第2章-一般血細(xì)胞學(xué)檢驗(yàn)

第二章一般血細(xì)胞學(xué)檢驗(yàn)?zāi)贤ù髮W(xué)第二附屬醫(yī)院檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)中心陸永輝1第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)主要內(nèi)容第一節(jié)

外周血液血細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)第二節(jié)

紅細(xì)胞檢驗(yàn)第三節(jié)白細(xì)胞檢驗(yàn)

2第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)外周血細(xì)胞由骨髓、淋巴器官造血產(chǎn)生，經(jīng)生長(zhǎng)發(fā)育成熟釋放入外周血紅細(xì)胞白細(xì)胞：中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞血小板3第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)外周血正常白細(xì)胞形態(tài)4第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)嗜酸細(xì)胞淋巴細(xì)胞單核細(xì)胞中性粒細(xì)胞血小板

嗜堿細(xì)胞外周血紅細(xì)胞、血小板形態(tài)5第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)血細(xì)胞生長(zhǎng)發(fā)育成熟過(guò)程1.造血干細(xì)胞2.造血祖細(xì)胞3.原始細(xì)胞4.幼稚細(xì)胞5.成熟細(xì)胞6第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)血細(xì)胞生長(zhǎng)發(fā)育成熟階段紅細(xì)胞：原始→早幼→中幼→晚幼→網(wǎng)織→成熟紅細(xì)胞白細(xì)胞--中性粒細(xì)胞：原始粒細(xì)胞→中性早幼?！杏琢！碛琢！鷹U狀核→分葉核細(xì)胞

--嗜酸、嗜堿粒細(xì)胞：原始粒細(xì)胞→嗜酸（堿）早幼?！杏琢！碛琢！人幔▔A）粒細(xì)胞

--淋巴細(xì)胞：原始淋巴細(xì)胞→幼稚淋巴細(xì)胞→淋巴細(xì)胞

--單核細(xì)胞：原始單核細(xì)胞→幼稚單核細(xì)胞→單核細(xì)胞血小板：由巨核細(xì)胞產(chǎn)生7第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)第一節(jié)外周血液血細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)一、血細(xì)胞涂片的制作和染色1.血涂片的制作手工涂片法自動(dòng)推片法8第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)良好血涂片的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)血膜距片端1/3處始，長(zhǎng)≥25mm，兩側(cè)邊距≥5mm，由厚到薄連續(xù)均勻涂開，始端平直，末端舌狀，邊緣光滑，厚薄適宜無(wú)畫線、裂隙、顆粒，頭、體、尾分清。9第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)2、血涂片的染色最經(jīng)典、最常用主要成分：堿性美蘭（亞甲藍(lán)）與酸性伊紅染色原理：物理吸附、化學(xué)親和與電荷作用的共同結(jié)果。各種細(xì)胞成分的化學(xué)性質(zhì)不同，對(duì)染料的親和力各異，呈現(xiàn)粉紅、紫色、藍(lán)色、紫紅等不同色彩。瑞氏染色10第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)瑞氏染液氯化亞甲藍(lán)（MCl）與伊紅化鈉（NaE）的甲醇溶液甲醇是Wright染料良好溶劑，固定細(xì)胞形態(tài)，將蛋白質(zhì)沉淀為顆粒網(wǎng)狀增加接觸面提高染料吸附解離成M+（亞甲藍(lán)）和E-（伊紅）磷酸鹽緩沖液（pH6.4-6.8）11第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)瑞氏染色步驟1.血涂片平放于染色架2.瑞氏染液數(shù)滴覆蓋血膜，固定1min3.加等量緩沖液與染液混勻，染5-10min4.自來(lái)水沖去染液，吸（吹）干鏡檢12第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)不同化學(xué)物質(zhì)的染色結(jié)果堿性蛋白質(zhì)（血紅蛋白、嗜酸顆粒）與酸性伊紅結(jié)合，染成粉紅色酸性蛋白質(zhì)（核蛋白、淋巴胞質(zhì)）與堿性美蘭或天青（亞甲藍(lán)氧化物）結(jié)合，染成紫色或藍(lán)色中性顆粒與伊紅和亞甲藍(lán)均結(jié)合，染成淡紫紅色13第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)血片瑞氏染色結(jié)果紅細(xì)胞呈粉紅色，略有碟狀感中性粒細(xì)胞核深紫紅色，胞質(zhì)淡紅，顆粒細(xì)小紫紅色嗜酸性粒細(xì)胞核紫紅色，胞漿充滿粗大橘紅色顆粒嗜堿性粒細(xì)胞核淡紫紅色，胞質(zhì)淡紅，大小不等黑紫色顆粒淋巴細(xì)胞核深紫紅色，胞質(zhì)淡藍(lán)透明，偶見紫紅色顆粒，單核細(xì)胞核淡紫紅色，胞質(zhì)淡藍(lán)或灰藍(lán)色，細(xì)小紫紅色顆粒血小板染紫紅色或藍(lán)紫色偏酸偏堿、時(shí)間長(zhǎng)短，染色有差異。14第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)染色效果的影響因素染液濃度：濃度高，染色較深，濃度低，染色較淡染色時(shí)間：時(shí)間長(zhǎng)，染色較深，時(shí)間短，染色較淡或未著色溫度：溫度高，細(xì)胞著色快，溫度低，著色慢pH：pH低，H+增多，細(xì)胞成分與伊紅親和力占優(yōu)，染色偏紅，pH高，和美蘭親和力大，染色偏藍(lán)細(xì)胞數(shù)量：細(xì)胞多則染液濃度略高，染色時(shí)間略長(zhǎng)染液濃度略低，染色時(shí)間長(zhǎng)些，染色效果好15第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)瑞氏染色與吉姆薩染色

