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文檔簡介
第十五章風濕性疾病的實驗診斷第一臨床學院實驗診斷學教研室李士軍教授Tel:e-mail:風濕性疾病風濕性疾?。╮heumaticdiseases)是指一大類病因各不相同,但累及機體多個器官與組織的疾病。許多風濕性疾病與自身免疫密切相關(guān),因自身免疫導致的組織器官損傷或功能障礙所致疾病又稱自身免疫病。
泛指影響骨、關(guān)節(jié)及其周圍軟組織,包括:肌肉、韌帶、滑囊、筋膜等結(jié)構(gòu)的一大組疾病。自身免疫病結(jié)締組織病風濕病免疫耐受(autoimmunetolerance)自身免疫(autoimmunity)自身免疫病(autoimmunedisease,AID)當某種原因使自身免疫應答過分強烈,導致相應的自身組織器官損傷或功能障礙,這種病理狀態(tài)就稱為自身免疫病。自身抗體(auto-antibody)
機體產(chǎn)生的針對自身組織器官或細胞、細胞成分的抗體。風濕性疾病相關(guān)機制第一節(jié)概述自身免疫病的臨床特征:女性多見高滴度的自身抗體有重疊現(xiàn)象病因多數(shù)不明:自發(fā)性、病毒感染、藥物病程較長易反復免疫抑制藥物治療有一定療效常見自身免疫病的分類→器官特異性常見自身免疫病的分類→非器官特異性病名自身抗原類風濕性關(guān)節(jié)炎變性IgG、類風濕相關(guān)的核抗原干燥綜合征細胞核(SSA、SSB)、唾液腺管系統(tǒng)性紅斑狼瘡胞核成分(DNA、DNP、RNP、Sm)混合性結(jié)締組織病細胞核(u1RNP)第二節(jié)風濕性疾病常用的篩查實驗一、常規(guī)檢測試驗
1、ASO;2、ESR;3、CRP;4、尿蛋白二、常用篩查試驗
1、抗核抗體ANA
2、類風濕因子RF3、免疫球蛋白測定Ig4、補體C3、C4測定1、抗鏈球菌溶血素“O”測定(anti-streptolysin“O”,ASO)溶血素“O”是A族溶血性鏈球菌的一種具有溶血活性的粘蛋白,ASO是鏈球菌溶血素“O”的對應抗體一、常規(guī)檢測試驗臨床意義1、ASO升高:常見于A族溶血性鏈球菌感染引起的疾病,如風濕熱、腎小球腎炎、扁桃體炎等。2、ASO陽性不一定是近期感染的指標,應多次動態(tài)觀察。3、病人確有A族溶血性鏈球菌感染,但ASO持續(xù)陰性,可能是發(fā)病早期用過大量的抗生素或免疫抑制劑等。膿庖病扁桃體炎2、C反應蛋白測定
C-reactiveprotein,CRP
CRP是一種能與肺炎鏈球菌的細胞壁C多糖反應的急性時相反應蛋白。具有激活補體,促進吞噬和免疫調(diào)理作用。臨床意義:1、組織損傷,CRP常于發(fā)病后數(shù)小時迅速升高,病變好轉(zhuǎn)時迅速下降。2、細菌性感染和病毒性感染的鑒別診斷指標,細菌性感染CRP常升高明顯。3、風濕熱活動期,CRP明顯升高,而治療好轉(zhuǎn)后,CRP逐漸降至正常。4、超敏CRP(hs-CRP)作為心血管病變的生物標志物。
抗核抗體是一組將自身真核細胞的各種細胞核成分作為靶抗原的自身抗體的總稱。特點:IgG為主,無器官和種屬特異性,主要存在于自身免疫病患者的血清中??购丝贵w的首選方法是間接免疫熒光法(IIF)原理:被檢血清中存在抗細胞核成分的抗體,可以特異的和抗原基質(zhì)片上的細胞核抗原成份結(jié)合,形成抗原抗體復合物,再與熒光素標記的抗人IgG抗體結(jié)合,在熒光顯微鏡下可觀察到細胞核位置發(fā)生特異的亮綠色熒光為ANA陽性。根據(jù)細胞內(nèi)靶抗原分子理化特性和分布部位分類:ANA亞型:anti-dsDNA,anti-Sm,anti-SSA,SSB,Scl-70antibodies,etc.1、抗核抗體測定(anti-nuclearantibody,ANA)二、常用篩查試驗細胞結(jié)構(gòu)DetectingmethodofANAIndirectimmunofluorescence(IIF)熒光顯微鏡下核型分析①均質(zhì)型Homogeneous抗dsDNA與抗組蛋白抗體。細胞胞漿熒光染色陽性。與抗不溶性DNP,抗組蛋白抗體有關(guān)。主要見于SLE。②斑點型(SpeckledPattern):與可提取性核抗原抗體有關(guān)(ENA,extractablenuclearantigen
antibodies),如:anti-U1RNP,anti-Sm,anti-Scl-70,anti-SSA,SSB.常見于MCTD,SLE。③核膜型membranous與抗dsDNA有關(guān),熒光染色在核膜周圍主要見于SLE④核仁型(nucleolar)抗核糖體、RNA聚合酶的抗體。常見于硬皮病2、類風濕因子
(rheumatoidfactor,RF)類風濕因子(rheumatoidfactor,RF)是一種抗人或動物IgG分子Fc片段抗原決定簇的抗體,是以變性IgG為靶抗原的自身抗體。RF在RA中檢出率達79.6%。RF并不是RA獨有的特異性抗體,在SLE病人約有50%陽性,在其他結(jié)締組織病如SS、硬皮病、慢性活動性肝炎及老年人中均可有不同程度的陽性率。RF陰性不能排除RA的診斷。3、免疫球蛋白測定自身免疫性疾病中免疫球蛋白常升高,并與疾病活動性有一定的相關(guān)性。
