基因文庫(kù)及復(fù)習(xí)

第1頁(yè)/共18頁(yè)基因文庫(kù)基因組文庫(kù)第2頁(yè)/共18頁(yè)為什么要建立基因文庫(kù)？直接從含目的基因的生物中提取不行嗎？第3頁(yè)/共18頁(yè)第4頁(yè)/共18頁(yè)第5頁(yè)/共18頁(yè)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因條件：已知目的基因的核苷酸序列先加熱至90－95度后降溫至55－56度結(jié)果：指數(shù)式增加第6頁(yè)/共18頁(yè)2基因表達(dá)載體的構(gòu)建－－基因工程的核心基因表達(dá)載體啟動(dòng)子：終止子：目的基因標(biāo)記基因目的：使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并遺傳給下一代，同時(shí)能夠表達(dá)和發(fā)揮作用第7頁(yè)/共18頁(yè)一段特殊結(jié)構(gòu)的DNA片斷，RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)；使轉(zhuǎn)錄開(kāi)始啟動(dòng)子：終止子：一段特殊結(jié)構(gòu)的DNA片斷，使轉(zhuǎn)錄停止?將生物所有DNA直接導(dǎo)入受體細(xì)胞不是更簡(jiǎn)單嗎？如果這么做，結(jié)果會(huì)怎樣？第8頁(yè)/共18頁(yè)3、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞轉(zhuǎn)化？目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)程，受體細(xì)胞？植物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞微生物細(xì)胞第9頁(yè)/共18頁(yè)將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞－雙子葉植物農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法第10頁(yè)/共18頁(yè)將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞－單子葉植物基因槍法第11頁(yè)/共18頁(yè)將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞－花粉管通道法轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉第12頁(yè)/共18頁(yè)將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞顯微注射將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞常用的為大腸桿菌，用CaCl2處理感受態(tài)細(xì)胞重組載體與之混合

受精卵第13頁(yè)/共18頁(yè)將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞常用的為大腸桿菌，用CaCl2處理感受態(tài)細(xì)胞重組載體與之混合

第14頁(yè)/共18頁(yè)4、目的基因的檢測(cè)和鑒定－－檢查基因工程是否成功的一步A、轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA上是否插入了目的基因－DNA分子雜交法B、目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA－分子雜交法C、目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)－抗原抗體雜交個(gè)體生物學(xué)水平鑒定第15頁(yè)/共18頁(yè)第16頁(yè)/共18頁(yè)如何從基因文庫(kù)中找到所需要的基因根據(jù)目的基因的有關(guān)信息基因的核苷酸序列基因的功能基因在染色體上位置基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物mRNA基因翻譯產(chǎn)物蛋白質(zhì)第17頁(yè)/共18頁(yè)作為基因工程表達(dá)載體，只需目的基因就可以完成任務(wù)嗎？根據(jù)農(nóng)桿菌可將目的基因?qū)腚p子葉植物的機(jī)理，你能分析出不能導(dǎo)入單子葉植物的原因嗎？大腸桿菌可以