實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué) 第十一章

第十一章

常用動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)的主要組成部分，是生命科學(xué)研究的主要手段之一。它包括動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇、應(yīng)用；實(shí)驗(yàn)設(shè)備的應(yīng)用；試劑、樣品的篩選、配制、應(yīng)用；實(shí)驗(yàn)后實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的飼養(yǎng)、觀察、實(shí)驗(yàn)樣品的采集、處理等多方面的知識(shí)。在生命科學(xué)研究的各個(gè)學(xué)科都有其不同的應(yīng)用，實(shí)驗(yàn)方法也是多種多樣的。但一些基本技術(shù)是許多學(xué)科的實(shí)驗(yàn)都要應(yīng)用的，我們稱(chēng)為常用動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)，是動(dòng)物實(shí)驗(yàn)工作者必須掌握的基本功。一、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)前應(yīng)注意的問(wèn)題動(dòng)物實(shí)驗(yàn)前要做好充分的準(zhǔn)備，選擇好合格的實(shí)驗(yàn)場(chǎng)所，實(shí)驗(yàn)后動(dòng)物的飼養(yǎng)場(chǎng)所等。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)人員要取得動(dòng)物實(shí)驗(yàn)人員崗位證書(shū)，熟練掌握動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)。1、要在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)前一周領(lǐng)取動(dòng)物，在實(shí)驗(yàn)飼養(yǎng)環(huán)境內(nèi)飼養(yǎng)觀察一周，以使動(dòng)物適應(yīng)飼養(yǎng)環(huán)境。2、每天測(cè)量動(dòng)物體溫，并記錄室內(nèi)溫、濕度等。3、實(shí)驗(yàn)前不要使動(dòng)物感到異常。4、注意消毒，不要使動(dòng)物離開(kāi)等級(jí)飼養(yǎng)設(shè)施，尤其是使用獨(dú)立送風(fēng)籠具或?qū)恿鞴襁M(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)飼養(yǎng)時(shí)要嚴(yán)格按操作規(guī)程進(jìn)行。5、實(shí)驗(yàn)中要做好記錄，包括實(shí)驗(yàn)起始時(shí)間，環(huán)境條件等。二、動(dòng)物的購(gòu)入領(lǐng)取或購(gòu)入實(shí)驗(yàn)動(dòng)物前要注意以下幾個(gè)問(wèn)題：1、領(lǐng)取動(dòng)物前要按計(jì)劃?rùn)z查各項(xiàng)準(zhǔn)備工具，如籠具數(shù)量、飲水瓶、飼養(yǎng)環(huán)境衛(wèi)生、消毒、飼料等。2、購(gòu)入動(dòng)物時(shí)要索取所購(gòu)動(dòng)物的質(zhì)量合格證，包括合格證批號(hào)，動(dòng)物的品種、品系、年齡、體重等，并有簽發(fā)人簽字蓋章。3、同時(shí)購(gòu)入相應(yīng)的飼料和墊料。4、運(yùn)輸時(shí)要注意防止途中污染和動(dòng)物窒息死亡，注意保持溫度、濕度。長(zhǎng)期運(yùn)輸還要給予足夠的飲水和飼料。5、運(yùn)輸動(dòng)物要用相應(yīng)等級(jí)的籠器具，例如運(yùn)輸清潔級(jí)動(dòng)物要用帶有空氣過(guò)濾膜的無(wú)菌運(yùn)輸罐或帶過(guò)濾帽的籠盒，并嚴(yán)格檢查密封狀況。三實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的抓拿、保定、編號(hào)、分組和除毛（一）抓取和固定

在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中必須首先抓取并固定動(dòng)物，正確地抓取固定動(dòng)物是為了不損害動(dòng)物健康，不影響觀察指標(biāo)，防止被動(dòng)物咬傷，保證實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行。同種動(dòng)物往往有幾種不同的固定方法，有些單位還有自己的習(xí)慣的方法。但不管用什么方法，實(shí)驗(yàn)者必須了解動(dòng)物的一般習(xí)性。操作小心仔細(xì)，大膽敏捷，熟練準(zhǔn)確，切不可粗暴，恐嚇動(dòng)物。本節(jié)介紹一些常用的方法。

