體液電解質(zhì)與微量元素檢驗(yàn)

體液電解質(zhì)與微量元素檢驗(yàn)第1頁/共132頁第十一章體液電解質(zhì)和微量元素檢驗(yàn)第2頁/共132頁11.掌握電解質(zhì)、微量元素的概念與生理功能，常見電解質(zhì)與微量元素檢測的方法、原理及臨床意義。2熟悉電解質(zhì)的代謝與調(diào)節(jié)、水鹽代謝紊亂機(jī)制以及人體內(nèi)必需的微量元素。

了解有害微量元素對人體的毒性作用。3學(xué)習(xí)目標(biāo)4能熟練進(jìn)行體液電解質(zhì)與微量元素的實(shí)驗(yàn)室檢測，并具有合理解釋實(shí)驗(yàn)結(jié)果的能力。第3頁/共132頁第一節(jié)鈉、鉀、氯代謝及其檢測第4頁/共132頁體液、電解質(zhì)的定義體液：是指機(jī)體內(nèi)覆蓋的液體，包括水和溶解于其中的無機(jī)鹽及一些有機(jī)物。電解質(zhì)：以體液形式存在的水都含有濃度不等的無機(jī)鹽成分，這些無機(jī)鹽和可溶性蛋白質(zhì)常以離子形式存在，稱為電解質(zhì)。

第5頁/共132頁、體液中水、電解質(zhì)分布及其功用1、分布成人體液約占體重的60%。細(xì)胞內(nèi)液（40%）以細(xì)胞膜為界血漿（5%）細(xì)胞外液（20%）細(xì)胞間液（15%）腦脊液淋巴液消化液等（一）體液電解質(zhì)的含量與分布特點(diǎn)第6頁/共132頁細(xì)胞外液陽離子：Na+等陰離子：Cl-、HCO3-等細(xì)胞內(nèi)液陽離子:K+、Mg2+等陰離子：HPO42-、蛋白質(zhì)等第7頁/共132頁2、分布特點(diǎn)：⑴血漿與細(xì)胞間液的大部分電解質(zhì)含量基本接近，但pr-不同，血漿的明顯高于細(xì)胞間液，這一差異對于維持血漿膠體滲透壓及血漿與細(xì)胞間液之間水的交換具有重要意義；⑵細(xì)胞內(nèi)液電解質(zhì)總量大于細(xì)胞外液，但細(xì)胞內(nèi)、外滲透壓基本相等，這是因?yàn)榧?xì)胞內(nèi)液二價(jià)離子、pr-多，但這些電解質(zhì)產(chǎn)生的滲透壓較小。第8頁/共132頁（二）體液電解質(zhì)的生理功用1、維持細(xì)胞的滲透壓及容量平衡；

2、可形成緩沖體系，對體液中的酸、堿起緩沖作用，在維護(hù)體液的酸堿平衡中起重要作用。如：HCO3-/H2CO3

、HPO4-/H2PO42-

、蛋白質(zhì)鹽/蛋白質(zhì)；3、維持神經(jīng)肌肉和心肌的興奮性；第9頁/共132頁體液中的Na+、K+、Ca2+、Mg2+等均可影響神經(jīng)肌肉的興奮性。神經(jīng)肌肉的興奮性∝離子濃度對心肌興奮性也有一定的影響，它們的關(guān)系是：心肌興奮性∝第10頁/共132頁4.與骨質(zhì)的代謝密切相關(guān)鈣、磷、鎂、鈉等是構(gòu)成人體骨骼和牙齒的主要組成成分，機(jī)體中99%的鈣、86%的磷、60%的鎂、40%～50%的鈉都分布在骨組織。5.其它如Ca2+作為凝血因子參與血液凝固、作為激素的“第二信使”對細(xì)胞內(nèi)代謝具有重要的調(diào)節(jié)作用、是許多酶（脂肪酶、ATP酶等）的激活劑等；磷參與體內(nèi)核酸、核苷酸、磷脂、磷蛋白等重要生物分子的組成、參與高能磷酸化合物的合成與多種磷酸化的中間產(chǎn)物的生成等；Mg2+廣泛參與人體物質(zhì)代謝中許多酶促反應(yīng)。第11頁/共132頁二、鈉、鉀、氯的代謝及平衡紊亂1、鈉、氯代謝：（一）鈉、氯代謝及平衡紊亂

正常成人鈉、氯的來源主要是食物中的NaCl，每日需要量約4.5-9g。60Kg重的成年人體內(nèi)含Na+總量約60g左右，其中約50%存在于細(xì)胞外液，血清鈉為135-145mmol/L，另有40%-45%存在于骨骼中。細(xì)胞內(nèi)液中含鈉量較少，約占總量的5%-10%，且主要存在于肌細(xì)胞中。氯也主要存在于細(xì)胞外液，血清中氯含量為96-105mmol/L。第12頁/共132頁

Na+和Cl-的排泄主要通過腎臟，少量由汗液排出。腎臟對Na+的排泄有嚴(yán)格的調(diào)節(jié)作用，尿中排出Na+量隨攝入Na+量的多少而增減，這對于維持體內(nèi)Na+含量的恒定有重要意義。

排泄特點(diǎn)：多吃多排、少吃少排、不吃不排。吸收與排泄第13頁/共132頁2、鈉、氯與體液平衡紊亂體液平衡主要由體液中水和電解質(zhì)的含量和比例決定。

脫水：人體體液丟失造成細(xì)胞外液的減少。

水腫：當(dāng)機(jī)體攝入水過多或排出減少，使體液中水增多，也稱為水中毒。

根據(jù)失水和失Na+的比例不同，可將脫水分為:高滲性脫水：丟水大于丟鈉（大量出汗）等滲性脫水：水鈉等比例丟失（補(bǔ)充等滲鹽水可緩解）低滲性脫水：丟鈉大于丟水(劇烈嘔吐，腹瀉，排鈉利尿劑，需及時(shí)補(bǔ)充NaCl)第14頁/共132頁（二）鉀的代謝及其平衡紊亂1、鉀的代謝

人體K+主要來自食物。蔬菜、果品、肉類均含有豐富的K+。成人每日約需K+2--3g，一個(gè)60kg重的成人體內(nèi)K+總量120g左右，其中98%存在于細(xì)胞內(nèi)液，僅有2%存在于細(xì)胞外液。因而血清K+濃度很低，僅為3.5--5.5mmol/L，而細(xì)胞內(nèi)液中K+濃度為150mmol/L左右。第15頁/共132頁吸收與排泄

食物中所含的鉀90%在消化道以離子的形式吸收。由于食物中K+含量很豐富，很少出現(xiàn)K+的缺乏。K+的排泄主要通過腎臟隨尿排出。腎臟排K+量可根據(jù)K+的攝入量和其它排出途徑的排泄情況而變化，但對K+的控制能力不如保Na+能力強(qiáng)。

