不同長度及突變的細菌毒素被用作黏膜佐劑。發(fā)展能預防HIV感染的疫苗的能力似乎依賴于誘導長期的黏膜免疫應答。對黏膜免疫新的理解（分子及細胞）適時出現(xiàn)，可被用來發(fā)展新一代HIV疫苗。黏膜疫苗和黏膜免疫，通過HIV特異性黏膜IgA、IgG應答和黏膜CD8+CTL來緩解感染，應作為發(fā)展預防性及治療性HIV疫苗策略的重要部分。性傳播疾病的免疫學艾滋?。?）HIV疫苗性傳播疾病的免疫學艾滋病九、男性附性腺腫瘤九、男性附性腺腫瘤1.睪丸附睪腫瘤睪丸癌很少見，約占所有男性惡性腫瘤的1%。睪丸腫瘤的發(fā)病有地區(qū)和種族差異，歐美發(fā)病率較高，中國則較低。睪丸癌具有以下特點：①20世紀70年代以后治療上有突破性進展，死亡率從50%降至10%左右。②為15~35歲青年人最常見的腫瘤。③有分化的傾向，自發(fā)的或治療后可由惡性變?yōu)榱夹?。④腫瘤分泌標記物質可以從血液中檢測出，而其他腫瘤不常見。隨著抗腫瘤藥物順鉑和中醫(yī)藥結合的應用，精確的腫瘤標記物以及手術的改進，擴散性睪丸腫瘤總治愈率達80%以上，而早期腫瘤患者幾乎都可治愈。盡管睪丸的原發(fā)瘤可以來源于間質細胞或支持細胞，但是95%的睪丸腫瘤來源于精原細胞或生殖細胞。原發(fā)性附睪腫瘤很罕見，Longo等復習文獻僅134例，其中僅有26%為惡心。男性附性腺腫瘤1.睪丸附睪腫瘤睪丸癌很少見，約占所有男性惡性腫瘤的1%。睪睪丸癌的腫瘤標記物有以下幾種：甲胎蛋白（AFP）絨毛膜上皮癌和精原細胞癌患者AFP正常，卵黃囊腫瘤和胚胎癌時AFP上升。人絨毛膜促性腺激素（HCG）生殖細胞腫瘤患者血HCG常升高，其中絨毛膜癌者100%升高，胚胎癌40%~60%升高，純精原細胞瘤僅5%~10%升高。胚盤堿性磷酸酶（PLAP）精原細胞瘤PLAP上升者達70%，自愈后PLAP下降，故可作為精原細胞瘤的一個標志物。但因多種組織均能產(chǎn)生PLAP，故其特異性較差。干擾素和IL-2已應用于睪丸癌的免疫治療。男性附性腺腫瘤睪丸附睪腫瘤睪丸癌的腫瘤標記物有以下幾種：男性附性腺腫瘤睪丸附睪腫瘤2.前列腺癌前列腺癌是西方男性較為常見的惡性腫瘤，中國近年來發(fā)病趨勢呈明顯上升趨勢。該病起病較為隱匿，發(fā)現(xiàn)時多為晚期。前列腺癌的侵潤性生長、轉移等行為與血管形成、腫瘤細胞與細胞外基質相互作用有密切關系。研究表明，COX-2與TGF-β1是前列腺基質-上皮中明顯表達的生物活性因子，與前列腺癌的生物學行為密切相關。COX-2調節(jié)前列腺素的合成，直接調控組織中多種生長因子的表達，可能通過抑制免疫監(jiān)視，引起細胞表型轉化癌變，促進細胞增殖，抑制凋亡，促進腫瘤血管新生，從而在前列腺癌的發(fā)生、侵潤和轉移過程中起重要作用。TGF-β1是超基因家族，在惡性前列腺組織高表達。TGF-β1在早期可能是腫瘤細胞生長的主要負性調節(jié)因子，而隨著腫瘤的發(fā)展，在腫瘤進展期通過促進因子刺激腫瘤血管生成，改變腫瘤細胞外基質的特點，并與其他生長因子相互作用，抑制免疫系統(tǒng)，使腫瘤細胞逃避監(jiān)視，抑制免疫系統(tǒng)對腫瘤的殺傷，間接促進腫瘤生長。男性附性腺腫瘤2.前列腺癌前列腺癌是西方男性較為常見的惡性腫瘤，中國近年來抗體是前列腺癌靶向治療的理想載體。把腫瘤細胞的某些分子作為靶抗原，封閉靶抗原使其不能發(fā)揮功能，或者利用抗體的靶向作用，通過結合在抗體上的藥物或放射性核素殺傷腫瘤細胞。