檢測實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制關(guān)鍵點(diǎn)

檢測實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制關(guān)鍵點(diǎn)第1頁/共95頁檢測實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制的重要性和關(guān)鍵點(diǎn)檢測質(zhì)量是實(shí)驗(yàn)室生存的保證；檢測質(zhì)量是占領(lǐng)市場的重要手段；檢測質(zhì)量是為客戶提供服務(wù)的前提;檢測質(zhì)量是衡量實(shí)驗(yàn)室管理能力的標(biāo)尺。

第2頁/共95頁認(rèn)識誤區(qū)——有人員、有設(shè)備、有方法、有場地、有資質(zhì)，檢測質(zhì)量就有保證。——檢測任務(wù)重、缺少專職的質(zhì)量管理人員，質(zhì)量控制就做不好?！蛻舨粚I(yè)、領(lǐng)導(dǎo)不精通，只要不出問題、沒有投訴就行。第3頁/共95頁

當(dāng)檢測實(shí)驗(yàn)室確認(rèn)法人地位和資源保障后,應(yīng)明確檢測質(zhì)量控制的關(guān)鍵點(diǎn)人—人員機(jī)—設(shè)備料—樣品和消耗材料法—檢測方法環(huán)—設(shè)施和環(huán)境條件以上五個方面的控制效果通過測試的實(shí)施來體現(xiàn)第4頁/共95頁