排泄特點(diǎn)：多吃多排、少吃少排、不吃也排。第16頁/共132頁2.鉀代謝平衡紊亂⑴胰島素對K+的分布有明顯的調(diào)節(jié)作用

胰島素通過鈉鉀泵將K+轉(zhuǎn)入細(xì)胞內(nèi)，可有效防止飯后大量K+攝入導(dǎo)致高鉀血癥。臨床上對高血鉀（hyperkalimia）病人，常用靜脈補(bǔ)充胰島素和葡萄糖，促進(jìn)血K+進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，從而使血K+降低。，胰島素不足患者，容易出現(xiàn)高鉀血癥。第17頁/共132頁⑵物質(zhì)代謝對K+分布的影響

引起低血鉀：

合成糖原

合成蛋白質(zhì)

組織生長、創(chuàng)傷修復(fù)，蛋白質(zhì)的合成代謝加強(qiáng)，K+進(jìn)入細(xì)胞增多；

引起高血鉀：

糖原與蛋白質(zhì)的分解釋放等量的K+到細(xì)胞外；嚴(yán)重創(chuàng)傷、感染、缺氧及溶血，蛋白質(zhì)分解代謝增強(qiáng)，從細(xì)胞內(nèi)向細(xì)胞外轉(zhuǎn)移。

第18頁/共132頁(3)酸堿平衡與K+的分布有密切的關(guān)系

酸中毒高血鉀：H+-K+交換，腎小管上皮細(xì)胞分泌H+ 加強(qiáng)，分泌K+減弱堿中毒低血鉀第19頁/共132頁三、鈉、鉀、氯的檢測（一）標(biāo)本的采集和處理

血清、肝素化的抗凝全血、尿液和其它體液均可作為鈉、鉀測定的標(biāo)本。血漿鉀比血清鉀低0.1—0.2mmol/L(凝血過程中PLT釋放少量K+)避免使用含鉀鈉的抗凝劑，若使用ISE法或比色法測定，則不能使用肝素銨，以免造成假性升高。避免溶血(細(xì)胞內(nèi)外鉀離子差距40倍)尿標(biāo)本注意防腐。第20頁/共132頁火焰光度法（FES法）

（參考方法）檢測方法

酶法離子選擇電極法（ISE法）（二）鈉、鉀的檢測

第21頁/共132頁

火焰的熱能使基態(tài)原子被激發(fā)，激發(fā)態(tài)的原子不穩(wěn)定，立即發(fā)射出特定波長的光譜線，并迅速回到基態(tài)。發(fā)射光譜線的強(qiáng)弱與樣品中鈉、鉀的濃度成正比。鈉的特征譜線為589nm（黃色），鉀的特征譜線為766nm（深紅色）1、火焰光度法（FES法）第22頁/共132頁定量方法：

外標(biāo)法：用不同濃度的鈉、鉀標(biāo)準(zhǔn)液制成標(biāo)準(zhǔn)曲線，然后對血、尿標(biāo)本進(jìn)行測定，并從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得鈉、鉀的濃度。

內(nèi)標(biāo)法：內(nèi)標(biāo)法是在標(biāo)本稀釋液中加入濃度恒定的鋰或銫，同時(shí)測定鈉、鉀和鋰（銫）濃度。根據(jù)鈉、鉀的電信號和鋰（銫）的電信號作為定量參數(shù)進(jìn)行鈉、鉀含量的計(jì)算。

內(nèi)標(biāo)法標(biāo)本稀釋度大，鈉、鉀測定與標(biāo)準(zhǔn)元素鋰（銫）的測定同時(shí)進(jìn)行，可減少由于霧化速度、火焰溫度波動所引起的誤差，其準(zhǔn)確性和精密度均較外標(biāo)法好，多數(shù)實(shí)驗(yàn)室采用內(nèi)標(biāo)法。被推薦為鈉、鉀測定的參考方法。第23頁/共132頁2．離子選擇電極法

是當(dāng)今定量測定鈉、鉀濃度的最常用的方法，通常選用對Na+或K+敏感的玻璃膜電極或用纈氨霉素膜制成的K+電極，Na+電極離子交換膜的主要成分是硅酸鋰

。定量方法：

直接電位法間接電位法第24頁/共132頁3．酶法

⑴Na+的測定鄰-硝基酚-β-D-半乳糖苷(ONPG)在鈉-依賴性β-半乳糖苷酶水解下生成鄰-硝基酚和半乳糖，鄰-硝基酚的生成量與Na+濃度呈正比。鄰-硝基酚在堿性條件下呈黃色，可在405nm處測定吸光度的升高速率，即可計(jì)算Na+的濃度。第25頁/共132頁⑵K+的測定

磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)與二磷酸腺苷(ADP)在鉀-依賴性丙酮酸激酶(PK)催化下，生成丙酮酸和三磷酸腺苷（ATP），丙酮酸和NADH在乳酸脫氫酶（LDH）催化下，生成乳酸和NAD+。反應(yīng)中NADH的消耗量與樣品中K+濃度呈成比，故在340nm處監(jiān)測吸光度下降速率，即可計(jì)算K+的含量。

K+、PKPEP+ADP丙酮酸+ATPLDH

丙酮酸+NADH+H+

乳酸+NAD+第26頁/共132頁

應(yīng)用鉀-依賴性丙酮酸激酶。采用掩蔽劑掩蔽Na+

，可使血清中Na+降低55mmol/L，使K+:Na+選擇性提高至600:1。用GLDH消除內(nèi)源性NH4+的正干擾，利用K+對丙酮酸激酶的激活作用來測定K+的濃度。

第27頁/共132頁【參考范圍】血清鈉 135～145mmol/L血清鉀 3.5～5.5mmol/L第28頁/共132頁【臨床意義】1.鈉

血清鈉增高：血清鈉濃度超過145mol/L為高鈉血癥，臨床上常見于腎上腺皮質(zhì)功能亢進(jìn)、嚴(yán)重脫水、ADH分泌不足等。

血清鈉降低：血清鈉濃度低于135mol/L為低鈉血癥，臨床上常見于胃腸道失鈉（嘔吐、腹瀉、引流等）、尿鈉排出增多（嚴(yán)重腎盂腎炎、腎小管嚴(yán)重?fù)p害等）、皮膚失鈉（大量出汗、大面積燒傷和創(chuàng)傷等）、抗利尿激素（ADH）過多（腎病綜合征、肝硬化腹水）等。第29頁/共132頁（2）血清鉀降低：常見于嚴(yán)重腹瀉、嘔吐、腎上腺皮質(zhì)功能亢進(jìn)、服用利尿劑、胰島素的應(yīng)用、家族性周期性麻痹發(fā)作時(shí)、鋇鹽與棉籽油中毒等。低血鉀影響心肌功能，表現(xiàn)為室上性心動過速，心傳到阻滯，室性期外收縮和室性心動過速，嚴(yán)重者心跳停止于收縮期。第30頁/共132頁2.鉀（1）血清鉀增高：常見于腎上腺皮質(zhì)功能減退癥、急性或慢性腎功能衰竭、休克、組織擠壓傷、重度溶血、口服或注射含鉀溶液過多等。高血鉀癥主要是神經(jīng)肌肉癥狀，如肌肉酸痛，蒼白，肢體濕冷等一系列類似缺血的現(xiàn)象，神經(jīng)與肌肉連接處興奮性抑制，可發(fā)生心內(nèi)傳到阻滯，出現(xiàn)心跳減慢，心率不齊，循環(huán)功能衰竭，甚至纖維性顫動，最后心跳停止于舒張期。第31頁/共132頁