前列腺癌表達多種較為特異的抗原，如前列腺特異性抗原（prostatespecificantigen，PSA）、前列腺特異性膜抗原（prostatespecificmembraneantige，PSMA）等，組織特異性較好。前列腺癌男性附性腺腫瘤抗體是前列腺癌靶向治療的理想載體。把腫瘤細胞的某些分子作為靶十、生殖免疫診斷技術十、生殖免疫診斷技術1.不孕癥的生殖免疫學檢測（一）精子抗體的免疫學檢測方法免疫性不孕癥確診前需進行深入細致的病史詢問及臨床輔助檢查，以除外其他病因。1.性交后試驗及精子-宮頸黏液接觸或穿透試驗性交后試驗必須注意受試夫婦心理、情緒狀態(tài)及宮頸黏液的理化特性等非免疫性因素對試驗結果的影響。精子-宮頸黏液接觸或穿透試驗是不受情緒或心理等因素影響的“體外性交后試驗”，比體內性交后試驗更客觀地反映精子抗體對精子移動的影響。通過交叉試驗還可以了解病因起源于男方或是女方。2.人精子-去透明帶蒼鼠卵子穿透試驗大部分正常人精子可穿透無透明帶蒼鼠卵子，精子頭部一旦結合了精子抗體，其穿透率明顯下降。然而，由于本試驗難以標準化及其他因素能使穿透率下降。因此，很難常規(guī)應用本法檢測不孕夫婦的精子抗體。生殖免疫診斷技術1.不孕癥的生殖免疫學檢測（一）精子抗體的免疫學檢測方法生殖3.精子凝集試驗精子表面結合了抗體后可以相互凝集。檢測方法包括明膠凝集法、管板凝集法、圓盤凝集法、毛細管凝集法等。4.補體依賴性細胞毒試驗及精子制動試驗精子表面結合了精子抗體后，在補體協(xié)同作用下，精子制動或死亡，顯微鏡下表現(xiàn)為精子不能向前移動或臺盼藍染色陽性。本法僅能檢測作用于精子尾干等的精子抗體，特異性強，敏感性差，假陰性發(fā)生率較高。5.間接免疫熒光試驗精子表面結合了抗體后，能與標有熒光素的第二抗體結合，在熒光顯微鏡下精子表面呈現(xiàn)熒光。6.酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）及生物素-親和素酶聯(lián)免疫吸附法（BA-ELISA)ELISA法敏感、特異、定量，能確定抗體類型，且易操作。BA-ELISA是近年來在常規(guī)ELISA基礎上發(fā)展起來的研究抗原抗體反應的新一代定量檢測法。生殖免疫診斷技術不孕癥的生殖免疫學檢測3.精子凝集試驗生殖免疫診斷技術不孕癥的生殖免疫學檢測7.放射性標記免疫球蛋白或A蛋白法用γ放射性物質標記的抗人免疫球蛋白或葡萄糖球A蛋白能與結合在精子表面的抗體結合，此后以γ計數(shù)器測定精子表面的放射活性。8.混合凝集法以抗紅細胞抗體致敏紅細胞，與待測精液及異源性抗人免疫球蛋白抗體混合培養(yǎng)。若精子表面結合了精子抗體，則精子與致敏紅細胞混合凝集。9.免疫珠結合法用抗人免疫球蛋白抗體包被的聚丙烯酰胺微球能結合于結合了精子抗體的精子表面，在相差顯微鏡或電子顯微鏡下可見到此種免疫珠隨精子向前行進而移動。本法可確定抗體類型及抗體的作用部位。生殖免疫診斷技術不孕癥的生殖免疫學檢測7.放射性標記免疫球蛋白或A蛋白法生殖免疫診斷技術不孕癥的生（二）抗透明帶抗體的免疫檢測1、透明帶沉淀反應2、間接免疫熒光試驗3、被動血凝法4、放射免疫法5、ELISA及BA-ELISA法6、精子—透明帶結合或穿透試驗生殖免疫診斷技術不孕癥的生殖免疫學檢測（二）抗透明帶抗體的免疫檢測生殖免疫診斷技術不孕癥的生殖免疫