瑞氏染色：細(xì)胞質(zhì)成分、中性顆粒等染色效果好，細(xì)胞核染色不如吉姆薩染色效果。吉姆薩染色：細(xì)胞核和寄生蟲著色較好，胞質(zhì)和中性顆粒著色較差。復(fù)合染色取長(zhǎng)補(bǔ)短。16第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)大小異常染色異常形態(tài)異常

結(jié)構(gòu)異常2、異常紅細(xì)胞形態(tài)17第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)大小異常

aMicrocyte

小紅細(xì)胞bMegalocyte巨紅細(xì)胞

cMacrocyte大紅細(xì)胞dAnisocytosis

紅細(xì)胞大小不均18第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)紅細(xì)胞大小異常小紅細(xì)胞：(d<6μm)缺鐵性貧血、鐵粒幼、珠蛋白生成障礙大紅細(xì)胞：(d>10μm)溶血性貧血、巨幼貧巨紅細(xì)胞：(d>15μm)巨幼細(xì)胞性貧血紅細(xì)胞大小不均：巨幼貧、重度增生性貧血19第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)染色異常A.Normochromaticerythrocyte

正常色素性紅細(xì)胞B.Hypochromaticerythrocyte

低色素性紅細(xì)胞C.Hyperchromaticerythrocyte高色素性紅細(xì)胞D.Polychromaticerythrocyte嗜多色性紅細(xì)胞20第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)紅細(xì)胞染色異常正常色素性紅細(xì)胞：淡紅色圓盤狀，中央生理蒼白區(qū)（Normal、AA）低色素性紅細(xì)胞：中央淺染區(qū)擴(kuò)大（IDA）高色素性紅細(xì)胞：中央淺染區(qū)縮小或消失（巨幼貧、球形紅細(xì)胞增多癥）嗜多色性紅細(xì)胞：灰藍(lán)或灰紅色，胞體較大（增生性貧血-溶貧）21第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)形態(tài)異常類型很多，原因復(fù)雜。A.Spherocyte

球形B.Sicklecell

鐮形

C.Rouleauxformation緡錢狀D.Acanthocyte

棘形

E.Targetcell靶形

22第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)A.Schistocyte裂片形B.Teardropcell淚滴形

C.Meniscocyte新月形

D.Stomatocyte

口形E.Elliptocyte

橢圓形23第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)紅細(xì)胞形態(tài)異常（一）球形紅細(xì)胞：直徑略小，厚度增加，球形，無(wú)中央淺染區(qū)（球形紅細(xì)胞增多癥）鐮形紅細(xì)胞：細(xì)胞膜變形如鐮刀狀（HbS病）緡錢狀紅細(xì)胞：銅錢串樣（骨髓瘤）棘形紅細(xì)胞：表面針尖狀突起，間距不規(guī)則，長(zhǎng)寬不一，不同于皺縮紅細(xì)胞（β-脂蛋白缺乏癥）靶形紅細(xì)胞：直徑增大，厚度變薄，中央、邊緣深染，間蒼白區(qū)，形如靶(珠蛋白生成障礙）24第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)紅細(xì)胞形態(tài)異常（二）裂片形紅細(xì)胞：碎片，有刺形、盔形、三角形、扭轉(zhuǎn)形等（DIC）淚滴形紅細(xì)胞：淚滴狀或梨形（骨纖）新月形紅細(xì)胞：殘缺如新月（瘧疾）口形紅細(xì)胞：中央蒼白區(qū)扁平狀，有裂縫，如嘴形或魚口（口形紅細(xì)胞增多癥）橢圓形紅細(xì)胞：紅細(xì)胞膜缺陷，橢圓形或桿形（橢圓形紅細(xì)胞增多癥、巨幼貧）25第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)結(jié)構(gòu)異常

