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七細(xì)菌感染診斷與防治第1頁(yè)/共27頁(yè)2023/3/42收集臨床標(biāo)本提供相關(guān)臨床資料正確取材形態(tài)學(xué)檢查分離培養(yǎng)及鑒定動(dòng)物試驗(yàn)生化反應(yīng)藥敏試驗(yàn)血清學(xué)鑒定形態(tài)學(xué)鑒定分子生物學(xué)鑒定快速檢測(cè)免疫學(xué)檢測(cè)核酸檢測(cè)
自動(dòng)化檢測(cè)
病原菌的檢驗(yàn)程序第2頁(yè)/共26頁(yè)第2頁(yè)/共27頁(yè)2023/3/43一、臨床標(biāo)本采集送檢及原則盡早采集標(biāo)本不同疾病取不同材料不同病程取不同材料嚴(yán)格無(wú)菌操作,盡量避免雜菌污染即使送檢,正確運(yùn)送準(zhǔn)確作好標(biāo)識(shí)第3頁(yè)/共26頁(yè)第3頁(yè)/共27頁(yè)2023/3/44致病菌的檢驗(yàn)程序藥物敏感試驗(yàn)標(biāo)本直接涂片檢查分離培養(yǎng)生化試驗(yàn)血清學(xué)試驗(yàn)動(dòng)物試驗(yàn)明確診斷初步診斷分子生物學(xué)技術(shù)其他檢測(cè)技術(shù)第4頁(yè)/共26頁(yè)第4頁(yè)/共27頁(yè)2023/3/45二、形態(tài)學(xué)檢查1.涂片染色與鏡檢革蘭染色抗酸染色鍍銀染色墨汁涂片負(fù)染色2.不染色標(biāo)本檢查細(xì)菌動(dòng)力3.暗視野顯微鏡檢查第5頁(yè)/共26頁(yè)第5頁(yè)/共27頁(yè)2023/3/46
三、分離培養(yǎng)與鑒定培養(yǎng)原則1、營(yíng)養(yǎng)要求不高的細(xì)菌用普通培養(yǎng)基2、營(yíng)養(yǎng)要求高的用營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基。如血瓊脂培養(yǎng)基3、厭氧菌用厭氧培養(yǎng)基4、正常菌群部位采集的標(biāo)本,應(yīng)使用選擇性或鑒別性培養(yǎng)基第6頁(yè)/共26頁(yè)第6頁(yè)/共27頁(yè)2023/3/47鑒定原則
1、形態(tài)學(xué)檢查
2、生化試驗(yàn)
3、血清學(xué)試驗(yàn)
4、動(dòng)物試驗(yàn)
5、分子生物學(xué)技術(shù)第7頁(yè)/共26頁(yè)第7頁(yè)/共27頁(yè)2023/3/48
五、細(xì)菌快速檢測(cè)法1.免疫學(xué)檢測(cè)
用已知特異性抗血清或單抗,檢測(cè)標(biāo)本中相應(yīng)的細(xì)菌性抗原,作出早期診斷。常用方法有:ELISA;直接法、間接法免疫熒光技術(shù);直接法;間接法協(xié)同凝集試驗(yàn);血凝試驗(yàn);乳膠凝集試驗(yàn);金標(biāo)技術(shù);第8頁(yè)/共26頁(yè)第8頁(yè)/共27頁(yè)2023/3/492.核酸檢測(cè)
包括核酸探針雜交和PCR。主要用于標(biāo)本中含量少、生長(zhǎng)極為緩慢或難于生長(zhǎng)的細(xì)菌檢測(cè)。核酸探針檢測(cè)較為準(zhǔn)確,但操作較復(fù)雜;PCR技術(shù)快速、敏感,但常受到非特異性因素的影響。第9頁(yè)/共26頁(yè)第9頁(yè)/共27頁(yè)2023/3/4103.臨床細(xì)菌鑒定系統(tǒng)
