紅外光譜儀的原理、使用和維護(hù)

概述基本原理紅外光譜儀試樣的處理、制備和操作注意事項(xiàng)紅外光譜在藥品檢驗(yàn)中應(yīng)用主要內(nèi)容

當(dāng)樣品受到頻率連續(xù)變化的紅外光照射時(shí)，分子吸收了某些特定頻率的輻射，并由其振動(dòng)或轉(zhuǎn)動(dòng)運(yùn)動(dòng)引起偶極矩的變化，產(chǎn)生分子振動(dòng)和轉(zhuǎn)動(dòng)能級(jí)從基態(tài)到激發(fā)態(tài)的躍遷,使相應(yīng)于這些吸收區(qū)域的透射光強(qiáng)度減弱。記錄紅外光的百分透射比與波數(shù)或波長(zhǎng)關(guān)系曲線，就得到紅外光譜。利用物質(zhì)對(duì)紅外光區(qū)電磁輻射的選擇性吸收的特性來(lái)進(jìn)行結(jié)構(gòu)分析、定性和定量的分析方法，稱紅外吸收光譜法。一、紅外光的區(qū)劃紅外線：波長(zhǎng)在0.76~500μm(1000μm)范圍內(nèi)的電磁波近紅外區(qū)（NIR）:0.76~2.5μm（760~2500nm）-OH和-NH倍頻吸收區(qū)中紅外區(qū)（MIR）:2.5~25μm（4000~400cm-1）振動(dòng)、伴隨轉(zhuǎn)動(dòng)光譜遠(yuǎn)紅外區(qū)（FIR）:25~500μm純轉(zhuǎn)動(dòng)光譜

絕大多數(shù)有機(jī)化合物的基頻吸收帶出現(xiàn)在MIR光區(qū)。基頻振動(dòng)是紅外光譜中吸收最強(qiáng)的振動(dòng)，最適于進(jìn)行紅外光譜的定性和定量分析。中紅外光譜儀最為成熟、簡(jiǎn)單，因此它是應(yīng)用極為廣泛的光譜區(qū)。通常,中紅外光譜法又簡(jiǎn)稱為紅外光譜法。紅外光譜是鑒別物質(zhì)和分析物質(zhì)化學(xué)結(jié)構(gòu)的有效手段，已被廣泛應(yīng)用于物質(zhì)的定性鑒別、物相分析和定量測(cè)定，并用于研究分子間和分子內(nèi)部的相互作用。概述基本原理紅外光譜儀試樣的處理、制備和操作注意事項(xiàng)紅外光譜在藥品檢驗(yàn)中應(yīng)用主要內(nèi)容紅外分光光度法

——研究物質(zhì)結(jié)構(gòu)與紅外光譜之間關(guān)系紅外光譜

——由吸收峰位置和吸收峰強(qiáng)度共同描述一、紅外吸收光譜的產(chǎn)生二、振動(dòng)形式三、吸收特征峰與相關(guān)峰四、吸收峰位置與強(qiáng)度紅外光譜主要由分子的振動(dòng)能級(jí)躍遷產(chǎn)生分子的振動(dòng)能級(jí)差0.051.0eV遠(yuǎn)大于轉(zhuǎn)動(dòng)能級(jí)差（0.00010.05eV）分子發(fā)生振動(dòng)能級(jí)躍遷必然同時(shí)伴隨轉(zhuǎn)動(dòng)能級(jí)躍遷雙原子分子A-B→近似看作諧振子兩原子間的伸縮振動(dòng)→近似看作簡(jiǎn)諧振動(dòng)只有當(dāng)紅外輻射頻率等于振動(dòng)量子數(shù)的差值與分子振動(dòng)頻率的乘積時(shí)，分子才能吸收紅外輻射，產(chǎn)生紅外吸收光譜。

一般將振動(dòng)形式分成兩類：伸縮振動(dòng)和變形振動(dòng)。（1）伸縮振動(dòng)原子沿鍵軸方向伸縮，鍵長(zhǎng)發(fā)生變化而鍵角不變的振動(dòng)稱為伸縮振動(dòng)，用符號(hào)表示。它又可以分為對(duì)稱伸縮振動(dòng)（s）和不對(duì)稱伸縮振動(dòng)（

as）。對(duì)同一基團(tuán)，不對(duì)稱伸縮振動(dòng)的頻率要稍高于對(duì)稱伸縮振動(dòng)。

（2）變形振動(dòng)（又稱彎曲振動(dòng)或變角振動(dòng)）基團(tuán)鍵角發(fā)生周期變化而鍵長(zhǎng)不變的振動(dòng)稱為變形振動(dòng)，用符號(hào)表示。變形振動(dòng)又分為面內(nèi)變形和面外變形振動(dòng)。面內(nèi)變形振動(dòng)又分為剪式（以表示）和平面搖擺振動(dòng)（以表示）。面外變形振動(dòng)又分為非平面搖擺（以表示）和扭曲振動(dòng)（以表示）。