庫侖電量分析法檢測方法（二）氯的檢測

硫氰酸汞比色法離子選擇電極法（ISE法）

硝酸汞滴定法第32頁/共132頁

ISE法是目前測定Cl-最好的、也是使用最多的方法。氯電極是由AgCl、FeCl3-HgS為膜性材料制成的固體膜電極，對樣本中的Cl-有特殊響應(yīng)。氯電極總是與鈉、鉀電極配套使用，測定氯所需的試劑和定標(biāo)液也是與鈉、鉀電極應(yīng)用的緩沖液和校準(zhǔn)液組合在一起。ISE法簡便、快速、準(zhǔn)確、精密。1.ISE法第33頁/共132頁2．硫氰酸汞比色法

利用硫氰酸汞與標(biāo)本中氯離子作用，生成不易解離的氯化汞和與Cl-等當(dāng)量的硫氰酸根（SCN-），SCN-與試劑Fe3+反應(yīng)生成橙紅色的硫氰酸鐵，在460nm波長處比色，可定量測出標(biāo)品中的Cl-的量。Hg（SCN）2+2Cl-HgCl2+2SCN-3SCN-+Fe3+Fe(SCN)3(橙紅色)第34頁/共132頁【參考范圍】血清（漿）氯化物96～108mmol/L腦脊液氯化物120～132mmol/L第35頁/共132頁【臨床意義】1.血清（漿）氯化物增高：臨床上高氯血癥常見于高鈉血癥、代謝性酸中毒、失水大于失鹽等。2.血清（漿）氯化物降低：臨床上低氯血癥常多見，常見原因有氯化鈉的異常丟失或攝入減少（嚴(yán)重嘔吐、腹瀉，胃液、胰液及膽汁的丟失等）、阿狄森病、抗利尿激素分泌增多的稀釋性低鈉、代謝性堿中毒等。第36頁/共132頁第二節(jié)鈣、磷、鎂的代謝與檢測第37頁/共132頁一、鈣、磷、鎂的代謝及調(diào)節(jié)(一)鈣、磷、鎂代謝1.鈣代謝

正常人體內(nèi)平均含鈣量為1～1.25kg，其中99%的鈣分布在骨骼和牙齒中，其余鈣分布于體液和其他組織中。正常人血鈣為2.1～2.7mmol/L，離子鈣為1.15～1.42mmol/L。第38頁/共132頁可擴(kuò)散鈣（60%）:可透過毛細(xì)血管壁，大部分為直接發(fā)揮生理功能的游離鈣，其濃度變化會影響機(jī)體組織細(xì)胞代謝和生理功能非擴(kuò)散鈣（40%）：與血漿蛋白結(jié)合的鈣，不易透過鈣離子與結(jié)合鈣之間可相互轉(zhuǎn)換第39頁/共132頁血漿中[Ca2+]、[H+]、[HCO3-]的關(guān)系可用下式表示：

血漿蛋白與鈣的結(jié)合受到pH影響。pH降低時(shí)，血漿蛋白質(zhì)帶負(fù)電荷少，結(jié)合的游離鈣釋放出來，使血鈣增高。pH升高，血漿蛋白質(zhì)帶負(fù)電荷增多，游離鈣結(jié)合增加，血鈣降低。因此，堿中毒時(shí)，總鈣量不減低，患者出現(xiàn)抽搐，是由于游離鈣減低。第40頁/共132頁影響食物中鈣吸收的因素：活性維生素D3年齡增高而減低鈣鹽在腸道的溶解狀態(tài)（pH）食物中的植酸、草酸與鈣結(jié)合食物中鈣磷比例2：1最佳第41頁/共132頁鈣的排泄途徑排泄途經(jīng)腸道：食物中未吸收的鈣和腸道分泌的鈣，占人體每日攝入鈣總量的80%。

腎臟：經(jīng)腎排泄的鈣占體內(nèi)總排鈣量的20%，但尿中鈣的排泄量隨血液中鈣濃度的變化而同步增減，在調(diào)節(jié)體內(nèi)鈣平衡方面發(fā)揮主要作用。第42頁/共132頁2、磷代謝含量：正常成人含磷600g左右。每kg無脂肪的組織約含磷12g。

分布：體內(nèi)磷的86%分布于骨，其余分布于全身各組織及體液中。血磷：指血漿中無機(jī)磷酸鹽所含的磷，正常人僅有0.6～1.6mmol/L，兒童稍高。

血磷濃度沒有血鈣穩(wěn)定，它不但隨年齡的增長而變化，

在同一天也會有較大的生理變化。第43頁/共132頁影響食物中磷吸收的因素：兒童生長階段P增高，成人進(jìn)食，攝糖，注射胰島素，腎上腺素時(shí)，因細(xì)胞利用增加，血磷降低。食物中有過多的鈣、鎂離子存在時(shí)，容易與磷酸結(jié)合，生成不溶性磷酸鹽影響磷的吸收。排泄：

主要是通過腎臟排泄，排泄量與血液中磷酸鹽濃度呈正比。對磷排泄的調(diào)節(jié)是通過腎小管的重吸收來完成的。第44頁/共132頁3、鎂代謝含量:

血漿中的鎂濃度約0.67～1.23mmol/L約占體重的0.03%正常成人含鎂約20～28g.分布：骨組織（60%）>骨骼肌(20%～30%)>其它組織(10%)中；從體液中鎂的分布看，細(xì)胞內(nèi)液的鎂的含量約占總量的39%，是細(xì)胞內(nèi)僅次于鉀的主要陽離子。僅有約1%的鎂存在于細(xì)胞外液中。

第45頁/共132頁鎂的生理功能

鎂是參與正常生命活動及代謝過程必需的元素。1．作為酶的輔助因子2．對神經(jīng)肌肉興奮性的作用第46頁/共132頁吸收部位：小腸上段吸收，吸收率只有30～40%。

天然食物中很豐富，很少發(fā)生鎂缺乏。排泄：

腎是體內(nèi)鎂的主要排泄途徑，也是血漿鎂水平調(diào)節(jié)的主要器官。

第47頁/共132頁（二）鈣、磷、鎂代謝的調(diào)節(jié)主要通過神經(jīng)體液進(jìn)行調(diào)節(jié)1．甲狀旁腺素（PTH）:PTH的靶組織是腎臟、骨和小腸

2．降鈣素：多肽類激素

3．1，25-(OH)2-D3:

是維生素D在體內(nèi)的活性形式，是維生素D在肝腎經(jīng)羥化作用轉(zhuǎn)變而成的。它的靶器官是小腸、骨和腎。第48頁/共132頁甲狀旁腺素（PTH）甲狀旁腺主細(xì)胞合成并分泌的一種蛋白質(zhì)激素，合成與分泌受細(xì)胞外液Ca2+濃度調(diào)節(jié)。血鈣降低促進(jìn)PTH合成與分泌，增高抑制其分泌。PTH靶器官是腎臟，骨骼，小腸對腎臟作用最快，促進(jìn)腎小管對Ca2+吸收，抑制P吸收，使尿鈣減少，尿磷增加。調(diào)節(jié)作用：1.促進(jìn)破骨細(xì)胞溶解骨組織。2.促進(jìn)腎小管對Ca2+吸收，抑制P吸收，使尿鈣減少，尿磷增加。3.促進(jìn)1，25-(OH)2-D3的合成，從而促進(jìn)對鈣磷的吸收PTH作用：增加細(xì)胞外鈣的含量，同時(shí)對細(xì)胞外磷也有調(diào)節(jié)。第49頁/共132頁降鈣素（CT）CT由甲狀腺濾泡旁細(xì)胞合成，分泌的單鏈多肽激素。作用與PTH相反。主要抑制破骨細(xì)胞生成，減少骨鹽溶解，促進(jìn)破骨細(xì)胞轉(zhuǎn)化為成骨細(xì)胞，增強(qiáng)成骨作用，降低血鈣和血磷。還可以抑制腎臟近曲小管對鈣磷重吸收，使尿鈣，尿磷排除增加，同時(shí)抑制活性維生素D3的生成，降低腸道鈣的吸收和骨鈣的釋放，而從降低血鈣和血磷。第50頁/共132頁1，25-(OH)2-D3

活性維生素D3:促進(jìn)腸粘膜對鈣磷的吸收促進(jìn)溶骨作用，與PTH有協(xié)同作用促進(jìn)近曲小管對鈣磷重吸收第51頁/共132頁(三)鈣、磷、鎂代謝紊亂高鈣血癥：多見于惡性腫瘤，原發(fā)性甲狀旁腺功能亢進(jìn)低鈣血癥：VD缺乏，紫外線照射不足，消化系統(tǒng)疾病，佝僂病，腎功能不全，急性胰腺炎高磷血癥：急性慢性腎功能不全，甲甲亢，甲狀旁腺功能減低，肢端肥大癥，VD中毒低磷血癥：甲狀旁腺功能亢進(jìn)，VD缺乏，腎小管酸中毒高鎂血癥：尿毒癥低鎂血癥：內(nèi)分泌疾病，神經(jīng)系統(tǒng)疾病等第52頁/共132頁二、鈣、磷、鎂的檢測（一）血清鈣和尿鈣的檢測1.血清鈣的檢測血清鈣檢測包括離子（游離）鈣與總鈣的測定，離子鈣比總鈣更有臨床價(jià)值，但在反映機(jī)體內(nèi)鈣總體代謝狀況上，還是不能完全代替總鈣的檢測。第53頁/共132頁⑴血清離子鈣（Ica2+）的測定

ISE法是測定Ica2+最常用的方法，也是Ica2+測定的參考方法。測定原理：離子鈣分析儀通常采用比較法來測定樣品溶液中離子鈣和pH，即先測量兩個(gè)已知標(biāo)準(zhǔn)液中的離子鈣和pH的電極電位，在儀器程序內(nèi)建立一條斜率曲線，然后測量樣品溶液中離子鈣和pH的電極電位，從已建立的斜率曲線上求出樣品溶液中離子鈣濃度和pH，并計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)化離子鈣（nCa2+）濃度，直接在儀器上顯示出結(jié)果或打印出分析報(bào)告。第54頁/共132頁血液中離子鈣受多種因素影響，特別是標(biāo)本pH的改變對Ca2+影響較大，pH降低能使Ca2+增加，反之減少。有的離子鈣分析儀在測定血清離子鈣濃度的同時(shí)，可測量血清pH，再計(jì)算出pH7.4時(shí)的標(biāo)準(zhǔn)化離子鈣濃度。第55頁/共132頁【參考區(qū)間】1.10～1.34mmol/L【臨床意義】1、血清ICa2+增高：見于甲狀旁腺功能亢進(jìn)、代謝性酸中毒、腫瘤、維生素D過多癥等。2、血清ICa2+降低：見于原發(fā)性和繼發(fā)性甲狀旁腺功能減退、慢性腎衰竭、腎移植或進(jìn)行血液透析的患者、維生素D缺乏癥、呼吸性或代謝性堿中毒、新生兒低鈣血癥等。第56頁/共132頁⑵血清總鈣測定

測定方法主要有滴定法、原子吸收分光光度法、分光光度法、同位素稀釋質(zhì)譜法、酶法等。

決定性方法：ID-MS

參考方法：原子吸收分光光度法常規(guī)方法：分光光度法（O-CPC法、MTB法）第57頁/共132頁鄰甲酚酞絡(luò)合酮（OCPC）法

OCPC是一種金屬絡(luò)合指示劑和酸堿指示劑，在堿性溶液中可與鈣離子螯合生成紫紅色螯合物，與同樣處理的鈣標(biāo)準(zhǔn)液比色，可求得血清鈣的含量。

pH118-羥基喹啉

Ca2+

+OCPC紫紅色螯合物

第58頁/共132頁MTB法

MTB是一種酸堿指示劑和金屬絡(luò)合劑，在堿性溶液中與鈣離子螯合后，反應(yīng)從淡綠色變成藍(lán)色，在612nm處與同樣處理的鈣標(biāo)準(zhǔn)液比色，即可求得血清總鈣含量。

PH10-13、8-羥喹啉Ca2++MTB淡綠色變成藍(lán)色第59頁/共132頁【參考區(qū)間】OCPC法：成人：2.03～2.54mmol/L

兒童：2.25～2.67mmol/LMTB法：成人：2.08～2.60mmol/L

兒童：2.23～2.80mmol/L第60頁/共132頁【臨床意義】血清鈣增高常見于甲狀旁腺功能亢進(jìn)癥、維生素D過多癥、多發(fā)性骨髓瘤、結(jié)節(jié)病引起腸道過量吸收而使血鈣增高。血清鈣降低可引起神經(jīng)肌肉應(yīng)激性增強(qiáng)而使手足搐搦，主要見于：①甲狀旁腺功能減退；②慢性腎炎尿毒癥；③佝僂病與軟骨??；④吸收不良性低血鈣；⑤大量輸入檸檬酸鹽抗凝后。第61頁/共132頁2.尿鈣的檢測

尿鈣的測定方法、原理及試劑與血鈣測定相同。一般采用OCPC法或MTB法。在收集尿標(biāo)本時(shí)，每100ml尿液應(yīng)加入10ml濃HCL，或調(diào)節(jié)尿樣的pH＜2.0，以溶解尿液中的鈣鹽，否則測定結(jié)果可能偏低。第62頁/共132頁【參考區(qū)間】

尿鈣的排泄量隨飲食不同有較大幅度的變化。低鈣飲食時(shí)尿鈣3.75mmol/24h；一般鈣飲食時(shí)尿鈣＜6.75mmol/24h；高鈣飲食時(shí)尿鈣可達(dá)10mmol/24h。第63頁/共132頁【臨床意義】1、尿鈣增高主要見于甲狀旁腺功能亢進(jìn)癥、維生素D中毒、維生素A中毒、腎上腺皮質(zhì)功能亢進(jìn)癥、肢端肥大癥、肝豆?fàn)詈俗冃浴⑻匕l(fā)性高尿鈣癥等。2、尿鈣降低主要見于甲狀旁腺功能減退、維生素D缺乏、乳糜瀉、尿毒癥晚期、阻塞性黃疸等。第64頁/共132頁（二）血清無機(jī)磷和尿磷的檢測人體內(nèi)的磷元素尚不能直接測定。通常測定的磷是指血漿中無機(jī)磷酸鹽（H2PO4-、HPO4