主要用于對(duì)臨床分離獲得的細(xì)菌進(jìn)行種、屬鑒定和抗生素敏感試驗(yàn)快速自動(dòng)化的分析??捎杉?xì)菌鑒定系統(tǒng)和藥敏試驗(yàn)系統(tǒng)兩部分組成,能夠檢查出感染的病原菌及其耐藥性。對(duì)于待測(cè)菌的分析,常用數(shù)值分類法。該方法以細(xì)菌的各種特性同等重要為理論基礎(chǔ),根據(jù)每種生化反應(yīng)特性在不同細(xì)菌中出現(xiàn)的概率進(jìn)行全面分析。通過(guò)比較待測(cè)菌與分類體系中已知菌的生化特性的相似性,判斷待測(cè)菌的歸屬。該方法適于計(jì)算機(jī)進(jìn)行大量的數(shù)據(jù)運(yùn)算,是自動(dòng)化分析儀器普遍采用的方法。
第10頁(yè)/共26頁(yè)第10頁(yè)/共27頁(yè)2023/3/411HX-21細(xì)菌鑒定/藥敏分析儀第11頁(yè)/共26頁(yè)第11頁(yè)/共27頁(yè)2023/3/412TypicalCultureLaboratoryBench第12頁(yè)/共26頁(yè)第12頁(yè)/共27頁(yè)2023/3/413第二節(jié)細(xì)菌感染的特異性預(yù)防特異性預(yù)防人工主動(dòng)免疫人工被動(dòng)免疫接種抗原性物質(zhì),機(jī)體自動(dòng)產(chǎn)生免疫力注入免疫物質(zhì),機(jī)體被動(dòng)獲得免疫力產(chǎn)生慢維持長(zhǎng)用于預(yù)防產(chǎn)生快維持短用于治療或緊急預(yù)防第13頁(yè)/共26頁(yè)第13頁(yè)/共27頁(yè)2023/3/414一、人工主動(dòng)免疫
所用生物制品,稱為疫苗人工主動(dòng)免疫生物制品的種類包括細(xì)菌菌苗、病毒疫苗、新型疫苗(亞單位疫苗、核酸疫苗、治療性疫苗等)、類毒素、自身疫苗等。第14頁(yè)/共26頁(yè)第14頁(yè)/共27頁(yè)2023/3/415
1.死疫苗
選用免疫原性強(qiáng)的標(biāo)準(zhǔn)微生物經(jīng)大量培養(yǎng)后,用物理或化學(xué)方法將其殺死后制成。其雖失去繁殖能力,但仍保持免疫原性目前常用的死疫苗有傷寒、百日咳、鉤端螺旋體、乙腦、流腦等疫苗第15頁(yè)/共26頁(yè)第15頁(yè)/共27頁(yè)2023/3/416
2.活疫苗用減毒或無(wú)毒的病原體制成。常用的有卡介苗、脊髓灰質(zhì)灸疫苗、麻疹疫苗等。此類疫苗進(jìn)入機(jī)體后有一定的增殖能力,類似自然狀態(tài)下的輕型或隱件感染,免疫系統(tǒng)受刺激的時(shí)間長(zhǎng),故一般只需注射一次即可獲得較好的免疫效果缺點(diǎn)是不易保存,有效期較短死、活疫苗的比較見(jiàn)表第16頁(yè)/共26頁(yè)第16頁(yè)/共27頁(yè)2023/3/417活疫苗與死疫苗比較第17頁(yè)/共26頁(yè)第17頁(yè)/共27頁(yè)2023/3/4183.類毒素細(xì)菌的外毒素經(jīng)o.3%一o.4%甲醒處理,毒性消失而保留其免疫原性,即為類毒素常用的類毒素有白喉、破傷風(fēng)類毒素第18頁(yè)/共26頁(yè)第18頁(yè)/共27頁(yè)2023/3/4194.新疫苗的研制
(1)亞單位疫苗
