新藥藥代動力學課件

新藥藥代動力學

藥理學(Pharmacology)藥效學(Pharmacodynamics)

(藥理作用、作用機制和毒、副作用)藥代動力學(Pharmacokinetics)(藥物吸收、分布、代謝和排泄,ADME).新藥藥代動力學1新藥藥代動力學研究

非血管途徑給藥---吸收過程

|

血管給藥----進入血液循環(huán)--分布和消除

|(代謝,排泄)

進入藥物作用部位及其他組織|

臨床藥理效應或毒性反應

新藥藥代動力學研究非血管途徑給藥---吸收過程2新藥研究、開發(fā)及上市的藥代動力學研究1.非臨床(動物)的藥代研究:*先導化合物藥代研究.(篩選)*入選化合物的藥代研究.2.臨床藥代動力學研究*I期臨床藥代動力學研究.(以正常受試者為試驗對象)*II、III及IV臨床藥代動力學研究(包括特殊人群、病人為試驗對象)新藥研究、開發(fā)及上市的藥代動力學研究1.非臨床(動物)的3新藥藥代動力學研究1.化學藥物臨床前藥代動力學研究技術(shù)指導原則(試行).2.速釋、緩釋、控釋制劑臨床前藥代動力學研究指導原則(試行).3.新生物制品臨床前藥代動力學技術(shù)指導原則(試行).4.化學藥物臨床藥代動力學研究技術(shù)指導原則(試行).5.化學藥物制劑人體生物利用度和生物等效性研究技術(shù)指導原則(試行).6.新生物制品臨床藥代動力學研究指導原則(試行).新藥藥代動力學研究1.化學藥物臨床前藥代動力學研究技術(shù)指導4新藥早期(先導化物)研究:

1.有效性：選擇作用。2.安全性:*肝毒性。*三致試驗。*Q-Tc不利影響-心臟毒性。3.藥代研究:*吸收試驗-Coca-2細胞通透性試驗或整體動物試驗。*P-糖蛋白轉(zhuǎn)運-藥物吸收、分布和排泄相關。*藥物代謝:新藥早期(先導化物)研究:1.有效性：選擇作用。5新藥早期藥代研究1.采用肝微粒體、肝細胞或肝灌流法研究藥物代謝途徑和藥酶.2.P450酶系統(tǒng)及及亞型分析.3.整體動物試驗.4.計算機模擬代謝物分析.新藥早期藥代研究1.采用肝微粒體、肝細胞或肝灌流法研究藥物6

臨床前（動物）藥代動力學研究

目的：

探討新藥在動物體內(nèi)的規(guī)律和特點。2為新藥研制和開發(fā)前景提供信息。3為臨床試驗設計提供依據(jù)。臨床前（動物）藥代動力學研究目的：7進行臨床前藥代動力學的基本要求1.試驗目的明確.2.分析方法可靠.3.試驗設計合理.4.試驗數(shù)據(jù)科學、全面、能滿足新藥評價要求.5.實事求是總結(jié)分析試驗結(jié)果,作出客觀的評價.進行臨床前藥代動力學的基本要求1.試驗目的明確.8建立分析方法。血藥濃度經(jīng)時變化:*單劑量給藥試驗。*多劑量給藥試驗等。藥物吸收。蛋白結(jié)合率:求結(jié)合型/非結(jié)合型藥物比值。組織分布。排泄試驗:藥物從尿、糞便和膽汁排泄。

研究內(nèi)容:建立分析方法。研究內(nèi)容:97.藥物生物轉(zhuǎn)化（代謝）:*代謝部位。

*代謝方式(途徑)。

*藥物代謝酶。*代謝產(chǎn)物。8.細胞色素P450酶(CYP)抑制和誘導作用。9.可能發(fā)生的藥物相互作用。

研究內(nèi)容:7.藥物生物轉(zhuǎn)化（代謝）:研究內(nèi)容:10藥品注冊中臨床前藥代研究的技術(shù)要求:

常用的藥物含量分析方法1.色譜法:1)高壓液相色譜法(HPLC)HPLC-UVHPLC-FHPLC-ECDHPLC-MSn(LC-MSn)2)氣相色譜法(GC)GC-FIDGC-NPDGC-ECDGC-MS

藥品注冊中臨床前藥代研究的技術(shù)要求:常用的藥物含量分析方法112.免疫法:放射免疫法(RIA)

酶免疫法(EMIT,ELISA等)螢光免疫法(FIA)

螢光偏振免疫法(FPIA)3.生物測定法:*微生物測定法*靶酶或靶細胞測定法4.放射性同位素示蹤法:3H-,14C-,125I-,131I-5.穩(wěn)定同位素示蹤法:2H-,13C-,15N-,18O-等。