分子吸收紅外輻射后，由基態(tài)振動(dòng)能級(jí)（=0）躍遷至第一振動(dòng)激發(fā)態(tài)（=1）時(shí)，所產(chǎn)生的吸收峰稱為基頻峰。在紅外吸收光譜上除基頻峰外，還有振動(dòng)能級(jí)由基態(tài)（=0）躍遷至第二激發(fā)態(tài)（=2）、第三激發(fā)態(tài)（=3），所產(chǎn)生的吸收峰稱為倍頻峰。在倍頻峰中，二倍頻峰還比較強(qiáng)。三倍頻峰以上，因躍遷幾率很小，一般都很弱，常常不能測(cè)到。倍頻峰、合頻峰和差頻峰統(tǒng)稱為泛頻峰。注：振動(dòng)自由度反映吸收峰數(shù)量并非每個(gè)振動(dòng)都產(chǎn)生基頻峰吸收峰數(shù)常少于振動(dòng)自由度數(shù)吸收峰的數(shù)量與振動(dòng)的自由度有關(guān)。振動(dòng)的自由度指分子獨(dú)立的振動(dòng)數(shù)目，或基本的振動(dòng)數(shù)目。紅外光譜的峰位、峰數(shù)與峰強(qiáng)（1）峰位

化學(xué)鍵的力常數(shù)K越大(化學(xué)鍵鍵強(qiáng)越強(qiáng))，原子折合質(zhì)量越小，鍵的振動(dòng)頻率越大，吸收峰將出現(xiàn)在高波數(shù)區(qū)（短波長(zhǎng)區(qū)）；反之，出現(xiàn)在低波數(shù)區(qū)（高波長(zhǎng)區(qū)）。與氫原子相連的化學(xué)鍵的折合質(zhì)量都小，紅外吸收在高波數(shù)區(qū)。～3000cm-1彎曲振動(dòng)比伸縮振動(dòng)容易

C-H：伸縮振動(dòng)吸收位于～3000cm-1

彎曲振動(dòng)吸收位于～1340cm-1例水分子（非對(duì)稱分子）（2）峰數(shù)

與分子自由度有關(guān)。無(wú)瞬間偶極距變化時(shí)，無(wú)紅外吸收。不同的分子振動(dòng)方式在不同的峰位會(huì)表現(xiàn)出不同的吸收峰

（3）峰強(qiáng)紅外吸收譜帶的吸收峰強(qiáng)度取決于分子振動(dòng)時(shí)偶極矩的變化，而偶極矩與分子結(jié)構(gòu)的對(duì)稱性有關(guān)。振動(dòng)的對(duì)稱性越高，振動(dòng)中分子偶極矩變化越小，譜帶強(qiáng)度也就越弱。一般地，極性較強(qiáng)的基團(tuán)（如C=0，C-X等）振動(dòng)，吸收強(qiáng)度較大；極性較弱的基團(tuán)（如C=C、C-C、N=N等）振動(dòng)，吸收較弱。紅外光譜的吸收強(qiáng)度一般定性地用很強(qiáng)（vs）、強(qiáng)（s）、中（m）、弱（w）和很弱（vw）等表示。物質(zhì)的紅外光譜是其分子結(jié)構(gòu)的反映，譜圖中的吸收峰與分子中各基團(tuán)的振動(dòng)形式相對(duì)應(yīng)。

實(shí)驗(yàn)表明，組成分子的各種基團(tuán)，如O-H、N-H、C-H、C=C、C=O和CC等，都有自己的特定的紅外吸收區(qū)域，分子的其它部分對(duì)其吸收位置影響較小。

通常把這種能代表及存在、并有較高強(qiáng)度的吸收譜帶稱為基團(tuán)頻率，其所在的位置一般又稱為特征吸收峰。

紅外光譜區(qū)可分成4000cm-1

~1300cm-1、

1300cm-1

~600cm-1兩個(gè)區(qū)域。

4000cm-1~1300cm-1之間，稱為基團(tuán)頻率區(qū)、官能團(tuán)區(qū)或特征區(qū)。區(qū)內(nèi)的峰是由伸縮振動(dòng)產(chǎn)生的吸收帶，比較稀疏，容易辨認(rèn)，常用于鑒定官能團(tuán)（最有分析價(jià)值）。