測試結(jié)果

人

機(jī)料法環(huán)第5頁/共95頁一、人員質(zhì)量控制方法

在ISO/IEC17025標(biāo)準(zhǔn)《檢測和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可準(zhǔn)則》中在“技術(shù)要素”中將“人員”歸結(jié)為決定實(shí)驗(yàn)室檢測的正確性和可靠性的第一個因素，對檢測實(shí)驗(yàn)室的人員從技術(shù)能力、經(jīng)驗(yàn)、所需專業(yè)知識、教育培訓(xùn)、工作職責(zé)和公正性等提出了嚴(yán)格的要求。第6頁/共95頁1、人員的技術(shù)能力確認(rèn)重點(diǎn)關(guān)注——教育背景、專業(yè)技能、工作經(jīng)歷、現(xiàn)任崗位授權(quán)；確認(rèn)證據(jù)——技術(shù)檔案、資格確認(rèn)、上崗考核和授權(quán)、培訓(xùn)記錄。特殊崗位的授權(quán)——感官評定、特種鍋爐容器、特殊設(shè)備、生物安全操作等。第7頁/共95頁2、人員的培訓(xùn)計(jì)劃和實(shí)施重點(diǎn)關(guān)注——培訓(xùn)計(jì)劃的可行性、實(shí)施記錄、培訓(xùn)效果的評價。確認(rèn)證據(jù)——全面的培訓(xùn)計(jì)劃（包括各個崗位、各類人員、再教育）、培訓(xùn)記錄（培訓(xùn)鑒定、小結(jié)、現(xiàn)場考核）等。第8頁/共95頁制訂培訓(xùn)計(jì)劃需要注意——計(jì)劃合理性、前瞻性、統(tǒng)一性?！鞔_需要培訓(xùn)的崗位、項(xiàng)目、時段、實(shí)施機(jī)構(gòu)、結(jié)果評價依據(jù)?！腥藛T應(yīng)有文件證明其對工作及實(shí)驗(yàn)室全部設(shè)施中潛在的風(fēng)險受過培訓(xùn)；——應(yīng)要求所有人員根據(jù)可能接觸的生物接受免疫以預(yù)防感染，應(yīng)保存免疫記錄。第9頁/共95頁3、人員的監(jiān)督重點(diǎn)關(guān)注——監(jiān)督人員資質(zhì)和授權(quán)、監(jiān)督計(jì)劃（選擇重點(diǎn)區(qū)域和人員）、被監(jiān)督人員、監(jiān)督記錄。確認(rèn)證據(jù)——監(jiān)督計(jì)劃、監(jiān)督記錄、監(jiān)督結(jié)果的評價。第10頁/共95頁監(jiān)督是否充分？——不同專業(yè)和領(lǐng)域均有監(jiān)督員；——監(jiān)督人員比例恰當(dāng)；——監(jiān)督過程和方法確定，有相應(yīng)的文件；——監(jiān)督記錄完整，是管理評審的輸入。第11頁/共95頁監(jiān)督人員的條件——熟悉檢測技術(shù)、經(jīng)驗(yàn)豐富、有責(zé)任心、細(xì)致公正。避免不懂專業(yè)的行政領(lǐng)導(dǎo)擔(dān)任監(jiān)督員，以免發(fā)生外行走過場。第12頁/共95頁監(jiān)督目的——對各類人員的能力確認(rèn)手段之一、保證持續(xù)改進(jìn)。監(jiān)督方式——盲樣考核、操作演示、現(xiàn)場提問、留樣復(fù)測、人員比對、參加能力驗(yàn)證、質(zhì)量控制圖、崗位輪換等。監(jiān)督記錄——真實(shí)、全面、發(fā)現(xiàn)問題和優(yōu)點(diǎn)。第13頁/共95頁實(shí)驗(yàn)室對人員進(jìn)行監(jiān)督時應(yīng)考慮：針對不同類型不同專業(yè)范圍應(yīng)配備符合資質(zhì)條件、有能力的監(jiān)督人員；應(yīng)有足夠比例的監(jiān)督人員；對監(jiān)督的內(nèi)容、方式、頻率有文件化的規(guī)定，每次監(jiān)督后應(yīng)對被監(jiān)督的人員或崗位的工作質(zhì)量做出評價。對監(jiān)督后表現(xiàn)不滿意的人員應(yīng)采取相應(yīng)的有效處理措施；監(jiān)督結(jié)果應(yīng)輸入管理評審。第14頁/共95頁二、儀器設(shè)備的質(zhì)量控制實(shí)驗(yàn)室的儀器設(shè)備應(yīng)側(cè)重于日常管理、維護(hù)保養(yǎng)、狀態(tài)確認(rèn)和安全防護(hù)。配備儀器設(shè)備應(yīng)考慮：實(shí)驗(yàn)室應(yīng)配備的基本設(shè)備；根據(jù)實(shí)驗(yàn)室開展項(xiàng)目的需要配備的特殊設(shè)備，如需要進(jìn)行確證試驗(yàn)，避免“假陽性”和“假陰性”結(jié)果的出現(xiàn)所需的設(shè)備如質(zhì)譜、三維光譜和紅外光譜等。第15頁/共95頁1、設(shè)備的日常使用和管理重點(diǎn)關(guān)注——設(shè)備唯一性標(biāo)識（管理標(biāo)識和校準(zhǔn)標(biāo)識）、設(shè)備檔案、操作人員能力、使用維護(hù)、設(shè)備溯源性。第16頁/共95頁確認(rèn)證據(jù)——檔案信息完整性、操作人員培訓(xùn)和授權(quán)、維護(hù)保養(yǎng)作業(yè)指導(dǎo)書和實(shí)施記錄、維修記錄和狀態(tài)確認(rèn)、期間核查計(jì)劃和記錄、校準(zhǔn)證書等。易忽視——相同型號設(shè)備的識別、測試樣品追溯、校準(zhǔn)證書有效性的確認(rèn)、故障設(shè)備處理和結(jié)果追溯。第17頁/共95頁2、設(shè)備的校準(zhǔn)重點(diǎn)關(guān)注——校準(zhǔn)機(jī)構(gòu)的選擇（資質(zhì)和能力、校準(zhǔn)報告的信息）、校準(zhǔn)計(jì)劃、校準(zhǔn)證書確認(rèn)、自校準(zhǔn)規(guī)程和記錄、校準(zhǔn)狀態(tài)標(biāo)識。確認(rèn)證據(jù)——校準(zhǔn)計(jì)劃、外部合格供應(yīng)方評價和選擇、自校準(zhǔn)規(guī)程、校準(zhǔn)標(biāo)識等。第18頁/共95頁測量儀器應(yīng)根據(jù)儀器的性能情況,加貼儀器狀態(tài)標(biāo)志。合格標(biāo)志——經(jīng)計(jì)量檢定或校準(zhǔn)、驗(yàn)證合格，確認(rèn)其符合檢測技術(shù)規(guī)范規(guī)定的使用要求。準(zhǔn)用標(biāo)志——設(shè)備存在部分缺陷或部分功能喪失，但可在限定范圍內(nèi)使用；設(shè)備某一量程準(zhǔn)確度不夠，但檢測所用量程合格，可降級使用。第19頁/共95頁停用標(biāo)志——設(shè)備目前狀態(tài)不能使用（故障、經(jīng)檢定校準(zhǔn)不合格、性能無法確定、超過周期未檢定校準(zhǔn)、不符合技術(shù)規(guī)范規(guī)定的使用要求等），但經(jīng)檢定校準(zhǔn)或修復(fù)后可以使用。第20頁/共95頁3、設(shè)備的期間核查設(shè)備的檢定/校準(zhǔn)與期間核查的差異：