不含病原體核酸,僅含能誘發(fā)宿主產(chǎn)生中和抗體的蛋白或表面抗原如流感病毒血凝素、神經(jīng)氨酸酶亞單位疫苗、腺病毒衣殼、腦膜炎球菌、肺炎球菌莢膜多糖亞單位疫苗等
(2)基因工程疫苗或DNA重組疫苗
(3)核酸疫苗
(4)轉(zhuǎn)基因植物疫苗第19頁(yè)/共26頁(yè)第19頁(yè)/共27頁(yè)2023/3/420二、人工被動(dòng)免疫
生物制品:免疫血清(抗毒素、抗菌血清)、丙種球蛋白、免疫球蛋白、免疫細(xì)胞、細(xì)胞因子等1.抗毒素
主要有破傷風(fēng)抗毒素、白喉抗毒素、肉毒抗毒素及氣性壞疽多價(jià)抗毒素等。
2.胎盤球蛋白和血漿丙種球蛋白
此類制劑可作為以上病原體感染的緊急預(yù)防。此外還可用于治療丙種球蛋白缺乏癥患者
3.細(xì)胞因子第20頁(yè)/共26頁(yè)第20頁(yè)/共27頁(yè)2023/3/421(1)轉(zhuǎn)移因子(TF)
是從外周血、扁桃體、脾臟等部位的白細(xì)胞凍融后提取的可透析物制成的低分子物質(zhì)。能特異性地轉(zhuǎn)移細(xì)胞免疫,從而增強(qiáng)受者的細(xì)胞免疫功能,主要用于細(xì)胞免疫功能低下引的疾病的免疫治療。如皮膚念珠菌病、腫瘤等。
第21頁(yè)/共26頁(yè)第21頁(yè)/共27頁(yè)2023/3/422(2)干擾素(IFN)是由干擾素誘生劑誘導(dǎo)有關(guān)細(xì)胞產(chǎn)生的一種具有抗病毒活性及免疫調(diào)節(jié)效應(yīng)的糖蛋白。
IFN可用于治療病毒性感染如乙型肝炎、單純皰疹性角膜炎、帶狀皰疹、呼吸道病毒感染等。因其能增強(qiáng)巨噬細(xì)胞和NK細(xì)胞活性.所以也用于多種腫瘤的免疫治療(3)腫瘤壞死因子(TNF)
是由巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的,能引起培養(yǎng)細(xì)胞及腫瘤細(xì)胞的壞死并對(duì)免疫細(xì)胞有調(diào)節(jié)、誘導(dǎo)作用?,F(xiàn)已重組成功可用于腫瘤治療,但有—定的副作用。第22頁(yè)/共26頁(yè)第22頁(yè)/共27頁(yè)2023/3/423(4)白細(xì)胞介素—2
是由活化的T細(xì)胞產(chǎn)生的—種具有多種生物學(xué)效應(yīng)的淋巴因子。它能促進(jìn)T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞的增殖、分化.增強(qiáng)各種免疫效應(yīng)細(xì)胞的治療.誘導(dǎo)干擾素產(chǎn)生及參與免疫調(diào)節(jié)等目前已用于多種與免疫相關(guān)病的治療,如腫瘤、病毒感染、自身免疫病、艾滋病等。特別是在腫瘤的免疫治療中,顯示出較好效果.第23頁(yè)/共26頁(yè)第23頁(yè)/共27頁(yè)2023/3/424三、生物制品使用的注意事項(xiàng)
對(duì)象途徑劑量次數(shù)時(shí)間禁忌癥等第24頁(yè)/共26頁(yè)第24頁(yè)/共27頁(yè)2023/3/425
人工主動(dòng)免疫與被動(dòng)免疫比較人工主動(dòng)免疫人工被動(dòng)一面免疫產(chǎn)生免疫的物質(zhì)抗原(微生物制劑、毒素制劑)現(xiàn)成的免疫抗體
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