常用的藥物含量分析方法2.免疫法:放射免疫法(RIA)常用的藥物含量分析方法12

分析方法學研究的考察1.特異性:證明測定的物質(zhì)為原形藥物或其活性代謝,能排除內(nèi)源性及其他外源性物質(zhì)的干擾。

2.靈敏度:用最低檢測濃度(LLOQ)表示。通常為標準曲線的最小濃度,要求能測出3-5個消除t1/2或Cmax的1/10或1/20的血藥濃度。

3.標準曲線制備:至少包括5個藥物濃度點,應能覆蓋生物樣品的濃度范圍,不得外推。提供標準曲線性方程式和相關系數(shù)(r>0.99)。測定不同生物樣品時應提供不同生物樣品的藥物標淮曲線。分析方法學研究的考察1.特異性:證明測定的物質(zhì)為原形134.精確度:方法回收率表示。選擇高、中、低三個濃度。回收率在80-120%范圍內(nèi)。

5.精密度:用相對標準誤差(RSD)表示。選擇高、中、低三個濃度,求日內(nèi)和日間精密度,應<10-20%。

6.樣品穩(wěn)定性。7.質(zhì)控。

對分析方法學研究考察4.精確度:方法回收率表示。選擇高、中、低三個濃度?；厥?4試驗藥品1.藥品的正式名稱.2.藥品的純度、批號和來源.3.保存條件.4.試驗用藥品的配制方法,應和藥效學及毒理學試驗一致.試驗藥品1.藥品的正式名稱.15試驗動物選擇*兩種動物:小鼠、大鼠或兔,beagle犬或猴等。*口服藥物試驗不選用家兔。*選用動物應與藥效及毒理試驗一致。*最好選用一種能多次采取血樣,制成藥-時曲線的動物.*試驗動物數(shù),每個時間點不少于5個數(shù)據(jù),雌雄各半.*生物制品試驗應選能產(chǎn)生相應活性動物或與人源蛋白同源性高的動物,如猴,相應轉(zhuǎn)基因動物等。

試驗動物選擇*兩種動物:小鼠、大鼠或兔,beagle犬16

血藥濃度經(jīng)時變化試驗目的和內(nèi)容

目的:探討藥物吸收,分布和消除的動力學規(guī)律和特點。

試驗內(nèi)容:*單劑量給藥。*多劑量給藥。*口服藥物的絕對生物利用度。*進食對口服藥物吸收的影響。*性別因素的影響。

血藥濃度經(jīng)時變化試驗目的和內(nèi)容目的:探討藥物吸收,17劑量的確定和給藥途徑1.高、中、低三種劑量:*主要參考動物藥效學和毒理試驗劑量(ED50,TD50,LD50,慢毒劑量

),*選擇其有效劑量范圍內(nèi),高、中、低三個劑量,高劑量不能>最大耐受量(MTD)。

2.給藥途徑應與藥效學、毒理學及以后臨床給藥途徑一致。

劑量的確定和給藥途徑1.高、中、低三種劑量:181.采樣點應能反映藥物吸收、平衡/分布和消除三個時相的動力學規(guī)律。2.吸收相至少2個采血點.3.平衡相至少3個點.4.消除相為4-6個點.應能反映3～5個消除半衰期或1/10或1/20的Cmax。5.求得一條完整的藥–時曲線。

1.采樣點應能反映藥物吸收、平衡/分布和消除三個時相的動力19圖1.大耳白家兔單次靜脈注射三種劑量（10mg·kg-1，20mg·kg-1，30mg·kg-1）A1998脂肪乳后平均藥-時曲線比較。圖1.大耳白家兔單次靜脈注射三種劑量（10mg·kg-1，20藥代參數(shù)的估算

*國內(nèi)多選用3P97軟件或其他公認的藥代動力學程序軟件來估算藥代動力學參數(shù)。*可采用房室模型或非房室模型程序。*主要藥代動力學參數(shù)有：

血管給藥:提供

t1/2,Vd,CL和AUC等參數(shù)。

血管外給藥:除上述參數(shù)外,尚應提供MRT,Cmax,Tmax,和F值。

藥代參數(shù)的估算*國內(nèi)多選用3P97軟件或其他公認21家兔靜注三種劑量A1998后的藥代動力學參數(shù)(n=5)參數(shù)

102030(mg)

