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文檔簡介
植物組織養(yǎng)實驗室設一、驗室基本成(一)本實驗1.備室:進行一切與實驗有關的準備工作完成所使用的各種藥品的貯備、稱量、溶解、器皿洗滌、培養(yǎng)基配制與分裝、培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿的滅菌、培養(yǎng)材料的預處理等。要求:最好有25平方米左右。要求寬敞明亮、以便于放置多個實驗臺和相關設備,方便多人同時工作;同時要求通風條件好,便于氣體交換;實驗室地面應便于清潔,并應進行防滑處理。設備:準備室應具備實驗臺、藥品柜、水池、儀器、藥品、防塵櫥(放置培養(yǎng)容器)、冰箱、天平、蒸餾水器、酸度計及常用的培養(yǎng)基配制用玻璃儀器等。2、滌滅菌完成各種器具的洗滌、干燥、保存、培養(yǎng)基的滅菌等。要求:洗滌滅菌室根據(jù)工作量的大小決定其大小,一般面積控制在25方米。在實驗室的一側(cè)設置專用的洗滌水槽用來清洗玻璃器皿。中央實驗臺還應配置2個水槽,用于清洗小型玻璃器皿,地面應耐濕并排水良好。設備:水池、落水架、中央實驗臺、高壓滅菌鍋、超聲波清洗器、干燥滅菌器等。3緩沖間是進入無菌室前的一個緩沖場地減少人體從外界帶入的塵埃等污染物工作人員在此換上工作服、拖鞋,戴上口罩,才能進入無菌室和培養(yǎng)室。進入無菌操作室前在此更衣?lián)Q鞋,以減少進出時帶入接種室雜菌。要求:緩沖間需平方米,可建在準備室外或無菌操作室外,應保持清潔無菌;備有鞋架和衣帽掛鉤,并有清潔的實驗用拖鞋、已滅菌過的工作服;墻頂用1-2盞紫外燈定時照射,對衣物進行滅菌。緩沖間最好也安一盞紫外線滅菌燈,用以照射滅菌。緩沖間的門應該與接種室的門錯開兩個門也不要同時開啟,以保證無菌室不因開門和人的進出帶進雜菌。設備:盞紫外燈、水槽、實驗臺、鞋帽架、柜子、滅菌后的工作服、拖鞋、口罩。4無菌操作室接種室也叫接種室,主要用于植物材料的消毒、接種、培養(yǎng)物的轉(zhuǎn)移、試管苗的繼代原生質(zhì)體的制備以及一切需要進行無菌操作的技術程序是植物離體培養(yǎng)研究或生產(chǎn)中最關鍵的一步。要求:接種室宜小不宜大,一般平方,其規(guī)模根據(jù)實驗需要和環(huán)境控制的難易程度而定要求封閉性好干爽安靜清潔明亮能較長時間保持無菌,因此不易設在容易受潮的地方地面、天花板及四壁盡可能密閉光滑,易于清潔和消毒;配置拉動門,以減少開關門時的空氣擾動;為便于消毒處理,地面及內(nèi)墻壁都應采用防水和耐腐蝕材料為了保持清潔,無菌室應防止空氣對流。接種室要求在適當位置吊裝1~2盞紫外線滅菌燈,用以照射滅菌。最好安裝一小型空調(diào),使室溫可控,這樣可使門窗緊閉,減少與外界空氣對流。一般新建實驗室的無菌室在使用之前應進行滅菌處理處理方法是甲醛和高錳酸鉀熏蒸并需定期滅菌處理,還可用紫外線照射1-2h/周,或每次使用前照射10-30min。設備:紫外燈、空調(diào)、解剖鏡、消毒器、酒精燈、接種器械(接種鑷子、剪刀、解剖刀接種針),實驗臺和擱架還有超凈工作臺和整套滅菌接種儀器、藥品等。5培養(yǎng)室對接種到培養(yǎng)瓶等器皿中的植物離體材料進行控制條件下的培養(yǎng)論是研究性實驗室還是生產(chǎn)性實驗材料進行培養(yǎng)的場所。要求:約需20-30平方米左右,培養(yǎng)室的大小可根據(jù)需要培養(yǎng)架的大小、數(shù)目、及其他附屬設備而定,其設計以充分利用空間和節(jié)省能源為原則基本要求是能夠控制光照和溫度并保持相對的無菌環(huán)境,因此,培養(yǎng)室應保持清潔和適度干燥為滿足植物培養(yǎng)材料生長對氣體的需要還應安裝排風窗和換氣扇等培養(yǎng)室的換氣裝置為節(jié)省能源和空間,應配置適宜的培養(yǎng)架,并安裝日光燈照明。研究用實驗室通??