（三）子宮內膜異位癥的免疫分析抗子宮內膜抗體（endometrialantibody，EM-Ab）:子宮內膜異位癥標志抗體,采用酶聯(lián)免疫吸附試驗,間接免疫熒光法檢測。血清CA-125。CA-199。SIL-2R與CA-125CA-199聯(lián)合檢測。血清細胞因子。黏附分子。生殖免疫診斷技術不孕癥的生殖免疫學檢測

（三）子宮內膜異位癥的免疫分析生殖免疫診斷技術不孕癥的生殖2.反復自然流產(chǎn)的免疫學技術（一）磷脂抗體的免疫檢測抗磷脂抗體分為狼瘡抗凝物（lupusanticoagulant,LAC）和抗心磷脂抗體（anticardiolipinantibody，ACA）?？沽字贵w的免疫學檢測主要采用抗原包被，加入檢測血清，使血清中的磷脂抗體與包被抗原結合，再與酶標抗體結合，顯色檢測。高滴度的磷脂抗體，尤其是IgG型，對反復自然流產(chǎn)更有意義，可作為預測高危婦女流產(chǎn)發(fā)生的一種較為敏感的指標。生殖免疫診斷技術2.反復自然流產(chǎn)的免疫學技術（一）磷脂抗體的免疫檢測生殖免疫（二）封閉效率及獨特型抗體檢測在反復自然流產(chǎn)診療中的應用封閉抗體(blockingantibodies)是人類白細胞抗原(HLA)、滋養(yǎng)層及淋巴細胞交叉反應抗原(TLX)等刺激母體免疫系統(tǒng)所產(chǎn)生的一類IgG型抗體。反復自然流產(chǎn)可能是母-胎免疫調節(jié)紊亂造成母體對胎兒免疫排斥的結果。其中母體因缺乏與父方淋巴細胞及滋養(yǎng)葉細胞交叉抗原作用的封閉抗體可能與RSA有關。實驗方法

封閉效率及獨特型抗體采用單向混合淋巴細胞反應（MLR-BE）檢測結果計算

封閉效率=（1－A組CPM值/B組CPM值）×100％獨特型抗體=[(C組CPM值－A組CPM值)/B組CPM值

]×100％生殖免疫診斷技術反復自然流產(chǎn)的免疫學技術（二）封閉效率及獨特型抗體檢測在反復自然流產(chǎn)診療中的應用生殖（三）流式細胞術分析封閉抗體實驗原理采用競爭法的原理，以AB型或小牛血清中抗CD3CD4CD25的抗體與測定管中的抗體競爭結合男方細胞。

抗CD3、CD4、CD25封閉效率＝（B管CD3、CD4、CD25表達情況－C管CD3、CD4、CD25表達情況）×100％測定值大于1%為陽性生殖免疫診斷技術反復自然流產(chǎn)的免疫學技術（三）流式細胞術分析封閉抗體生殖免疫診斷技術反復自然流產(chǎn)的免（四）Rh,ABO血型檢測常見的母-胎血型不合所致的同種免疫?。?.ABO血型不合的同種免疫2.RH血型不合的同種免疫診斷主要依靠實驗室的特異性抗體檢查。生殖免疫診斷技術反復自然流產(chǎn)的免疫學技術（四）Rh,ABO血型檢測生殖免疫診斷技術反復自然流產(chǎn)的免3.生殖系感染的免疫實驗診斷一、梅毒、支原體、衣原體的免疫學檢測（一）梅毒螺旋體感染的實驗室診斷1.病原體的檢查(1)暗視野顯微鏡檢查（DF）

直接觀察分泌物中的梅毒螺旋體，如見到運動活潑的蒼白螺旋體可直接診斷梅毒，是最特異、最準確的診斷方法，但靈敏度低。(2)活體組織涂片染色檢查常用銀染色法或熒光抗體染色。