T1/2(h)0.36±0.062.67±0.582.36±2.87V(c)(L/kg)4.40±0.576.11±1.365.39±2.40AUC(ug·ml/h)1.13±0.244.46±0.966.14±1.19CL(mg·ml.h-1)11.0±2.565.17±0.825.58±2.79家兔靜注三種劑量A1998后的藥代動力學參數(shù)(n=5)參數(shù)22提供資料1.各組(各個)的藥-時數(shù)據(jù)和曲線圖及其平均值.2.各組(各個)的藥代參數(shù)及其平均值.3.試驗結(jié)果分析和討論:*吸收的規(guī)律和特點.*血藥濃度和劑量相關性.*藥物消除動力學的特點.*藥物體內(nèi)分布特點.提供資料1.各組(各個)的藥-時數(shù)據(jù)和曲線圖及其平均值.23多次給藥試驗藥品在臨床需長期給藥及呈蓄積傾向時,應進行多次給藥試驗.1.選用一種有效劑量.2.確定給藥間隔時間和給藥次數(shù).3.測定3次Cmin,求穩(wěn)態(tài)藥-時數(shù)據(jù)和曲線.4.求算t1/2,AUCss,Cmin,Cav和DF值等.5.比較單、多次給藥試驗結(jié)果:藥代規(guī)律的差別和蓄積性.多次給藥試驗藥品在臨床需長期給藥及呈蓄積傾向時,應進行多次給24單劑量和多劑量口服加替沙星的藥代參數(shù)藥代參數(shù)單劑量多劑量(10d)________________________________________Cmax(mg.L-1)3.39±0.563.51±0.93Cmin(mg.L-1)0.23±0.100.29±0.16Tmax(h)0.9±0.291.15±0.41AUC(mg.h.L-1)20.26±4.24*26.16±4.53t1/2(h)7.25±1.507.69±0.81Vd(L)102.27±32.1297.24±19.23CL(L.h-1)19.14±4.24*16.72±2.93_________________________________________單劑量和多劑量口服加替沙星的藥代參數(shù)藥代參數(shù)25血管外給藥的藥物吸收試驗1.體外Coca-2細胞模型試驗.2.在體腸道試驗.3.整體生物利用度試驗:*絕對生物利用度試驗.*相對生物利用度試驗.血管外給藥的藥物吸收試驗26藥物的組織分布

目的：探討藥物在組織分布規(guī)律,親和力及與藥效和毒性的相關性。

通常選用大鼠或小鼠。一種有效劑量。>13種組織,根據(jù)藥品特點相應增加。(肺,脾,肝,心,腎,腦,肌,平滑肌,脂肪,生殖器,骨髓等)至少三個采樣時間點,反映其動力學規(guī)律。

藥物的組織分布目的：探討藥物在組織分布規(guī)律,親和力及與藥27組織分布5.除提供試驗數(shù)據(jù)外,應分析組織/血中藥物濃度的比值。6.特別注意藥物濃度高、蓄積時間長及在靶器官的組織分布.7.采用同位素示蹤法時,盡可能提供給藥后不同時相的整體放射自顯影圖像.組織分布5.除提供試驗數(shù)據(jù)外,應分析組織/血中藥物濃度的28藥物的血漿蛋白結(jié)合率試驗

采用透析法,超濾法等。高,中,低三種藥物濃度,應接近體內(nèi)濃度。兩種動物和人血漿。

A1998的蛋白結(jié)合率濃度(ug/ml)大鼠

人666.04±9.897.54±1.78875.83±2.893.15±8.321077.94±3.7397.93±1.94藥物的血漿蛋白結(jié)合率試驗采用透析法,超濾法等。

A19929藥物排泄試驗

目的：探討藥物排泄途徑,排泄總量,排泄高峰,排泄終點的規(guī)律和特點。

大鼠,一種有效劑量內(nèi)容:糞便,尿和膽汁排泄試驗主要排泄途徑、排泄速率和排泄量(至藥物排泄結(jié)束為止)。注意原形藥排泄累積總量占劑量的百分比,物料平衡問題。是否存在肝腸循環(huán),胃腸循環(huán)等現(xiàn)象。

藥物排泄試驗目的：探討藥物排泄途徑,排泄總量,30藥物生物轉(zhuǎn)化(代謝)如原形藥在體內(nèi)生成大量具有藥理活性代謝物,并其排泄總量<50%時,則應進行初步藥物代謝試驗代謝部位。代謝途徑和藥物代謝酶。主要代謝物M1,M2,M3…..等。如為前藥,要確定主要代謝物的化學結(jié)構(gòu),代謝物合成,藥理活性和PK試驗。

藥物生物轉(zhuǎn)化(代謝)如原形藥在體內(nèi)生成大量具有藥理活31藥酶誘導和抑制作用

測定藥物對肝微粒中P450總量的影響.

