第四章 清洗與消毒

第四章清洗與消毒一、清洗主要針對新的或重新使用的器皿，清除雜質和微生物，使其不殘留任何影響細胞生長的成分。有害物質：微生物細胞殘余物非營養(yǎng)成分的化學物質1.玻璃器皿的清洗浸泡（清水浸泡、5%稀鹽酸浸泡過夜）→刷洗（軟毛刷、優(yōu)質洗滌劑）→浸酸（不少于6小時，一般過夜）→沖洗（自來水十遍，蒸餾水2～3次）→晾干備用要求：干凈透明、無油跡，不能殘留任何物質

成分強酸清潔液次強酸清潔液弱酸清潔液重鉻酸鉀（g)63120100硫酸(ml)1000200100蒸餾水(ml)2002001000

棕紅色深綠色，要重新配制2.橡膠制品的清洗自來水浸泡→

0.5mol/LNaOH煮沸10～

15min（除掉蛋白質）→流水沖洗→0.5mol/LHCl浸泡30min→流水沖洗→自來水沖洗2次→蒸餾水清洗2～

3次

→50℃烤干備用。3.塑料器皿的清洗浸泡（洗滌劑）→沖洗（自來水10遍，蒸餾水3次）→

70%乙醇沖洗→無水乙醇沖洗1次→無菌室內紫外線照射晾干4.不銹鋼除菌濾器的清洗新的或使用后的流水沖洗15min→三蒸水沖洗濾器2～

3次→干燥備用去離子水浸泡濾膜24h→安裝濾器→消毒滅菌。包裝:

對細胞培養(yǎng)用品進行消毒前，要進行嚴密包裝，以便于消毒和貯存。常用的包裝材料：牛皮紙、硫酸紙、棉布、鋁飯盒、較大培養(yǎng)皿等，近幾年用鋁箔包裝，非常方便，適用。培養(yǎng)皿、注射器、金屬器械等用牛皮紙包裝后再裝入飯盒內，較大的器皿可以進行局部包扎。

二、消毒和滅菌主要針對微生物污染◆物理消毒法1、紫外線消毒是一種低能量的電磁輻射，可以殺滅多種微生物，多用于無菌室空氣、地面以及超凈工作臺面的消毒。消毒效果與輻射強度和照射劑量呈正相關，輻射強度隨距燈管距離的增加而降低，照射劑量和照射時間呈正比。

缺點：穿透力弱；產生臭氧，污染空氣，對身體有害。2、電離輻射滅菌以60Co、X射線和電子加速器產生的加速離子輻照物品殺滅微生物的方法。優(yōu)點：滅菌時物品不會升溫，尤其適用不耐熱物品的消毒；輻射的穿透力強，可直接對密封包裝的物品進行消毒。缺點：由于電離輻射有較強的誘變作用，不適合消毒活的生物材料。適用于消毒量大和不適做高壓或濾過等培養(yǎng)用品。

3.濕熱消毒以高壓（103.4kPa）蒸汽滅菌最為常用，是最有效的一種方法。壓力蒸汽滅菌器消毒好的物品應注意烘干。

4.干熱消毒電烤箱160℃以上，保持90～120min，才能殺死細菌芽胞，達到滅菌目的。適用于玻璃器皿的消毒。

5.過濾除菌主要用于培養(yǎng)用液的除菌?！艋瘜W消毒法采用化學消毒劑消毒那些不能用物理等方法消毒的物品和場地，如無菌室的空氣、臺面、操作者的皮膚等。常用化學消毒劑：來蘇兒、新潔爾滅、過氧乙酸、70%酒精、乳酸蒸汽等◆抗生素的應用主要適用于培養(yǎng)用液的消毒。消毒滅菌物品壓力蒸汽干熱過濾紫外線化學化學電離抗生素氣體消毒劑輻射培養(yǎng)室、工作臺+++玻璃制品+++金屬器械++++塑料用品+++橡膠制品++++培養(yǎng)用液