光學(xué)顯微鏡的構(gòu)造和使用

光學(xué)顯微鏡的構(gòu)造和使用一、目的要求1.熟悉光學(xué)顯微鏡各部分的結(jié)構(gòu)和用途，掌握顯微鏡維護的基本知識。2.初步掌握低倍鏡、高倍鏡和油鏡的使用方法。二、實驗用品和材料

1.字母裝片、動物血細胞裝片。2.顯微鏡、擦鏡紙、載玻片、抹布、香柏油、二甲苯。三、實驗內(nèi)容（一）顯微鏡的構(gòu)造

顯微鏡的種類很多，常用的是復(fù)式顯微鏡，由3個主要部分構(gòu)成：①機械部分；②光學(xué)部分；③照明部分。1．機械部分（1）鏡座：顯微鏡的基座，支撐著整個鏡體，起穩(wěn)固作用。（2）鏡柱：垂直于鏡座上的短柱，用以支持鏡臂。（3）傾斜關(guān)節(jié)：鏡柱與鏡臂間的活動關(guān)節(jié)，可使鏡臂傾斜，以利觀察。（4）鏡臂：鏡柱上方呈弓形結(jié)構(gòu)的部分。（5）調(diào)節(jié)器：鏡柱兩側(cè)兩對齒輪，較大的稱粗調(diào)節(jié)器，較小的稱細調(diào)節(jié)器，轉(zhuǎn)動時能使鏡筒上下移動用來調(diào)節(jié)焦距。（6）鏡筒：位于鏡臂前方，上端裝置目鏡，下端連接物鏡轉(zhuǎn)換器。（7）物鏡轉(zhuǎn)換器：又稱旋轉(zhuǎn)盤，位于鏡筒下端的一個可旋轉(zhuǎn)的凹形圓盤。一般裝有2~4個放大倍數(shù)不同的物鏡。（8）載物臺：鏡臂下面的平臺，用以承放玻片標本。其中央有一圓形的通光孔，光線可通過它由下向上反射。（9）標本推進器：位于鏡臺的后方或側(cè)面邊緣，連一可動弧形彈簧夾。其下方一側(cè)有兩個旋鈕，轉(zhuǎn)動旋鈕可調(diào)節(jié)推進器，使玻片標本前后或左右移動。2．照明部分（1）照明裝置：即光源，位于底座，開關(guān)在底座一側(cè)，旁邊有旋鈕可以調(diào)節(jié)燈光的明暗。（2）聚光器：在載物臺下方，作用是聚焦光線，增強視野的亮度，聚光器的一側(cè)有一個螺旋，旋動它可升降聚光鏡，上升時可增強反射光，反之可減弱。（3）光圈：聚光器下方的圓環(huán)結(jié)構(gòu)，為多片半圓形的薄金屬片疊合而成。圓環(huán)外緣有一小柄，撥動它能使金屬薄片分開或合攏，用以控制光線的強弱。3．光學(xué)部分（1）目鏡：裝在鏡筒的上端。放大倍數(shù)有5~25倍等數(shù)種，“5×”即標志5倍，“10×”即10倍。（2）

物鏡：嵌裝在旋轉(zhuǎn)盤上，一般分低倍鏡、高倍鏡和油鏡三種。其上刻有4×或10×為低倍鏡；40×或45×為高倍鏡；90×或100×油鏡。各物鏡的長短不同，一般是越短的放大率越低，越長的放大率越高。顯微鏡放大倍數(shù)=目鏡放大率×物鏡放大率。例如：所使用的目鏡是10×，物鏡是40×，則放大倍數(shù)為400倍。（二）顯微鏡的使用方法右手握住鏡臂，左手托鏡座，從鏡箱內(nèi)取出顯微鏡，放在身前稍左側(cè)的實驗桌上，鏡臂對著胸前，使鏡筒向前方，鏡座與桌邊距離約6.6cm，坐于適當高度的凳上操作。1.低倍鏡的使用（1）先向上轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)器，使載物臺下降，再轉(zhuǎn)動旋轉(zhuǎn)盤，使低倍鏡對準通光孔，即能聽到“咔”的固定響聲，同時手也感到有阻力，說明物鏡與鏡筒已成一直線。（2）對光：打開光圈，旋轉(zhuǎn)聚光器升降螺旋，使聚光器升到與鏡臺平齊。用左眼在目鏡上觀察（兩眼齊睜），同時調(diào)節(jié)光源亮度，使視野內(nèi)的光線適中。（3）玻片標本：將標本片有蓋玻片的一面向上，置于載物臺上，用彈簧夾固定住，然后移動玻片，使標本對準通光孔。（4）調(diào)焦：從側(cè)面觀察低倍鏡，轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)器，使載物臺上升，當?shù)捅剁R距標本約0.5cm時，從目鏡上觀察，慢慢向上轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)器，直至視野出現(xiàn)清晰物象為止。如物象不在視野中央，可稍移動玻片標本的位置，注意玻片移動方向與物象移動方向恰好相反。2.高倍鏡的使用：使用高倍鏡必須按照上述步驟，先在低倍鏡下找到物象后，再把放大的部分移到視野的中央，調(diào)節(jié)到最清晰的程度后，進行以下操作：（1）轉(zhuǎn)動物鏡轉(zhuǎn)換器，使高倍鏡與鏡筒成一直線，轉(zhuǎn)換高倍鏡時速度要慢，特別當心高倍鏡是否觸碰到玻片，如觸碰到玻片證明低倍鏡的焦距沒有調(diào)好，應(yīng)重新調(diào)節(jié)。（2）調(diào)焦：從目鏡觀察，這時物象往往不甚清楚，可用細調(diào)節(jié)器慢慢向上或向下轉(zhuǎn)動（切勿用粗調(diào)節(jié)器），轉(zhuǎn)動范圍不宜過大，一般只需向上或向下轉(zhuǎn)動一圈，就能清晰地看到物象。

