過柱子經(jīng)驗總結(jié)

過柱子經(jīng)驗?總結(jié)常說?的過柱應(yīng)該?叫柱層析分?離，也叫柱?色譜。我們?常用的是以?硅膠或氧化?鋁作固定相?的吸附柱。?由于柱分的?經(jīng)驗成分太?多，所以下?面我就幾年?來過柱的體?會寫些心得?，希望能有?所幫助。?一：柱子可?以分為：加?壓，常壓，?減壓壓力?可以增加淋?洗劑的流動?速度，減少?產(chǎn)品收集的?時間，但是?會減低柱子?的塔板數(shù)。?所以其他條?件相同的時?候，常壓柱?是效率最高?的，但是時?間也最長，?比如天然化?合物的分離?，一個柱子?幾個月也是?有的。減?壓柱能夠減?少硅膠的使?用量，感覺?能夠節(jié)省一?半甚至更多?，但是由于?大量的空氣?通過硅膠會?使溶劑揮發(fā)?（有時在柱?子外面有水?汽凝結(jié)），?以及有些比?較易分解的?東西可能得?不到，而且?還必須同時?使用水泵抽?氣（很大的?噪音，而且?時間長）。?以前曾經(jīng)大?量的過減壓?柱，對它有?比較深厚的?感情，但是?自從嘗試了?加壓后，就?幾乎再也沒?動過減壓的?念頭了。?加壓柱是一?種比較好的?方法，與常?壓柱類似，?只不過外加?壓力使淋洗?劑走的快些?。壓力的提?供可以是壓?縮空氣，雙?連球或者小?氣泵（給魚?缸供氣的就?行）。特別?是在容易分?解的樣品的?分離中適用?。壓力不可?過大，不然?溶劑走的太?快就會減低?分離效果。?個人覺得加?壓柱在普通?的有機化合?物的分離中?是比較適用?的。二：?關(guān)于柱子的?尺寸應(yīng)該?是粗長的最?好。柱子長?了，相應(yīng)的?塔板數(shù)就高?。柱子粗了?，上樣后樣?品的原點就?小（反映在?柱子上就是?樣品層比較??。?，這樣?相對的減小?了分離的難?度。試想如?果柱子十厘?米，而樣品?就有二厘米?，那么分離?的難度可想?而知，恐怕?要用很低極?性的溶劑慢?慢沖了。而?如果樣品層?只有0.5?厘米，那么?各組分就比?較容易得到?完全分離了?。當然采用?粗大的柱子?要犧牲比較?多的硅膠和?溶劑了，不?過這些成本?相對于產(chǎn)品?來說也許就?不算什么了?（有些不環(huán)?保的說，不?過溶劑回收?重蒸后也就?減小了部分?浪費）。?現(xiàn)在見到的?柱子徑高比?一般在1。?5～10，?書中寫硅膠?量是樣品量?的30～_?__倍，具?體的選擇要?具體分析。?如果所需組?分和雜質(zhì)分?的比較開（?是指在所需?組分rf在?0.2～0?.4，雜質(zhì)?相差0.1?以上），就?可以少用硅?膠，用小柱?子（例如2?00毫克的?樣品，用2?cm___?20cm的?柱子）；如?果相差不到?0.1，就?要加大柱子?，我覺得可?以增加柱子?的直徑，比?如用3cm?的，也可以?減小淋洗劑?的極性等等?。三：關(guān)?于無水無氧?柱適用于?對氧，水敏?感，易分解?的產(chǎn)品，可?以濕柱，也?可以干柱。?不過在樣品?之前至少要?用溶劑把柱?子飽和一次?，因為溶劑?和硅膠飽和?時放出的熱?量有可能是?產(chǎn)品分解，?畢竟要分離?的是敏感的?東東，小心?不為過。也?是因為分離?的東西比較?敏感，所以?接收瓶一定?要用可密封?的，遵循s?chlen?k操作。至?于是加壓、?常壓、減壓?，隨需而定?。因為是s?chlen?k操作，所?以點板是個?問題，如果?樣品是顯色?的，恭喜了?，不用點板?，直接看柱?子上的色帶?就行了。如?果樣品無色?，只好準備?幾十個sc?hlenk?瓶，一瓶一?瓶的點，不?過幾次之后?就知道樣品?在哪，也就?可以省些了?。像我以前?過一根無水?無氧柱，需?要六個sc?hlenk?，現(xiàn)在只一?個就能把所?要的全收集?到。無水?無氧柱中用?的比較多的?是用氧化鋁?作固定相。?因為硅膠中?有大量的羥?基裸露在外?，很容易是?樣品分解，?特別是金屬?有機化合物?和含磷化合?物。而氧化?鋁可以做成?堿性、中性?和酸性的，?選擇余地比?較大，但是?比硅膠要貴?些。聽說有?個方法，就?是用石英做?柱子，然后?用hf25?4做固定相?，這樣在柱?子外面用紫?外燈一照就?知道產(chǎn)品在?哪里了，沒?有驗證過。?哪位做過可?以提出來大?家參詳參詳?。四：關(guān)?于濕法、干?法上樣濕?法省事，一?般用淋洗劑?溶解樣品，?也可以用二?氯甲烷、乙?酸乙酯等，?但溶劑越少?越好，不然?溶劑就成了?淋洗劑了。?很多樣品在?上柱前是粘?乎乎的，一?般沒關(guān)系。?可是有的上?樣后在硅膠?上又會析出?，這一般都?是比較大量?的樣品才會?出現(xiàn)，是因?為硅膠對樣?品的吸附飽?和，而樣品?本身又是比?較好的固體?才會發(fā)生，?這就應(yīng)該先?