執(zhí)行的主體不同——設(shè)備檢定/校準(zhǔn)是由國家法定機(jī)構(gòu)授權(quán)的校準(zhǔn)機(jī)構(gòu)或授權(quán)部門來執(zhí)行，可以是計(jì)量院或是某個機(jī)構(gòu)內(nèi)的計(jì)量實(shí)驗(yàn)室。而設(shè)備期間核查是由實(shí)驗(yàn)室人員來完成，不需要經(jīng)過國家法定機(jī)構(gòu)的授權(quán)，只需實(shí)驗(yàn)室授權(quán)。第21頁/共95頁

執(zhí)行的標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)不同——設(shè)備檢定/校準(zhǔn)依據(jù)的是國家已經(jīng)頒布的檢定/校準(zhǔn)規(guī)程或經(jīng)過法定計(jì)量管理機(jī)構(gòu)備案批準(zhǔn)的校準(zhǔn)程序。設(shè)備期間核查依據(jù)的是實(shí)驗(yàn)室自己制訂的設(shè)備期間核查作業(yè)指導(dǎo)書，不需要報法定計(jì)量部門備案。第22頁/共95頁

執(zhí)行的周期頻率不同——設(shè)備檢定的間隔周期執(zhí)行的是國家法定頒布的設(shè)備檢定周期，或是當(dāng)設(shè)備經(jīng)過故障修復(fù)后需要送檢定/校準(zhǔn)機(jī)構(gòu)重新檢定，帶有強(qiáng)制性質(zhì)。設(shè)備期間核查的周期頻率可以由實(shí)驗(yàn)室根據(jù)設(shè)備的使用頻率、數(shù)據(jù)爭議程度、設(shè)備的新舊和穩(wěn)定水平自行確定，不帶有強(qiáng)制性。第23頁/共95頁