需要更換玻片標本時，應(yīng)先轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)器使鏡筒上升之后，才能取下玻片標本。

3.油鏡的使用（1）使用油鏡時必須先在低倍鏡下看到一清晰物象后再換高倍鏡觀察，并使觀察的物象位于高倍鏡的視野中央。（2）轉(zhuǎn)動旋轉(zhuǎn)盤，使高倍鏡移向一側(cè)，在所要觀察的蓋玻片上，滴上一滴香柏油，從側(cè)面觀察，轉(zhuǎn)動物鏡轉(zhuǎn)換盤將油鏡鏡筒移至鏡筒下方，與鏡筒成一直線，使油鏡鏡頭與香柏油接觸，用眼觀察目鏡，慢慢上下轉(zhuǎn)動細調(diào)節(jié)器，直至視野中央出現(xiàn)清晰的物象為止。油鏡用完后須用擦鏡紙沾少許二甲苯將玻片標本及油鏡上的香柏油擦干凈。

4．低倍鏡和高倍鏡使用練習(xí)（1）依照上述低倍鏡使用方法，觀察文字或字母裝片，反復(fù)練習(xí)對光、調(diào)光、標本放置、調(diào)焦和玻片移動等。注意將玻片前后左右移動時，物象與玻片移動方向是否一致，玻片上的字母是正象還是反象？為什么？（2）觀察頭發(fā)交叉裝片，先用低倍鏡觀察，找到兩根毛發(fā)后，將毛發(fā)交叉點移到視野中央，然后換高倍鏡觀察，轉(zhuǎn)動細調(diào)節(jié)器觀察，判斷哪條毛發(fā)在上方，哪條在下方。5．油鏡的使用練習(xí)（1）取一張血涂片，先用低倍鏡再用高倍鏡觀察。（2）用油鏡觀察，并分辨紅細胞、白細胞和淋巴細胞。比較三種物鏡的放大倍數(shù)和分辨力。（3）觀察完畢，務(wù)必將油鏡按上述方法擦凈。繪圖生物實驗圖不同于一般美術(shù)圖，也不同于機械制圖。生物繪圖要求將標本的外形和內(nèi)部結(jié)構(gòu)準確地描述下來，然后詳加說明，要求形象自然，比例適當，線條清晰。

生物繪圖一般用點、線表示，輪廓用線條描繪，明暗程度、物質(zhì)含量多少等則用細點的疏密表示之，圖紙應(yīng)選擇能夠用橡皮拭擦的上好白紙，繪圖時先用中軟鉛筆繪出輪廓，然后用較硬的鉛筆繪出全圖，圖中各部分應(yīng)注字說明，圖與字之間用水平細線連接，圖的標題填在圖的下方，同時標明放大倍數(shù)。

（三）使用顯微鏡的注意事項

1．拿顯微鏡應(yīng)右手緊握鏡臂，左手托住鏡座，不能用一手隨便斜提，以防止目鏡從鏡筒滑出和反光鏡脫落。2．顯微鏡用完后，必須將目鏡、物鏡等用清潔的擦鏡紙或綢布輕輕揩擦，切勿口吹、手摸或用粗布揩擦，勿用乙醇及其他藥物，以免侵蝕鏡臺或鏡頭。3．使用顯微鏡應(yīng)先用低倍鏡調(diào)節(jié)光源，如觀察組織細胞或染色較淺的標本時，要適當關(guān)小光圈，使物象清晰。4．放置玻片標本時，應(yīng)將有蓋玻片的一面向上，用標本夾輕輕固定住玻片，再把要觀察的部分對準通光孔的正中央。如果玻片標本放反了，不僅不易找到物象，并且容易壓碎玻片，損傷物鏡。（三）使用顯微鏡的注意事項5．用雙筒微鏡觀察時，調(diào)整兩目鏡的距離以適合本人的瞳孔距離；用單筒微鏡觀察時要兩眼齊睜，用左眼從目鏡中尋找物象，仔細觀察，用右眼看紙繪圖。6.使用低倍鏡用粗調(diào)節(jié)器調(diào)節(jié)物距，使用高倍鏡必須用細調(diào)節(jié)器調(diào)節(jié)物距。粗、細調(diào)節(jié)器都不能做單方向的旋轉(zhuǎn)，防止壓碎玻片。7．不要隨意取出物鏡，以防灰塵落入。禁止任意拆卸任何零件，以防意外損失。8．顯微鏡用完后，應(yīng)轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)器使載物臺徐徐下降，取下玻片，并轉(zhuǎn)動旋轉(zhuǎn)盤，使物鏡離開聚光鏡，調(diào)暗光線，關(guān)閉電源。再裝入箱內(nèi)。四、作業(yè)與思考

1．作業(yè)（1）畫圖注明光學(xué)