1、

小鼠的抓取固定：圖1、小鼠的抓取固定方法

2、

大鼠的抓取固定：

圖2、大鼠保定法之一也可用無(wú)紡布巾或無(wú)紡布三角袋包起大鼠進(jìn)行固定。

圖3、無(wú)紡布方巾包裹大鼠固定為防止大鼠咬傷也可戴上帆布手套。3、

豚鼠的抓取固定：圖4、豚鼠的抓取4、家兔的抓取固定

圖5、家兔的抓取

兔的固定方法常用的有手法固定、盒式固定和臺(tái)式固定法。手法固定常用于灌胃給藥，人坐在椅子上用一只手抓住頸背部毛皮，另一只手抓住兩后肢放入大腿之間用雙腿夾住兔下半身，空著手抓住兩前肢固定之，抓頸背的手同時(shí)捏住兩個(gè)耳朵，不讓頭部轉(zhuǎn)動(dòng)。盒式固定用于耳部采血和耳部血管注射，把兔放入盒或筒內(nèi)，前方露出頭部。。

圖6、兔的盒式固定臺(tái)式固定適用于測(cè)血壓、呼吸等實(shí)驗(yàn)或進(jìn)行手術(shù)操作（圖10）。圖7、家兔的臺(tái)式固定讓麻醉兔仰臥，用線(xiàn)繩依次將四肢系扎在固定器兩側(cè)，把頭部放在金屬制的首枷和嘴環(huán)上固定。如果做頭部手術(shù)，可用馬蹄形固定器固定頭部，固定時(shí)先剪去兩側(cè)眼眶下部的皮毛，暴露顴骨突起，調(diào)節(jié)固定器兩端的尖頭金屬棒，使其正好嵌在突起下方的凹陷處，然后在適當(dāng)?shù)母叨裙潭ń饘侔簦▓D11）。圖8、兔的馬蹄形固定5、家犬的抓取固定

經(jīng)過(guò)馴服的家犬，例如Beagle犬，抓取是比較方便的。未經(jīng)馴服的較兇惡的狗，要用特制的鉗式長(zhǎng)柄狗夾挾住狗頸部，將狗按倒在地，系上脖套和鐵鏈條。急性實(shí)驗(yàn)用犬可將狗嘴綁住，再將其四肢固定好。在給狗進(jìn)行靜脈給藥或采血等操作時(shí)可用架式懸吊固定法或用箱式固定法。箱式固定法類(lèi)似家兔的盒式固定法，自制犬箱，將犬牽入，使犬不能回身，蓋上箱蓋前端卡住狗頸，使犬頭露在箱外（卡頸處的箱蓋和箱前端合攏后應(yīng)為圓形，僅容犬頸存在，犬頭不能縮回），犬即站立在犬箱內(nèi)，犬箱的側(cè)面可為柵欄式，可伸手隨意牽出犬腿。

（二）編號(hào)和個(gè)體標(biāo)記

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，為了區(qū)別和觀察每一個(gè)動(dòng)物，必須對(duì)動(dòng)物進(jìn)行標(biāo)記和編號(hào)，要根據(jù)動(dòng)物的種類(lèi)、數(shù)量和實(shí)驗(yàn)時(shí)間的長(zhǎng)短來(lái)選擇合適的標(biāo)記方法，標(biāo)記方法要保證號(hào)碼耐久、清楚、簡(jiǎn)便、易認(rèn)、適用。常用的方法有以下幾種：

1、染色法：用毛筆或棉簽蘸取化學(xué)藥品在動(dòng)物身體明顯部位進(jìn)行涂染。常用的染色劑有0.5%中性品紅溶液（紅色），3—5%苦味酸溶液（黃色），2%硝酸銀溶液（咖啡色）和煤焦油溶液（黑色）。染色法常用于實(shí)驗(yàn)同期短的實(shí)驗(yàn)，方法簡(jiǎn)單，動(dòng)物無(wú)疼苦損害，但常因動(dòng)物磨擦、舐毛，尿、水浸、被毛脫落等而脫落，因此不適用長(zhǎng)期的實(shí)驗(yàn)。2、掛牌法：用帶號(hào)碼的金屬牌固定在動(dòng)物的耳上或掛在脖頸上，常用鋁牌，可以反復(fù)使用不生銹，常用于家兔、豚鼠和貓、家犬、猴等動(dòng)物。在兔耳上固定時(shí)要將號(hào)碼牌的尖端避開(kāi)血管，穿過(guò)耳殼，在耳的內(nèi)側(cè)面將其折曲固定。3、耳緣剪孔法：在動(dòng)物的耳邊緣剪出不同的缺口或打成不同的小孔進(jìn)行標(biāo)記的方法。剪耳緣和打孔后要注意防止傷口感染，可用消毒滑石粉涂沫在打孔局部。4、烙印法：烙印法是把編號(hào)烙壓在動(dòng)物身上，如狗可將號(hào)碼烙在被毛上，其他動(dòng)物（主要為兔）可用刺數(shù)鉗在耳上刺上號(hào)碼，然后用棉簽蘸溶在酒精中的染料（如黑墨）涂沫。

