學(xué)支原體立克次體

學(xué)支原體立克次體第一頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日概念：支原體是一類(lèi)缺乏細(xì)胞壁的原核細(xì)胞型微生物，也是在無(wú)生命培養(yǎng)基上生長(zhǎng)繁殖的最小微生物。其特點(diǎn)為細(xì)胞膜含固醇，能通過(guò)細(xì)菌濾器；高度多形性、形成分枝的長(zhǎng)絲；含DNA和RNA，二分裂繁殖等。第二頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日柔膜體綱支原體目支原體科無(wú)膽甾原體科螺原體科支原體屬脲原體屬第三頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日主要病原性支原體肺炎支原體M.pneumoniae人型支原體M.Nominis生殖器支原體M.genitalium穿透支原體

M.penetraus溶脲脲原體U.urealyticum第四頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日第一節(jié)概述第五頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日一、生物學(xué)性狀1.形態(tài)結(jié)構(gòu)最小的原核細(xì)胞生物；球形、球桿形、長(zhǎng)絲狀及分枝狀等多種形態(tài)；G-，著色困難，常用Giemsa染色法染成淡紫色。第六頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日第七頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日細(xì)胞膜由蛋白質(zhì)和脂質(zhì)（固醇）組成三層結(jié)構(gòu)第八頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日第九頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日

特殊的頂端結(jié)構(gòu)：粘附宿主上皮

細(xì)胞表面，與支原

體的致病有關(guān)。第十頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日2.培養(yǎng)特性:荷包蛋樣菌落培養(yǎng)基中含人或動(dòng)物的血清(10~20%)及酵母浸液。多數(shù)支原體能在雞胚絨毛尿囊膜或細(xì)胞培養(yǎng)中生長(zhǎng)。第十一頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日固體培養(yǎng)基：

2～7天長(zhǎng)出直徑約10～600μm的典型的“荷包蛋樣”菌落：低倍鏡下見(jiàn)菌落呈圓形，心致密隆起，深入瓊脂，外周由顆粒包繞。液體培養(yǎng)基：

清亮需用放大鏡/低倍顯微鏡觀察第十二頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日第十三頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日支原體是污染細(xì)胞培養(yǎng)的重要原因之一第十四頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日

鑒別點(diǎn)

支原體細(xì)菌L型細(xì)胞壁缺失原因在遺傳上與細(xì)菌無(wú)關(guān)與原菌相關(guān)，可以回復(fù)細(xì)胞膜含高濃度固醇細(xì)胞膜不含固醇培養(yǎng)特性需要膽固醇大多需要高滲培養(yǎng)菌落大小生長(zhǎng)慢，菌落小菌落稍大(0.6~1.0)液體培養(yǎng)液體培養(yǎng)混濁度極低一定混濁度，可附壁支原體與細(xì)菌L型的異同點(diǎn)

不同點(diǎn)缺乏細(xì)胞壁，形態(tài)多樣，能通過(guò)濾菌器。固體培養(yǎng)—菌落呈荷包蛋樣或顆粒狀。臨床表現(xiàn)相似—間質(zhì)性肺炎、泌尿生殖道感染、不育等

相同點(diǎn)第十五頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日

支原體葡萄糖精氨酸尿素吸附細(xì)胞致病性

肺炎支原體+——紅細(xì)胞肺炎、支氣管炎人型支原體—+——泌尿生殖道感染生殖器支原體+———泌尿生殖道感染穿透支原體++—紅細(xì)胞條件感染

CD4+T細(xì)胞多見(jiàn)于艾滋病巨噬細(xì)胞溶脲脲原體——+—泌尿生殖道感染

流產(chǎn)及不孕不育

3、生化反應(yīng)第十六頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日溶脲脲原體分解尿素產(chǎn)氨，是酚紅變紅，液體清亮，為陽(yáng)性（右）第十七頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日

（四）抗原結(jié)構(gòu)來(lái)自細(xì)胞膜，胞膜外層蛋白質(zhì)是主要抗原，常用生長(zhǎng)抑制試驗(yàn)(GIT)與代謝抑制試驗(yàn)

(MIT)鑒定。

GIT是將吸有型特異性抗血清的濾紙片置于接種有支原體的固體培養(yǎng)基上，經(jīng)孵育出現(xiàn)同型血清抑制該型支原體生長(zhǎng)現(xiàn)象。