basophilicstipplingcell

Howell-Jolly’sbody

cabotring

nucleatederythrocyte

26第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)A.Basophilicstippling

嗜堿點(diǎn)彩紅細(xì)胞B.Howell-Jolly’sbody

豪-焦小體C.Cabotring

卡波環(huán)D.Nucleatederythrocyte

有核紅細(xì)胞E.Haemoplasmodium

寄生蟲27第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)紅細(xì)胞結(jié)構(gòu)異常嗜堿點(diǎn)彩紅細(xì)胞：胞質(zhì)有藍(lán)黑色顆粒，重金屬（鉛、汞等）中毒表現(xiàn)豪-焦小體：紅細(xì)胞胞質(zhì)中暗紫紅圓形小體，核殘余，巨幼貧、溶貧、脾切増多卡波氏環(huán)：紅細(xì)胞胞質(zhì)中紫紅細(xì)線圈狀或8字結(jié)構(gòu)，見于溶貧、巨幼貧、鉛中毒、白血病有核紅細(xì)胞：幼稚紅細(xì)胞，見于新生兒、溶貧、惡性造血疾患、骨纖等寄生蟲：瘧原蟲、微絲蚴、利什曼原蟲等。28第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)三、白細(xì)胞形態(tài)檢查29第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)中性粒細(xì)胞核的變化核左移、核右移核變性Pelger-Huet畸形中毒性改變核棘突鼓槌小體30第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)1、中性粒細(xì)胞核象變化成熟幼稚31第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)核左移(shifttotheleft)核右移(shifttotheright)？32第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)核左移定義：外周血桿狀核粒細(xì)胞增多和幼稚細(xì)胞出現(xiàn)，常由急性感染、失血、中毒、免疫低下引起。再生性左移：伴WBC增多，機(jī)體反應(yīng)性強(qiáng)，骨髓造血旺盛，常見于急性感染、失血、中毒退行性左移：WBC不增或降低，骨髓釋放受抑，見于嚴(yán)重感染或抵抗力低下33第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)核右移定義：外周血中性分葉核粒細(xì)胞增多，5葉核以上>3%，是造血功能衰退或造血物質(zhì)缺乏表現(xiàn)。常伴WBC減少，見于惡性貧血、巨幼貧、使用抗代謝藥炎癥恢復(fù)期一過(guò)性出現(xiàn)，進(jìn)行期出現(xiàn)示預(yù)后不良。34第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)核變性核固縮：染色質(zhì)凝集呈深紫色粗大塊狀核溶解：胞核膨脹，著色淺淡，常伴核膜碎裂，細(xì)胞衰老死亡表現(xiàn)核碎裂：核裂解成數(shù)塊35第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)空泡變性棒狀小體中毒顆粒杜勒小體顆粒消失Chediak-Higashi畸形2、中性粒細(xì)胞胞質(zhì)變化36第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)A.D?hlebody杜勒小體B.toxicgranulation

中毒顆粒C.Vacuolation空泡變性D.Auerbody

棒狀小體

37第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)中性粒細(xì)胞胞質(zhì)變化

空泡變性：胞質(zhì)、核出現(xiàn)空泡（脂肪變性）

--（嚴(yán)重感染和中毒）中毒顆粒：比中性顆粒大，（紫）黑色杜勒小體（藍(lán)斑）：圓（梨）形天藍(lán)或藍(lán)黑色，-（胞質(zhì)毒性變化，核質(zhì)發(fā)育失衡）棒狀小體：紅色細(xì)桿狀，急粒、急單可見，M3明顯-（急性白血病診斷及鑒別診斷）38第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)淋巴細(xì)胞形態(tài)異常異型淋巴細(xì)胞：病毒感染或過(guò)敏性疾病等刺激淋巴細(xì)胞增生，出現(xiàn)形態(tài)變化

Ⅰ-空泡型

Ⅱ-不規(guī)則型

Ⅲ-幼稚型褪變型淋巴細(xì)胞：放射損傷，核變性（核固縮、核碎裂、雙核、衛(wèi)星核）39第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)空泡型（漿細(xì)胞型）不規(guī)則型（單核細(xì)胞型）幼稚型（未成熟細(xì)胞型）異型淋巴細(xì)胞A異型淋巴細(xì)胞漿細(xì)胞型B異型淋巴細(xì)胞幼稚型C單核細(xì)胞型40第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)異型淋巴細(xì)胞形態(tài)特征Ⅰ-空泡型：胞質(zhì)豐富（核質(zhì)1:1）深藍(lán)泡沫樣，有空泡，核偏固縮似漿細(xì)胞Ⅱ-不規(guī)則型：胞體較大花邊狀，胞質(zhì)量多（核質(zhì)1:2）淺藍(lán)或藍(lán)色透明感，核圓或不規(guī)則，較細(xì)致疏松，似單核細(xì)胞，

Ⅲ-幼稚型：胞體較大，胞質(zhì)量多（核質(zhì)2:3），藍(lán)或深藍(lán)，核大較規(guī)則，細(xì)致疏松，似幼稚細(xì)胞41第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)第二節(jié)

紅細(xì)胞檢驗(yàn)42第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)紅細(xì)胞生理生長(zhǎng)發(fā)育：造血干細(xì)胞→紅系祖細(xì)胞→原紅→早幼紅→中幼紅→晚幼紅→網(wǎng)織紅→成熟紅細(xì)胞骨髓中原始紅細(xì)胞→網(wǎng)織紅細(xì)胞約72h網(wǎng)織紅細(xì)胞→成熟紅細(xì)胞約48h紅細(xì)胞平均壽命120d在脾臟破壞，由單核巨噬細(xì)胞清除主要功能：作為呼吸載體（血紅蛋白）,結(jié)合、運(yùn)輸O2和CO2，

進(jìn)行氣體交換43第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)紅細(xì)胞生成必需的元素鐵葉酸維生素B12蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、糖類、無(wú)機(jī)離子44第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)淡紅色雙凹圓盤狀，直徑6.7-9.5μm，中央蒼白區(qū)。表面積/體積比值大；增加氣體透過(guò)面積有變形能力1、正常紅細(xì)胞形態(tài)45第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)嗜酸細(xì)胞淋巴細(xì)胞單核細(xì)胞中性粒細(xì)胞血小板

嗜堿細(xì)胞外周血瑞氏染色紅細(xì)胞形態(tài)46第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)1、方法顯微鏡計(jì)數(shù)法血細(xì)胞分析儀法一、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)47第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)顯微鏡計(jì)數(shù)法48第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)干擾因素冷凝集-RBC聚集導(dǎo)致計(jì)數(shù)假性減低溶血-假性減低白細(xì)胞顯著增多-假性增高，須減去WBC數(shù)大血小板增多-假性增高49第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)成年男性：（4.09~5.74）×1012/L成年女性：（3.68~5.13）×1012/L新