肝微粒體酶促動力學試驗(應用巳知被CYP1A2,2C9,2C19,2D6和3A4等藥酶催化的藥物進行試驗)或藥酶抗體反應試驗,研究:*藥物代謝酶。*藥酶誘導作用。*藥物抑制作用。

藥酶誘導和抑制作用測定藥物對肝微粒中P450總量的影32CYP典型底物KmIC50Ki1A2非那西丁541000519.22A6雙香豆素0.341000253.72C9甲苯磺丁脲120532290.22C19S-美芬妥英36.11000419.32D6異喹胍57.5*53.3*39.9*2E1氯唑沙宗30.414655.23A4紅霉素55.8*56.5*39.1*藥酶誘導作用和抑制作用CYP典型底物Km33

討論和結(jié)論

除試驗結(jié)果小結(jié)外,應結(jié)合藥效學和毒理進行分析討論.如:

吸收規(guī)律,BA。消除動力學規(guī)律。性別,進食及用藥持續(xù)時間對藥代的影響。藥物蛋白結(jié)合率、組織分布親和力和藥效,毒性的相關性。排泄和吸收的平衡,蓄積性。代謝特點,和藥效,毒性相關性,相互作用等。

討論和結(jié)論除試驗結(jié)果小結(jié)外,應結(jié)合藥效學和毒理進行分析34新藥、新制劑的生物利用度/生物等效性試驗研究

*生物利用度(Bioavailability,BA)是以藥物濃度-時間曲線下面積(AUC)為基礎,反映藥物在體內(nèi)的吸收程度和速度.

絕對生物利用度:F=AUCpo/AUCiv×100%相對生物利用度:F=AUC(試驗制劑)/AUC(參比制劑)×100%

*生物等效性(Bioequivalancy,BE)是指一種藥物的不同制劑在相同的實驗條件下,其體內(nèi)吸收程度和速度無顯著性差異.

新藥、新制劑的生物利用度/生物等效性試驗研究*生物利用度35BA和BE的意義和應用確定新藥的給藥途徑.確定新藥的劑型(包括處方的篩選).新劑型,特殊劑型的研究(緩、控釋制劑,脂質(zhì)體制劑等).仿制制劑的研制(制劑工藝,藥物粒徑等).不同條件下,同一藥物在體內(nèi)吸收程度和速度的比較,說明各種因素對藥物吸收和血藥濃度的影響,以指導臨床用藥.如進食,食物,疾病,藥物相互作用等.

BA和BE的意義和應用確定新藥的給藥途徑.36生物利用度試驗--

臨床前(動物)生物利用度試(生物藥劑學)

血藥濃度檢測方法同前。受試對象:動物-Beagle犬(>6只),大鼠等。3.藥物制劑:受試制劑-研究的制劑。4.參比制劑-巳批準上市的主導藥物劑型。5.試驗設計:通常采用兩制劑雙周期交叉試驗(二種制劑)或3×3拉丁方試驗設計(三種制劑)。生物利用度試驗--血藥濃度檢測方法同前。37劑量:一般應用有效劑量.不同劑型(制劑)和研究目的,試驗內(nèi)容要求不同:*普通制劑:單劑量給藥交叉試驗。*特殊劑型,緩,控釋制劑:單劑量或多劑量給藥交叉試驗。

第1周期第2周期A組

testreferenceB組

referencetest其間清洗期約1-2周劑量:一般應用有效劑量.第1周期第2周期A組testre38

藥代參數(shù)估算單劑量試驗主要藥代參數(shù):用房室模型或非房室模型求藥代參數(shù),但其中a)AUCo-t

以梯形法計算。b)AUCo-∞

按下式計算:AUCo-∞=AUCo-t+Ct/λz2.t為最后一次采血時間;Ct為末次的藥物濃度,λz為藥-時曲線末端部份求得的消除速率常數(shù).3.Cmax和Tmax

以實測值表示。4.生物利用度:F%=AUCT/AUCR×100%藥代參數(shù)估算39多劑量生物利用度試驗主要藥代參數(shù)

*三次谷濃度(Cmin)、Tmax、t1/2、AUCss和F值.*Cav=AUCss/τ(用藥間隔時間)*DF=Cmax-Cmin/Cav×100%

多劑量生物利用度試驗主要藥代參數(shù)*三次谷濃度(Cm40生物等效性評價

1.主要對Cmax,Tmax及AUC三個參數(shù)進行統(tǒng)計學處理,評價生物等效性.