執(zhí)行的內(nèi)容覆蓋面不同——設(shè)備檢定/校準(zhǔn)是對需檢定/校準(zhǔn)的設(shè)備進(jìn)行系統(tǒng)性檢查，對設(shè)備的穩(wěn)定性、精密度、靈敏度等整體功能或技術(shù)指標(biāo)進(jìn)行檢定或校準(zhǔn)，在可能的情況下，還需要給出不確定度評定，出具檢定報告或校準(zhǔn)證書。設(shè)備期間核查可以在某次核查過程中只對設(shè)備的個別或部分的功能或技術(shù)指標(biāo)進(jìn)行核查，并不一定需要給出不確定度的評定，也不需要出具校準(zhǔn)報告。第24頁/共95頁是否所有設(shè)備都需要經(jīng)過期間核查？應(yīng)關(guān)注——設(shè)備的新舊和穩(wěn)定程度、使用頻率、操作人員熟練程度、所產(chǎn)生檢測結(jié)果的爭議程度、設(shè)備所處環(huán)境條件的優(yōu)劣等。---核查的方式可以標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)比對，設(shè)備穩(wěn)定性試驗(yàn)、設(shè)備特征值偏離試驗(yàn)和檢測靈敏度測試等。第25頁/共95頁儀器設(shè)備的期間核查應(yīng)選擇國家計(jì)量檢定規(guī)程中的主要檢定項(xiàng)目，一般選擇以下合適項(xiàng)目：零點(diǎn)檢查；靈敏度；準(zhǔn)確度；分辨率；測量重復(fù)性；標(biāo)準(zhǔn)曲線線性；儀器內(nèi)置自校檢查；標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)或參考物質(zhì)測試比對；儀器說明書列明的技術(shù)指標(biāo)。第26頁/共95頁微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)注意以下設(shè)備的交叉污染：a）一次性設(shè)備和重復(fù)使用的玻璃器皿應(yīng)潔凈，必要時應(yīng)消毒滅菌；b)建議實(shí)驗(yàn)室使用專門處理污染物的高壓滅菌鍋。以下設(shè)備需要清潔、維護(hù)，定期進(jìn)行損壞檢驗(yàn)，必要時進(jìn)行滅菌：a)一般設(shè)備：濾器、玻璃和塑料容器（瓶子、試管）、玻璃或塑料的帶蓋培養(yǎng)皿、取樣器具、鎳/鉻/鉑及一次性接種針或接種環(huán)等；b)測量器具：溫度計(jì)、計(jì)時器、天平、酸度計(jì)、菌落計(jì)數(shù)器等；c)定容設(shè)備：吸管、自動分液器、微量移液器等；d)其他設(shè)備：水浴鍋、培養(yǎng)箱、超凈工作臺或生物安全柜、高壓滅菌鍋、均質(zhì)器、冷藏箱、冷凍柜等。第27頁/共95頁化學(xué)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)注意以下設(shè)備的交叉污染：a）一次性設(shè)備和重復(fù)使用的玻璃器皿應(yīng)潔凈，必要時應(yīng)進(jìn)行浸泡清洗；b)檢出高濃度樣品或存放標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的儲液瓶若不易清洗處理，應(yīng)用后丟棄；c)高、低濃度的樣品測試設(shè)備應(yīng)盡量分開；d)易串味樣品的存放容器應(yīng)有良好的密封性能，注意及時從測試工作區(qū)或樣品儲存區(qū)域撤離。第28頁/共95頁三、樣品和消耗材料的質(zhì)量控制1、樣品的控制關(guān)注重點(diǎn)——數(shù)量代表性、方法適用性、制備有效性、傳遞可溯性。數(shù)量代表性——樣品抽取階段必須制定合適的抽樣方案，明確抽樣的數(shù)量和抽樣方式。方法適用性——檢測方法對檢測樣品的特殊要求。第29頁/共95頁制備有效性——采用適當(dāng)?shù)闹苽浞椒ǎ苊獗粶y物的分解和樣品遭受污染，注意環(huán)境條件、制樣工器具的影響。傳遞可溯性——有效的包裝、標(biāo)識、傳遞、儲存方式。第30頁/共95頁確認(rèn)證據(jù)——合同評審記錄、樣品標(biāo)識系統(tǒng)、樣品狀態(tài)、保存設(shè)施的監(jiān)控、樣品處理設(shè)施和記錄。易忽視——檢畢物品的處理、樣品的群組細(xì)分。第31頁/共95頁化學(xué)實(shí)驗(yàn)室采樣需要注意——抽樣依據(jù)、抽樣所代表的樣品總量、抽樣方案、抽樣環(huán)境條件和空間情況、抽樣器具溯源和標(biāo)識、樣品包裝容器等。第32頁/共95頁微生物檢驗(yàn)采樣原則代表性原則：所采的樣本能真正反映被采樣的總體水平。典型性原則:

應(yīng)根據(jù)中毒癥狀，可疑中毒物性質(zhì)采集可能含毒量最多的樣本，如中毒者吃剩的食物、餐具（未洗刷）。適時性原則：及時采樣，盡快送檢。適量性原則：采樣數(shù)量應(yīng)根據(jù)檢驗(yàn)項(xiàng)目和目的而定，但每份樣本不少于檢驗(yàn)需要量的三倍，以便供檢驗(yàn)和留樣備用。程序原則：采樣、送檢、留樣和出具報告必須按規(guī)定的程序進(jìn)行，各階段都要有完整的手續(xù)，責(zé)任分明。第33頁/共95頁關(guān)于留樣和復(fù)驗(yàn)食品中微生物的分布是不均勻的，并受環(huán)境變化的影響較大，一旦進(jìn)行了樣品制備和目標(biāo)微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室，食品中微生物的本底便發(fā)生了一些變化，國際社會一直認(rèn)為對于食品微生物檢驗(yàn)不能復(fù)驗(yàn)，那么是否有必要保留樣品？對于是否有必要保留樣品，歐洲認(rèn)可合作組織（EuropeanCo-operationForAccreditation，EA）在其認(rèn)證文件EA-4/10(rev.02)《微生物實(shí)驗(yàn)室認(rèn)證》中規(guī)定，微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)制定樣品的保留和處理程序。要求樣品儲存至出具檢驗(yàn)結(jié)果時，必要時應(yīng)保留更長時間。而其他國內(nèi)外權(quán)威組織（ISO、AOAC、NMKL等）和政府機(jī)構(gòu)（USAFDA、USDA等）均沒有明確規(guī)定。因此，如果客戶沒有特殊要求，可以不留樣。第34頁/共95頁2、消耗材料的控制關(guān)注重點(diǎn)——外部供應(yīng)商的評價和控制、采購驗(yàn)收（符合性檢查）、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的保管和期間核查。確認(rèn)證據(jù)——外部供應(yīng)商的評價記錄、采購控制記錄、符合性檢查記錄、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)確認(rèn)記錄和配制記錄、期間核查作業(yè)指導(dǎo)書和核查記錄。易忽視——用數(shù)量清點(diǎn)代替符合性檢查、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)配制溯源過程、期間核查。第35頁/共95頁

一些重要消耗材料，如標(biāo)準(zhǔn)品、試劑盒、預(yù)處理小柱、層析填料、培養(yǎng)基等，可根據(jù)供貨商提供的性能指標(biāo)進(jìn)行初步驗(yàn)證，作出進(jìn)一步評價，并根據(jù)評價結(jié)果采取適當(dāng)?shù)拇胧?。?6頁/共95頁

技術(shù)性驗(yàn)證可采用色譜、光譜、質(zhì)譜、化學(xué)常規(guī)分析、生化鑒定等多種方法，具體可采用與原有標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)比對、濃度檢測、保留時間驗(yàn)證、峰純度鑒別、官能團(tuán)鑒別、分子離子峰檢索、血清學(xué)特征鑒別等技術(shù)。第37頁/共95頁

對檢測結(jié)果有重要影響的消耗品、使用頻率高的或有疑慮的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)要用適當(dāng)?shù)姆椒ㄟM(jìn)行符合性檢查。符合性檢查手段——與另一標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行比對試驗(yàn)；——用色譜、質(zhì)譜、光譜的特征峰、特征離子、特征譜圖進(jìn)行確證；——利用化學(xué)特征反應(yīng)進(jìn)行驗(yàn)證。必要的儀器分析；——生化傳代、血清鑒別等。第38頁/共95頁標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)一級標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（GBW）——由國家計(jì)量部門批準(zhǔn)、頒布并授權(quán)生產(chǎn)，采用絕對測量法或兩種以上不同原理的準(zhǔn)確可靠的方法定值，也可由多個實(shí)驗(yàn)室采用同一種方法協(xié)同定值，計(jì)量準(zhǔn)確度達(dá)到國內(nèi)最高水平，穩(wěn)定性在一年以上。二級標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（GBW（E））——由國家計(jì)量部門批準(zhǔn)、頒布并授權(quán)生產(chǎn)，采用與一級標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)相比較的方法或一級標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的定值方法定值，計(jì)量準(zhǔn)確度能滿足一般測量的需要，穩(wěn)定性在半年以上。第39頁/共95頁