重結(jié)晶，得?到大部分的?產(chǎn)品后再柱?分，如果不?能重結(jié)晶，?那就不管它?了，直接過?就是了，樣?品隨著淋洗?劑流動會溶?解的。有?些樣品溶解?性差，能溶?解的溶劑又?不能上柱（?比如dmf?，dmso?等，會隨著?溶劑一起走?，顯色是一?個很長的脫?尾），這時?就必須用干?法上柱了。?樣品和硅膠?的量有一種?說法是1：?1，我覺得?是越少越好?，但是要保?證在旋干后?，不能看到?明顯的固體?顆粒（那說?明有的樣品?沒有吸附在?硅膠上）。?五：溶劑?的選擇當?然是最便宜?，最安全，?最環(huán)保的了?。所以大多?選用石油醚?，乙酸乙酯?。文獻中有?寫用正己烷?的，太貴了?，除非特別?需要不要用?不然銀子嘩?嘩的，流的?比淋洗劑還?快，不過因?為極性很小?，有時還是?非它不可。?乙醚也可以?用，但是就?是容易睡覺?，注意保持?清醒別讓溶?劑流干了，?那樣柱子也?就不爽了。?二氯甲烷也?有用的，但?是要知道，?它和硅膠的?吸附是一個?放熱過程，?所以夏天的?時候經(jīng)常會?在柱子里產(chǎn)?生氣泡，天?氣冷的時候?會好一些。?甲醇據(jù)說能?溶解部分的?硅膠，所以?產(chǎn)品如果想?過元素分析?的話要留神?，應(yīng)該經(jīng)過?后繼處理，?比如說重結(jié)?晶等。其他?的溶劑用的?相對較少，?要依個人的?不同需要選?擇了。由?于某些原因?，用到的淋?洗劑多是大?包裝的（便?宜嘛），我?們這里是用?___升或?___升的?塑料桶裝的?，就要注意?這些工業(yè)品?的純度是較?低的。經(jīng)常?能夠從送來?的大桶底部?看見有色的?雜質(zhì)，其他?的雜質(zhì)就可?想而知了，?所以在比較?嚴格的柱分?時就要對溶?劑重蒸。當?然過原料時?就可以免去?這一步了，?反正下面還?有提純的方?法。另外?溶劑在過柱?子后最好也?回收使用，?一方面環(huán)保?，另一方面?也能節(jié)省部?分經(jīng)費，缺?點是要消耗?一定的人工?。這里要注?意的是，一?般在過柱同?時進行的是?減壓旋蒸，?石油醚和乙?酸乙酯的比?例由于揮發(fā)?度的不同會?導(dǎo)致極性的?變化，一般?會使得極性?變大，在梯?度淋洗時比?較合適，正?好極性越來?越大了。在?過完柱子后?，溶劑最后?回收要采用?常壓，因為?在減壓旋蒸?時會有部分?低沸點的雜?質(zhì)一起出來?，常壓時就?會減少這種?現(xiàn)象，如果?雜質(zhì)和你下?面要過的樣?品有反應(yīng)那?就慘了。六?：關(guān)于操作?問題1、?裝柱柱子?下面的活塞?一定不要涂?潤滑劑，會?被淋洗劑帶?到產(chǎn)品中的?，可以采用?四氟節(jié)門的?。干法和濕?法裝柱覺得?沒什么區(qū)別?，只要能把?柱子裝實就?行。裝完的?柱子應(yīng)該要?適度的緊密?（太密了淋?洗劑走的太?慢），一定?要均勻（不?然樣品就會?從一側(cè)斜著?下來）。書?中寫的都是?不能見到氣?泡，我覺得?在大多數(shù)情?況下有些小?氣泡沒太大?的影響，一?加壓氣泡就?全下來了。?當然如果你?裝的柱子總?是有氣泡就?說明需要多?練習(xí)了。但?是柱子更忌?諱的是開裂?，甭管豎的?還是橫的，?都會影響分?離效果，甚?至作廢。?2、加樣?用少量的溶?劑溶樣品加?樣，加完后?將下面的活?塞打開，待?溶劑層下降?至石英砂面?時，再加少?量的低極性?溶劑，然后?再打開活塞?，如此兩三?次，一般石?英砂就基本?是白色的了?。加入淋洗?劑，一開始?不要加壓，?等溶樣品的?溶劑和樣品?層有一段距?離（2～4?cm就夠了?），再加壓?，這樣避免?了溶劑（如?二氯甲烷等?）夾帶樣品?快速下行。?3、淋洗?劑的選擇?感覺上要使?所需點在r?f0.2～?0.3左右?的比較好。?不要認為在?板上爬高了?分的比較開?，過柱子就?用那種極性?，如果rf?在0.6，?即使相差0?.2也不容?易在柱子上?分開，因為?柱子是一個?多次爬板的?狀態(tài)，可以?通過公式的?比較：0.?6/0.8?一次的分離?度，肯定不?如（0.2?/0.3）?的三次方或?四次方大。?4、樣品?的收集用?硅膠作固定?相過柱子的?原理是一個?吸附與解吸?的平衡。所?以如果樣品?與硅膠的吸?附比較強的?話，就不容?易流出。這?樣就會發(fā)生?，后面的點?先出，而前?面的點后出?。這時可以?采用氧化鋁?作固定相。?另外，收集?的試管大小?要以樣品量?而定，特別?是小量樣品?，如果用大?試管，可能?一根就收到?了三個樣品?，wuwu?。如果都用?小試管那工?作量又太大?。5、最?后的處理?柱分后的產(chǎn)?品，由于使?用了大量的?溶劑，其中?的雜質(zhì)也會?