2-）所含的磷。測定血清磷的決定性方法是放射性核素稀釋質(zhì)譜法（ID-MS法），WHO推薦的常規(guī)方法是比色法，我國衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心（1997年）推薦的常規(guī)方法是以硫酸亞鐵或?qū)装被恿蛩猁}（米吐爾）做還原劑的還原鉬藍(lán)法，實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)多采用紫外分光光度法。1.血清磷的檢測第65頁/共132頁⑴紫外分光光度法原理：血清中無機(jī)磷在酸性溶液中與鉬酸銨反應(yīng)生成的磷鉬酸銨復(fù)合物，在340nm或325nm處的吸光度值與無機(jī)磷含量成正比，與同樣處理的標(biāo)準(zhǔn)品比較，即可計(jì)算出標(biāo)本中無機(jī)磷的含量。評價(jià)：本法反應(yīng)快速，操作簡便，可用于自動化生化分析測定。但黃疸、溶血、高脂血清在340nm波長處有吸收，必須做標(biāo)本空白對照。第66頁/共132頁⑵硫酸亞鐵磷鉬藍(lán)比色法

還原劑磷酸鹽+鉬酸磷鉬酸鉬藍(lán)

(無色)（藍(lán)色）還原劑有：硫酸亞鐵銨、米吐爾、鄰苯二胺、氯化亞錫等。無蛋白血濾液法：三氯乙酸沉淀蛋白質(zhì)。不除蛋白法：表面活性劑TritonX—100。第67頁/共132頁⑶米吐爾直接顯色法

無機(jī)磷在酸性溶液中與鉬酸銨反應(yīng)生成磷鉬酸銨復(fù)合物，用還原劑對甲氨基酚硫酸鹽（米吐爾）還原生成鉬藍(lán)。在試劑中加入吐溫-80以抑制蛋白質(zhì)的干擾。第68頁/共132頁（4）酶法

嘌呤核苷磷酸化酶（PNP）和黃嘌呤氧化酶（XOD）偶聯(lián)并以過氧化物酶（POD）為指示劑的方法，可用于常規(guī)標(biāo)本的自動分析。

PNPHPO42-/H2PO4-+次黃嘌呤核苷核苷-1-磷酸+次黃嘌呤

XOD次黃嘌呤+2O2+2H2O尿酸+2H2O2POD2H2O2+4-AAP+EMAE醌亞胺

第69頁/共132頁【參考區(qū)間】紫外分光光度法：0.9～1.34mmol/L硫酸亞鐵磷鉬藍(lán)比色法：健康成年人：0.96～1.62mmol/L

兒童：1.45～2.10mmol/L第70頁/共132頁【臨床意義】血清無機(jī)磷增高：①甲狀旁腺功能減退癥；②慢性腎炎晚期；③維生素D過多；④多發(fā)性骨髓瘤及骨折愈合期。血清無機(jī)磷降低：①甲狀旁腺功能亢進(jìn)癥；②佝僂病或軟骨病伴有繼發(fā)性甲狀旁腺增生；③連續(xù)靜脈注入葡萄糖并同時(shí)注入胰島素或胰腺瘤伴有胰島素過多癥，；④腎小管重吸收磷功能發(fā)生障礙。第71頁/共132頁2.尿磷的檢測尿磷的檢測方法與血磷相同，取24小時(shí)混合尿，并在尿樣收集容器中預(yù)先加入濃度為6mmol/L的HCl120ml，以防堿性尿磷酸鹽沉淀析出，分析之前應(yīng)對尿液進(jìn)行稀釋、過濾。【參考區(qū)間】硫酸亞鐵磷鉬藍(lán)比色法：16.14～41.98mmol/24h【臨床意義】從尿中排出的磷為無機(jī)磷，主要是HPO42-及H2PO4-的混合物。尿磷排泄增多見于甲狀旁腺功能減退、甲狀旁腺切除、腎衰竭、伴有酸中毒的腎炎等患者。第72頁/共132頁（三）血清鎂和尿鎂的檢測參考方法：原子吸收分光光度法常用方法：分光光度法（MTB、Calmagite法）分光光度法準(zhǔn)確度和精密度較好，且適宜自動化分析，在臨床實(shí)驗(yàn)室廣泛使用。最近又發(fā)展了酶學(xué)方法用于血清鎂的測定。1、血清鎂的測定第73頁/共132頁⑴原子吸收分光光度法原理：鎂的空心陰極燈（鎂燈）發(fā)射特征性的285.2nm光譜，在通過火焰時(shí)被待測標(biāo)本中處于基態(tài)的鎂原子蒸汽所吸收，其光吸收的量與火焰中鎂離子的濃度成正比。在相同條件下，本法可對同一份標(biāo)本同時(shí)進(jìn)行鈣、鎂的測定。因其特異性強(qiáng)，靈敏度和準(zhǔn)確性高，已成為鎂測定的參考方法。特別適宜測定生物體液中鎂的濃度，在臨床上被廣泛使用。第74頁/共132頁⑵MTB法原理：在堿性條件下，MTB可與鎂絡(luò)合成藍(lán)紫色復(fù)合物，由于MTB還可與鈣絡(luò)合，故需加入特殊的鈣螯合劑乙二醇雙（β-氨基乙醚）N，N，N′，N′-四乙酸（Ethyleneglycol-bisβ-aminoethylether）-N，N，N′，N′-tetraaceticacid(簡稱EGTA)以掩蔽鈣的干擾。本法與原子吸收分光光度法相關(guān)性好，已被國家衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心推薦為測定鎂的常規(guī)方法。第75頁/共132頁⑶Calmagite染料比色法

Calmagite俗稱鈣鎂試劑。在堿性條件下，血清中鎂與Calmagite染料生成紫紅色復(fù)合物，吸收峰在520nm波長處。應(yīng)用EGTA去除Ca2+的干擾，使用表面活性劑可使蛋白質(zhì)膠體穩(wěn)定，不必去除血清蛋白質(zhì)即可直接測定。本法反應(yīng)迅速，顯色性好，適合于手工操作及大多數(shù)自動分析儀。第76頁/共132頁⑷酶法