生

兒：（5.2~6.4）×1012/L嬰

兒：（4.0~4.3）×1012/L兒

童：（4.0~4.5）×1012/L2、參考范圍50第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)紅細(xì)胞醫(yī)學(xué)決定水平醫(yī)學(xué)決定水平：對(duì)疾病診斷、治療、預(yù)后有決定意義的生物學(xué)指標(biāo)>6.8×1012/L對(duì)癥治療<3.5×1012/L診斷貧血<1.5×1012/L考慮輸血

51第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)3、臨床應(yīng)用A、生理性增多新生兒、高原生活、劇烈運(yùn)動(dòng)、精神因素等。（1）增多52第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)（B

）絕對(duì)性增多：繼發(fā)性心、肺疾病代償增異常血紅蛋白病生

某些腫瘤等原發(fā)性真性紅細(xì)胞增多癥病理性增多（A）相對(duì)性增多：血漿水分丟失，血液濃縮，絕對(duì)數(shù)沒(méi)有發(fā)生變化。53第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)生理性減少

兒童、孕婦、老年人。病理性減少A、骨髓造血功能低下，如再障。B、造血原料缺乏，如缺鐵貧、巨幼貧。C、紅細(xì)胞破壞增加，如溶貧。D、紅細(xì)胞丟失過(guò)多，如失血。（2）減少54第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)二、血紅蛋白測(cè)定（hemoglobin，Hb）55第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)血紅蛋白結(jié)構(gòu)種類珠蛋白和亞鐵血紅素結(jié)合蛋白，4條珠蛋白肽鏈各包裹一個(gè)亞鐵血紅素，分子量64458HbA（α2β2）——占成人Hb90%以上HbA2（α2δ2）HbF（α2γ2）——占新生兒、嬰兒Hb70%左右血紅蛋白衍生物：Hi、HbCo、HbS56第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)1、測(cè)定方法氰化高鐵血紅蛋白法（HiCN

）十二烷基硫酸鈉血紅蛋白測(cè)定法（SDS-Hb）疊氮高鐵血紅蛋白法（HiN3）57第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)氰化高鐵血紅蛋白法（HiCN

）原理：血紅蛋白（除HbS）Fe2+被高鐵氰化鉀氧化成Fe3+,形成高鐵血紅蛋白（Hi），與氰根離子形成氰化高鐵血紅蛋白（HiCN），540nm有最大吸收峰，吸光度與血紅蛋白濃度成正比。ICSH和WHO推薦標(biāo)準(zhǔn)參考方法58第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)HiCN測(cè)定法干擾因素脂血-假性增高有核細(xì)胞大量增多-假性增高其它引起濁度升高的因素59第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)2、參考范圍新生兒：（180~190）g/L；兒

童：（120~140）g/L；成年男性：（131~172）g/L；成年女性：（113~151）g/L；老年人（70歲以上）：男性：（94~122）g/L；女性：（87~112）g/L；60第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)血紅蛋白臨床應(yīng)用血紅蛋白增高：成男>170g/L，成女>160g/L血紅蛋白減低（貧血）：成男<120g/L，成女<110g/L輕度貧血-90g/L<Hb<參考值下限中度貧血-60g/L<Hb≤90g/L重度貧血-30g/L<Hb≤60g/L極重度貧血-Hb≤30g/L61第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)測(cè)定方法微量法（WHO推薦）溫氏比容法血液分析儀法三、血細(xì)胞比容測(cè)定（hematocrit，Hct）紅細(xì)胞比容（packedcellvolume，PCV）即紅細(xì)胞壓積（Hct）,指在一定條件下經(jīng)離心沉淀壓緊的紅細(xì)胞在全血標(biāo)本中所占體積的比值。62第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)離心法結(jié)果讀取離心血液分五層：血漿層血小板層白細(xì)胞和有核紅細(xì)胞層還原紅細(xì)胞層帶氧紅細(xì)胞層讀取還原紅細(xì)胞層表面刻度/100或紅細(xì)胞柱長(zhǎng)/全層高63第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)血液分析儀法PCV=MCV×RBC數(shù)（L/L）64第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)【參考范圍】男性：0.380~0.508L/L女性：0.335~0.450L/L【臨床應(yīng)用】●紅細(xì)胞比容增高：相對(duì)性增多（血液濃縮）。絕對(duì)性增高（紅細(xì)胞增多）。●紅細(xì)胞比容降低：見于各種貧血。65第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)四、紅細(xì)胞相關(guān)參數(shù)1、紅細(xì)胞平均容積（meancorpuscularvolume,MCV）。MCV=紅細(xì)胞比容每升血液中紅細(xì)胞數(shù)原理：血細(xì)胞通過(guò)分析儀電極小孔引起電阻改變，產(chǎn)生脈沖信號(hào)，振幅與體積成正比，脈沖數(shù)即細(xì)胞數(shù)?！緟⒖挤秶?/p>