5、形態(tài)特征標(biāo)記法：可用于豚鼠、家犬等，根據(jù)動(dòng)物形態(tài)顏色特征編號(hào)

6、籠子編號(hào)：用籠號(hào)作為個(gè)體號(hào)，但千萬(wàn)注意不要把動(dòng)物放錯(cuò)籠盒。（三）、分組

進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，常常需要把選擇的動(dòng)物按需要分成若干組。1、分組的原則：按隨機(jī)分配的原則，使每一只動(dòng)物都有同等機(jī)會(huì)被分配到各個(gè)組，包括各個(gè)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組。以避免各組之間的差別，保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確，有利于統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)。應(yīng)避免人為因素，要隨機(jī)將動(dòng)物編號(hào)；若分兩組進(jìn)行，可把雙數(shù)做為一組，單數(shù)做為一組；若分為多組時(shí)可用統(tǒng)計(jì)學(xué)的隨機(jī)數(shù)字表進(jìn)行完全隨機(jī)化分組。每組動(dòng)物的數(shù)量要根據(jù)實(shí)驗(yàn)周期的長(zhǎng)短，實(shí)驗(yàn)的類(lèi)型和統(tǒng)計(jì)學(xué)要求而定。慢性、周期長(zhǎng)的實(shí)驗(yàn)或?qū)嶒?yàn)中要定期處死動(dòng)物檢驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)，使用的動(dòng)物數(shù)量就多一些，以補(bǔ)充動(dòng)物自然死亡和人為處死喪失的數(shù)量，保證有合乎統(tǒng)計(jì)學(xué)要求的動(dòng)物數(shù)量。

2、建立對(duì)照組：一般動(dòng)物實(shí)驗(yàn)都要設(shè)立對(duì)照組，常設(shè)的對(duì)照組有以下幾種（1）、自身對(duì)照：用每個(gè)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)處理前和實(shí)驗(yàn)處理后的各項(xiàng)相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行對(duì)照，就分別是對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。用每個(gè)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物自身對(duì)比，可排除個(gè)體間的差異。（2）、平行對(duì)照組：設(shè)兩個(gè)對(duì)照組，正對(duì)照和負(fù)對(duì)照組；對(duì)實(shí)驗(yàn)組給以實(shí)驗(yàn)處理；對(duì)照組也給予同樣的實(shí)驗(yàn)處理手段，但處理時(shí)不給予實(shí)驗(yàn)所要的藥物（或樣品）；而負(fù)對(duì)照組則不給任何處理。 還有一些其他的設(shè)立對(duì)照組的方法，可根據(jù)實(shí)驗(yàn)的需要進(jìn)行設(shè)置。（四）、被毛去除

1、剪毛法：2、拔毛法： 3、剃毛： 4、脫毛法：用化學(xué)藥品脫去被毛。先將被毛剪短，然后用棉球蘸取脫毛劑，在欲脫毛部位涂一薄層，2—3分后用溫水洗去脫下的被毛，用紗布擦干。常用于犬等大動(dòng)物的脫毛劑配方為：硫化鈉10g，生石灰15g，溶于100ml水中。用于兔、鼠等小動(dòng)物脫毛劑為：①硫化鈉3g，肥皂粉1g，淀粉7g，加適量水調(diào)成糊狀。②硫化鈉8g，淀粉7g，糖4g，甘油5g，硼沙1g，加水75ml。③硫化鈉8g溶于100ml水中。四實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的麻醉

實(shí)驗(yàn)中為了減少動(dòng)物痛苦和不適，保證動(dòng)物安全，使動(dòng)物服從操作，確保實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行，常常需要對(duì)動(dòng)物進(jìn)行麻醉。因動(dòng)物品種不同，實(shí)驗(yàn)的方法不同，麻醉的方法也不同。（一）常用的麻醉藥1、常用局部麻醉藥