根據(jù)Mg2+是多種酶的輔因子，現(xiàn)已建立了多種根據(jù)這些酶的活性測定離子鎂的方法，其原理是基于下列反應(yīng)：

己糖激酶葡萄糖+Mg·ATP葡萄糖-6磷酸+Mg·ADPG6PDH

葡萄糖-6-磷酸+NADP+

葡萄糖-6-磷酸內(nèi)酯+NADPH+H＋在340nm處，監(jiān)測NADPH的生成速率，即可求出血清鎂的濃度。該法有可能成為新的自動化方法，但由于試劑較貴，目前尚未廣泛使用。第77頁/共132頁【參考區(qū)間】甲基麝香草酚藍(lán)比色法：0.67~1.04mmol/LCalmagite染料比色法：0.7~1.10mmol/L原子吸收分光光度法：0.6~1.10mmol/L第78頁/共132頁【臨床意義】血清鎂增高：①腎臟疾病，如急性或慢性腎衰竭；②內(nèi)分泌疾病，如甲狀腺功能減退癥、阿狄森病和糖尿病昏迷；③多發(fā)性骨髓瘤、嚴(yán)重脫水癥等血清鎂也增高。血清鎂降低：①鎂由消化道丟失，如長期禁食、吸收不良或長期丟失胃腸液者，慢性腹瀉、吸收不良綜合征、長期吸引胃液者等；②鎂由尿路丟失，如慢性腎炎多尿期，或長期用利尿藥治療者；③內(nèi)分泌疾病，如甲狀腺功能亢進(jìn)癥、甲狀旁腺功能亢進(jìn)癥、糖尿病酸中毒、醛固酮增多癥等，以及長期使用皮質(zhì)醇激素治療者。第79頁/共132頁2.尿鎂的檢測用于檢測血鎂的方法均可尿鎂的測定。測定的尿液標(biāo)本應(yīng)當(dāng)HCl酸化至pH=1，如果有沉淀形成，可搖動、混合、酸化或加溫至60℃，以重新溶解?！緟⒖紖^(qū)間】3.00~5.0mmol/24h第80頁/共132頁【臨床意義】尿鎂排泄增多見于各種原因的多尿，包括長期服用利尿劑、原發(fā)性醛固酮增多癥、皮質(zhì)醇增多癥、腎小管性酸中毒、糖尿病治療后期、甲狀旁腺功能亢進(jìn)癥、皮質(zhì)激素治療以及腫瘤骨轉(zhuǎn)移等。尿鎂排泄減少見于長期禁食、厭食及吸收不良者。甲狀旁腺功能減退、腎上腺皮質(zhì)功能減退時(shí)也可減少。第81頁/共132頁第三節(jié)微量元素代謝與檢測第82頁/共132頁微量元素（traceelements）的定義：是指含量占體重0.01％以下，每日需要量在100㎎以下的元素。

第83頁/共132頁微量元素的分類

必需的無害的有害的第84頁/共132頁人體內(nèi)必需微量元素有：鐵（Fe）、銅（Cu）、鋅（Zn）、鉻（Cr）、鈷（Co）、鉬（Mo）、鎳（Ni）、釩（V）、硅（Si）、錫（Sn）、銫（Se）、碘（I）、氟（F）等；無害的微量元素有：鈦（Ti）、鋇（Ba）、鈮（Nb）、鋯（Zr）等；有害的微量元素有：鎘（Cd）、汞（Hg）、鉛（Pb）、鋁（Al）等。第85頁/共132頁一、微量元素對人體各種生命活動的影響1．促進(jìn)機(jī)體的生長發(fā)育2．對神經(jīng)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)和功能的影響3．內(nèi)分泌系統(tǒng)的影響4．對免疫系統(tǒng)的影響5．對心血管疾病及創(chuàng)傷的影響。6．對腫瘤發(fā)生、發(fā)展的影響。7．對胚胎及胎兒發(fā)育的影響第86頁/共132頁二、微量元素與疾病

微量元素缺乏或過多，可導(dǎo)致某些地方病的發(fā)生。如缺碘與地方性甲狀腺腫及呆小病有關(guān)；低硒與克山病和大骨節(jié)病有關(guān)。即使是必需微量元素如鐵、銅、鋅、鈷、錳、鉻等進(jìn)入機(jī)體過多也會引起急性或慢性中毒，如接觸六價(jià)鉻可引起特征鷹眼狀鉻潰瘍及鼻中隔穿孔；還有鐵中毒、鋅中毒、錳中毒等。接觸或吸收過量的有害微量元素可導(dǎo)致各種職業(yè)病。第87頁/共132頁（一）必需微量元素

在體內(nèi)分布很廣，幾乎所有的組織都含有鐵。鐵在體內(nèi)分兩類，即功能鐵和儲存鐵。功能鐵是指在體內(nèi)具有重要生理功能的鐵，包括血紅蛋白、肌紅蛋白、少量含鐵酶及運(yùn)鐵蛋白中所含的鐵；儲存鐵有分為鐵蛋白及含鐵血黃素，鐵蛋白的鐵是可以被立即動用的儲存鐵。1.鐵（iron，F(xiàn)e）第88頁/共132頁影響鐵吸收的因素①與鐵在胃腸道存在的狀態(tài)有關(guān)，只有溶解狀態(tài)的鐵才能被吸收；②酸性環(huán)境有利于鐵鹽的溶解，故胃酸可促進(jìn)鐵的吸收，而檸檬酸、氨基酸、膽汁酸等能與鐵形成不溶性鹽，使鐵的吸收受到影響；③食物的鐵多為Fe3+，而Fe3+

不如Fe2+易吸收，食物中的還原性物質(zhì)如維生素C、谷胱甘肽、半胱氨酸等，能使Fe3+還原成Fe2+

，增加鐵的吸收。第89頁/共132頁

Fe2+從小腸進(jìn)入血液后，首先在銅藍(lán)蛋白（CER）的催化下，氧化成Fe3+，然后與血漿中運(yùn)鐵蛋白結(jié)合而運(yùn)輸。鐵主要用于合成血紅素，進(jìn)而合成各種含鐵蛋白質(zhì)，如血紅蛋白、肌紅蛋白、細(xì)胞色素、過氧化氫酶等，只有少量用于合成非血紅素化合物鐵硫蛋白等，鐵廣泛參與機(jī)體的物質(zhì)代謝，并對機(jī)體發(fā)育及免疫功能產(chǎn)生影響。第90頁/共132頁2.鋅（zinc，Zn）

鋅在體內(nèi)可通過多種途徑發(fā)揮作用：①與多種酶的合成和活性有關(guān)，如DNA聚合酶、RNA聚合酶、胸腺核苷酸酶、谷氨酸脫氫酶、乳酸脫氫酶等，它們在蛋白質(zhì)、脂肪、糖和核酸代謝以及組織呼吸中都起著重要作用；②可促進(jìn)機(jī)體生長發(fā)育。鋅是調(diào)節(jié)基因表達(dá)即調(diào)節(jié)DNA復(fù)制、轉(zhuǎn)錄的DNA聚合酶的必需組成部分，因此，鋅缺乏會導(dǎo)致創(chuàng)傷組織的愈合困難、性器官發(fā)育不全或減退、生長發(fā)育不良，兒童出現(xiàn)缺鋅性侏儒癥；第91頁/共132頁③可促進(jìn)維生素A的正常代謝和生理功能。鋅參與維生素A還原酶和視黃醇結(jié)合蛋白的合成，促進(jìn)視黃醛的合成和變構(gòu)，以維持血漿維生素A的正常水平；④與巨噬細(xì)胞的釋放、白細(xì)胞的吞噬、趨化和殺菌等作用有關(guān)，故鋅缺乏可引起免疫功能障礙。第92頁/共132頁3.銅（cuprum，Cu）

