LC用戶現(xiàn)場(chǎng)培訓(xùn)

島津高效液相色譜LC-20A維護(hù)保養(yǎng)島津企業(yè)管理（中國(guó)）有限公司培訓(xùn)目的2認(rèn)識(shí)儀器：了解儀器的構(gòu)造組成，統(tǒng)一名稱，以便以后溝通。規(guī)范使用：能規(guī)范的使用儀器，充分發(fā)揮儀器的性能?；A(chǔ)規(guī)范維護(hù)：掌握LC日常維護(hù)及常見(jiàn)故障的排除方法。保障內(nèi)容介紹3LC20A簡(jiǎn)單介紹規(guī)范操作使用規(guī)范維護(hù)保養(yǎng)特別注意。LPGE清洗，乙腈閥現(xiàn)場(chǎng)討論認(rèn)識(shí)儀器4C:\Users\IBM\Desktop\用戶培訓(xùn)資料\部件解釋.pdf用戶培訓(xùn)資料\部件解釋.pdf5壓力異常問(wèn)題（壓力不上升、偏低、偏高、波動(dòng)）漏液?jiǎn)栴}（泵，進(jìn)樣器、檢測(cè)器）基線問(wèn)題（漂移、噪聲、異常）進(jìn)樣精度問(wèn)題（面積重現(xiàn)差）保留時(shí)間精度問(wèn)題（保留時(shí)間變化大）出峰問(wèn)題(拖尾、變胖）液相色譜常見(jiàn)問(wèn)題－總結(jié)6液相色譜常見(jiàn)問(wèn)題－壓力

壓力是液相色譜中最重要的指標(biāo)，反映儀器運(yùn)行正常與否。保留時(shí)間的變化經(jīng)常是由于壓力不穩(wěn)引起的。壓力與流動(dòng)相的粘度有關(guān)。要關(guān)注壓力大小及其變化，記下儀器正常狀態(tài)時(shí)，在固定條件下（流動(dòng)相、流速、溫度等）的壓力值。7液相色譜常見(jiàn)問(wèn)題－壓力為零凸輪柱塞桿柱塞密封圈單向閥泵頭1_ad.flv1_at.flv8液相色譜常見(jiàn)問(wèn)題－壓力為零泵頭中沒(méi)有液體，充滿氣泡單向閥完全堵死吸濾頭完全堵死排液閥沒(méi)關(guān)上管路漏液主板或者壓力傳感器泵體銹蝕，柱塞桿不動(dòng)或折斷（兩根折斷）9液相色譜常見(jiàn)問(wèn)題－壓力為零故障：寶石球沾在球座上。寶石球或球座受污染導(dǎo)致密封不好。球座磨損表現(xiàn)：不送液系統(tǒng)壓力波動(dòng)大。更換周期：兩年。措施：推薦用注射器連接入口單向閥將其頂開(kāi)。(附帶）單向閥的日常維護(hù)同流路清洗。拆下單向閥，放入純異丙醇中，超聲波清洗

15min以上。如果太臟，考慮用5％HNO3超聲清洗。10液相色譜常見(jiàn)問(wèn)題－壓力低泵頭有氣泡柱塞密封墊漏液管路漏液?jiǎn)蜗蜷y輕度堵塞。單向閥磨損。吸濾頭堵塞排液閥沒(méi)關(guān)緊。排液閥鑼紋磨損或O圈磨損漏液傳感器故障1_ad.flv1_at.flv11液相色譜常見(jiàn)問(wèn)題－壓力高吸濾頭單向閥柱塞密封圈線路過(guò)濾器手動(dòng)進(jìn)樣器檢測(cè)器12液相色譜常見(jiàn)問(wèn)題－壓力高保護(hù)柱泵的管路過(guò)濾器混合器預(yù)混合室過(guò)濾器某些細(xì)內(nèi)徑的系統(tǒng)管路自動(dòng)進(jìn)樣器高壓閥和細(xì)內(nèi)徑的出口管路（UFLC)。自動(dòng)進(jìn)樣器的進(jìn)樣口到高壓閥管路（LC2010)手動(dòng)進(jìn)樣閥的定子堵塞。檢測(cè)器流通池半微量池的入口管和背壓管。自動(dòng)進(jìn)樣針堵塞（劣質(zhì)進(jìn)樣墊或不溶樣品）LC-20A壓力高的標(biāo)準(zhǔn)是什么？LC-20A新儀器系統(tǒng)壓力是多少？流動(dòng)相是什么？流速是多少？參考標(biāo)準(zhǔn)：水1.0MP以下（1ml/min）（注：進(jìn)樣器和檢測(cè)器之間接雙通）。注意柱子的壓差（真實(shí)壓力值）13液相色譜常見(jiàn)問(wèn)題－壓力波動(dòng)泵頭中有氣泡。（建議甲醇趕氣泡）單向閥臟、堵塞、磨損單向閥非耐乙腈型柱塞密封墊漏液柱塞桿磨損漏液流動(dòng)相有氣泡吸濾頭臟脫氣機(jī)脫氣不良14液相色譜常見(jiàn)問(wèn)題－漏液泵：柱塞密封墊（漏流動(dòng)相）、排液閥、清洗墊（漏清洗液）手動(dòng)進(jìn)樣器:轉(zhuǎn)子密封墊自動(dòng)進(jìn)樣器:進(jìn)樣墊樣品環(huán)柱子接頭處:接頭松動(dòng)、接頭磨損、接頭不匹配）檢測(cè)器:流通池堵塞（墊片損壞、透鏡破碎）