MIT是將支原體接種在含有抗血清培養(yǎng)基中，若抗體與支原體型一致，則抑制該支原體不能分解葡萄糖產(chǎn)酸。此兩種方法可將支原體分成若干血清型。第十八頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日（五）抵抗力

?對(duì)脂溶劑化學(xué)消毒劑敏感，對(duì)結(jié)晶紫、醋酸鉈、亞碲酸鉀有抵抗力；

?對(duì)影響細(xì)胞壁合成的抗生素如青霉素類(lèi)天然耐受，但對(duì)干擾蛋白質(zhì)合成的抗生素如強(qiáng)力霉素等敏感。第十九頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日二、致病性與免疫性頂端結(jié)構(gòu)與宿主細(xì)胞上受體結(jié)合而粘附于細(xì)胞上莢膜或微莢膜的抗吞噬作用產(chǎn)生毒性代謝產(chǎn)物超抗原，刺激炎癥細(xì)胞分泌大量細(xì)胞因子粘附、侵入CD4T淋巴細(xì)胞（穿透支原體）第二十頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日免疫性

?體液免疫：抗膜蛋白的抗體包括

IgM、IgG和SIgA

?細(xì)胞免疫：主要是特異性CD4＋Th1

細(xì)胞分泌細(xì)胞因子

第二十一頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日第二節(jié)主要致病性支原體第二十二頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日一肺炎支原體是下呼吸道重要的致病性支原體，所引起的人類(lèi)支原體肺炎占細(xì)菌性肺炎50%左右，其病理變化以間質(zhì)性肺炎為主，又稱(chēng)之原發(fā)性非典型性肺炎。癥狀輕，與胸片嚴(yán)重程度不符第二十三頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日（一）致病性

1.主要經(jīng)飛沫傳播，但大多數(shù)發(fā)生于夏

末秋初，5～15歲青少年發(fā)病率最高。

2.含特殊的頂端結(jié)構(gòu)：P1表面蛋白（170

kDa）和P30（32

kDa）為主要的粘附蛋白，使肺炎支原體黏附于呼吸道上皮。

3.肺炎支原體具有超抗原作用，能刺激炎癥細(xì)胞在感染部位釋放大量的淋巴因子（如TNF-α、IL-1、IL-6）引起組織損傷。致病性與免疫性第二十四頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日所致疾病------支原體肺炎傳播途徑

經(jīng)飛沫傳播發(fā)病年齡

兒童及青少年多見(jiàn)潛伏期2－3W臨床表現(xiàn)發(fā)熱（約39℃）、頭痛、持續(xù)性頑固咳嗽、胸痛等。一般經(jīng)3－10d主要癥狀消失，但咳嗽可以持續(xù)1個(gè)月之久。第二十五頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日第二十六頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日第二十七頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日免疫性

血清特異性IgM、IgG及SIgA和致敏的淋巴細(xì)胞；呼吸道局部黏膜產(chǎn)生的SIgA對(duì)防止再感染有較強(qiáng)保護(hù)作用；出現(xiàn)IgE介導(dǎo)的I型超敏反應(yīng)，促使哮喘病急性發(fā)作

第二十八頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日（一）分離培養(yǎng)

痰或咽拭子接種在SP-4培養(yǎng)基，挑選可疑菌落，經(jīng)形態(tài)學(xué)、糖發(fā)酵、溶血性、血細(xì)胞吸附試驗(yàn)進(jìn)行初步鑒定，進(jìn)一步鑒定需用特異性抗血清做GIT與MIT實(shí)驗(yàn)。三、微生物學(xué)檢查法第二十九頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日三、微生物學(xué)檢查法（二）血清學(xué)檢查

冷凝集試驗(yàn)：

即用病人血清與人O型血紅細(xì)胞或自身紅細(xì)胞混合，4℃過(guò)夜時(shí)可發(fā)生凝集，而在37℃時(shí)這種凝集又分散解離開(kāi)，但僅50％左右的患者才出現(xiàn)陽(yáng)性。此反應(yīng)為非特異性?？焖僭\斷

ELISA：檢測(cè)P1和P30蛋白mAbs

PCR：從痰標(biāo)本中檢測(cè)16SrRNA或

P1蛋白基因第三十頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日ELISA：此法敏感，特異性高，快速、經(jīng)濟(jì)，并可檢測(cè)IgM和IgG抗體，為目前診斷的可靠方法。檢測(cè)分子量190kDa的P1蛋白，3h可完成試驗(yàn)，特異性高，敏感性為104CFU／μl標(biāo)本。第三十一頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日防治原則