銅在體內(nèi)的主要生理功能：①參與許多酶的組成，如賴氨酸氧化酶、細(xì)胞色素酶、超氧化物歧化酶、多巴胺-β-羥化酶等，對細(xì)胞內(nèi)代謝、神經(jīng)傳導(dǎo)和內(nèi)分泌功能均有重要作用；②CER促進(jìn)Fe3+還原為Fe2+，增強(qiáng)小腸對體鐵的吸收，加速血紅蛋白及鐵卟啉的合成，從而促進(jìn)幼稚紅細(xì)胞的成熟，維持正常的造血功能。第93頁/共132頁4．硒（selenium，Se）

硒的主要生理功能：①硒是體內(nèi)多種酶的組成成分，其中谷胱甘肽過氧化物酶（glutathioneperoxidase，GSH-Px）是體內(nèi)重要的含硒酶，硒的抗氧化功能與人類衰老、癌變、心血管疾病、中樞系統(tǒng)疾病的關(guān)系日益受到重視；②硒參與輔酶A和輔酶Q的合成，并可增強(qiáng)丙酮酸、α-酮戊二酸氧化系統(tǒng)的酶活性，在三羧酸循環(huán)及呼吸鏈電子傳遞中發(fā)揮重要作用；③硒具有保護(hù)視器官健全的功能。第94頁/共132頁④硒具有拮抗和降低機(jī)體內(nèi)許多重金屬的毒性作用，它與銀、鎘、汞、鉛等形成不溶性鹽，減低重金屬對機(jī)體的毒害作用；⑤硒能促進(jìn)淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體，增強(qiáng)機(jī)體對疾病的抵抗力；⑥硒參與保護(hù)細(xì)胞膜的穩(wěn)定性及正常通透性，消除自由基的毒害作用，抑制脂質(zhì)的過氧化反應(yīng)，從而保護(hù)心肌的正常結(jié)構(gòu)和功能；⑦硒能調(diào)節(jié)維生素A、維生素C、維生素E、維生素K的吸收與消耗，并能與維生素E起協(xié)同作用，加強(qiáng)維生素的抗氧化作用。第95頁/共132頁5．鉻（chromium，Cr）

鉻的主要生理功能：①增強(qiáng)胰島素的作用及調(diào)節(jié)血糖。②鉻可增加膽固醇的分解和排泄。因此缺鉻可造成胰島素生物學(xué)效應(yīng)降低，糖代謝及脂代謝紊亂，出現(xiàn)高膽固醇血癥，從而易誘發(fā)動脈粥樣硬化和冠心病。③鉻可與機(jī)體中核蛋白、蛋氨酸、絲氨酸等結(jié)合，故缺鉻可影響蛋白質(zhì)代謝及生長發(fā)育。第96頁/共132頁6．鈷（cobalt，Co）

體內(nèi)鈷主要以維生素B12的形式發(fā)揮作用，維生素B12

參與機(jī)體一碳單位代謝，影響細(xì)胞增殖和分化。因此，鈷的缺乏可導(dǎo)致葉酸利用率下降，骨髓造血功能降低，造成巨幼紅細(xì)胞性貧血。維生素B12

能促進(jìn)鐵的吸收及儲存鐵的動員，也能促進(jìn)鋅的吸收和利用。第97頁/共132頁7．錳（manganese，Mn）

錳是體內(nèi)多種酶如精氨酸酶、丙酮酸羥化酶和超氧化物歧化酶等多種酶的的組成成分，錳與多糖聚合酶和糖基轉(zhuǎn)移酶的活性有關(guān)。錳缺乏時(shí)黏多糖合成受到干擾，影響軟骨和骨骼生長，導(dǎo)致骨骼畸形。此外，錳也與造血、生殖和中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能有關(guān)。第98頁/共132頁8．氟（fluorum，F(xiàn)）氟對骨、牙的形成有重要作用，可增加骨硬度和牙齒的耐酸蝕能力。氟缺乏時(shí)易發(fā)生齲齒，氟過量常引起氟中毒而使牙齒呈斑斑釉狀。第99頁/共132頁9．碘（iodine，I）

碘主要用于甲狀腺激素T3、T4的合成。甲狀腺激素在調(diào)節(jié)機(jī)體能量的轉(zhuǎn)換和利用，維持正常生長發(fā)育和智力發(fā)育方面發(fā)揮著重要作用。甲狀腺能主動聚集碘，某些地方性甲狀腺腫與當(dāng)?shù)赝寥兰八腥钡庥嘘P(guān)。第100頁/共132頁有害的微量元素

鉛是對人體有毒性作用的重金屬，主要引起以神經(jīng)、消化、造血系統(tǒng)障礙為主的全身性疾病。鉛中毒機(jī)制中最主要的是引起卟啉代謝紊亂，使血紅蛋白合成障礙；鉛可致血管痙攣、直接作用于成熟紅細(xì)胞而引起溶血、可使大腦皮質(zhì)興奮和抑制的正常功能產(chǎn)生紊亂，從而引起一系列的神經(jīng)系統(tǒng)癥狀等。1．鉛（plumbum，Pb）第101頁/共132頁2．汞（mercury，Hg）

金屬汞及其化合物主要以蒸氣和粉塵形式經(jīng)呼吸道侵入機(jī)體，還可直接經(jīng)消化道、皮膚侵入。汞主要經(jīng)腎、腸道排出，還可由肺呼出，汗液、乳汁、唾液也可排出少量。汞對機(jī)體的毒性作用，主要是因?yàn)楣c酶的巰基（—SH）結(jié)合后，使酶的活性喪失，影響細(xì)胞的正常代謝而出現(xiàn)中毒癥狀。第102頁/共132頁3．鎘（cadmium，Cd）

鎘主要通過呼吸道、皮膚吸收，分布到全身各個(gè)器官。鎘的排泄主要通過糞便排出，其次是經(jīng)腎由尿排出，少量可隨膽汁排出。鎘化合物可抑制肝細(xì)胞線粒體氧化磷酸化過程，對各種氨基酸脫羧酶、過氧化物酶、脫氫酶等均有抑制作用，從而使組織代謝發(fā)生在障礙。鎘還可直接損傷組織細(xì)胞和血管，引起水腫、炎癥和組織損傷。第103頁/共132頁4．砷（arsenic，As）

砷及其化合物主要經(jīng)呼吸道、消化道和皮膚吸收，吸收入血后主要與血紅蛋白結(jié)合，隨血液分布到全身組織和器官。砷的毒性作用主要表現(xiàn)在：砷對細(xì)胞中的巰基（—SH）有很強(qiáng)的親和力，進(jìn)入機(jī)體的砷可與許多含巰基的酶結(jié)合，特別是易與丙酮酸氧化酶的巰基結(jié)合，使酶喪失活性，丙酮酸不能進(jìn)一步氧化，從而影響細(xì)胞的正常代謝。第104頁/共132頁三、血清鐵、銅、鋅和全血鉛的檢測

微量元素檢測的樣本主要有血液、尿液、毛發(fā)、胃液、腦脊液、唾液、精液、汗液、擔(dān)汁及肝、腎、肺、腸、腦、心、肌肉等臟器組織，樣本的采集應(yīng)遵循三大原則：針對性、適時(shí)性和代表性。在收集樣本及整個(gè)分析過程中，均需嚴(yán)格防止離子的污染。第105頁/共132頁（一）血清鐵與TIBC的檢測

