實(shí)驗(yàn)二 徒手切片與臨時(shí)裝片的制作

實(shí)驗(yàn)二徒手切片與臨時(shí)裝片的制作授課教師：鄭磊2008.12.04

實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c要求

熟練掌握徒手切片技術(shù)，能夠切出只有一層細(xì)胞的切片。實(shí)驗(yàn)器材與用具顯微鏡、培養(yǎng)皿、單面刀片、雙面刀片、載玻片、蓋玻片、毛筆、吸水紙。實(shí)驗(yàn)材料與試劑實(shí)驗(yàn)材料

新鮮的吊蘭莖和葉、芹菜葉柄、黃豆芽，胡蘿卜（支持物）。試劑

1%番紅水溶液、

45%醋酸。實(shí)驗(yàn)原理徒手制片一般指徒手用刀片把新鮮的或固定好的植物材料切成薄片，不經(jīng)染色或經(jīng)簡(jiǎn)單染色后用水封片制成臨時(shí)制片的方法。此制片法主要優(yōu)點(diǎn)是：（1）能及時(shí)觀察研究植物生活組織的結(jié)構(gòu)和天然色彩；（2）方法及用具簡(jiǎn)單，不需切片機(jī)等機(jī)械設(shè)備，短時(shí)間即可完成。主要缺點(diǎn)是：（1）對(duì)于微小、柔軟、水分過多以及堅(jiān)硬的材料，難以用徒手切成薄片；（2）不能制成連續(xù)的切片；（3）對(duì)于操作不熟練者，往往難以切成厚薄均勻和完整的切片。實(shí)驗(yàn)方法材料的準(zhǔn)備和修整

將植物莖切成2~3cm長(zhǎng)的小段，并將其切面削平；若為質(zhì)地較軟而薄的材料，如葉片，可沿主脈兩側(cè)切成寬5~6mm、長(zhǎng)1~1.5cm的小塊，夾在支持物中進(jìn)行切片。支持物通常為蘿卜、胡蘿卜、馬鈴薯、通心草等。先將支持物切成高3~5cm、長(zhǎng)、寬0.5cm的立方體小塊，將其中部縱切一縫，然后將修整好的材料夾在其中。

切片

切片前在培養(yǎng)皿內(nèi)盛放適量清水。以左手拇指、食指、中指捏住材料，拇指應(yīng)低于食指，以免切傷手指，材料高出食指2~3mm。切片前，用水潤(rùn)濕刀片，以減少切片阻力。右手執(zhí)刀，將刀片平放在左手食指上，刀口朝內(nèi)，刀面與材料斷面平行，然后以均勻快捷的動(dòng)作自左前方向右后方以臂力帶動(dòng)刀片水平切割，不要用腕力。同時(shí)還要注意，切時(shí)動(dòng)作要迅速，材料一次切下，切忌停頓或拉鋸式切割。切下數(shù)片后，用濕毛筆輕輕將薄片移入清水中，防止材料萎蔫。染色與鏡檢若要觀察植物組織的天然色彩：挑選薄而透明、平整的切片，放在載玻片上，水封，制成臨時(shí)裝片。若想染色以觀察更清楚的切片：采用單染色，即用1%番紅水溶液染色3~5min，用蒸餾水洗去浮色，水封，鏡檢。觀察材料剃刀雙面刀片拿材料的手勢(shì)胡蘿卜木髓切取標(biāo)本切取的標(biāo)本擦拭載玻片滴水放置標(biāo)本加蓋蓋玻片葉的橫切玉米莖橫切南瓜莖橫切南瓜莖縱切任務(wù)與要求

1.制作