80～92fl（1fl=10-15L）66第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)２、紅細(xì)胞平均血紅蛋白量（meancorpuscular

hemoglobin,MCH）MCH=血紅蛋白量每升血液中紅細(xì)胞數(shù)【參考范圍】

27～31pg（1pg=10-12g)67第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)３.紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度（meancopuscularhemoglobinconcentration，MCHC）MCHC=紅細(xì)胞比容【參考范圍】

320～360g/L血紅蛋白量68第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)４.紅細(xì)胞體積分布寬度（RDW）定義：是反映外周血紅細(xì)胞體積差異的參數(shù)，通過(guò)變異系數(shù)或標(biāo)準(zhǔn)差定量表示紅細(xì)胞體積分布的離散程度。【參考范圍】

成人：≤15.0%

新生兒：男≤15.9%女≤16.2%69第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)【臨床應(yīng)用】根據(jù)上述指標(biāo)可進(jìn)行貧血的形態(tài)學(xué)分類。四、紅細(xì)胞相關(guān)參數(shù)70第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)MCVMCHMCHC大細(xì)胞性貧血＞正常＞正常正常正常細(xì)胞性貧血正常正常正常單純小細(xì)胞貧血＜正常＜正常正常小細(xì)胞低色素性貧血＜正常＜正常＜正常各種貧血時(shí)三項(xiàng)指數(shù)的變化71第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)幾種貧血類型的MCV和RDW變化72第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)五、網(wǎng)織紅細(xì)胞（reticulocyte，Ret）計(jì)數(shù)界于晚幼紅細(xì)胞和成熟紅細(xì)胞之間的過(guò)渡型細(xì)胞。因其胞質(zhì)中殘存的核糖核酸經(jīng)堿性染料活體染色后，呈現(xiàn)點(diǎn)狀或線網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，故名網(wǎng)織紅細(xì)胞。73第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)１.計(jì)數(shù)方法（1）顯微鏡計(jì)數(shù)法：染色后油鏡計(jì)數(shù)1000個(gè)RBC中Ret數(shù)米勒(Miller)窺盤法該方法可明顯提高計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性。

A31B將Miller窺盤放在顯微鏡目鏡中,通過(guò)窺盤中大小方格間的9比1比例關(guān)系計(jì)算RBC數(shù)和網(wǎng)織RBC。74第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)網(wǎng)織紅細(xì)胞類型Ⅰ型（絲球型）顆粒呈致密塊狀Ⅱ型（網(wǎng)型）顆粒呈疏松網(wǎng)狀Ⅲ型（破網(wǎng)型）顆粒松散Ⅳ型（點(diǎn)粒型）顆粒點(diǎn)狀散在顆粒越多越密越幼稚外周血Ⅳ型占60%以上75第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)（２）血液分析儀法

新亞甲藍(lán)-VCS檢測(cè)法以超活染料新亞甲藍(lán)（NMB）著色網(wǎng)織紅細(xì)胞內(nèi)殘存的RNA漂去紅細(xì)胞內(nèi)血紅蛋白（酸性漂洗液）在流式通道，運(yùn)用VCS三維技術(shù)，將網(wǎng)織紅細(xì)胞與成熟紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板、和有核紅細(xì)胞區(qū)分開來(lái)76第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)抗凝全血噻唑橙染色，用流式細(xì)胞儀分析樣本中10000個(gè)細(xì)胞，報(bào)告網(wǎng)織紅細(xì)胞百分比和平均熒光強(qiáng)度。熒光強(qiáng)度越強(qiáng)，細(xì)胞越幼稚。流式細(xì)胞儀分析簡(jiǎn)便，結(jié)果精確、靈敏，消除了取樣帶來(lái)的誤差。（3）流式細(xì)胞儀法：77第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)成人：0.005～0.015（0.5%～1.5%)新生兒：0.03～0.06兒童：0.005~0.075

絕對(duì)值：成人(24～84)×109/L２.參考范圍78第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)（1）評(píng)價(jià)骨髓增生能力，判斷貧血類型

增多表示紅細(xì)胞生成旺盛，降低是無(wú)效紅細(xì)胞造血指征。再障時(shí)，明顯降低。絕對(duì)值低于5×109/L可做為急性再障的輔助診斷指標(biāo)。失血、多數(shù)溶血性貧血患者網(wǎng)織紅細(xì)胞可明顯增高，脾亢輕度增高。營(yíng)養(yǎng)不良性貧血網(wǎng)織紅細(xì)胞可正常、輕度升高或降低。３.網(wǎng)織紅細(xì)胞臨床應(yīng)用79第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)

（2）評(píng)價(jià)療效

網(wǎng)織紅細(xì)胞反應(yīng)：IDA或巨幼細(xì)胞貧血分別給予鐵劑、維生素B12或葉酸治療2~3d后，網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)值開始上升，7~10d達(dá)到最高(10%左右)；兩周以后逐漸降至正常水平，紅細(xì)胞、血紅蛋白開始升高。 骨髓移植、EPO治療后：若骨髓開始恢復(fù)造血功能，網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)值上升。80第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)（3）放、化療監(jiān)測(cè)