1300cm-1~600cm-1區(qū)域內(nèi)，除單鍵的伸縮振動(dòng)外，還有因變形振動(dòng)產(chǎn)生的譜帶。這種振動(dòng)與整個(gè)分子的結(jié)構(gòu)有關(guān)。當(dāng)分子結(jié)構(gòu)稍有不同時(shí)，該區(qū)的吸收就有細(xì)微的差異，并顯示出分子特征。這種情況就像人的指紋一樣，因此稱為指紋區(qū)。（作為化合物存在某種基團(tuán)的旁證）┕━━━━━━━━━━━━┙4000～2500cm-1

端H結(jié)構(gòu)┕━━━┙2500～2000cm-1

叁鍵、連雙鍵┕━━━━━━┙1300～400cm-1

單鍵┕━━┙1900～1500cm-1

雙鍵特征區(qū)指紋區(qū)（1）4000~2500cm-1X-H伸縮振動(dòng)區(qū)（X可以是O、C或S等原子）

O-H基的伸縮振動(dòng)出現(xiàn)在3650~3200cm-1范圍內(nèi)，它可以作為判斷有無(wú)醇類、酚類和有機(jī)酸類的重要依據(jù)。羥基化合物產(chǎn)生締合現(xiàn)象，O-H基的伸縮振動(dòng)吸收峰向低波數(shù)方向位移，在3400~3200cm-1出現(xiàn)一個(gè)寬而強(qiáng)的吸收峰。胺和酰胺的N-H伸縮振動(dòng)也出現(xiàn)在3500~3100cm-1，因此，可能會(huì)對(duì)O-H伸縮振動(dòng)有干擾。

C-H的伸縮振動(dòng)可分為飽和和不飽和的兩種。飽和的C-H伸縮振動(dòng)出現(xiàn)在3000cm-1以下，約3000~2800cm-1，取代基對(duì)它們影響很小；不飽和的C-H伸縮振動(dòng)出現(xiàn)在3000cm-1以上，以此來(lái)判別化合物中是否含有不飽和的C-H鍵；苯環(huán)的C-H鍵伸縮振動(dòng)出現(xiàn)在3030cm-1附近，它的特征是強(qiáng)度比飽和的C-H漿稍弱，但譜帶比較尖銳。

（2）2500~2000

為叁鍵和累積雙鍵區(qū)

主要包括-CC、-CN等叁鍵的伸縮振動(dòng)，以及-C=C=C、-C=C=O等累積雙鍵的不對(duì)稱性伸縮振動(dòng)。對(duì)于炔烴類化合物，可以分成R-CCH和R-CC-R兩種類型，R-CCH的伸縮振動(dòng)出現(xiàn)在2100~2140cm-1附近；R-CC-R出現(xiàn)在2190~2260cm-1附近；

-CN基的伸縮振動(dòng)在非共軛的情況下出現(xiàn)在2240~2260cm-1附近，當(dāng)與不飽和鍵或芳香核共軛時(shí)，該峰位移到2220~2230cm-1附近。（3）1900~1500cm-1為雙鍵伸縮振動(dòng)區(qū)該區(qū)域主要包括三種伸縮振動(dòng)：

①C=O伸縮振動(dòng)：出現(xiàn)在1900~1650cm-1，是紅外光譜中很特征的且往往是最強(qiáng)的吸收，以此很容易判斷酮類、醛類、酸類、酯類以及酸酐等有機(jī)化合物。酸酐的羰基吸收帶由于振動(dòng)耦合而呈現(xiàn)雙峰。

②C=C伸縮振動(dòng)：烯烴的C=C伸縮振動(dòng)出現(xiàn)在1680~1620

cm-1，一般很弱；單核芳烴的C=C伸縮振動(dòng)出現(xiàn)在1600cm-1和1500cm-1附近，有兩個(gè)峰，這是芳環(huán)的骨架結(jié)構(gòu)，用于確認(rèn)有無(wú)芳核的存在。

③苯的衍生物的泛頻譜帶：出現(xiàn)在2000~1650cm-1范圍，是C-H面外和C=C面內(nèi)變形振動(dòng)的泛頻吸收，雖然強(qiáng)度很弱，但它們的吸收面貌在表征芳核取代類型上是有用的。1、1300~900cm-1區(qū)域