2.Cmax和AUC對數(shù)轉(zhuǎn)換,以校正其對稱性.3.用多因素方差分析(ANOVA)進行顯著性檢驗.4.用雙單側(cè)t檢驗和計算90%可信區(qū)間.5.試驗制劑Cmax的90%可信限在70-143%范圍內(nèi).

AUC的90%可信限在80-125%范圍內(nèi).Tmax經(jīng)非參數(shù)法檢驗.

生物等效性評價1.主要對Cmax,Tmax及AUC三個41生物等效性分析和評價1.與研究的目的相關:*仿制藥:則兩制劑應生物等效。*劑型改革:一般要求AUC生物等效,而Cmax和Tmax不等效.如速,緩,控釋制劑。2.如生物不等效,出現(xiàn)超生物利用度時,則考慮:*參比制劑質(zhì)量.*按新制劑進行研究。生物等效性分析和評價1.與研究的目的相關:42對存在內(nèi)源性物質(zhì)干擾的藥物,如鈣劑、鐵劑、激素維生素等,應重點解決分析方法問題.有些藥物需同時進行藥效學BA/BE試驗,如口服或局部用藥的胰島素劑型研究。復方制劑BE研究,原則上應證實每個主要有效成份.對存在內(nèi)源性物質(zhì)干擾的藥物,如鈣劑、鐵劑、激素維生素等,43結(jié)束語非臨床藥代動力學研究技術(shù)指導原則是供研究時參考。研究者應根據(jù):*藥品注冊分類.*不同藥品的特點.*參考指導原則.科學、合理地確定研究目的、內(nèi)容、設計試驗、并對試驗結(jié)果進行綜合評價。結(jié)束語非臨床藥代動力學研究技術(shù)指導原則是供研究時參考。44根據(jù)注冊分類:1類:1-5品種進行系統(tǒng)藥代試驗.

4-5品種尚需進行復方和單藥比較.2類:與原藥進行藥代比較(BA)后決定.3類:進行一種劑量藥代,參考文獻.4類:進行與原藥比較藥代試驗(BA).5類:BA/BE試驗.6類:(±).根據(jù)注冊分類:1類:1-5品種進行系統(tǒng)藥代試驗.45新藥藥代動力學

藥理學(Pharmacology)藥效學(Pharmacodynamics)

(藥理作用、作用機制和毒、副作用)藥代動力學(Pharmacokinetics)(藥物吸收、分布、代謝和排泄,ADME).新藥藥代動力學46新藥藥代動力學研究

非血管途徑給藥---吸收過程

|

血管給藥----進入血液循環(huán)--分布和消除

|(代謝,排泄)

進入藥物作用部位及其他組織|

臨床藥理效應或毒性反應

新藥藥代動力學研究非血管途徑給藥---吸收過程47新藥研究、開發(fā)及上市的藥代動力學研究1.非臨床(動物)的藥代研究:*先導化合物藥代研究.(篩選)*入選化合物的藥代研究.2.臨床藥代動力學研究*I期臨床藥代動力學研究.(以正常受試者為試驗對象)*II、III及IV臨床藥代動力學研究(包括特殊人群、病人為試驗對象)新藥研究、開發(fā)及上市的藥代動力學研究1.非臨床(動物)的48新藥藥代動力學研究1.化學藥物臨床前藥代動力學研究技術(shù)指導原則(試行).2.速釋、緩釋、控釋制劑臨床前藥代動力學研究指導原則(試行).3.新生物制品臨床前藥代動力學技術(shù)指導原則(試行).4.化學藥物臨床藥代動力學研究技術(shù)指導原則(試行).5.化學藥物制劑人體生物利用度和生物等效性研究技術(shù)指導原則(試行).6.新生物制品臨床藥代動力學研究指導原則(試行).新藥藥代動力學研究1.化學藥物臨床前藥代動力學研究技術(shù)指導49新藥早期(先導化物)研究:

1.有效性：選擇作用。2.安全性:*肝毒性。*三致試驗。*Q-Tc不利影響-心臟毒性。3.藥代研究:*吸收試驗-Coca-2細胞通透性試驗或整體動物試驗。*P-糖蛋白轉(zhuǎn)運-藥物吸收、分布和排泄相關。*藥物代謝:新藥早期(先導化物)研究:1.有效性：選擇作用。50新藥早期藥代研究1.采用肝微粒體、肝細胞或肝灌流法研究藥物代謝途徑和藥酶.2.P450酶系統(tǒng)及及亞型分析.3.整體動物試驗.4.計算機模擬代謝物分析.新藥早期藥代研究1.采用肝微粒體、肝細胞或肝灌流法研究藥物51

