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關(guān)于標(biāo)準(zhǔn)菌株在質(zhì)控中的應(yīng)用第1頁,共20頁,2023年,2月20日,星期四一、使用標(biāo)準(zhǔn)菌株的意義二、如何選擇和使用標(biāo)準(zhǔn)菌株第2頁,共20頁,2023年,2月20日,星期四一、標(biāo)準(zhǔn)菌株意義
要做好微生物學(xué)檢驗(yàn)質(zhì)控,必須保存有一批標(biāo)準(zhǔn)菌株,作為對(duì)儀器、培養(yǎng)基、染色液、試劑和診斷血清的質(zhì)控菌株,也可作為從事細(xì)菌檢驗(yàn)的工作人員熟悉某些菌株的教具。
第3頁,共20頁,2023年,2月20日,星期四二、如何選擇標(biāo)準(zhǔn)菌株1.標(biāo)準(zhǔn)菌株的條件
⑴形態(tài)、生理、生化及血清學(xué)特性典,并相當(dāng)穩(wěn)定。
⑵菌株對(duì)所試藥物產(chǎn)生恒定的抑菌環(huán)和恰當(dāng)?shù)腗IC
值。
⑶對(duì)測(cè)試項(xiàng)目反應(yīng)敏感。如測(cè)試巧克力瓊脂平板的分離能力,應(yīng)選流感嗜血桿菌或腦膜炎奈瑟菌。第4頁,共20頁,2023年,2月20日,星期四二、如何選擇標(biāo)準(zhǔn)菌株來源(1)ATCC:美國(guó)標(biāo)準(zhǔn)菌種保藏中心(2)NCTC:英國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)菌種保藏倫敦(3)CBS:真菌中心收藏所荷蘭(4)WFCC:世界菌種保藏聯(lián)合會(huì)(5)IFO:大阪發(fā)酵研究所日本(6)UCM:全蘇微生物保藏所蘇聯(lián)第5頁,共20頁,2023年,2月20日,星期四二、如何選擇標(biāo)準(zhǔn)菌株來源(1)CMCC:中國(guó)國(guó)家微生物菌種保藏中心(2)CGMCC:中國(guó)普通微生物菌種保藏中心(3)ACCC:中國(guó)農(nóng)業(yè)微生物菌種保藏中心(4)CICC:中國(guó)工業(yè)微生物菌種保藏中心(5)中國(guó)醫(yī)學(xué)真菌菌種保藏中心中國(guó)醫(yī)科院皮研所(6)中國(guó)醫(yī)學(xué)病毒毒種保藏中心中國(guó)CDC病毒所(7)中國(guó)鼠疫耶爾森菌菌種保藏中心青海CDC
目前全球菌種保藏機(jī)構(gòu)有300以上第6頁,共20頁,2023年,2月20日,星期四二、如何選擇標(biāo)準(zhǔn)菌株來源
實(shí)驗(yàn)室分離菌株(地方株):實(shí)驗(yàn)室分離菌株必須經(jīng)過嚴(yán)格鑒定,其形態(tài)、生理、生化特征典型,經(jīng)多次傳代,特征恒定,否則不能作為標(biāo)準(zhǔn)菌株。
第7頁,共20頁,2023年,2月20日,星期四二、如何選擇標(biāo)準(zhǔn)菌株驗(yàn)證⑴實(shí)驗(yàn)室保存菌種是否按規(guī)定時(shí)間轉(zhuǎn)種,是否每3代作一次鑒定,是否有詳細(xì)記錄卡(菌種名稱、編號(hào)、來源、保存日期、傳代)等記錄。⑵驗(yàn)證后不得擅自處理或帶出實(shí)驗(yàn)室,如確需要帶離實(shí)驗(yàn)室,須經(jīng)上級(jí)領(lǐng)導(dǎo)批準(zhǔn),并做好詳細(xì)的記錄。⑶菌株應(yīng)有專人保管,驗(yàn)證時(shí)要有2人在場(chǎng)并及時(shí)做好交接工作。第8頁,共20頁,2023年,2月20日,星期四二、如何使用標(biāo)準(zhǔn)菌株注意事項(xiàng)
⑴不能用含有可發(fā)酵性糖的培養(yǎng)基保存菌種。
⑵不可以使用選擇性培養(yǎng)基,不能從藥敏試驗(yàn)平板培養(yǎng)基上留取菌株。
⑶不可使培養(yǎng)菌干枯,所有試管要保持良好的密封性。
⑷對(duì)溫度變化敏感的細(xì)菌,如淋病奈瑟菌和腦膜炎奈瑟菌,不可貯存于冰箱,但可用快速冷凍干燥法長(zhǎng)期保存。
⑸作為抗菌藥物敏感試驗(yàn)用的標(biāo)準(zhǔn)菌株,由保存狀態(tài)取出后,不能連續(xù)使用1
周以上,應(yīng)定期傳代,但一般不超過6
次,必要時(shí)進(jìn)行更換。
第9頁,共20頁,2023年,2月20日,星期四二、如何使用標(biāo)準(zhǔn)菌株注意事項(xiàng)來自國(guó)際/國(guó)家菌種保藏中心(本標(biāo)準(zhǔn)要求為ATCC菌株)或經(jīng)ISO9002認(rèn)證的經(jīng)銷商提供的菌株(有資質(zhì))
制備儲(chǔ)備菌株和工作菌株時(shí)一次制備多份,每株菌原則上不能重復(fù)使用,通常工作菌株不能再傳代,但處理得當(dāng)可再次使用。第10頁,共20頁,2023年,2月20日,星期四二、如何使用標(biāo)準(zhǔn)菌株微生物學(xué)質(zhì)控?zé)o菌試驗(yàn)性能試驗(yàn)菌種必須經(jīng)國(guó)家或國(guó)際公認(rèn)的菌種所用培養(yǎng)基嚴(yán)格按照要求進(jìn)行儲(chǔ)藏。第11頁,共20頁,2023年,2月20日,星期四二、如何使用標(biāo)準(zhǔn)菌株質(zhì)控菌株分離培養(yǎng)基的質(zhì)控增菌及選擇性增菌培養(yǎng)基的質(zhì)控方法結(jié)果判斷微生物學(xué)質(zhì)控
第12頁,共20頁,2023年,2月20日,星期四三、如何使用標(biāo)準(zhǔn)菌株方法無菌試驗(yàn):制備好培養(yǎng)基礎(chǔ)置37℃溫箱過夜培養(yǎng),觀察結(jié)果。第13頁,共20頁,2023年,2月20日,星期四三、如何使用標(biāo)準(zhǔn)菌株方法
性能試驗(yàn)(見圖)糖發(fā)酵培養(yǎng)基的質(zhì)控生化試驗(yàn)的質(zhì)控干燥培基與新配制培基的對(duì)比試驗(yàn)
第14頁,共20頁,2023年,2月20日,星期四第15頁,共20頁,2023年,2月20日,星期四第16頁,共20頁,2023年,2月20日,星期四第17頁,共20頁,2023年,2月20日,星期四第18頁,共20頁,2023年,2月20日,星期四復(fù)習(xí)題
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