C-O、C-N、C-F、C-P、C-S、P-O、Si-O等單鍵的伸縮振動(dòng)和C=S、S=O、P=O等雙鍵的伸縮振動(dòng)吸收。其中1375cm-1的譜帶為甲基的C-H對(duì)稱彎曲振動(dòng)，對(duì)識(shí)別甲基十分有用，C-O的伸縮振動(dòng)在1300~1000cm-1，是該區(qū)域最強(qiáng)的峰，也較易識(shí)別。

2、900~650cm-1區(qū)域某些吸收峰可用來(lái)確認(rèn)化合物的順反構(gòu)型。烯烴的=C-H面外變形振動(dòng)出現(xiàn)的位置，很大程度上決定于雙鍵的取代情況。對(duì)于RCH=CH2結(jié)構(gòu)，在990cm-1和910cm-1出現(xiàn)兩個(gè)強(qiáng)峰；對(duì)于RC=CRH結(jié)構(gòu)，其順、反構(gòu)型分別在690cm-1和970cm-1出現(xiàn)吸收峰，可以共同配合確定苯環(huán)的取代類型。

指紋區(qū)出現(xiàn)的頻率有基團(tuán)頻率和指紋頻率。指紋頻率不是某個(gè)基團(tuán)的振動(dòng)頻率，而是整個(gè)分子或分子的一部分振動(dòng)產(chǎn)生的。分子結(jié)構(gòu)的微小變化會(huì)引起指紋頻率的變化。指紋頻率沒有特征性，但對(duì)特定分子是特征的。不能企圖將全部指紋頻率進(jìn)行指認(rèn)。概述基本原理紅外光譜儀試樣的處理、制備和操作注意事項(xiàng)紅外光譜在藥品檢驗(yàn)中應(yīng)用主要內(nèi)容Bruker公司：BrukerTensor27、Tensor37、Vertex70型傅里葉變換型中/近紅外分光光度計(jì)Bio-Rad公司：FTS-135型、FTS-165型、FIS-7R型傅里葉變換紅外分光光度計(jì)PE公司：PE-Two型、Frontier型紅外分光光度計(jì)Nicolet公司：IS系列、NEXUS型紅外分光光度計(jì)島津公司：IRPrestige-21型、FT\IR8101型、FTIR-8201PC型傅里葉變換紅外分光光度計(jì)天光TJ270-30型紅外分光光度計(jì)（國(guó)產(chǎn)）紅外分光光度計(jì)分為色散型和付里葉變換型兩種。色散型主要由光源、單色器（通常為光柵）、樣品室、檢測(cè)器、記錄儀、控制和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)組成。

目前主要有Fourier變換紅外光譜儀（FTIR）

Fourier變換紅外光譜儀沒有色散元件，主要由光源（硅碳棒、高壓汞燈）、Michelson干涉儀、檢測(cè)器、計(jì)算機(jī)和記錄儀組成。核心部分為Michelson干涉儀，它將光源來(lái)的信號(hào)以干涉圖的形式送往計(jì)算機(jī)進(jìn)行Fourier變換的數(shù)學(xué)處理，最后將干涉圖還原成光譜圖。它與色散型紅外光度計(jì)的主要區(qū)別在于干涉儀和電子計(jì)算機(jī)兩部分。IR光源干涉儀樣品檢測(cè)器光頻率和吸收紅外光干涉光干涉圖FT變換單通道圖強(qiáng)度變化透過圖T()=S()/R()FT變換T()=S()/R()紅外吸收光譜的特點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)：（1）特征性高。幾乎很少有兩個(gè)不同的化合物具有相同的紅外光譜。（2）無(wú)機(jī)、有機(jī)、高分子等氣體、液體、固體均可測(cè)定。（3）所需樣品少，幾毫克到幾微克。（4）操作方便、速度快、重復(fù)性好。（5）已有的標(biāo)準(zhǔn)圖譜較多，便于查閱。缺點(diǎn)：（1）靈敏度和精度不夠高，含量小于1％難于測(cè)出。（2）多用于定性分析，定量分析的準(zhǔn)確度和靈敏度低于可見和紫外吸收光譜。（3）有些物質(zhì)不能產(chǎn)生紅外吸收光譜。例如原子（Ar、Ne、He等），單原子離子（K+、Na+、Ca2+等），同質(zhì)雙原子分子（H2、O2、N2等）。（4）有些吸收峰的理論解釋難度大。應(yīng)對(duì)儀器定期進(jìn)行校正檢定色散型應(yīng)符合JJG681-90有關(guān)規(guī)定付里葉變換型應(yīng)參照藥典和JJG681-90有關(guān)規(guī)定主要指標(biāo):波數(shù)準(zhǔn)確度、波數(shù)重現(xiàn)性、分辨率，另外有100%線平直度,雜散光,透光率準(zhǔn)確度等用聚苯乙烯薄膜（50μm）對(duì)儀器進(jìn)行波長(zhǎng)準(zhǔn)確度、重現(xiàn)性和分辨率校正檢定波數(shù)準(zhǔn)確度常用聚苯乙烯膜光譜特定吸收峰:3027.12850.7