臨床前（動物）藥代動力學研究

目的：

探討新藥在動物體內(nèi)的規(guī)律和特點。2為新藥研制和開發(fā)前景提供信息。3為臨床試驗設計提供依據(jù)。臨床前（動物）藥代動力學研究目的：52進行臨床前藥代動力學的基本要求1.試驗目的明確.2.分析方法可靠.3.試驗設計合理.4.試驗數(shù)據(jù)科學、全面、能滿足新藥評價要求.5.實事求是總結(jié)分析試驗結(jié)果,作出客觀的評價.進行臨床前藥代動力學的基本要求1.試驗目的明確.53建立分析方法。血藥濃度經(jīng)時變化:*單劑量給藥試驗。*多劑量給藥試驗等。藥物吸收。蛋白結(jié)合率:求結(jié)合型/非結(jié)合型藥物比值。組織分布。排泄試驗:藥物從尿、糞便和膽汁排泄。

研究內(nèi)容:建立分析方法。研究內(nèi)容:547.藥物生物轉(zhuǎn)化（代謝）:*代謝部位。

*代謝方式(途徑)。

*藥物代謝酶。*代謝產(chǎn)物。8.細胞色素P450酶(CYP)抑制和誘導作用。9.可能發(fā)生的藥物相互作用。

研究內(nèi)容:7.藥物生物轉(zhuǎn)化（代謝）:研究內(nèi)容:55藥品注冊中臨床前藥代研究的技術(shù)要求:

常用的藥物含量分析方法1.色譜法:1)高壓液相色譜法(HPLC)HPLC-UVHPLC-FHPLC-ECDHPLC-MSn(LC-MSn)2)氣相色譜法(GC)GC-FIDGC-NPDGC-ECDGC-MS

藥品注冊中臨床前藥代研究的技術(shù)要求:常用的藥物含量分析方法562.免疫法:放射免疫法(RIA)

酶免疫法(EMIT,ELISA等)螢光免疫法(FIA)

螢光偏振免疫法(FPIA)3.生物測定法:*微生物測定法*靶酶或靶細胞測定法4.放射性同位素示蹤法:3H-,14C-,125I-,131I-5.穩(wěn)定同位素示蹤法:2H-,13C-,15N-,18O-等。

常用的藥物含量分析方法2.免疫法:放射免疫法(RIA)常用的藥物含量分析方法57

分析方法學研究的考察1.特異性:證明測定的物質(zhì)為原形藥物或其活性代謝,能排除內(nèi)源性及其他外源性物質(zhì)的干擾。

2.靈敏度:用最低檢測濃度(LLOQ)表示。通常為標準曲線的最小濃度,要求能測出3-5個消除t1/2或Cmax的1/10或1/20的血藥濃度。

3.標準曲線制備:至少包括5個藥物濃度點,應能覆蓋生物樣品的濃度范圍,不得外推。提供標準曲線性方程式和相關系數(shù)(r>0.99)。測定不同生物樣品時應提供不同生物樣品的藥物標淮曲線。分析方法學研究的考察1.特異性:證明測定的物質(zhì)為原形584.精確度:方法回收率表示。選擇高、中、低三個濃度。回收率在80-120%范圍內(nèi)。

5.精密度:用相對標準誤差(RSD)表示。選擇高、中、低三個濃度,求日內(nèi)和日間精密度,應<10-20%。

6.樣品穩(wěn)定性。7.質(zhì)控。

對分析方法學研究考察4.精確度:方法回收率表示。選擇高、中、低三個濃度?；厥?9試驗藥品1.藥品的正式名稱.2.藥品的純度、批號和來源.3.保存條件.4.試驗用藥品的配制方法,應和藥效學及毒理學試驗一致.試驗藥品1.藥品的正式名稱.60試驗動物選擇*兩種動物:小鼠、大鼠或兔,beagle犬或猴等。*口服藥物試驗不選用家兔。*選用動物應與藥效及毒理試驗一致。*最好選用一種能多次采取血樣,制成藥-時曲線的動物.*試驗動物數(shù),每個時間點不少于5個數(shù)據(jù),雌雄各半.*生物制品試驗應選能產(chǎn)生相應活性動物或與人源蛋白同源性高的動物,如猴,相應轉(zhuǎn)基因動物等。

