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關(guān)于心梗腦梗心肌損傷第一頁,共二十一頁,編輯于2023年,星期一冠狀動脈結(jié)扎過程:
大鼠,ip戊巴比妥鈉45ml/kg麻醉,氣管內(nèi)插管,接人工呼吸機(65次/分,8-10ml/次)。連接微電腦生理記錄儀,描記正常II導(dǎo)聯(lián)心電圖(ECG)。沿前正中線切開胸骨前皮膚,暴露2-5肋,連同肋骨一起結(jié)扎肋下動脈,緊靠胸骨旁左緣處用純頭剪刀剪開5、4、3肋。暴露心臟,輕捏右胸廓,抵壓左胸背部肋骨擠出心臟。找到肺動脈圓椎,撥起左心房(耳)根部。結(jié)扎冠狀動脈:用5/0號絲線,在肺動脈圓椎右緣、平左心耳下緣1-2mm處冠狀靜脈走行處淺層心肌用小圓針穿線、結(jié)扎。記錄結(jié)扎時間。將心臟納入胸腔,縫合切口,停止人工呼吸。記錄ECG,觀察S-T段變化。缺血6小時時,再次記錄ECG。取下心臟,用NBT染色法測心肌梗塞范圍,心室內(nèi)取血,離心制備血清,用比色法測血清乳酸脫氫酶(LDH)含量。第二頁,共二十一頁,編輯于2023年,星期一心梗測定指標心電圖(ECG)記錄:用微電腦生理記錄儀記錄結(jié)扎前、結(jié)扎后10min、結(jié)扎后6h的II導(dǎo)聯(lián)ECG,觀察S-T段變化。心肌梗塞范圍測定:于結(jié)扎后6h取下心臟,剪去心房,將心室橫切為3-4片,立即置0.5%NBT(溶在0.1mmol/L磷酸緩沖液中,pH7.4)溶液中,37℃孵2min,以拒染部分為梗塞區(qū),藍染部分為未梗塞區(qū)(見圖1),剪下拒染部分心肌,稱重,計算該部分心肌占心室全重的%,作為心肌梗塞范圍,如下式:心肌梗塞范圍/%=×100%第三頁,共二十一頁,編輯于2023年,星期一冠狀動脈結(jié)扎部位第四頁,共二十一頁,編輯于2023年,星期一大鼠心梗NBT染色第五頁,共二十一頁,編輯于2023年,星期一大鼠心梗ECG變化第六頁,共二十一頁,編輯于2023年,星期一心室內(nèi)壓及心室收縮功能曲線
第七頁,共二十一頁,編輯于2023年,星期一腦缺血模型的復(fù)制方法頸外血管阻斷法(雙側(cè)頸總動脈夾閉,沙土鼠結(jié)扎一例頸總動脈,雙側(cè)頸總動脈夾閉加放血,雙側(cè)頸總動脈夾閉加一例或兩側(cè)椎動脈結(jié)扎)顱內(nèi)動脈阻塞法主要是大腦中動脈的阻塞(直接暴露大腦中動脈電凝或結(jié)扎),穿線法阻斷大腦中動脈(0.2mm的尼龍線)栓子法:腦表面血管阻塞法血管周圍注射促凝劑應(yīng)用光敏劑第八頁,共二十一頁,編輯于2023年,星期一MCA解剖第九頁,共二十一頁,編輯于2023年,星期一第十頁,共二十一頁,編輯于2023年,星期一大鼠大腦中動脈(MCA)
