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CapillaryGelElectrophoresis毛細(xì)管凝膠電泳CITPCZECIEFCGECECCapillaryGelElectrophoresis根據(jù)帶電組分的大小分離毛細(xì)管的表面電荷少分離介質(zhì)交聯(lián)聚丙烯酰胺線性聚丙烯酰胺其它可更換的水溶性聚合物適用于淌度相近而大小不同的組分DNAProteins-SDScomplexOgstonModelRepatationModelCH2=CHC=ONHCH2NHCH2=CHC=OCH2=CHCONH2丙烯酰胺量(a)甲叉雙丙烯酰胺(b)PA凝膠的濃度T和CT-單體和交聯(lián)劑的百分濃度C-交聯(lián)劑的量a-丙烯酰胺量(g)b-甲叉雙丙烯酰胺的量(g)m-緩沖溶液的體積(ml)聚丙烯酰胺凝膠毛細(xì)管柱的制備方法檢測(cè)窗口制備內(nèi)壁修飾
120°C熱空氣吹,室溫氨氣沖洗2h,后50%3-甲基丙烯酰氧丙基-三甲氧基硅烷(3-methacryloxypropyl-trimethoxysilane)充滿(mǎn)一晝夜后,用甲醇和水沖洗緩沖溶液制備1.1gTris和0.01gEDTA溶于100ml7M尿素溶液,用NaH2PO4調(diào)至pH8.6單體溶液制備29g丙烯酰胺和1gN-甲叉雙丙烯酰胺溶解在100ml緩沖溶液中催化劑制備0.2g過(guò)硫酸銨溶于2ml緩沖溶液中凝膠溶液制備10ml單體溶液加入到30ml緩沖溶液中,甲4ul催化劑溶液,2.5ul
四甲基乙二胺(TEMED)預(yù)聚合45分鐘灌注聚合上述凝膠溶液注入毛細(xì)管到無(wú)氣泡,將兩端浸入緩沖溶液中聚合數(shù)小時(shí)。親水高分子聚合物無(wú)膠篩分體系MobilityofdsDNAandthechoiceofgelconcentration凝膠的濃度-ssDNAConcentrationofHPMContheseparationofdsDNAladderA-0.1%,B-0.3%,C-0.7%電場(chǎng)強(qiáng)度ssDNA高效分離塔板數(shù)達(dá)3千萬(wàn)!EBanddsDNAssDNASanger鏈中止法擴(kuò)增測(cè)序HVsupplyCapillaryGlassslideDetectionwindowITOthermostatPCRvialFractureChipPCRonlinewithchipCEDenaturingofproteinbeforeSDS-CDenaturecondition:1%SDS,2%beta-mercaptoethanol30minat90C.SDSCGEofprot
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