15液相色譜常見(jiàn)問(wèn)題－基線噪音大流動(dòng)相污染，使用低純度溶劑流動(dòng)相、檢測(cè)器流通池內(nèi)有氣泡通過(guò)檢測(cè)池的能量低(光路臟、氘燈老化、流動(dòng)相、池子臟）波長(zhǎng)設(shè)定短（220nm以下）電源電壓波動(dòng)幾十伏沒(méi)接好地線儀器振動(dòng)－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－基線噪音標(biāo)準(zhǔn)：SPD-10Avp/20A20uv流動(dòng)相純水250nmSPD-M20A50uv流動(dòng)相純水250nm600nm16液相色譜常見(jiàn)問(wèn)題－基線不穩(wěn)流動(dòng)相污染，使用低純度溶劑檢測(cè)器的溫度受到環(huán)境波動(dòng)（風(fēng)口，空調(diào)口）沖洗平衡柱子時(shí)間不夠（半小時(shí)），柱子沒(méi)恒溫柱子或管路太臟波長(zhǎng)設(shè)定短（220nm以下）特殊流動(dòng)相溫控影響。（離子對(duì)試劑需要恒溫較穩(wěn)定）檢測(cè)器要預(yù)熱30min以上基線漂移標(biāo)準(zhǔn)：SPD-10Avp/20A:600uv/hour純水250nmSPD-M20A:2mv/hour純水250nm600nm17液相色譜常見(jiàn)問(wèn)題－面積重現(xiàn)性差1手動(dòng)進(jìn)樣閥7725i進(jìn)樣量不合適（10ul）進(jìn)樣針定量不準(zhǔn)。（不熟練）進(jìn)樣針有氣泡。（慢提快打）進(jìn)樣口轉(zhuǎn)子針密封松動(dòng)（用橡皮頂緊）進(jìn)樣針太細(xì)，插不緊轉(zhuǎn)子密封墊臟、磨損、漏液定量環(huán)堵塞廢液管堵塞或者位置不對(duì)進(jìn)樣的方法不正確進(jìn)樣針用完以后要及時(shí)清洗，否則針會(huì)粘住。CV：10ul6針面積RSD1％18液相色譜常見(jiàn)問(wèn)題－面積重現(xiàn)性差2自動(dòng)進(jìn)樣器沒(méi)有排氣（purge）或排氣時(shí)間（25min)不夠清洗液干了。（瓶子或管路）清洗液沒(méi)脫氣。（沒(méi)有在線脫氣機(jī)情況）高壓閥轉(zhuǎn)子密封墊堵塞或磨損進(jìn)樣墊堵塞或磨損漏液非島津的瓶及瓶墊針或定量環(huán)漏液或堵塞室溫波動(dòng)色譜柱性能降低

10ul6針面積RSDSIL-10ADvpSIL-20A0.3%SIL-10AF模式A0.5%模式F1%SIL-10AP1.0%19液相色譜常見(jiàn)問(wèn)題－保留時(shí)間重現(xiàn)性差泵輸液送液不正常（壓力波動(dòng)、氣泡）柱溫的變化（室溫變化小于2度）流動(dòng)相組分揮發(fā)變化（封口膜）流動(dòng)相的PH值不同，緩沖能力不夠（樣品影響）（低波長(zhǎng)用磷酸鹽，普通波長(zhǎng)用醋酸鹽。）色譜柱平衡時(shí)間不夠（C18,15cm30min-60min）梯度洗脫未回初始流動(dòng)相濃度比例或時(shí)間不夠純有機(jī)試劑與高鹽流動(dòng)相混合柱子問(wèn)題低壓梯度閥不良密封墊漏液，排液閥沒(méi)擰緊

6針RT.