機(jī)體接受放、化療后，如出現(xiàn)骨髓抑制，早期HFR和MFR降低，然后才檢測(cè)到網(wǎng)織紅細(xì)胞的降低。而停止放、化療，骨髓功能恢復(fù)后，又見上述指標(biāo)依次上升?？芍笇?dǎo)臨床醫(yī)師適時(shí)調(diào)整治療方案，避免造成嚴(yán)重的骨髓抑制。81第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)網(wǎng)織紅細(xì)胞成熟指數(shù)（RMI）RMI=（HFR+MFR）/LFR×100%HFR、MFR、LFR-高、中、低熒光強(qiáng)度網(wǎng)織紅細(xì)胞，熒光強(qiáng)度高，網(wǎng)織紅細(xì)胞越幼稚RMI增高是RBC造血早期標(biāo)志，較Ret計(jì)數(shù)敏感82第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)網(wǎng)織紅細(xì)胞類型Ⅰ型（絲球型）顆粒呈致密塊狀Ⅱ型（網(wǎng)型）顆粒呈疏松網(wǎng)狀Ⅲ型（破網(wǎng)型）顆粒松散Ⅳ型（點(diǎn)粒型）顆粒點(diǎn)狀散在顆粒越多越密越幼稚外周血Ⅳ型占60%以上83第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)RPI=病人網(wǎng)織紅細(xì)胞%/2×病人PCV/正常人PCV（男0.45，女0.40）臨床應(yīng)用：＞3提示溶血性貧血或急性失血性貧血；＜2提示為骨髓增生低下或紅細(xì)胞系成熟障礙性貧血。網(wǎng)織紅生成指數(shù)（Reticulocyteproductionindex,RPI）84第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)嗜堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞計(jì)數(shù)發(fā)育過(guò)程中因化學(xué)損傷，胞質(zhì)殘留RNA變性沉淀的未成熟紅細(xì)胞。血涂片瑞氏染色后油鏡下計(jì)數(shù)1000個(gè)RBC中點(diǎn)彩紅細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)參考范圍<=0.01%重金屬（鉛、汞等）中毒顯著增高惡貧、溶貧、鐵粒幼、白血病、惡性腫瘤、瘧疾可增高85第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)嗜堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞與嗜多色性紅細(xì)胞86第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)概念紅細(xì)胞在一定條件下單位時(shí)間內(nèi)沉降的速度，簡(jiǎn)稱血沉，是反映紅細(xì)胞聚集性的指標(biāo)。病理情況下血沉可明顯加快。六、血細(xì)胞沉降率（erythrocytesedimentationrate,ESR）87第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)魏氏法：取靜脈血1.6ml，按4:1比例與檸檬酸鈉溶液（0.4ml）混勻，吸入清潔、干燥的標(biāo)準(zhǔn)魏氏血沉管至“0”刻度處。血沉管在室溫下（18～25℃）垂直放置于血沉架，避免陽(yáng)光直照、振動(dòng)和血液外溢。1h后，血漿凹液面底部至沉降紅細(xì)胞柱頂部之間距離，即為血沉結(jié)果，以mm/h報(bào)告。

１.測(cè)定方法88第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)法：根據(jù)紅細(xì)胞界面隨時(shí)間下降的原理，采用光電管每隔60s動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)紅細(xì)胞沉降的位置，得到沉降高度-時(shí)間曲線,動(dòng)態(tài)分析血沉過(guò)程。光密度法：利用激光為光源，對(duì)毛細(xì)管中的微量抗凝全血照射，動(dòng)態(tài)檢測(cè)紅細(xì)胞聚集和沉降的變化過(guò)程，而后通過(guò)光密度的變化換算成魏氏法的相關(guān)結(jié)果。89第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)參考范圍

魏氏法成年男性：0-15mm/h

成年女性：0-20mm/h許多疾病血沉加快缺乏特異性，用于篩查90第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)２.影響血沉的因素

（１）血漿因素正電荷的大分子物質(zhì)（凝血因子I、球蛋白）：血沉加快;負(fù)電荷的蛋白質(zhì)（白蛋白）：血沉減慢;脂類：膽固醇，甘油三脂，利于紅細(xì)胞聚集，血沉加快;卵磷脂使血沉減慢;分子多聚體藥物：使紅細(xì)胞聚集，如白明膠等。91第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)（２）紅細(xì)胞因素紅細(xì)胞數(shù)量：一般數(shù)量減少，阻力減小，血沉加快，數(shù)量增多，血沉減慢;紅細(xì)胞形態(tài)：直徑大，厚度薄，紅細(xì)胞易形成緡錢狀，血沉加快，形態(tài)異?；虼笮〔痪翜p慢。紅細(xì)胞表面電荷破壞：病毒、細(xì)菌感染，血沉加快。92第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)（３）技術(shù)因素血沉管的位置：傾斜，血沉加快；

溫度：室溫越高，血沉加快；

時(shí)間：2h內(nèi)測(cè)定抗凝劑的使用:稀釋度大，血沉加快；

標(biāo)本因素：脂血、凝塊、溶血

93第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)３.臨床應(yīng)用

（1）生理性加快

?婦女月經(jīng)期，妊娠1月以上；

?兒童；

?老年人，特別是70歲以上。94第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)（2）病理性加快

?各種炎癥

?組織損傷及壞死

?惡性腫瘤

?高球蛋白血癥?貧血?高膽固醇血癥95第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)病理性加快感染是最常見原因，動(dòng)態(tài)觀察疾病活動(dòng)性及變化；鑒別心梗、肺梗與心絞痛，腫瘤篩查與良惡鑒別貧血肝硬化腎炎免疫系統(tǒng)疾病96第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)第三節(jié)白細(xì)胞檢驗(yàn)白細(xì)胞為有核細(xì)胞，分為中性粒細(xì)胞，嗜酸性粒細(xì)胞，嗜堿性粒細(xì)胞，淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞五種。97第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)外周血正常白細(xì)胞形態(tài)98第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)白細(xì)胞成熟過(guò)程祖細(xì)胞釋放入外周血液血循環(huán)血管壁