（1）0.5—1%普魯卡因（Procaine,又名奴佛卡因，Novocain）毒性小，見(jiàn)效快（注射后1—3min），作用時(shí)間短（30—45min），常用于局部浸潤(rùn)麻醉。（2）利多卡因（Lidocaine,又名賽羅卡因，Xylocaine）注身后見(jiàn)效快，作用時(shí)間稍長(zhǎng)，組織穿透）性好，用于大動(dòng)物神經(jīng)干阻止效果好，也用于局部浸潤(rùn)麻醉（0.25％－0.5％）。局部浸潤(rùn)用0.25—0.5%水溶液，神經(jīng)干組織用1—2%水溶液。2、全身麻醉藥：常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物全身麻醉藥及其用法和劑量

見(jiàn)表格.（二）麻醉前的準(zhǔn)備和麻醉方法的選擇

1、麻醉前的準(zhǔn)備（1）麻醉前禁食，一般在麻醉前12h禁食。（2）大動(dòng)物如犬、猴、羊、豬等可給予一定量的安定劑和阿托品類(lèi)藥物，以減輕動(dòng)物的緊張和唾液分泌。（3）準(zhǔn)備好麻醉器具和應(yīng)急藥品。2、麻醉方法的選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物麻醉方法的選擇要根據(jù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的種類(lèi)、品系；實(shí)驗(yàn)的方法、類(lèi)型、時(shí)間的長(zhǎng)短；麻醉方法和麻醉藥的特性，麻醉的設(shè)備、條件進(jìn)行考慮，例如實(shí)驗(yàn)時(shí)間短可采用吸入性麻醉或短效麻醉藥；心臟、肺部手術(shù)實(shí)驗(yàn)，采用氣管內(nèi)插管控制呼吸的方法；犬、猴等適于靜脈麻醉，鼠類(lèi)動(dòng)物常用腹腔注射麻醉，也可以用聯(lián)合麻醉的方法，例如先用乙醚吸入的方法將大鼠麻醉，再腹腔注射麻醉藥的方法。（三）、常用的麻醉方法

1、全身麻醉： （1）注射麻醉： （2）吸入麻醉： （3）氣管內(nèi)插管麻醉： 2、局部麻醉： （1）局部浸潤(rùn)麻醉： （2）區(qū)域阻滯麻醉：（3）神經(jīng)干（叢）阻滯麻醉：（4）椎管內(nèi)麻醉：（5）表面麻醉：.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物給藥途徑和方法

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物給藥的途徑和方法是多種多樣的，可根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、?shí)驗(yàn)動(dòng)物的種類(lèi)、藥物的劑型、劑量等情況確定。常用的有經(jīng)消化道給藥和注射法給藥。另外還有涂布法（經(jīng)皮膚）、吸入法（經(jīng)呼吸道）等方法。（一）經(jīng)消化道給藥受試物質(zhì)經(jīng)口給入，常用下列幾種方式

1、口服法：把藥物混入食物或溶于飲水中讓動(dòng)物自動(dòng)食入。2、灌胃法：為準(zhǔn)確掌握給藥劑量常用灌胃法。用灌胃器將應(yīng)投給的藥物灌到動(dòng)物胃內(nèi)。灌胃器由注射器和灌胃針組成。灌胃針為特制的，小鼠灌胃針長(zhǎng)4—5cm，直徑約1mm，大鼠灌胃針長(zhǎng)6—8cm，直徑1.2mm。灌胃針的尖端焊有一小金屬球，以防插入時(shí)損傷消化道，針的前端可以彎成20°左右的角度。犬、貓、兔等常用導(dǎo)尿管作為灌胃管。操作前，將灌胃針（或管）按在注射器上，先大致測(cè)一下從動(dòng)物口腔到胃內(nèi)的位置的長(zhǎng)度（從動(dòng)物口角到最末一根肋骨前端的長(zhǎng)度），估計(jì)灌胃針插入的深度。成年動(dòng)物插入的深度一般是小鼠3—4cm，大鼠和豚鼠4—6cm，兔約15cm，犬約20cm。常用灌胃量小鼠0.2—1ml，大鼠1—4ml，豚鼠1—5ml，兔80—150ml，狗200—500ml，貓100—150ml。鼠類(lèi)的灌胃：用左手拇指和食指抓住兩耳間和頸后皮膚固定頭部，其他三指抓住背部皮膚，將鼠握持在左掌中，小鼠可用無(wú)名指和小指夾住固定一側(cè)后肢。使動(dòng)物腹部向上，頭部向上有一個(gè)傾斜度。右手持灌胃器，將灌胃針沿咽后壁慢慢插入食道，進(jìn)入相當(dāng)深度進(jìn)入胃內(nèi)，回抽注射器針?biāo)ǎ鐭o(wú)空氣抽回（以防插入氣管）即注入藥液（圖15）。圖9、大鼠的灌胃