RSD0.5%20液相色譜常見(jiàn)問(wèn)題－峰形異常色譜柱性能降低（污染、堵塞、塌陷、化學(xué)保留）色譜柱選擇不合適流動(dòng)相緩沖不足或不合適樣品溶劑選擇不當(dāng)，與流動(dòng)相之間極性差異太大樣品過(guò)載泵和色譜柱之間的管路連接顛倒流路連接中存在死體積流路漏液采樣針管或管路中出現(xiàn)阻塞流動(dòng)相組成變化管線公螺母死體積溶解樣品的溶劑選擇不當(dāng)最好不要選擇高溶解性的試劑作為溶解樣品的溶劑甲醇作為溶劑20μLCaffeine乙醇作為溶劑20μLCaffeine乙醇作為溶劑10μLCaffeine最好注入少量樣品溶解性效應(yīng)低溶解性溶劑高溶解性溶劑23液相色譜常見(jiàn)問(wèn)題－鬼峰流動(dòng)相被污染進(jìn)樣閥殘余峰樣品中未知物色譜柱中的污染物所用樣品瓶臟無(wú)清洗液清洗液體積[RINSEVOL]參數(shù)太低未注入樣品時(shí)空白梯度的色譜圖水中不純物的出峰水中的不純物保留在柱中，隨之被乙腈洗脫使用好儀器24

根據(jù)典記，魏文王曾求教于名醫(yī)扁鵲：“你們家兄弟三人，都精于醫(yī)術(shù)，誰(shuí)是醫(yī)術(shù)最好的呢？”扁鵲：“大哥最好，二哥差些，我是三人中最差的一個(gè)。”魏王不解地說(shuō)：“請(qǐng)你介紹的詳細(xì)些。”

扁鵲解釋說(shuō)：“大哥治病，是在病情發(fā)作之前，那時(shí)候病人自己還不覺(jué)得有病，但大哥就下藥鏟除了病根，使他的醫(yī)術(shù)難以被人認(rèn)可，所以沒(méi)有名氣，只是在我們家中被推崇備至。我的二哥治病，是在病初起之時(shí)，癥狀尚不十分明顯，病人也沒(méi)有覺(jué)得痛苦，二哥就能藥到病除，使鄉(xiāng)里人都認(rèn)為二哥只是治小病很靈。我治病，都是在病情十分嚴(yán)重之時(shí)，病人痛苦萬(wàn)分，病人家屬心急如焚。此時(shí)，他們看到我在經(jīng)脈上穿刺，用針?lè)叛?，或在患處敷以毒藥以毒攻毒，或?dòng)大手術(shù)直指病灶，使重病人病情得到緩解或很快治愈，所以我名聞天下?！蔽和醮笪颉?/p>

事后控制不如事中控制，事中控制不如事前控制，可惜大多數(shù)的事業(yè)經(jīng)營(yíng)者均未能體會(huì)到這一點(diǎn)，等到錯(cuò)誤的決策造成了重大的損失才尋求彌補(bǔ)。彌補(bǔ)得好，當(dāng)然是聲名鵲起，但更多的時(shí)候是亡羊補(bǔ)牢，為時(shí)已晚。