1944.01801.61601.41583.11154.31028.0906.7cm-1付里葉變換型波長(zhǎng)準(zhǔn)確度3000cm-1為±5cm-11000cm-1為±1cm-1色散型波長(zhǎng)準(zhǔn)確度3000cm-1為±8cm-11000cm-1為±4cm-1波數(shù)重現(xiàn)性用聚苯乙烯膜測(cè)定3～5次,應(yīng)符合規(guī)定分辨率試驗(yàn)3110～2870cm-1范圍內(nèi)有7個(gè)峰;分辨率不低于2cm-1概述基本原理紅外光譜儀試樣的處理、制備和操作注意事項(xiàng)紅外光譜在藥品檢驗(yàn)中應(yīng)用主要內(nèi)容

要獲得一張高質(zhì)量紅外光譜圖，除了儀器本身的因素外，還必須有良好的紅外光譜測(cè)定技術(shù)。紅外光譜測(cè)定技術(shù)分為兩類。一類是指檢測(cè)方法如透射、衰減全反射、漫反射、光聲光譜及紅外發(fā)射等。通常測(cè)定的都是透射光譜一類是指制樣技術(shù)采用的制樣技術(shù)主要有壓片法、糊法、膜法、溶液法、衰減全反射和氣體吸收池法等。紅外光譜的試樣可以是液體、固體或氣體，一般應(yīng)要求：（1）單一組份的純物質(zhì)，純度應(yīng)>98%或符合藥典規(guī)格（多組分抗生素不列入紅外光譜鑒別）（2）試樣應(yīng)適當(dāng)干燥，不應(yīng)含游離水。水本身有紅外吸收，會(huì)嚴(yán)重干擾樣品譜，而且會(huì)侵蝕吸收池的鹽窗。（3）試樣的濃度和測(cè)試厚度應(yīng)選擇適當(dāng)，以使光譜圖中的大多數(shù)吸收峰的透射比處于10%~80%范圍內(nèi)。環(huán)境條件：紅外實(shí)驗(yàn)室的室溫應(yīng)控制在15～30℃，相對(duì)濕度應(yīng)小于65%，適當(dāng)通風(fēng)換氣，以避免積聚過量的二氧化碳和有機(jī)溶劑蒸汽。壓片模具及液體吸收池等紅外附件，使用完后應(yīng)及時(shí)擦拭干凈，必要時(shí)清洗，保存在干燥器中，以免銹蝕。任何氣態(tài)、液態(tài)、固態(tài)樣品均可進(jìn)行紅外光譜測(cè)定，這是其它儀器分析方法難以做到的。紅外光譜樣品制樣方法氣體－用氣體吸收池，測(cè)氣相光譜，低溫下測(cè)其液相光譜液體液膜法—適用一般液體樣品液池法—用密封液體池裝樣，適用于低沸點(diǎn)液體樣品涂膜法—流動(dòng)性差的粘液樣品氣相法—蒸氣壓高或沸點(diǎn)低的液樣,氣化后灌入氣體池測(cè)定溶液法—溶解后用液池法測(cè)定ATR法（衰減全發(fā)射法）—適用一般液體樣品固體壓片法—適用不會(huì)潮解、分解的全部固樣糊狀法—加入液態(tài)介質(zhì)，磨細(xì)后調(diào)成糊狀溶液法—溶解后用液池法測(cè)定熔融法—加熱熔化呈液態(tài)測(cè)定其他多種方法，如：漫反射法、光聲光譜法、顯微鏡反射法等1.壓片法