血清中鐵的含量很低，均以Fe3+形式與運(yùn)鐵蛋白結(jié)合。故血清鐵測定的同時(shí)要進(jìn)行總鐵結(jié)合力（TIBC）測定。正常情況下，僅有20％~55％的運(yùn)鐵蛋白與血清鐵結(jié)合，其余的運(yùn)鐵蛋白處于不飽和狀態(tài)。當(dāng)血清蛋白全部被飽和后，其結(jié)合鐵的含量就是TIBC。第106頁/共132頁1.比色法

是臨床實(shí)驗(yàn)室測定血清鐵使用最廣的一種方法，其原理是與運(yùn)鐵蛋白結(jié)合的鐵在酸性介質(zhì)中從運(yùn)鐵蛋白中解離出來，高鐵離子（Fe3+）在還原劑的作用下被還原成亞鐵離子（Fe2+），F(xiàn)e2+與發(fā)色試劑發(fā)生絡(luò)合反應(yīng)，再進(jìn)行比色測定。常用的還原劑有：肼、維生素C、巰基乙酸或羥基胺等。常用的絡(luò)合劑有3-（2-吡啶基）-5,6-雙（苯磺酸）-1,2,4-三嗪（亞鐵嗪）、紅菲繞嗪和三吡啶基三啉（TPZ）。第107頁/共132頁亞鐵嗪比色法

H+還原劑

Fe3+-prFe2++prH+Fe2++亞鐵嗪紫紅色復(fù)合物第108頁/共132頁

應(yīng)用比色法測定TIBC時(shí)，首先在血清標(biāo)本中加入足量的高鐵化合物使運(yùn)鐵蛋白被鐵飽和，剩余的未與運(yùn)鐵蛋白集合的鐵，用碳酸鎂吸附除去，然后再按血清鐵的方法測定鐵的含量，即為TIBC。TIBC的測定第109頁/共132頁2.電化學(xué)法

原理是基于庫侖測定的原理，首先加入乙醇鹽酸溶液將鐵離子從鐵蛋白上解離下來，游離的鐵離子暴露在一個(gè)多電極傳感器的不同的特點(diǎn)電位中，這樣在Fe2+與Fe3+之間的電子轉(zhuǎn)移就產(chǎn)生了一個(gè)電流，它與鐵的濃度相關(guān)。該法樣品用量少，分析時(shí)間短，但需專門的儀器，故臨床應(yīng)用較少。第110頁/共132頁鐵飽和度

鐵飽和度=×100%第111頁/共132頁【參考區(qū)間】血清鐵（亞鐵嗪比色法）：男性：11～30μmol/L；女性：9～27μmol/L血清總鐵結(jié)合力48.3～71.6μmol/L鐵飽和度 20%～55%第112頁/共132頁【臨床意義】血清鐵增高見于：①紅細(xì)胞破壞增多時(shí)，如溶血性貧血；②紅細(xì)胞的再生或成熟障礙，如再生障礙性貧血、巨幼細(xì)胞貧血；③鐵的利用率低，如鉛中毒或維生素B6缺乏引起的造血功能減退；④鐵貯存釋放增加，如血紅蛋白沉著癥、含鐵血黃素沉著癥、反復(fù)輸血治療或肌內(nèi)注射鐵劑引起急性中毒癥等。第113頁/共132頁血清鐵降低見于：①機(jī)體攝取不足，如營養(yǎng)不良、胃腸道病變、消化道潰瘍等；②機(jī)體失鐵增加，如腎炎、腎結(jié)核、胃腸道出血等；③體內(nèi)鐵的需要量增加有未及時(shí)補(bǔ)充，如妊娠、嬰兒生長期等；④體內(nèi)貯存鐵釋放減少，如急性和慢性感染、尿毒癥等。血清總鐵結(jié)合力增高見于缺鐵性貧血、急性肝炎等。血清總鐵結(jié)合力降低見于肝硬化、腎病、尿毒癥和血色素沉著癥。第114頁/共132頁（二）血清銅的檢測

血清銅的檢測方法包括原子吸收分光光度法、分光光度法、中子活化分析法和陽極溶出伏安法等。目前，尚無血清銅測定的參考方法，首選方法為原子吸收分光光度法，當(dāng)不能采用原子吸收分光光度法時(shí)，可采用雙環(huán)己酮草酰二腙（Cuprizone）比色法。第115頁/共132頁1.原子吸收分光光度法

用等量去離子水稀釋血清，吸入原子化器（火焰），標(biāo)本中的銅在高溫下離解成銅原子蒸氣。銅的空心陰極燈發(fā)射的324.5nm譜線中，部分發(fā)射光被蒸氣中基態(tài)銅原子吸收，光吸收的量與火焰中銅離子的濃度成正比。用10％甘油水溶液做標(biāo)準(zhǔn)液的稀釋劑，使標(biāo)準(zhǔn)液的黏度與血清相近，在同樣的試驗(yàn)條件下制成標(biāo)準(zhǔn)曲線，可得出標(biāo)本中銅的含量。第116頁/共132頁2.雙環(huán)己酮草酰二腙比色法

血清經(jīng)稀鹽酸處理后，與清蛋白結(jié)合的銅釋放，用三氯醋酸沉淀蛋白，濾液中的銅離子與雙環(huán)己酮草酰二腙反應(yīng)，生成穩(wěn)定的藍(lán)色化合物。本法十分靈敏，所有試劑要求高純度，試驗(yàn)中所用器材都要避免銅的污染。第117頁/共132頁【參考區(qū)間】血清銅：原子吸收分光光度法：男性：11.0～22.0μmol/L

女性：12.6～24.4μmol/L比色法：男性：10.99～21.98μmol/L

女性：12.56～23.55μmol/L尿銅:0.24～0.47μmol/24h第118頁/共132頁【臨床意義】血漿銅增高見于：霍奇金氏病、白血病及其他許多惡性病變、巨幼細(xì)胞貧血、再生障礙性貧血、色素沉著病，風(fēng)濕熱、雌激素治療及口服避孕藥等。血清銅降低見于：肝豆?fàn)詈俗冃裕╓ilsondisease）、Menkes’或絲卷綜合征、燒傷患者、某些缺鐵性貧血、蛋白質(zhì)營養(yǎng)不良以及慢性局部缺血性心臟病等。第119頁/共132頁（三）血清鋅的檢測

測定方法包括原子吸收分光光度法、比色法、絡(luò)合滴定法、熒光光度法、極譜法、陽性溶出伏安法和中子活化法等。目前臨床實(shí)驗(yàn)室常用的測定方法是原子吸收分光光度法和吡啶偶氮萘酚比色法。第120頁/共132頁1.原子吸收分光光度法

標(biāo)本在高溫下反應(yīng)，離子鋅被還原并轉(zhuǎn)化為鋅原子蒸氣。鋅的空心陰極燈發(fā)射的213.8nm譜線中，部分發(fā)射光被蒸氣中基態(tài)鋅原子吸