兔、貓、犬的灌胃：將動(dòng)物固定，再將開(kāi)品器固定于動(dòng)物口中，壓住舌頭，將適宜粗細(xì)的灌胃管從開(kāi)口器的小孔插入動(dòng)物口中，沿上腭壁慢慢插入食道，進(jìn)入適當(dāng)深度進(jìn)入胃內(nèi)。為防止進(jìn)入氣管要慢，要輕，可用動(dòng)物毛在導(dǎo)管外試一下，觀看動(dòng)物呼吸時(shí)毛有無(wú)擺動(dòng)，或?qū)?dǎo)管外端浸入水中，看是否有氣泡逸出，查看是否在氣管內(nèi)。如證實(shí)確在胃內(nèi)，聯(lián)結(jié)注射器將藥物推入。

動(dòng)物種類(lèi)體重（g）最大容積(ml)

小鼠>301.025~300.820~240.5大鼠.>3008.0250~3006.0200~2494.0~5.0100~1993.0豚鼠>3006.0250~3004.0~5.0家兔>35002002500~3500150200~2400100貓>3000100~1502500~300050~80狗10000～15000200～50011-表2各種動(dòng)物一次灌胃能耐受的最大容積（魏泓，1998年）（二）注射法給藥 1、皮內(nèi)注射：注射量：小鼠最多不得超過(guò)0.05ml，豚鼠、大鼠、兔一般為0.1ml。 2、皮下注射： 3、肌肉注射： 4、腹腔注射：圖16）圖10、小鼠腹腔注射小鼠的一次注射量為0.1—0.2ml/10g（體重）。大鼠一次注射量為1—2ml/10g體重。5、靜脈注射：靜脈注射根據(jù)動(dòng)物的種類(lèi)不同，選擇不同的靜脈血管。注射藥物，一般只限于液體藥物，如果是混懸液，可能會(huì)因懸浮粒子較大而引起血管栓塞。小鼠和大鼠的靜脈注射：常選用尾靜脈。鼠的尾靜脈共有3根（圖17）。

圖11、鼠尾部血管左右兩側(cè)和背側(cè)各一根，兩側(cè)尾靜脈比較容易固定，常被采用。注射量一般為0.5ml為宜。11-表3、不同動(dòng)物所使用針頭型號(hào)和投入量（ml）（孫敬方）動(dòng)物灌胃皮下肌肉腹腔靜脈

小鼠使用針頭9（鈍頭）5554給藥量10.40.410.8大鼠使用針頭腰穿針6665給藥量2（鈍頭）10.424豚鼠使用針頭靜脈切開(kāi)針6675給藥量310.545兔使用針頭導(dǎo)尿管（10）6676給藥量2022510貓使用針頭導(dǎo)尿管（10）7776給藥量2022610蛙淋巴囊注射最大量1ml/只

（三）其他途徑給藥

呼吸道給藥：呈粉塵、氣體、蒸汽或霧水等狀態(tài)的藥物或毒氣通過(guò)呼吸道吸入。如鋸末煙霧吸入制作慢性氣管炎動(dòng)物模型等。皮膚給藥：鑒定藥物或毒物經(jīng)皮膚的吸收作用、局部作用、致敏作用、光感作用等需經(jīng)皮膚給藥，如用豚鼠進(jìn)行化妝品的刺激、致敏作用實(shí)驗(yàn)；經(jīng)兔腹部皮膚給予血吸蟲(chóng)尾蚴，制做血吸蟲(chóng)動(dòng)物模型等。還可以根據(jù)需要經(jīng)直腸內(nèi)給藥、關(guān)節(jié)腔內(nèi)給藥、淋巴囊內(nèi)給藥、脊髓腔內(nèi)和腦內(nèi)給、鼻內(nèi)接種等途徑。（四）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物用藥量的確定動(dòng)物的用藥量一般因動(dòng)物種類(lèi)而異，也與給藥的方法有關(guān)，一般按mg/kg計(jì)算，應(yīng)用時(shí)應(yīng)查閱有關(guān)資料，如查不到，可選用致死量的1/10—1/5進(jìn)行嘗試，也可以用其它動(dòng)物或人的劑量來(lái)?yè)Q算。一般來(lái)說(shuō)，動(dòng)物的耐受性比人大，因此單位體重的用藥量比人要大，大鼠、小鼠為人的25—50倍，兔、豚鼠為15—20倍，狗、貓為5—10倍。六實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的采血技術(shù)方法