生殖免疫診斷技術3.生殖系感染的免疫實驗診斷一、梅毒、支原體、衣原體的免疫學2.梅毒血清學試驗非螺旋體抗原血清反應（USR或RPR）作篩選檢查

陰性

生殖免疫診斷技術生殖系感染的免疫實驗診斷否定梅毒

陽性

梅毒螺旋體血清確診試驗

臨床上診斷或懷疑梅毒時2.梅毒血清學試驗非螺旋體抗原血清反應（USR或RPR）作篩

（1）非梅毒螺旋體血清試驗非特異性抗體檢測，為梅毒的常規(guī)篩查試驗,此外可作定量試驗，用于療效觀察和跟蹤。1.性病研究室玻片試驗2.血清不加熱反應素試驗3.快速血漿反應素環(huán)狀卡片試驗4.甲苯胺紅不加熱血清反應素試驗（2）梅毒螺旋體抗原血清反應本法用活的或死的TP或其成分作抗原測定抗螺旋體抗體,這種試驗敏感性和特異性均高，一般用作確認試驗。1.熒光密螺旋體抗體吸收試驗2.梅毒螺旋體血凝試驗

3.梅毒螺旋體明膠凝集試驗生殖免疫診斷技術生殖系感染的免疫實驗診斷（1）非梅毒螺旋體血清試驗生殖免疫診斷技術生殖系感染的免

（3）免疫印跡試驗1.菌體抗原成分經(jīng)

SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS）按分子量大小不同分離。2.

電轉移：分離的條帶轉移至硝酸纖維素膜上。3.酶免疫定位:待測標本中抗TP抗體，與抗原膜條上的多肽抗原成份結合，依次與特異性抗體和酶標二抗作用后加底物顯色后判斷結果。（4）TP酶聯(lián)免疫吸附試驗（TP-ELISA）本法主要檢測梅毒螺旋體IgG和IgM抗體，對診斷新生兒的先天性梅毒意義很大。

生殖免疫診斷技術生殖系感染的免疫實驗診斷（3）免疫印跡試驗生殖免疫診斷技術生殖系感染的免疫實驗3.基因診斷技術聚合酶鏈反應（PCR）從選擇的標本擴增梅毒螺旋體DNA序列，使其拷貝數(shù)量增加，再用特異性探針來進行檢測，能選擇性地將靶基因擴增106以上，方法敏感特異。生殖免疫診斷技術生殖系感染的免疫實驗診斷3.基因診斷技術生殖免疫診斷技術生殖系感染的免疫實驗診斷（二）支原體感染的實驗室診斷從人體分離的16種支原體中，5種對人有致病性，即肺炎支原體（M.pneumoniae）、解脲脲原體（Ureaplasmaurealyticum，Uu）、人型支原體（Mycoplasmahominis，Mh）、生殖支原體（Mycoplasmagenitalium，Mg）及發(fā)酵支原體（M.fermentans）。實驗室檢測方法主要有：病原培養(yǎng)法血清學試驗抗原檢測分子生物學檢測方法

生殖免疫診斷技術生殖系感染的免疫實驗診斷（二）支原體感染的實驗室診斷生殖免疫診斷技術生殖系感染的免疫1.病原培養(yǎng)法一般采用間接培養(yǎng)法，即根據(jù)培養(yǎng)液在反應試劑的作用下顏色發(fā)生改變，間接判斷病原體的存在。應盡可能收集到更多的細胞，注意無菌操作并立即送檢。2.血清學試驗特異性血清學檢測方法中最常用的是補體結合試驗，另有間接免疫熒光染色法、生長抑制試驗、代謝抑制試驗、間接血凝試驗和ELISA等。非特異血清學方法有肺炎支原體冷凝集試驗等。

生殖免疫診斷技術生殖系感染的免疫實驗診斷1.病原培養(yǎng)法生殖免疫診斷技術生殖系感染的免疫實驗診斷3.抗原檢測一般用ELISA、間接免疫熒光法、反向間接血凝法等直接檢測分泌物和體液中支原體抗原，具有較高的特異度和靈敏度。4.分子生物學檢測方法有基因探針、PCR、蛋白表達等方法(1)套式PCR法(2)多重PCR(MultiplexPCR)(3)限制性片段長度多態(tài)性分析(RFLP)(4)隨機引物PCR法(RAPD)(5)蛋白表達生殖免疫診斷技術生殖系感染的免疫實驗診斷3.抗原檢測生殖免疫診斷技術生殖系感染的免疫實驗診斷（三）衣原體感染的免疫學診斷

衣原體包括沙眼衣原體、鸚鵡熱衣原體和肺炎衣原體。寄生于宿主細胞內，有特殊的生長繁殖周期，在周期中以形態(tài)和功能不同的狀態(tài)存在，即細胞外具有感染性的原體和細胞內無感染性的始體或網(wǎng)狀體。