將1~2mg試樣與200mg純KBr研細(xì)均勻，置于模具中，用（5~10）107Pa壓力在油壓機(jī)上壓成透明薄片，即可用于測(cè)定。油壓機(jī)模具固體樣品稀釋劑有溴化鉀、氯化鈉、碘化銫、高壓聚乙烯，最常用的是溴化鉀。采用壓片法時(shí)，以溴化鉀最常用。若供試品為鹽酸鹽，可比較氯化鉀壓片和溴化鉀壓片法的光譜，若二者沒有區(qū)別，則使用溴化鉀。供試品研磨應(yīng)適度，通常以粒度2～5μm為宜。粒度過大而引起強(qiáng)烈散射，使譜圖基線發(fā)生漂移，吸收譜帶畸變。過度研磨有時(shí)會(huì)導(dǎo)致晶格結(jié)構(gòu)的破壞或晶型的轉(zhuǎn)化。固體樣品溴化鉀必須干燥溴化鉀研磨很細(xì)，樣品與KBr粉混合均勻（操作應(yīng)在紅外干操箱內(nèi)進(jìn)行）?？刂其寤浥c樣品的比例。溴化鉀對(duì)鋼制模具表面的腐蝕性很大，模具用過后必須及時(shí)清洗干凈。此法適用于可以研細(xì)的樣品，但對(duì)于不穩(wěn)定的化合物，如發(fā)生分解、異構(gòu)化、升華等變化的化合物不宜使用壓片法，和稀釋劑起反應(yīng)或進(jìn)行離子交換的樣品不能使用壓片法。壓片法注意事項(xiàng)固體樣品主要用于高分子材料，可通過加熱或壓延的方法制備成薄膜。也可將試樣溶解在低沸點(diǎn)的易揮發(fā)溶劑中，涂在鹽片上，待溶劑揮發(fā)后成膜測(cè)定。薄膜法要求膜的厚度為10-30μm，且厚薄均勻。薄膜樣品會(huì)由于薄膜兩表面的反射而產(chǎn)生干涉條紋，與樣品吸收譜疊加而造成定量分析的誤差。2.薄膜法固體樣品常用的成膜法有4種：熔融成膜適用熔點(diǎn)低、熔融時(shí)不分解、無(wú)化學(xué)變化的樣品。熱壓成膜適用熱塑性聚合物，將樣品在膜具中加熱至軟化點(diǎn)以上壓成薄膜。溶液成膜適用可溶性聚合物，將樣品溶于適當(dāng)?shù)娜軇┲?，滴在玻璃板上使溶劑揮發(fā)得到薄膜。液膜法適用液體樣品。兩基片之間的薄膜一般將幾滴樣品滴在兩片薄透明窗片之間（如三明治），再固定在樣品架上。切記使用KBr時(shí)樣品不得有水。固體樣品熱壓成膜法1)熱壓裝置由液壓膜機(jī)、加熱模具及溫控裝置組成。2)制樣方法

將樣品放在兩片鋁箔間，再放在模具芯中，把上模塊放上后將模具放在壓片機(jī)上，升溫到選定的溫度，保持1min左右，即可緩慢加壓，壓力一般控制1000~3000kg/cm2。加熱控制的溫度及加壓時(shí)間，應(yīng)以不會(huì)發(fā)生熱分解和其他化學(xué)變化為依據(jù)。加壓時(shí)間約為1min。然后從壓片機(jī)上取下模具（注意戴上保溫手套以免燙傷）。冷至室溫后，脫模取出樣品片。溶液成膜法注意事項(xiàng)要得到均勻和純凈的薄膜是不容易的，其關(guān)鍵在于溶劑的選擇和配置的樣品濃度。

選擇溶劑的原則：避免使用沸點(diǎn)高、極性強(qiáng)的溶劑，應(yīng)選擇較低沸點(diǎn)、在低溫下可從薄膜中揮發(fā)、清除的溶劑。盡量不用對(duì)人體有害的溶劑，否則對(duì)操作者的健康和環(huán)境都不利。選擇的溶劑不能與樣品產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng)或其他相互作用，否則會(huì)引起聚集態(tài)結(jié)構(gòu)的變化。（1）根據(jù)實(shí)驗(yàn)所需的透明范圍、溶液性質(zhì)等選擇液體池的窗片種類，最常用的是KBr、NaCl鹽片，如果樣品是水溶液則可選用CaF2、BaF2、KRS-5等水不溶性窗片。（2）避免水汽侵蝕易溶于水、吸濕性強(qiáng)的窗片。（3）液體池要及時(shí)清洗干凈，不使其被污染。（4）盡可能選用極性小的溶劑，避免極性溶質(zhì)與極性溶劑間會(huì)產(chǎn)生“溶劑效應(yīng)”，使譜圖失真。（5）水溶液樣品應(yīng)先設(shè)法脫除全部水分或部分脫水濃縮，然后進(jìn)行紅外測(cè)定。液膜法注意事項(xiàng)3.石蠟糊法：將樣品研磨細(xì)后與液體石蠟或全氟代烴混合，調(diào)成糊狀，夾在鹽片間分析。4.溶液法：常用的紅外光譜溶劑應(yīng)在所測(cè)光譜區(qū)內(nèi)本身沒有強(qiáng)烈的吸收，不侵蝕鹽窗，對(duì)試樣沒有強(qiáng)烈的溶劑化效應(yīng)等。5.顯微切片：有一定強(qiáng)度的高聚物6.對(duì)于無(wú)機(jī)固體樣品還可以通過測(cè)定紅外反射光譜的方式獲得紅外特征吸收信息。固體樣品氣體池法

