中性粒細(xì)胞漿抗體anca的檢測(cè)

抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體(ANCA)的檢德國(guó)歐蒙醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)診 公1ANCA=Anti-NeutrophilCytosmcANCA:胞漿中性粒細(xì)pANCA:核周2兩種ANCA熒光染 核周型 胞漿型3兩種ANCA熒光染色成4已知的ANCA靶抗原及其在中性粒細(xì)胞胞漿中分嗜天青顆 特異性顆 胞 核板 溶菌酶（LYS）（α-enolase） （lamina） 人溶酶體相關(guān)膜蛋白2（H-LAMP2）5cANCA:靶抗蛋白酶3(PR3;proteinincytosmic其它未知抗6pANCA:靶抗髓過(guò)氧化物酶(MPO;固定乳鐵蛋彈性蛋白組織蛋白酶殺菌性/通透性增強(qiáng)蛋白(BPI;-烯醇化-葡萄糖溶菌 7ANCA自身抗體譜臨性系統(tǒng)性小血管藥物性/性疾8(accordingtoChapelHillConsensusConference,韋格納氏肉芽顯微多動(dòng)脈Churg-Strauss綜合(變應(yīng)性肉芽腫性脈管炎腎臟局限型特發(fā)性壞死性新月體腎9受累血管JennetteJC,NEnglJMed337:1512-1523ANCA臨床意義(1)：性系統(tǒng)性小血管相關(guān)疾 IIF染色 特異性靶抗原抗韋格納氏肉芽腫 c,p(少見(jiàn) 顯微型多動(dòng)脈炎 c, 壞死性新月體腎小球腎 p,c(少見(jiàn) 過(guò)敏性肉芽腫性血管炎(CSS)p,c(少見(jiàn))PR3(10%),MPO(60%) 低陽(yáng)性率PR3(5%),MPO(15%) （抗GBM病ANCA臨床意義相關(guān)疾IIF染色特異性靶炎癥性自身免疫系統(tǒng)性紅斑狼瘡p,BPIlamina？其p,BPI,lamina？其p,actin?BPIp,actin?BPIp,actinBPIp,LF,CG,MPO(少見(jiàn)p,LF,CG,MPO少見(jiàn)p,LF,CG,MPO(少見(jiàn)ANCA臨床意義(3)：藥物性相關(guān)疾IIF染色特異性靶甲狀腺功能亢進(jìn)(PTU治療性支氣管擴(kuò)張真菌(真菌病原蟲(chóng)(急性瘧疾、侵襲性阿米)p,a,a,a,a,a,a,a,MPO（常見(jiàn)）LF,HELMPO,LF,HEL,BPI,BPI不歐蒙研究：在各種疾病中ANCA的陽(yáng)性npANCA000000000000000000000000000009000000000000ANCA檢測(cè)推薦方ANCA檢測(cè)和報(bào)告的國(guó)際(Savige,vanderWoude,Wiiketal.,陽(yáng)最優(yōu)檢

最低檢結(jié)IIF檢測(cè)IIF是檢測(cè)ANCA的經(jīng)典方cC和pCA的參考方法或標(biāo)準(zhǔn)方法測(cè)定的是總CANCA篩查免疫熒粒細(xì)胞(乙醇固定 猴粒細(xì)胞(固定 HEp-粒細(xì)胞(乙醇固定 猴粒細(xì)胞 固定 HEp-2細(xì)pANCA(抗性粒細(xì)胞(乙醇固定 猴粒細(xì)胞 固定 HEp-2細(xì)pANCA(敏感粒細(xì)胞(乙醇固定 猴粒細(xì)胞 固定 HEp-2細(xì)ANA+粒細(xì)粒細(xì)胞(乙醇固定HEp-2粒細(xì)胞 固定

粒細(xì)胞 固定ANA猴 猴ANA+pANCA（抗性中性粒細(xì)胞(乙醇固定 猴中性粒細(xì)胞(固定 HEp-PR3(純化靶抗原 MPO(純化靶抗原pANCA（抗性中性粒細(xì)胞(乙醇固定 猴中性粒細(xì)胞 固定 HEp-2細(xì) 中性粒細(xì)胞(乙醇固定 猴中性粒細(xì)胞 固定 HEp-2細(xì) TestCaptureELISABCDEFGHIJKProf.Gross,BadBramstedtSS1010Csernok,Grossetal.,Rheumatol41:1313捕獲法抗PR3ELISA具有最高的敏感度:抗PR3抗體檢測(cè)方法學(xué)革歐蒙Anti-PR3捕獲法敏感度和SerumnPositiveAnti-PR3PositiveAnti-PR3CaptureBlood敏感度提高蛋白酶3在粒細(xì)胞的修(basedonArthritisRes.2000;2(4):重組表達(dá)PR3(rPR3)在HEK293細(xì)胞中的修basedonKidneyInt.2003Feb;63(2):756-NewProductAnti-PR3hn-hrAnti-PR3ELISAIIFTnCaptureELISAhn-hrELISAAAV,renalAAV,AAV,nCaptureELISAhn-hrELISAVasculitis020030Sj?gren‘s251090Healthy152Sumover33 ANCA譜 ANCA檢測(cè)注意事ANCAANA對(duì)IIF檢測(cè)ANCA的影ANCAANCA檢測(cè)方法的合理選對(duì)于不同的ANCA相關(guān)疾病，臨床常規(guī)檢測(cè)的方法及程序存在 單獨(dú)使用IIF法或特異性ELISA法是不完善的，應(yīng)提倡兩種方法聯(lián)合使用，可提高ANCA臨床應(yīng)用價(jià)值 對(duì)于懷疑性小血管炎患者提倡應(yīng)用IIF法和特異性ELISA法同時(shí)檢測(cè)，約5%IIF法ELISA法+ 對(duì)于懷疑IBDAiLD患者可只選用IIF法，檢測(cè)結(jié) 對(duì)于懷疑CTD伴有血管炎癥狀的患者，因此類患者與性小血管炎很難鑒別，常規(guī)檢測(cè)ANCA，檢測(cè)時(shí)應(yīng)特別注意排除ANA的干擾ANA對(duì)IIF法檢測(cè)ANCA的影 應(yīng)用II法檢測(cè)SLE中的ANCA，國(guó)內(nèi)外的陽(yáng)性率從16%到69%，差異很大，主要為ACA這些研究大部分僅采用乙醇固定抗原片檢測(cè)，ANAANCA檢測(cè)干擾可能我們檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，SLE中單獨(dú)采用乙醇固定抗原片檢測(cè)ANCA，由于ANA干擾可產(chǎn)生3.2%的假陽(yáng)性結(jié)果，主要為均質(zhì)型的ANA（占.%）IIF法檢測(cè)ANCA提倡應(yīng)用組合抗原片（固定片、乙醇固定片、Hep-2細(xì)胞片等），綜和判斷結(jié)果，避免ANA干擾，提高ANCA臨床應(yīng)用價(jià)值A(chǔ)NCA的定量或半定量檢抗及M抗體滴度與病情活動(dòng)一致，在小血管炎患者，常被作為判斷療效、估計(jì)復(fù)發(fā)的指C患者等非血管炎患者，可偶見(jiàn)抗價(jià)較低，而高滴度的抗抗體見(jiàn)于性小臨床常規(guī)檢測(cè)ANC應(yīng)報(bào)告定量或半定量檢測(cè)結(jié)果。法：將作倍比稀釋后（:01:100），再進(jìn)行檢測(cè)抗體滴度ELISA法：應(yīng)選擇可定量或相對(duì)定