目前檢測衣原體技術主要包括以下幾方面：※尋找抗原※尋找特異性核酸※尋找特異性抗體

生殖免疫診斷技術生殖系感染的免疫實驗診斷（三）衣原體感染的免疫學診斷生殖免疫診斷技術生殖系感染的免尋找抗原1.雞胚分離培養(yǎng)

2.細胞分離培養(yǎng)

3.涂片檢查包涵體4.ELISA或熒光法檢查衣原體抗原

5.金標法衣原體快速檢測等尋找特異性核酸1.連接酶鏈反應（LCR）2.轉錄介導的擴增試驗（TMA）3.酶放大免疫反應（PCE）4.聚合酶鏈反應（PCR）5.半巢式聚合酶鏈反應—微孔板雜交法6.巢式聚合酶鏈反應（nPCR）7.實時熒光聚合酶鏈反應定量檢測（RT-PCR）等尋找特異性抗體沙眼衣原體感染時血清和泌尿生殖道分泌液中會出現(xiàn)抗體，可用微量免疫熒光法等檢測。生殖免疫診斷技術生殖系感染的免疫實驗診斷尋找抗原生殖免疫診斷技術生殖系感染的免疫實驗診斷（四）TORCH感染的免疫學檢測

TORCH弓形體(Tox)風疹病毒((Ruv)巨細胞病毒(CMV)單純皰疹病毒(HSV)其他病原體(O)生殖免疫診斷技術生殖系感染的免疫實驗診斷（四）TORCH感染的免疫學檢測TORCH弓形體(Tox1.弓形體檢測（1）在組織液和組織病灶中直接鏡檢找病原體。（2）病原體分離：動物接種分離弓形蟲。（3）PCR檢測：用孕婦宮頸分泌物、羊水、臍血等檢測弓形蟲DNA。（4）間接免疫熒光試驗、間接血凝試驗、補體結合試驗和ELISA等檢測血清抗體。2.風疹病毒（1）特異性抗體檢測如血凝抑制試驗、ELISA法等。（2）RNA檢測：用聚合酶鏈反應（PCR）法生殖免疫診斷技術生殖系感染的免疫實驗診斷1.弓形體檢測生殖免疫診斷技術生殖系感染的免疫實驗診斷3.巨細胞病毒（1）病毒分離。（2）血清特異性抗體檢測：主要有放射免疫試驗(RIA)、免疫熒光試驗(IF)、免疫印跡試驗(IB)、間接血凝試驗(IHA)、補體結合試驗(CV)和ELISA等。（3）DNA的檢測如PCR法，mRNA的檢測如反轉錄PCR(RT—PCR法)。

4.單純皰疹病毒

（1）分離病毒病原體（2）抗原測定（3）DNA的檢測如PCR法（4）特異性抗體檢測如ELISA生殖免疫診斷技術生殖系感染的免疫實驗診斷3.巨細胞病毒生殖免疫診斷技術生殖系感染的免疫實驗診斷5.TORCH宮內感染的免疫學診斷孕期TORCH感染相當普遍，但只有近期或活動性感染并發(fā)展到宮內感染時才會危及胎兒引起不良妊娠結局PCR技術用于病原體DNA或RNA檢測,敏感、準確、快速與TORCH宮內感染相關的免疫分子的檢測生殖免疫診斷技術生殖系感染的免疫實驗診斷5.TORCH宮內感染的免疫學診斷生殖免疫診斷技術生殖系感染（五）HPV感染的檢測HPV分型及病理學作用目前已知的HPV有110多種，根據(jù)病毒致癌性的大小分為兩大類：(1)低危型HPV(非癌性相關型，LRHPV)(2)高危型HPV(癌相關型，HRHPV)HPV感染與宮頸癌及癌前病變密切相關宮頸癌常規(guī)篩查方法分析：宮頸巴氏涂片及組織學熒光分光鏡檢查法等。生殖免疫診斷技術生殖系感染的免疫實驗診斷（五）HPV感染的檢測生殖免疫診斷技術生殖系感染的免疫實驗診HPV檢測方法1.傳統(tǒng)的細胞學檢測方法及其進展:巴氏涂片法、薄層液基制片技術、計算機輔助檢測技術等。2.HPV-DNA檢測方法通用型引物聚合酶鏈反應(PCR)