大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)藥物

喹諾酮類(lèi)藥物四、防治原則第三十二頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日二解脲脲原體溶脲脲原體U.urealyticum人型支原體M.Nominis生殖器支原體M.genitalium性傳播疾?。⊿TD）的病原體第三十三頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日解脲脲原體

通常寄居在人的泌尿生殖道粘膜，引起非淋菌性尿道炎，也能引起盆腔等部位的感染。還可通過(guò)胎盤(pán)感染胎兒，出現(xiàn)早產(chǎn)和死胎。也能引起婦女不孕不育癥。常與衣原體、淋球菌合并感染第三十四頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日1.寄居泌尿生殖道，2.傳播途徑為性接觸和母嬰傳播。3.致病機(jī)制-粘附于宿主細(xì)胞表面，引起細(xì)胞膜損傷；-產(chǎn)生毒性代謝產(chǎn)物如NH3，對(duì)宿主細(xì)胞有急性毒性作用；-磷脂酶損傷宿主的細(xì)胞膜。解脲脲原體

第三十五頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日2.引起非淋菌性尿道炎(NGU)，上行感染，可引起前列腺炎或附睪炎；陰道炎和宮頸炎，并可導(dǎo)致流產(chǎn)。因?yàn)榕c人精子膜有共同抗原，對(duì)精子可造成免疫損傷而致不育。常與衣原體、淋球菌合并感染第三十六頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日引起男性不孕的原因：①Uu吸附于精子表面，使其運(yùn)動(dòng)受阻，并蔽蓋了精子識(shí)別卵細(xì)胞的部位②Uu產(chǎn)生神經(jīng)氨酸樣物質(zhì)，干擾精子與卵細(xì)胞結(jié)合。③Uu與精子膜有共同抗原，從而產(chǎn)生抗精子抗體第三十七頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日

病原體檢測(cè)

接種液體培養(yǎng)基，分解尿素產(chǎn)堿，酚紅指示劑由橘黃色變?yōu)榧t色；培養(yǎng)24～48h，用低倍鏡觀察菌落，進(jìn)一步鑒定需用特異抗血清做GIT與MIT。三、微生物學(xué)檢查法第三十八頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日核酸檢測(cè)

PCR檢測(cè)：

檢測(cè)尿素酶基因、多帶抗原（MB-Ag）基因和16S

rRNA基因。此法快速、特異，適宜于大批量標(biāo)本檢測(cè)。三、微生物學(xué)檢查法第三十九頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日生殖支原體與泌尿生殖道感染有關(guān)人型支原體能引起滲出性咽炎及尿道炎，也與卵巢膿腫、產(chǎn)褥熱等有關(guān)。第四十頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日思考題1、名詞解釋?zhuān)褐гw(mycoplasma)2、簡(jiǎn)述致病性支原體的種類(lèi)及其致病性。3、支原體與細(xì)菌L型的比較第四十一頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日第20章立克次體（Rickettsia）概念：立克次體是一類(lèi)以節(jié)肢動(dòng)物為傳播媒介，嚴(yán)格活細(xì)胞內(nèi)寄生的原核細(xì)胞型微生物，可以引起斑疹傷寒、Q熱、恙蟲(chóng)病、斑點(diǎn)熱等傳染病。第四十二頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日1906年首次被發(fā)現(xiàn)，第一個(gè)被發(fā)現(xiàn)的立克次體病是斑疹傷寒。為了紀(jì)念因研究斑疹傷寒被感染而犧牲的年僅39歲的醫(yī)師，將這類(lèi)微生物統(tǒng)稱(chēng)為立克次體。第四十三頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日立克次體的共同特點(diǎn)：專(zhuān)性活細(xì)胞內(nèi)寄生，以二分裂方式繁殖有DNA和RNA兩類(lèi)核酸球桿狀或多形態(tài)，革蘭染色陰性寄生在吸血性節(jié)肢動(dòng)物體內(nèi)，以節(jié)肢動(dòng)物為傳播媒介或儲(chǔ)存宿主引起自然疫源性疾病對(duì)多種抗生素敏感第四十四頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日第一節(jié)概述第四十五頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日一、生物學(xué)性狀大小:(0.3μm-0.6μm)×(0.8μm-2.0μm)形態(tài):

類(lèi)似球桿菌,多形性

(球形、啞鈴形、長(zhǎng)桿狀或絲狀等)染色:Giemsa染色法:紫色或藍(lán)色

馬氏染色法(Macchiavellostain):紅色排列:

散在于細(xì)胞漿中、核旁成堆

(斑點(diǎn)熱立克次體在胞漿或核內(nèi))培養(yǎng):

專(zhuān)性細(xì)胞內(nèi)(活細(xì)胞內(nèi))寄生培養(yǎng)方法:

雞胚卵黃囊內(nèi)接種，組織細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物接種第四十六頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日第四十七頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日抗原構(gòu)造：群特異性抗原,種特異性外膜抗原外斐反應(yīng)(Weil-Felixreaction):斑疹傷寒等立克次體與變形桿菌某些X菌株（OX19、OX2、OXk

）有共同的耐熱多糖類(lèi)抗原。利用這些變形桿菌菌株代替立克次體抗原，進(jìn)行定量非特異凝集反應(yīng)（交叉凝集反應(yīng)），以檢測(cè)人或動(dòng)物血清中的相應(yīng)抗體。協(xié)助診斷斑疹傷寒,恙蟲(chóng)病,滴度超過(guò)1:160有意義.第四十八頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日立克次體變形桿菌抗體抗體交叉反應(yīng)

外裴氏反應(yīng)示意圖第四十九頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日抵抗力:

熱、消毒劑:較弱(56℃,數(shù)分鐘,0.5%石碳酸、

0.5%來(lái)蘇,75%酒精中數(shù)分鐘)

抗生素:敏感:氯霉素和四環(huán)素不敏感:磺胺類(lèi)，磺胺藥刺激生長(zhǎng)低溫、干燥:較強(qiáng)(-20℃或冷凍干燥半年以上)第五十頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日二、致病性與免疫性傳播媒介：吸血節(jié)肢動(dòng)物，如虱、蚤、蜱、螨等。致病物質(zhì)：脂多糖（發(fā)熱、微循環(huán)障礙、DIC、休克磷脂酶A（溶解宿主細(xì)胞膜或吞噬體膜）微莢膜（粘附、抗吞噬）第五十一頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日致病過(guò)程

體虱鼠蚤人體局部淋巴結(jié)及小血管內(nèi)皮細(xì)胞恙螨第一次入血

全身小血管內(nèi)皮細(xì)胞高熱、皮疹神經(jīng)系統(tǒng)癥狀臨床癥狀第二次入血心血管系統(tǒng)癥狀生長(zhǎng)繁殖大量繁殖第五十二頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日致病機(jī)制：立克次體虱、蚤、蜱、螨等叮咬或其糞便污染傷口局部淋巴組織或小血管內(nèi)皮細(xì)胞中增殖立克次體血癥（第一次）經(jīng)血流全身小血管內(nèi)皮細(xì)胞大量增殖立克次體血癥（第二次）、毒血癥和各種臨床癥狀。第五十三頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日螨蟲(chóng)蜱第五十四頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日吃飽的跳蚤人體虱第五十五頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日致病性與免疫性所致疾病

人畜共患性疾病流行性斑疹傷寒地方性斑疹傷寒恙蟲(chóng)病

Q熱第五十六頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日免疫性：以細(xì)胞免疫為主，體液免疫為輔。多數(shù)可獲得持久的免疫。第五十七頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日三、微生物學(xué)診斷與防治病原體的分離培養(yǎng)與鑒定血清學(xué)試驗(yàn)（外斐反應(yīng)、ELISA）控制和消滅媒介昆蟲(chóng)；抗生素治療（氯霉素、四環(huán)素，但禁用磺胺類(lèi)藥物）；全細(xì)胞滅活疫苗立克次體易引起實(shí)驗(yàn)室感染，注意無(wú)菌操作??！第五十八頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日第二節(jié)主要致病性立克次體第五十九頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日一、普氏立克次體

(R.prowazekii)流行性斑疹傷寒（epidemictyphus）虱型斑疹傷寒（louse-bornetyphus）第六十頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日流行環(huán)節(jié)

傳染源：

病人

儲(chǔ)存宿主：

病人

傳播媒介：

人虱

傳播方式：

人人虱人第六十一頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日第六十二頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日所致疾病——流行性斑疹傷寒臨床表現(xiàn):

潛伏期（10～14d）高熱、頭痛、肌肉痛等（4～7d）皮疹神經(jīng)、心血管和其他器官病變第六十三頁(yè)，共七十二頁(yè)，2022年，8月28日免疫力