邊緣池循環(huán)池原粒細(xì)胞早幼粒中幼粒晚幼粒桿狀核分葉核成熟池(髓內(nèi))分裂池(髓內(nèi))貯備池(髓內(nèi))干細(xì)胞99第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)白細(xì)胞生長(zhǎng)發(fā)育成熟階段中性粒細(xì)胞：原始粒細(xì)胞→中性早幼?！杏琢！碛琢！鷹U狀核→分葉核細(xì)胞嗜酸、嗜堿粒細(xì)胞：原始粒細(xì)胞→嗜酸（堿）早幼?！杏琢！碛琢！人幔▔A）粒細(xì)胞淋巴細(xì)胞：原始淋巴細(xì)胞→幼稚淋巴細(xì)胞→淋巴細(xì)胞單核細(xì)胞：原始單核細(xì)胞→幼稚單核細(xì)胞→單核細(xì)胞100第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)中性粒細(xì)胞生長(zhǎng)發(fā)育成熟階段101第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)一、白細(xì)胞計(jì)數(shù)

是測(cè)定單位體積（每升）血液中各種白細(xì)胞的總數(shù)。計(jì)數(shù)方法：1.顯微鏡計(jì)數(shù)法2.血細(xì)胞分析儀法

102第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)１.參考范圍

成人：男（3.97~9.15）×109/L；

女（3.69~9.16）×109/L；

兒童：（8～10）×

109/L

嬰兒：（11～12）×

109/L

新生兒：（15～20）×

109/L103第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)２.顯微鏡計(jì)數(shù)法原理用白細(xì)胞稀釋液將血液稀釋一定倍數(shù)并破壞紅細(xì)胞后充入計(jì)數(shù)池，在顯微鏡下計(jì)數(shù)一定容積中的白細(xì)胞數(shù)，換算成每升血液中的白細(xì)胞總數(shù)。

104第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)計(jì)數(shù)板105第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)顯微鏡計(jì)數(shù)法106第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)107第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)計(jì)數(shù)方法與原則采血順利，血量準(zhǔn)確，稀釋液量正確充分混勻后點(diǎn)樣充入計(jì)數(shù)池計(jì)數(shù)9大方格中四角4個(gè)方格，弓形移動(dòng)壓線細(xì)胞數(shù)左不數(shù)右，數(shù)上不數(shù)下，白細(xì)胞數(shù)=N/4×10×稀釋倍數(shù)×106/L出現(xiàn)大量有核紅細(xì)胞應(yīng)校正108第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)（1）經(jīng)驗(yàn)控制

血涂片RBC:WBC=500:1

WBC(×109/L)WBC/HP4~72~47~104~610~136~1013~1810~20血涂片白細(xì)胞分布密度：109第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)二、白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)

（differentialcount，DC）顯微鏡分類計(jì)數(shù)法110第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)外周血五種白細(xì)胞111第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)白細(xì)胞形態(tài)特征（一）中性粒細(xì)胞：圓形，胞質(zhì)豐富，顆粒較多，細(xì)小均勻紫紅色，核分葉或桿狀，染色質(zhì)粗，緊密成團(tuán)，深紫紅色嗜酸粒細(xì)胞：圓形，顆粒橘紅色，粗大整齊均勻，充滿胞質(zhì)，核多二葉眼鏡狀，染色質(zhì)粗，染紫紅色嗜堿粒細(xì)胞：圓形，胞質(zhì)量少淡紅色，顆粒紫黑色，大小不均，排列不齊，常覆于核，核分葉不明顯，染色質(zhì)粗，著色淺有模糊感112第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)白細(xì)胞形態(tài)特征（二）淋巴細(xì)胞：圓形，有大小，胞質(zhì)很少，藍(lán)色透明，無(wú)顆粒，偶見少數(shù)粗大不均紫紅色嗜天青顆粒，核圓或腎形，染色質(zhì)粗，緊密成團(tuán)排列均勻，深紫紅色單核細(xì)胞：圓形或橢圓形，胞質(zhì)豐富，淡藍(lán)或灰藍(lán)色，毛玻璃樣半透明，彌散細(xì)小灰塵樣紫紅色嗜天青顆粒，核呈腎形、馬蹄形折疊，染色質(zhì)疏松網(wǎng)狀，淡紫紅色113第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)瑞氏染液氯化亞甲藍(lán)（MCl）與伊紅化鈉（NaE）的甲醇溶液甲醇是Wright染料良好溶劑，固定細(xì)胞形態(tài)，將蛋白質(zhì)沉淀為顆粒網(wǎng)狀增加接觸面提高染料吸附解離成M+（亞甲藍(lán)）和E-（伊紅）磷酸鹽緩沖液（pH6.4-6.8）114第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)瑞氏染色步驟1.血涂片平放于染色架2.瑞氏染液數(shù)滴覆蓋血膜，固定1min3.加等量緩沖液與染液混勻，染5-10min4.流水沖去染液，吸（吹）干鏡檢115第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)1.顯微鏡分類計(jì)數(shù)法