試驗動物選擇*兩種動物:小鼠、大鼠或兔,beagle犬61

血藥濃度經(jīng)時變化試驗目的和內(nèi)容

目的:探討藥物吸收,分布和消除的動力學規(guī)律和特點。

試驗內(nèi)容:*單劑量給藥。*多劑量給藥。*口服藥物的絕對生物利用度。*進食對口服藥物吸收的影響。*性別因素的影響。

血藥濃度經(jīng)時變化試驗目的和內(nèi)容目的:探討藥物吸收,62劑量的確定和給藥途徑1.高、中、低三種劑量:*主要參考動物藥效學和毒理試驗劑量(ED50,TD50,LD50,慢毒劑量

),*選擇其有效劑量范圍內(nèi),高、中、低三個劑量,高劑量不能>最大耐受量(MTD)。

2.給藥途徑應與藥效學、毒理學及以后臨床給藥途徑一致。

劑量的確定和給藥途徑1.高、中、低三種劑量:631.采樣點應能反映藥物吸收、平衡/分布和消除三個時相的動力學規(guī)律。2.吸收相至少2個采血點.3.平衡相至少3個點.4.消除相為4-6個點.應能反映3～5個消除半衰期或1/10或1/20的Cmax。5.求得一條完整的藥–時曲線。

1.采樣點應能反映藥物吸收、平衡/分布和消除三個時相的動力64圖1.大耳白家兔單次靜脈注射三種劑量（10mg·kg-1，20mg·kg-1，30mg·kg-1）A1998脂肪乳后平均藥-時曲線比較。圖1.大耳白家兔單次靜脈注射三種劑量（10mg·kg-1，65藥代參數(shù)的估算

*國內(nèi)多選用3P97軟件或其他公認的藥代動力學程序軟件來估算藥代動力學參數(shù)。*可采用房室模型或非房室模型程序。*主要藥代動力學參數(shù)有：

血管給藥:提供

t1/2,Vd,CL和AUC等參數(shù)。

血管外給藥:除上述參數(shù)外,尚應提供MRT,Cmax,Tmax,和F值。

藥代參數(shù)的估算*國內(nèi)多選用3P97軟件或其他公認66家兔靜注三種劑量A1998后的藥代動力學參數(shù)(n=5)參數(shù)

102030(mg)

T1/2(h)0.36±0.062.67±0.582.36±2.87V(c)(L/kg)4.40±0.576.11±1.365.39±2.40AUC(ug·ml/h)1.13±0.244.46±0.966.14±1.19CL(mg·ml.h-1)11.0±2.565.17±0.825.58±2.79家兔靜注三種劑量A1998后的藥代動力學參數(shù)(n=5)參數(shù)67提供資料1.各組(各個)的藥-時數(shù)據(jù)和曲線圖及其平均值.2.各組(各個)的藥代參數(shù)及其平均值.3.試驗結(jié)果分析和討論:*吸收的規(guī)律和特點.*血藥濃度和劑量相關性.*藥物消除動力學的特點.*藥物體內(nèi)分布特點.提供資料1.各組(各個)的藥-時數(shù)據(jù)和曲線圖及其平均值.68多次給藥試驗藥品在臨床需長期給藥及呈蓄積傾向時,應進行多次給藥試驗.1.選用一種有效劑量.2.確定給藥間隔時間和給藥次數(shù).3.測定3次Cmin,求穩(wěn)態(tài)藥-時數(shù)據(jù)和曲線.4.求算t1/2,AUCss,Cmin,Cav和DF值等.5.比較單、多次給藥試驗結(jié)果:藥代規(guī)律的差別和蓄積性.多次給藥試驗藥品在臨床需長期給藥及呈蓄積傾向時,應進行多次給69單劑量和多劑量口服加替沙星的藥代參數(shù)藥代參數(shù)單劑量多劑量(10d)________________________________________Cmax(mg.L-1)3.39±0.563.51±0.93Cmin(mg.L-1)0.23±0.100.29±0.16Tmax(h)0.9±0.291.15±0.41AUC(mg.h.L-1)20.26±4.24*26.16±4.53t1/2(h)7.25±1.507.69±0.81Vd(L)102.27±32.1297.24±19.23CL(L.h-1)19.14±4.24*16.72±2.93_________________________________________單劑量和多劑量口服加替沙星的藥代參數(shù)藥代參數(shù)70血管外給藥的藥物吸收試驗1.體外Coca-2細胞模型試驗.2.在體腸道試驗.3.整體生物利用度試驗:*絕對生物利用度試驗.*相對生物利用度試驗.血管外給藥的藥物吸收試驗71藥物的組織分布

目的：探討藥物在組織分布規(guī)律,親和力及與藥效和毒性的相關性。

通常選用大鼠或小鼠。一種有效劑量。>13種組織,根據(jù)藥品特點相應增加。(肺,脾,肝,心,腎,腦,肌,平滑肌,脂肪,生殖器,骨髓等)至少三個采樣時間點,反映其動力學規(guī)律。