氣態(tài)樣品可在玻璃氣槽內(nèi)進(jìn)行測(cè)定，它的兩端粘有紅外透光的NaCl或KBr窗片密封。先將氣槽抽真空，再將試樣注入。將氣體池放在氣體池架上即可，要特別注意防止鹽片受潮。氣體樣品氣體樣品采用氣體池，直接測(cè)試；濃度高的樣品，采用光程短的氣體池，或者減小壓力，或者用氮?dú)饣蚝膺M(jìn)行稀釋；對(duì)于濃度低至PPM或PPB量級(jí)的樣品，采用光程長(zhǎng)的氣體池以及更高靈敏度的MCT檢測(cè)器。將氣體樣品注入一個(gè)（抽真空的）氣體池進(jìn)行分析。測(cè)量得到峰的強(qiáng)度受氣體池的光程、氣體的壓力以及摩爾吸收系數(shù)的影響。氣體樣品會(huì)由于吸收池總壓不同而引起吸收譜帶強(qiáng)度變化。氣體樣品（1）液體池法沸點(diǎn)較低，揮發(fā)性較大的試樣，可注入封閉液體池中，液層厚度一般為0.01~1mm。（2）液膜法沸點(diǎn)較高的試樣，直接滴在兩片鹽片之間，形成液膜。對(duì)于一些吸收很強(qiáng)的液體，當(dāng)用調(diào)整厚度仍得不到滿意的譜圖時(shí)，可用適當(dāng)?shù)娜軇┡涑上∪芤哼M(jìn)行測(cè)定。常用的紅外光譜溶劑應(yīng)在所測(cè)光譜區(qū)內(nèi)沒有強(qiáng)烈的吸收，不侵蝕鹽窗，有CCl4

、CCl3、CS2、C6H14、環(huán)己烷等。液體樣品譜圖質(zhì)量判斷標(biāo)準(zhǔn)一般來(lái)說，譜圖中最大吸收峰在10%T左右，基線在80%T左右，且基線保持平直，沒有雜峰的干擾，這樣的圖就是好圖。在某些情況下，即使沒有得到很好紅外譜圖，OPUS軟件也具有很好的譜圖處理功能。紅外譜圖質(zhì)量的判斷譜圖信噪比太差樣品量大，有干涉條紋壓片太薄基線傾斜背景不好概述基本原理紅外光譜儀試樣的處理、制備和操作注意事項(xiàng)紅外光譜在藥品檢驗(yàn)中應(yīng)用主要內(nèi)容（1）定性鑒別：

對(duì)于已有結(jié)構(gòu)，判斷峰的歸屬是否與結(jié)構(gòu)相一致，用簡(jiǎn)單的方法與對(duì)照光譜或?qū)φ掌饭庾V比較（譜帶的有與無(wú)、各譜帶的相對(duì)強(qiáng)弱）。若供試品的光譜圖與對(duì)照光譜圖一致，通常可判定兩化合物為同一物質(zhì)（只有少數(shù)例外，如有些光學(xué)異構(gòu)體或大分子同系物等）；若兩光譜不同，則可判定兩化合物不同。（2）結(jié)構(gòu)確證：

對(duì)于未知結(jié)構(gòu)，判斷峰的歸屬是否為某官能團(tuán)。特點(diǎn)：1、基本與對(duì)照光譜比較，少數(shù)與對(duì)照品光譜比較；2、多為原料鑒別，制劑很少（在考慮擴(kuò)大鑒別方法