4、補體C3、C4測定第三節(jié)風濕性疾病常用的診斷實驗抗體靶抗原、特性臨床意義抗dsDNA細胞核DNA雙螺旋結(jié)構(gòu),識別嘌呤和嘧啶堿基SLE敏感性30%-50%,SLE重要診斷標準之一。滴度可作為治療監(jiān)測指標。抗Sm(smith)snRNP核心蛋白A-GSLE所特有,不與疾病活動相關(guān),敏感性較低30%-40%.抗U1-RNPU1-核糖核蛋白RNP混合性結(jié)締組織病(MCTD),30%-40%SLE也可出現(xiàn)抗SSA/SSBRNA蛋白復合體干燥綜合征(靈敏度50%-80%),SLA、RA等也可出現(xiàn)抗Scl-70DNA拓撲異構(gòu)酶Ⅰ進行性系統(tǒng)性硬化癥(PSS)抗J0-1抗體組氨酰-tRNA合成酶為靶抗原多發(fā)性肌炎,皮肌炎常見自身抗體檢測臨床意義提取核抗原(extractablenuclearantigen,ENA):是可提取核抗原的總稱,ENA抗原可用鹽水或磷酸鹽緩沖液從細胞核中被提取。anti-Smanti-U1-RNPanti-SS-Aanti-SS-Banti-Jo-1anti-Scl-70Anti-Rib抗ENA抗體譜測定PrincipalofdetectingENA
1.Immunoblottechniques
2.ELISA
抗體靶抗原、特性臨床意義抗環(huán)瓜氨酸肽抗體(anti-CCP)絲集蛋白中的氨基酸-瓜氨酸診斷RA的高度特異性新指標,敏感性80%,特異性96%,尤其早期RA可陽性。(抗角蛋白抗體AKA輔助診斷)抗心磷脂抗體(ACA)心磷脂為靶抗原SLE等自身免疫病,抗磷脂綜合征(習慣性流產(chǎn)、血栓、血小板減少)抗中性粒細胞漿抗體(ANCA)胞漿型cANCA(蛋白酶3,PR3)韋格納肉芽腫(呼吸、泌尿系統(tǒng)累及時靈敏度高),陽性率達90%。核周型pANCA抗髓過氧化物酶(MPO)抗體壞死性或新月型腎小球腎炎達80%,多發(fā)性微動脈炎。抗平滑肌抗體(SMA)肌動蛋白等,非器官種屬特異性自身免疫性肝炎(90%),原發(fā)性膽汁性肝硬化PBC常見自身抗體檢測臨床意義淋巴細胞免疫表型檢測
HLA-B27大部分強直性脊柱炎(AS)患者與HLA-B27密切相關(guān),目前,國際上常規(guī)檢測HLA-B27用于AS輔助診斷。第四節(jié)常見風濕性疾病的實驗診斷類風濕關(guān)節(jié)炎(RA)
RA是一種慢性、反復發(fā)作、主要累及關(guān)節(jié)部位的系統(tǒng)性炎癥性疾病。
1.主要免疫學特征:血清和滑液中存在類風濕因子(RF),淋巴細胞活化產(chǎn)生細胞因子。
2、主要抗體:RF、抗CCP抗體、抗核周因子、抗角質(zhì)蛋白抗體等陽性。JointsMostAffectedbyRheumatoidArthritis(Symmetricaljointinvolvement)ThedetectionRFintheserumisalaboratorydiagnosticcriterion1.Morningstiffness2.Arthritis(softtissueswellingoreffusion)ofatleast3joints3.Arthritisofthehandjointsincludingthemetacarpophalangealandproximalinterphalangealjoints4.Symmetricaljointinvolvement5.Subcutaneousrheumatoidnodules6.RadiologicalchangestypicalofRA.7.Rheumatoidfactors(RF)ispositive系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)
SLE是一種可惡化或緩解的非器官特異性免疫炎性疾病,疾病活動??衫奂岸鄠€器官系統(tǒng)。主要免疫學特征
1.抗核抗體(ANA)陽性,較為特異的抗核抗體為抗dsDNA。2.出現(xiàn)多種其它自身抗體,如抗磷脂抗體、抗Sm抗體等。
3.IC和補體沿腎小球基底膜、表皮和真皮交界處沉積。
4.病情活動期,血清補體水平下降。SLE的診斷標準1.Characteristicrashacrossthecheek2.Discoidlesionrash3.Photosensitivity4.Oralulcers5.Arthritis6.Inflammationofmembranesinthelungs,theheart,ortheabdomen7.Evidenceofkidneydisease8.Evidenceofsevereneurologicdisease9.
Blooddisorders,includinglowredandwhitebloodcellandplateletcounts10.Immunologicabnormalities11.Positiveantinuclearantibody(ANA)Note:FourofthecriteriamustbeexperiencedbyapatientbeforeaclassificationofSLEcanbemade.Thesecriteria,proposedbytheAmericanCollegeofRheumatology,arenottoberelieduponsolelyfordiagnosis.Characteristicrashacrossthecheek,discoidlesionrash風濕性疾病實驗診斷流程免疫球蛋白、補體等檢測抗核抗體ANA抗ENA抗體譜抗中性粒細胞漿抗體RF等其他抗體檢測+如何診斷風濕性疾病?病史MedicalHistory體格檢查Physicalexam
實驗室檢查LaboratoryTests1.Antinuclearantibody(ANA),Rheumatoidfactor2.C-reactiveproteintest3.Erythrocytesedimentationrate(ESR)4.Ig,Complement:Ig、C3,C4.5.Completebloodcount6.Urinalysis(+)病例分析患者女,22歲。
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