將血液制成涂片，經(jīng)染色后在油鏡下計(jì)數(shù)100個(gè)白細(xì)胞進(jìn)行分類，求得各種類型白細(xì)胞的比值（百分率）。

116第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)2.參考范圍

cellpercentageabsolutevalueneutrophilicgranulocytebandform1~6％(0.04~0.6)×109/Lneutrophilicgranulocytesegmentedform50~70％(2.0~7.0)×109/Leosinophil0.5~5%(0.02~0.5)×109/L

basophil0~1%(0~1.0))×109/Llymphocyte20~40%(0.8~4.0))×109/L

monocyte3~10%(0.12~1.0))×109/L117第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)顯微鏡分類計(jì)數(shù)要點(diǎn)良好的涂片染色低倍鏡查看細(xì)胞分布、染色質(zhì)量，片尾邊緣有無(wú)巨大細(xì)胞和寄生蟲，體尾交界處油鏡分類，城墻式移動(dòng)根據(jù)細(xì)胞大小、胞質(zhì)色量、顆粒色形、核形密度等形態(tài)染色特征辨別種類,分別計(jì)數(shù)幼稚、異常白細(xì)胞包括在總數(shù)內(nèi)有核紅細(xì)胞報(bào)計(jì)數(shù)100個(gè)白細(xì)胞同時(shí)所見個(gè)數(shù)118第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)血細(xì)胞分析儀法三分類：檢測(cè)溶血后的白細(xì)胞體積按大小分成3類細(xì)胞群五分類：運(yùn)用VCS技術(shù)分析數(shù)千個(gè)白細(xì)胞，根據(jù)其體積、核形、胞質(zhì)顆粒特征參數(shù)，分成5類細(xì)胞群119第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)三.白細(xì)胞計(jì)數(shù)與分類計(jì)數(shù)的臨床應(yīng)用

1.中性粒細(xì)胞（Neutrophil，N）：具有黏附，趨化，吞噬及殺菌等功能，在機(jī)體防御和抵抗病原菌侵襲過(guò)程中起著重要作用。數(shù)量最多，對(duì)白細(xì)胞總數(shù)影響最大。120第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)光鏡結(jié)構(gòu)電鏡結(jié)構(gòu)121第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)(1)生理性變化

年齡新生兒WBC升高，一般在20×109/L；3～4天降至10×109/L左右；3月后接近成人水平。122第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)

運(yùn)動(dòng)、疼痛和情緒影響

當(dāng)劇烈運(yùn)動(dòng)、疼痛和激動(dòng)時(shí)，WBC↑↑，以N為主，為循環(huán)池和邊緣池細(xì)胞重新分布和骨髓釋放增加的結(jié)果。123第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)日間變化

在安靜和休息時(shí)WBC較低?；顒?dòng)和進(jìn)食后較高。下午高于上午。一日之內(nèi)最高值約為最低值的2倍。124第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)妊娠與分娩

妊娠>5個(gè)月，WBC↑。通常在

(12~17)×109/L

，分娩時(shí)疼痛和產(chǎn)傷可更高，如無(wú)并發(fā)癥產(chǎn)后1周內(nèi)恢復(fù)正常。125第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)（２）中性粒細(xì)胞病理性變化急性感染：化膿性球菌嚴(yán)重的組織損傷急性溶血急性大出血急性中毒腫瘤性增多骨髓增殖性疾病病理性增多126第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)?zāi)承└腥荆℅-桿菌、病毒感染）某些血液?。ˋA、粒缺）慢性理化損傷（放射、化療）自身免疫性疾?。⊿LE）脾功能亢進(jìn)病理性減少127第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)２.嗜酸性粒細(xì)胞（eosinophil，Ｅ）

光鏡結(jié)構(gòu)電鏡結(jié)構(gòu)128第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)嗜酸粒細(xì)胞功能殺傷細(xì)菌和寄生蟲抗過(guò)敏反應(yīng)調(diào)節(jié)超敏反應(yīng)促炎癥反應(yīng)129第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)（1）病理性增多

過(guò)敏性疾病寄生蟲病某些傳染病及傳染病恢復(fù)期某些皮膚病血液病某些惡性腫瘤130第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)（2）病理性減少見于傷寒、副傷寒、手術(shù)后嚴(yán)重組織損傷以及應(yīng)用腎上腺皮質(zhì)激素或促腎上腺皮質(zhì)激素后。131第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)3.嗜堿性粒細(xì)胞（

basophil，B）

光鏡結(jié)構(gòu)電鏡結(jié)構(gòu)132第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)嗜堿粒細(xì)胞功能參與超敏反應(yīng)133第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)（1）病理性增多

慢粒：嗜堿性粒細(xì)胞可>10％;骨髓增生性疾病：如真性紅細(xì)胞增多癥;其他：如嗜堿性粒細(xì)胞白血病、脾切除后和某些轉(zhuǎn)移癌。

134第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)4.淋巴細(xì)胞（Lymphocyte，L）

光鏡結(jié)構(gòu)電鏡結(jié)構(gòu)135第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)淋巴細(xì)胞功能細(xì)胞免疫體液免疫免疫調(diào)節(jié)136第二章一般血液學(xué)檢驗(yàn)?zāi)承﹤魅静。喝顼L(fēng)疹、百日咳等。某些傳染病恢復(fù)期和腎移植術(shù)后發(fā)生排斥反應(yīng)時(shí);急慢性淋巴細(xì)胞