專屬性不強(qiáng)的品種）；3、譜段：4000～400cm-1；4、制樣方法：壓片法、糊法、溶液法、液膜法、薄膜法、ATR法、氣體池法；5、光譜集：收有藥品、輔料、對(duì)照品等，不包括藥品包裝材料6、無(wú)效晶型的控制：如甲苯咪唑。1995年第一卷，收載了藥品紅外光譜圖共685幅，由光柵型紅外分光光度計(jì)繪制2000年第二卷，收載藥品紅外光譜圖208幅，并全部改由傅立葉紅外光譜儀繪制2005年第三卷，收載藥品紅外光譜圖210幅，其中172個(gè)為新增品種，38個(gè)老品種重新繪制了圖譜2010年第四卷，共收載藥品紅外光譜圖124幅紅外光譜集是中華人民共和國(guó)藥典的配套叢書，是藥品質(zhì)量檢驗(yàn)的法定依據(jù)之一。（1）凡《中華人民共和國(guó)藥典》、國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)已收載用紅外光譜法作為鑒別的原料藥，本光譜集中收載的相應(yīng)光譜圖供比對(duì)用。對(duì)于制劑的紅外鑒別，由于可能存在輔料干擾，本光譜集收載的光譜圖僅作參考，參照原料藥的標(biāo)準(zhǔn)光譜在指紋區(qū)選擇3～5個(gè)輔料無(wú)干擾的待測(cè)成分的特征吸收峰，列出他們的波數(shù)位置作為鑒別的依據(jù)。（2）固體藥品在測(cè)定時(shí)，可能由于晶型的影響，致使錄制的光譜圖與本光譜圖集所收載的光譜圖不一致，如無(wú)晶型要求，應(yīng)按本光譜集中個(gè)相應(yīng)光譜圖中備注的方法或該品種正文中規(guī)定的方法進(jìn)行預(yù)處理后，再進(jìn)行錄制。

馬來(lái)酸依索拉定---不同生產(chǎn)廠結(jié)晶溶劑不同，紅外光譜有差異，甲醇重結(jié)晶后，各生產(chǎn)廠紅外光譜一致

固體藥品在測(cè)定時(shí)，如有晶型要求，應(yīng)用IR對(duì)有效晶型進(jìn)行鑒別，并對(duì)無(wú)效晶型進(jìn)行控制檢查。一般不采用研磨壓片法，多采用糊法，但要對(duì)礦油（石蠟油）峰與樣品峰甑別。氯沙坦鉀---糊法(如石蠟油峰明顯,應(yīng)增加樣品量或與對(duì)照品一并測(cè)定)（3）由于圖譜的質(zhì)量或供試品的多晶型等原因，有些化合物的光譜圖作了重新繪制，并收入后續(xù)卷中。若同一化合物的光譜圖在不同卷中均有收載，用于鑒別時(shí)以后卷光譜圖作為比對(duì)依據(jù)，前卷光譜圖僅作為參考。

二氟尼柳----乙醇重結(jié)晶藥物的多晶型——不同重結(jié)晶溶劑產(chǎn)生不同晶型多晶現(xiàn)象——藥物的同質(zhì)異晶。不同晶型對(duì)藥物的影響因素：溶解度、溶出速率、熔點(diǎn)、密度、硬度、外觀以及生物有效性、藥物的穩(wěn)定性、生物利用度及療效的發(fā)揮。藥物多晶型現(xiàn)象的研究已經(jīng)成為日常控制藥品生產(chǎn)及新藥劑型確定前設(shè)計(jì)所不可缺少的重要組成部分。了解藥物的晶型及其性質(zhì)后，將有助于保證藥物制劑的物理化學(xué)穩(wěn)定性，提高藥物的生物利用度，減少毒性，增進(jìn)治療效果，保證每批生產(chǎn)的藥物間的等效性，改善藥物粉末的壓片性能，防止在制備或儲(chǔ)藏中產(chǎn)生晶型轉(zhuǎn)變而影響質(zhì)量。同時(shí)，可以通過一定的轉(zhuǎn)晶手段，尋求藥物新的晶型，新的療效。加熱：達(dá)到某一特定的轉(zhuǎn)變溫度，可能發(fā)生晶型轉(zhuǎn)變。如聯(lián)苯雙酯。熔融物冷卻時(shí)，可能析出多晶型物，其類型因冷卻方式及速度而異。如無(wú)味氯霉素，無(wú)效晶型A經(jīng)過熔融和快速冷卻，可轉(zhuǎn)變?yōu)橛行У腂晶型。研磨對(duì)晶型轉(zhuǎn)變有一定的影響。如頭孢菌素、氯霉素棕櫚酸酯及消炎痛在研磨過程中均發(fā)生晶型轉(zhuǎn)變，并會(huì)加速甲氰咪胍的多晶型轉(zhuǎn)化?；前?5-甲氧嘧啶結(jié)晶Ⅱ型經(jīng)研磨，能轉(zhuǎn)變成Ⅲ型。不同的結(jié)晶條件采用溶劑法，通過改變藥物結(jié)晶時(shí)溶劑