藥物的組織分布目的：探討藥物在組織分布規(guī)律,親和力及與藥72組織分布5.除提供試驗數(shù)據(jù)外,應分析組織/血中藥物濃度的比值。6.特別注意藥物濃度高、蓄積時間長及在靶器官的組織分布.7.采用同位素示蹤法時,盡可能提供給藥后不同時相的整體放射自顯影圖像.組織分布5.除提供試驗數(shù)據(jù)外,應分析組織/血中藥物濃度的73藥物的血漿蛋白結(jié)合率試驗

采用透析法,超濾法等。高,中,低三種藥物濃度,應接近體內(nèi)濃度。兩種動物和人血漿。

A1998的蛋白結(jié)合率濃度(ug/ml)大鼠

人666.04±9.897.54±1.78875.83±2.893.15±8.321077.94±3.7397.93±1.94藥物的血漿蛋白結(jié)合率試驗采用透析法,超濾法等。

A19974藥物排泄試驗

目的：探討藥物排泄途徑,排泄總量,排泄高峰,排泄終點的規(guī)律和特點。

大鼠,一種有效劑量內(nèi)容:糞便,尿和膽汁排泄試驗主要排泄途徑、排泄速率和排泄量(至藥物排泄結(jié)束為止)。注意原形藥排泄累積總量占劑量的百分比,物料平衡問題。是否存在肝腸循環(huán),胃腸循環(huán)等現(xiàn)象。

藥物排泄試驗目的：探討藥物排泄途徑,排泄總量,75藥物生物轉(zhuǎn)化(代謝)如原形藥在體內(nèi)生成大量具有藥理活性代謝物,并其排泄總量<50%時,則應進行初步藥物代謝試驗代謝部位。代謝途徑和藥物代謝酶。主要代謝物M1,M2,M3…..等。如為前藥,要確定主要代謝物的化學結(jié)構(gòu),代謝物合成,藥理活性和PK試驗。

藥物生物轉(zhuǎn)化(代謝)如原形藥在體內(nèi)生成大量具有藥理活76藥酶誘導和抑制作用

測定藥物對肝微粒中P450總量的影響.

肝微粒體酶促動力學試驗(應用巳知被CYP1A2,2C9,2C19,2D6和3A4等藥酶催化的藥物進行試驗)或藥酶抗體反應試驗,研究:*藥物代謝酶。*藥酶誘導作用。*藥物抑制作用。

藥酶誘導和抑制作用測定藥物對肝微粒中P450總量的影77CYP典型底物KmIC50Ki1A2非那西丁541000519.22A6雙香豆素0.341000253.72C9甲苯磺丁脲120532290.22C19S-美芬妥英36.11000419.32D6異喹胍57.5*53.3*39.9*2E1氯唑沙宗30.414655.23A4紅霉素55.8*56.5*39.1*藥酶誘導作用和抑制作用CYP典型底物Km78

討論和結(jié)論

除試驗結(jié)果小結(jié)外,應結(jié)合藥效學和毒理進行分析討論.如:

吸收規(guī)律,BA。消除動力學規(guī)律。性別,進食及用藥持續(xù)時間對藥代的影響。藥物蛋白結(jié)合率、組織分布親和力和藥效,毒性的相關性。排泄和吸收的平衡,蓄積性。代謝特點,和藥效,毒性相關性,相互作用等。

討論和結(jié)論除試驗結(jié)果小結(jié)外,應結(jié)合藥效學和毒理進行分析79新藥、新制劑的生物利用度/生物等效性試驗研究

*生物利用度(Bioavailability,BA)是以藥物濃度-時間曲線下面積(AUC)為基礎,反映藥物在體內(nèi)的吸收程度和速度.

絕對生物利用度:F=AUCpo/AUCiv×100%相對生物利用度:F=AUC(試驗制劑)/AUC(參比制劑)×100%

*生物等效性(Bioequivalancy,BE)是指一種藥物的不同制劑在相同的實驗條件下,其體內(nèi)吸收程度和速度無顯著性差異.

新藥、新制劑的生物利用度/生物等效性試驗研究*生物利用度80BA和BE的意義和應用確定新藥的給藥途徑.確定新藥的劑型(包括處方的篩選).新劑型,特殊劑型的研究(緩、控釋制劑,脂質(zhì)體制劑等).仿制制劑的研制(制劑工藝,藥物粒徑等).不同條件下,同一藥物在體內(nèi)吸收程度和速度的比較,