血栓形成模型模型制備:大鼠術(shù)前禁食12小時。0.3%戊巴比妥鈉(30mg/kg)腹腔注射麻醉。右側(cè)臥位固定,沿左眼外眥與左外耳道連線中點垂直線做一約2cm縱切口,鈍性分離顳肌,咬去顴弓,撐開顳頜關(guān)節(jié),在蝶骨大翼處用牙科鉆打薄骨質(zhì),牙科探針挑去骨片,開一約4mm×3mm骨窗,可見大腦中動脈沿嗅束垂直走行。取3mm長4號手術(shù)絲線,浸50%FeCl310μL,將此絲線置MCA嗅束-大腦下靜脈之間,即置MCA中段表面,損傷血管誘導(dǎo)血栓形成,每5分鐘重置一根,20分鐘后除去絲線,用生理鹽水洗凈創(chuàng)面,縫合皮膚傷口。第十一頁,共二十一頁,編輯于2023年,星期一指標檢測:
神經(jīng)損傷癥狀檢測:術(shù)后待大鼠清醒后及24小時進行腦缺血行為評分,按以下標準進行:尾部倒提時,患側(cè)上肢內(nèi)收,肩外旋,4分;向?qū)?cè)推左(右)上肢,患側(cè)抵抗力下降,1-3分;將上肢置金屬網(wǎng)上,患側(cè)肌張力下降,1-3分;向患側(cè)旋轉(zhuǎn),1分。總分11分。第十二頁,共二十一頁,編輯于2023年,星期一梗塞面積:術(shù)后24小時將大鼠斷頭取腦,去除小腦,肉眼可見MCA中段呈黑色,血栓形成。沿冠狀面切四刀,切成3mm厚腦片,將腦片置2%
TTC(紅四氮唑)溶液中,37℃溫孵30min染色,用圖象分析儀攝像,計算梗死灶(未著色區(qū))面積,腦梗塞面積以梗死灶面積與腦總面積百分比表示。第十三頁,共二十一頁,編輯于2023年,星期一腦含水量:腦片TTC染色攝像后,沿正中矢狀線將腦片切為左右兩半,取左側(cè)(病變區(qū))及右側(cè)(無病變區(qū))皮質(zhì),分別稱取左右大腦的濕重,60℃96
h干至恒重,稱干重,計算腦含水量。腦含水量=(濕重-干重)/濕重×100%第十四頁,共二十一頁,編輯于2023年,星期一正常MCA位置第十五頁,共二十一頁,編輯于2023年,星期一氯化鐵致右側(cè)MCA血栓形成第十六頁,共二十一頁,編輯于2023年,星期一大鼠腦梗TTC染色未著色區(qū)為梗塞區(qū)第十七頁,共二十一頁,編輯于2023年,星期一異丙腎上腺素
誘發(fā)大鼠心肌肥厚SD大鼠,體重136.5±11.2g,隨機分為4組:生理鹽水對照組,異丙腎上腺素(ISO)組,給藥前準確稱大鼠體重,麻醉狀態(tài)下描記大鼠標準導(dǎo)聯(lián)、單極加壓肢體導(dǎo)聯(lián)及CR和CL胸前導(dǎo)聯(lián)ECG,將心電圖異常的動物剔除,然后ISO組用ISO(0.02mg/kg)sc,每日2次,共6wk。給藥6wk時,末次給藥24h后,在麻醉狀態(tài)下描記心電圖,然后迅速剖取心臟,用濾紙拭干血液,稱取全心重、心室重、左心室重、右心室重和室間隔重,以上均為濕重,測量右心室壁厚、左心室游離壁厚和室間隔厚,取左心室心尖部分組織做常規(guī)病理切片,余左心室組織置4℃冰箱保存,待后供SOD活性和MDA含量測定用。第十八頁,共二十一頁,編輯于2023年,星期一結(jié)果大鼠心肌肥厚模型中,持續(xù)給異丙腎上腺素6周,可使大鼠的心電圖J點異常抬高,病檢顯示大鼠心肌細胞廣泛損傷,同時使全心重/體重(hw/bw)、左心室重/體重(lvw/bw)和室間隔重/體重(vsw/bw)增加,左室游離壁和室間隔厚度增加,第十九頁,共二十一頁,編輯于2023年,星期
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