25液相色譜常見(jiàn)問(wèn)題－總結(jié)從以上常見(jiàn)故障的原因，可以看出規(guī)范操作非常重要：試劑達(dá)標(biāo)嚴(yán)把關(guān)排除氣泡須徹底鹽析結(jié)晶要避免管路部件不污染定期保養(yǎng)是保障日資企業(yè)，臺(tái)資企業(yè)故障較少，嚴(yán)格遵照操作SOP。26關(guān)于流動(dòng)相－脫氣流動(dòng)相必須預(yù)先脫氣，否則容易在系統(tǒng)內(nèi)逸出氣泡，影響泵的工作。影響色譜柱的分離效率及檢測(cè)器的靈敏度，基線穩(wěn)定溶解氧可能與樣品，流動(dòng)相，甚至固定相反應(yīng)可能引起PH的變化，給分離及分析結(jié)果帶來(lái)誤差溶解氧能與甲醇，四氫呋喃形成有紫外吸收的絡(luò)合物，提高背景吸收，降低靈敏度基線漂移或形成鬼峰熒光猝滅現(xiàn)象27關(guān)于流動(dòng)相－脫氣常用脫氣法：吹氦脫氣法加熱回流法抽真空脫氣法超聲波脫氣法在線真空脫氣法28關(guān)于流動(dòng)相－過(guò)濾所有溶劑使用前都必須用0.45μm（或0.22μm）濾膜過(guò)濾，以除去雜質(zhì)微粒。濾膜類型：聚四氟乙烯濾膜（油膜）：適用于所有溶劑，酸和鹽（過(guò)濾水速度慢）。醋酸纖維濾膜(水膜）：不適用于有機(jī)溶劑（溶解），特別適用于水相。29關(guān)于流動(dòng)相－貯存一般貯存于玻璃、聚四氟乙烯容器內(nèi)，不能貯存在其他塑料容器中。容器一定蓋嚴(yán)，防止揮發(fā)引起組成變化磷酸鹽、乙酸鹽緩沖液極易長(zhǎng)霉，應(yīng)盡量現(xiàn)用現(xiàn)配。冷藏不超過(guò)3天。容器定期清洗，特別是盛水、緩沖鹽的瓶子，以除去底部的雜質(zhì)沉淀和可能生長(zhǎng)的微生物。甲醇具有防腐作用。規(guī)范操作___操作前準(zhǔn)備30泵（LC-20AD）自動(dòng)進(jìn)樣器(SIL-20A)柱溫箱(CTO-20A)檢測(cè)器（SPD）打開(kāi)/關(guān)閉電源操作前的準(zhǔn)備檢查壓力值打開(kāi)/關(guān)閉電源

準(zhǔn)備清洗液和廢液瓶

清洗液的選擇

清除氣泡

準(zhǔn)備樣品源打開(kāi)/關(guān)閉電源設(shè)定操作溫度[SETTEMP

設(shè)定溫度上限[T.MAX操作注意事項(xiàng)打開(kāi)/關(guān)閉電源規(guī)范操作___基本操作31清洗與流動(dòng)相更換.pdf自動(dòng)進(jìn)樣器準(zhǔn)備.pdfSPD-20A20AV注意事項(xiàng).pdf32規(guī)范維修常見(jiàn)故障及應(yīng)對(duì)方法.pdf泵的定期維護(hù)保養(yǎng).pdf以泵為例，介紹規(guī)范維修33定期保養(yǎng)34定期保養(yǎng)35定期保養(yǎng)在線過(guò)濾器228-48607-91老式228-35871-96整體式單向閥清洗步驟由于不斷輸送流動(dòng)相，單向閥容易臟，所以建議分析結(jié)束后或者一段時(shí)間不用時(shí)用下面的方法清洗單向閥：用IPA清洗單向閥。連接一阻尼管(I.D.0.1mmx2m)到泵的出口，設(shè)置流速，使壓力至少10MPa(standard:1ml/min),清洗至少30minutes，這樣效果較好。關(guān)于LPGE的清洗：清洗比例閥

如果流動(dòng)相中含有可能產(chǎn)生鹽析的成分，比如磷酸鹽緩沖液。當(dāng)流動(dòng)相變干或與有機(jī)相混合時(shí)，就會(huì)產(chǎn)生鹽析。鹽晶將會(huì)大大縮短比例閥及泵消耗品的壽命。所以，如果使用這些流動(dòng)相，就需要定期的（大約一周），用純水PURGE所有的通道(A,B,C,andD)。接著設(shè)定濃度比例到每個(gè)通道各(A,B,C,andD)25%進(jìn)行沖洗至少30分鐘，流量為1.0mL/min?？梢圆唤又踊蛘吲乓洪y打開(kāi)。另外，如果系統(tǒng)將有一段時(shí)間不用的情況下，也需要立即清洗。注意事項(xiàng)有關(guān)緩沖溶液的注意點(diǎn)：①在使用緩沖液和有機(jī)溶劑預(yù)先混合好的溶液作為流動(dòng)相時(shí)，需將有機(jī)溶劑慢慢倒入緩沖液容器內(nèi)。溶劑混合后，目測(cè)確認(rèn)是否有鹽析出。備注1：在有機(jī)溶劑