筛鶕?jù)光照時間設置成長日照日照短日照培養(yǎng)室,也可以根據(jù)溫度設置成高溫和低溫培養(yǎng)室每一個培養(yǎng)室的空間不宜過大便于對條件的均勻控制進行精細培養(yǎng)類型如細胞培養(yǎng)和原生質(zhì)體培養(yǎng)可采用光照培養(yǎng)箱或人工氣候箱代替培養(yǎng)室。為了控制培養(yǎng)室的溫度和光照時間及其強度培養(yǎng)室的房間不要窗戶但應當留一個通氣窗,并安上排氣扇。室內(nèi)溫度由空調(diào)控制,光照由日光燈控制。天花板和內(nèi)墻最好用塑料鋼板裝修地面用水磨石或瓷磚鋪設,一般要分兩間,一為光照培養(yǎng)室,一為暗培養(yǎng)室。培養(yǎng)室外應有一預備間或走廊。培養(yǎng)材料放在培養(yǎng)架上培養(yǎng)培養(yǎng)架大多由金屬制成,一般設層最低一層離地高約lOcm,其他每層間30cm左右,培養(yǎng)架即高1.7m左右。培養(yǎng)架長度都是根據(jù)日光燈的長度而設計如采用日光燈則長I.3m,30W的長,寬度一般為60cm。日光燈一般用40W,固定在培養(yǎng)架的側(cè)面或擱板的下面,每層有兩支日光燈,距離在20cm,光照強度為。培養(yǎng)室最重要的因子是溫度,一般保持在20℃左右,具備產(chǎn)熱裝置,并安裝窗式或立式空調(diào)機。由于熱帶植物和寒帶植物等不同種類要求不同溫度,最好不同種類有不同的培養(yǎng)室。室內(nèi)濕度也要求恒定,相對濕度以保持在70%~80%為好,可安裝加濕器。控制光照時間可安裝定時開關鐘,一般需要每天光照,也有的要連續(xù)照明。短日照植物需要短日照條件長日照植物需要長日照條件?,F(xiàn)代組培實驗室大多設計為采用天然太陽光照作為主要能源這樣不但可以節(jié)省能源而且組培苗接受太陽光生長良好,馴化易成活。在陰雨天可用燈光作補充。設備:培養(yǎng)架(控溫控光控濕)、搖床、轉(zhuǎn)床、自動控時器、紫外燈、光照培養(yǎng)箱或人工氣候箱、生化培養(yǎng)箱邊臺實驗臺用于拍攝培養(yǎng)物生長狀況,除濕機、顯微鏡、溫濕度計、空調(diào)等。(二)助實驗室1細胞學實驗用于對培養(yǎng)物的觀察分析與培養(yǎng)物的計數(shù)培養(yǎng)材料進行細胞學鑒定和研究,由制片室和顯微觀察室組成。制片是獲取顯微觀察數(shù)據(jù)的基礎,配備有切片機、磨刀機、溫箱及樣品處理和切片染色的設備。應有通風櫥和廢液處理設施。顯微觀察室主要是顯微鏡和圖像拍攝、處理設備。要求:明亮、清潔、干燥、防止潮濕和灰塵污染。設備:雙筒實體顯微鏡、顯微鏡、倒置顯微鏡等。2生化分析實室培養(yǎng)細胞產(chǎn)物為主要目的的實驗室應建立相應的分析化驗實驗室隨時對培養(yǎng)物成分進行取樣檢查。大型次生代謝物生產(chǎn),還需有效分離實驗室。二、器設備和皿用具(一)規(guī)設備1、天平組織培養(yǎng)實驗室需要臺不精度的天平。感量的天平(分析天平)和感量0.0001g的天(電子天平用于稱量微量元素和一些較高精確度的實驗用品。感量和0.1g天平,用于大量元素母液配制和一些用量較大的藥品的稱量。2、冰箱各種維生素和激素類藥品以及培養(yǎng)基母液均需低溫報存些試驗還需植物材料進行低溫處理,一般普通冰箱即可。3、酸度計用于測定培養(yǎng)基及其它溶液的pH,一般要求可測定pH范圍1-14之間,精度0.01即可。4、離心機用于細胞、原生質(zhì)體等活細胞分離亦用于培養(yǎng)細胞的細胞器、核酸以及蛋白質(zhì)的分離提取。根據(jù)分離質(zhì)不同配置不同類型的離心機。細胞、原生質(zhì)體等活細胞的分離用低速離心機核酸、蛋白質(zhì)分離用高速冷凍離心機;規(guī)?;a(chǎn)次生產(chǎn)物,還需選擇大型離心分離系統(tǒng)。5、加熱器用于培養(yǎng)基的配制。研究性實驗室一般選用帶磁力攪拌功能的加熱器,規(guī)?;笮蛯嶒炇矣么蠊β始訜岷碗妱訑嚢柘到y(tǒng)。6、其它純水器、分裝設備(二)菌設備維持相對得無菌環(huán)境是組織培養(yǎng)實驗室的基本要求。