、核酸雜交檢測

、核酸印跡原位雜交、斑點印跡原位雜交

、雜交捕獲法(hybridcapture-II，又稱HC-Ⅱ系統(tǒng))

。3.血清學檢測試驗初篩試驗:酶聯(lián)免疫吸附試驗(EL1SA)、快速檢測(RT)實驗確認試驗:免疫印跡試驗(WB)、條帶免疫試驗(LIATEKHIVI)、放射免疫沉淀試驗(RIPA)及免疫熒光試驗(IFA)。4.分子生物學檢測技術自動化PCR檢測技術、熒光實時定量PCR技術5.生物芯片技術的應用生殖免疫診斷技術生殖系感染的免疫實驗診斷HPV檢測方法生殖免疫診斷技術生殖系感染的免疫實驗診斷4.生殖系腫瘤的免疫學實驗診斷目前臨床廣泛應用的腫瘤標志物主要有胚胎抗原，天然自身抗原，糖類抗原，細胞角蛋白，腫瘤相關的酶、激素以及某些癌基因等。

ELISA和酶免疫化學發(fā)光技術常用于檢測血液或其他體液中腫瘤標記物。免疫組化、流式細胞技術等用于檢測腫瘤細胞表面標記物。原位雜交、PCR等技術已用于測定癌基因、抑癌基因、端粒酶及細胞因子基因。單克隆抗體與同位素結合物的體內示蹤技術，有助于對腫瘤的早期診斷和定位。生殖免疫診斷技術4.生殖系腫瘤的免疫學實驗診斷目前臨床廣泛應用的腫瘤標志物主（一）固相非競爭的直接夾心ELISA法檢測腫瘤標記物以雙抗體夾心法為例，操作步驟如下生殖免疫診斷技術生殖系腫瘤的免疫學實驗診斷

（1）本法測定二價或二價以上的大分子抗原。不適用于測定半抗原及小分子單價抗原。（2）標本中含RF存在時，可出現(xiàn)假陽性，采用F（ab'）或Fab片段作酶結合物的試劑，由于去除了Fc段，可消除RF的干擾。（一）固相非競爭的直接夾心ELISA法檢測腫瘤標記物生殖免疫（二）生殖系腫瘤常用主要酶免疫學檢測指標1.血清糖蛋白抗原腫瘤標記物（1）CA-l25:為上皮性卵巢癌細胞膜上的一種高分子糖蛋白,是特異性較高的卵巢上皮癌標志物和子宮內膜癌的標志物。（2）CA-153：屬乳腺細胞膜表面糖蛋白的變異體，是乳腺癌的特異性血清學標志物。（3）CA-199：是一種類粘蛋白的糖蛋白成分，與LewiS血型成分有關，是對胰腺癌敏感性最高的標志物，主要用于監(jiān)測胃腸道惡性腫瘤。（4）CA-50。（5）癌胚抗原（carcinoembryonicantigen，CEA）。（6）鱗狀細胞癌抗原（squamouscellcarcinomaantigen，SCCA）。（7）前列腺特異性抗原（prostatespecificantigen，PSA）。

生殖免疫診斷技術生殖系腫瘤的免疫學實驗診斷（二）生殖系腫瘤常用主要酶免疫學檢測指標生殖免疫診斷技術生殖2.胎兒胎盤蛋白腫瘤標記物（1）甲胎蛋白（AFP）（2）人絨毛膜促性腺激素（humanchorionicgonagotropin，HCG）

3.酶類腫瘤標記物（1）堿性磷酸酶(alkalinephosphatase，ALP)（2）乳酸脫氫酶(1actatedehydrogenase，LDH)（3）端粒酶(telomerase，TLMA)生殖免疫診斷技術生殖系腫瘤的免疫學實驗診斷2.胎兒胎盤蛋白腫瘤標記物生殖免疫診斷技術生殖系腫瘤的免疫學（三）腫瘤標記物檢測的研究進展1．細胞因子及受體

多種細胞因子及其受體在卵巢腫瘤發(fā)生時，成為癌基因編碼的異常蛋白而異常表達，參與腫瘤細胞的信號傳遞、基因轉錄的調控。細胞因子產(chǎn)生的異常、細胞因子受體質與量的異常以及受體激活后信號傳遞系統(tǒng)的紊亂，對于婦科腫瘤的形成和發(fā)展起著重要的作用，因此有望成為新的診斷標志物。2．蛋白質組學在腫瘤標記物篩選鑒定中