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中常常需要采取動(dòng)物的血液進(jìn)行檢查和分析，所以必須熟練地掌握動(dòng)物的采血方法。采血方法依動(dòng)物的種類(lèi)和采血的血量不同。靜脈采血，若需反復(fù)多次。應(yīng)先從遠(yuǎn)心端開(kāi)始，以免發(fā)生栓塞而影響整條靜脈。大、小鼠的采血1、剪尾采血：需血量少時(shí)可用此方法。小鼠每次采血約0.1ml，大鼠約0.4ml。為了多次反復(fù)取血應(yīng)盡量從鼠尾末端開(kāi)始。2、摘眼球采血：此法常用于鼠類(lèi)大量采血3、眼眶后靜脈叢采血：小鼠一次可采血0.2—0.3ml，大鼠一次可采0.5—0.1ml（圖18）。

圖12、大鼠后眼框靜脈叢取血方法

4、頸靜脈或頸動(dòng)脈采血：5、斷頭采血：6、心臟采血：

七、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體液、骨髓的采集（一）、尿液的采集

常用的采集方法較多，一般在實(shí)驗(yàn)前需給動(dòng)物灌服一定量的水。1、代謝籠法此法較常用，適用于大、小鼠。將動(dòng)物放在特制的籠內(nèi)（圖19）。動(dòng)物排便時(shí)，可以通過(guò)籠子底部的大小便分離漏斗將尿液與糞便分開(kāi)，達(dá)到采集尿液的目的。圖13、大小鼠代謝籠裝置由于大、小鼠尿量較小，操作中的損失和蒸發(fā)，各鼠膀胱排空不一致等原因，都可造成較大的誤差，因此一般需收集5小時(shí)以上的尿液，最后取平均值。八動(dòng)物實(shí)驗(yàn)后的有關(guān)問(wèn)題（一）、實(shí)驗(yàn)后的護(hù)理動(dòng)物實(shí)驗(yàn)后應(yīng)在相應(yīng)等級(jí)的動(dòng)物飼養(yǎng)設(shè)施內(nèi)飼養(yǎng)觀察。無(wú)菌動(dòng)物、SPF級(jí)動(dòng)物和清潔級(jí)動(dòng)物飼養(yǎng)要嚴(yán)格執(zhí)行操作規(guī)程，每天做好飼養(yǎng)及觀察記錄。普通級(jí)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)后也應(yīng)在普通級(jí)飼養(yǎng)環(huán)境內(nèi)飼養(yǎng)觀察，每天做好環(huán)境條件數(shù)據(jù)記錄：天氣、室溫、濕度等。切不可在普通的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)、房間內(nèi)等處飼養(yǎng)觀察動(dòng)物。（二）、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的處死

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的處死，有的是因中斷實(shí)驗(yàn)而淘汰動(dòng)物的需要，有的是因?qū)嶒?yàn)結(jié)束后做進(jìn)一步檢查的需要，有的是為保護(hù)健康動(dòng)物而處理患病動(dòng)物的需要。處死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物應(yīng)遵循動(dòng)物安樂(lè)死的基本原則。注意：①保證操作人員安全。當(dāng)用乙醚或三氯甲烷處死動(dòng)物時(shí)，從人的安全及實(shí)驗(yàn)條件來(lái)看還有不少問(wèn)題，盡量不要使用。②不能影響實(shí)驗(yàn)檢查的結(jié)果，而且處死方法應(yīng)易于操作。③盡可能縮短致死時(shí)間，即處死開(kāi)始到動(dòng)物意識(shí)消失的時(shí)間。④確認(rèn)動(dòng)物是否已被處死不能只看呼吸是否停止，還要看神經(jīng)反射、肌肉松弛等狀況。⑤盡量避免動(dòng)物產(chǎn)生驚恐、掙扎、叫喊，盡量減少動(dòng)物的疼痛、痛苦。⑥處死動(dòng)物是一件令人不愉快的事情，禁止無(wú)關(guān)人員參加。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物處死的方法很多，常用的無(wú)痛苦死亡的處死方法有頸椎脫臼法、過(guò)量麻醉法。此外，還有斷頭法、毒氣法、放血法、空氣栓塞法等。實(shí)驗(yàn)人員可根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、?dòng)物種類(lèi)等因素選擇不同的處死方法。1、頸椎脫臼法:所謂頸椎脫臼法，就是使動(dòng)物的頸椎脫臼，斷開(kāi)脊髓使動(dòng)物致死?？雌饋?lái)很殘酷，但能使動(dòng)物很快