1、高壓滅菌鍋用于培養(yǎng)基玻璃器皿以及其它可高溫滅菌用品的滅菌根據(jù)規(guī)模大小有手提式、立式、臥式等不同規(guī)格。2、干熱消毒柜用于金屬工具如鑷子剪刀剖刀以及玻璃器皿的滅菌一般選用℃左右的普通或遠紅外消毒柜。3、過濾滅菌器用于一些酶制劑激素以及某些維生素等不能高壓滅菌試劑的滅菌主要有真空抽濾式和注射器式。4、紫外燈方便經(jīng)濟的控制無菌環(huán)境的裝置,緩沖間、接種室和培養(yǎng)室必備。(三)菌操作設備1、接種箱是使用較早的最簡單的無菌裝置主體為玻璃箱罩、入口有袖罩,內(nèi)裝紫外燈和日光燈,使用時對無菌室要求較高。2、超凈工作臺其操作臺面是半開放區(qū),具方便操作舒適優(yōu)點,通過過濾的空氣連續(xù)不斷吹出,大于0.03um直徑的微生物很難在工作臺的操作空間停留,保持了較好的無菌環(huán)境。由于過濾器吸附微生物使用一段時間后過濾網(wǎng)易堵塞,因此應定期更換。(四)養(yǎng)設備培養(yǎng)設備是指根據(jù)需要所選用的不同規(guī)格和控制精度的用于植物細胞織和器官培養(yǎng)的設施和設備。1、培養(yǎng)架目前所有植物組織培養(yǎng)實驗室植株繁殖培養(yǎng)的通用設施本低計靈活、可充分利用培養(yǎng)空間,以操作方便、最大限度利用培養(yǎng)空間為原則。一般4-5層,層間間隔光照強度可根據(jù)培養(yǎng)植物特性來確定,一般每架上配備2-4盞日光燈。2、培養(yǎng)箱細胞培養(yǎng)、原生質(zhì)體培養(yǎng)等要求精確培養(yǎng)的實驗,可用光照培養(yǎng)箱CO2培養(yǎng)箱、濕度控制培養(yǎng)箱等培養(yǎng)。3、搖床進行液體培養(yǎng)時,為改善通氣狀況,可用振蕩培養(yǎng)箱或搖床。(五)他設備可安裝時間程序控制器溫度控制系統(tǒng)或空調(diào)實體顯微鏡倒置式生物顯微鏡及配套的攝影、錄像和圖像處理設備;電泳儀、萃取和層析設備、紫外分光光度計、高效液相色譜儀、氣相色譜儀、酶聯(lián)免疫測定系統(tǒng)。三、培容器與用具培養(yǎng)容器指盛有培養(yǎng)基并提供培養(yǎng)物生長空間的無菌裝置養(yǎng)用具指培養(yǎng)物接種封口所用的各種金屬或塑料制品,實驗室必備。(一)養(yǎng)容器包括各種規(guī)格的培養(yǎng)皿、三角瓶、試管、培養(yǎng)瓶。玻璃容器,一般用無色并不產(chǎn)生顏色折射的硼硅酸鹽玻璃材質(zhì)。塑料容器材質(zhì)輕、不易破碎、制作方便,廣泛使用。一般為聚丙烯、聚碳酸酯材料的培養(yǎng)容器。(二)屬用具1、鑷子植物組織解剖用小的尖頭鑷子分株轉(zhuǎn)移繁殖轉(zhuǎn)接用槍型鑷子16-22cm長。2、剪刀不銹鋼醫(yī)用彎頭剪,做取材和切段轉(zhuǎn)移繁殖,。3、解剖刀組織切段,多用短柄可換刀片的醫(yī)用不銹鋼解剖刀。4、其他用具接種鏟、接種針在花藥培養(yǎng)、花粉培養(yǎng)中有用。(三)料用具各種封口膜、蓋、塑料盤及其它實驗用具。項目中央實驗臺邊臺儲物柜通風櫥超凈工作臺高壓蒸汽滅菌鍋冰箱干熱滅菌箱組培架接種器械滅菌器空調(diào)超純水機搖床紫外燈管pH計電子分析天平天平酒精燈實驗室凳子離心機磁力攪拌器顯微鏡橡膠手套一次性口罩實驗服接種器材分光光度計培養(yǎng)皿500mL錐形瓶250mL50mL1000mL500mL
單價18001800800300035503900300025301200400220029008300531382000248151002480148398282050204800576.53.52518
數(shù)目571216331301101182101213210101010210030301055
價格900012600960030002130011700900025303600040022000290083004242764000744150120024
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