標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書應(yīng)給出標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的名稱、編號、定值日期、定值方法、特性值、測量不確定度、有效期和貯存要求。當(dāng)只能使用不具有溯源性的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)時，應(yīng)獲取由生產(chǎn)廠商出具的能說明其特性的有效證明，并進(jìn)行必要的驗(yàn)證試驗(yàn)或比對試驗(yàn)。第40頁/共95頁標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制——注意信息可追溯；——按標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定配制；GB/T601-2002《化學(xué)試劑標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的制備》；GB/T602-2002《化學(xué)試劑雜質(zhì)測定用標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備》——雙人八平行、極差分析?！行谙蕖５?1頁/共95頁培養(yǎng)基制備和質(zhì)量控制購置驗(yàn)收要求(CNAS-CL01：4.6.2)生產(chǎn)企業(yè)提供資料實(shí)驗(yàn)室外觀檢查記錄儲存、使用、棄置要求（CNAS-CL11：5.9)成品的質(zhì)量控制(概述第2部分.重點(diǎn)為菌株)物理指標(biāo):培養(yǎng)基外觀微生物指標(biāo):重點(diǎn)提到對測試菌株的要求SN/T1538.1-2005培養(yǎng)基制備指南第1部分實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)基制備質(zhì)量保證通則

第42頁/共95頁常規(guī)質(zhì)量控制要求物理指標(biāo):外觀控制微生物指標(biāo):污染;生長率;選擇性;特異性(CNAS-CL01:20064.6.2;CNAS/CL09：2006)性能測試方法舉例對質(zhì)量控制要求的補(bǔ)充說明和詳細(xì)實(shí)例參考SN/T1538.2-2007培養(yǎng)基制備指南第2部分:培養(yǎng)基性能測試實(shí)用指南

GB/T27405-2008實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范

食品微生物檢測第43頁/共95頁四、檢測方法的質(zhì)量控制1、關(guān)注重點(diǎn)——檢測方法的現(xiàn)行有效、方法確認(rèn)、非標(biāo)方法的建立、方法的偏離、驗(yàn)證和審批。確認(rèn)證據(jù)——方法查新和跟蹤、方法確認(rèn)記錄、非標(biāo)方法確認(rèn)記錄、方法偏離的技術(shù)驗(yàn)證、作業(yè)指導(dǎo)書。第44頁/共95頁2、方法選擇關(guān)注——對檢測樣品的適用性、準(zhǔn)確性和靈敏性。SOP（作業(yè)指導(dǎo)書）——當(dāng)缺少指導(dǎo)書可能影響檢測和/或校準(zhǔn)結(jié)果，實(shí)驗(yàn)室可對所有相關(guān)設(shè)備的使用和操作、檢測和/或校準(zhǔn)樣品的準(zhǔn)備（或者二者兼有）、關(guān)鍵性操作步驟編制指導(dǎo)書。第45頁/共95頁應(yīng)由專人定期對檢測標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行有效性查詢，及時更新作廢標(biāo)準(zhǔn)。國內(nèi)國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)、國外標(biāo)準(zhǔn)查詢：國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會；中國標(biāo)準(zhǔn)信息網(wǎng)，，；

www.F;第46頁/共95頁3、SOP的建立當(dāng)因檢測時效、試劑、設(shè)備、檢測靈敏度等原因，需要對標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行改進(jìn)，以滿足檢測需求時，應(yīng)對標(biāo)準(zhǔn)方法做偏離性確認(rèn)，經(jīng)過批準(zhǔn)并形成SOP。

SOP應(yīng)經(jīng)過審核批準(zhǔn)并列入受控范疇。第47頁/共95頁實(shí)驗(yàn)室編制SOP的內(nèi)容應(yīng)滿足5W1H原則：What——此項(xiàng)作業(yè)的名稱及內(nèi)容是什么；Why——此項(xiàng)作業(yè)的目的是干什么；Where——即在哪里使用該作業(yè)指導(dǎo)書；Who——什么樣的人使用該作業(yè)指導(dǎo)書；When——此項(xiàng)作業(yè)什么時候做；How——如何按步驟完成作業(yè)。第48頁/共95頁實(shí)驗(yàn)室應(yīng)關(guān)注以下四個方面SOP的編制：1．方法類：包括食品檢驗(yàn)方法中不詳細(xì)或不完善部分的補(bǔ)充，期間核查、方法確認(rèn)及比對等；2．設(shè)備類：重要或復(fù)雜設(shè)備的使用、操作規(guī)范（如設(shè)備制造商提供的技術(shù)說明書不夠明細(xì)等）；3．樣品類：取樣、制樣和樣品處置的“實(shí)施細(xì)則”等；4．?dāng)?shù)據(jù)類：定量檢測結(jié)果的表達(dá)、異常數(shù)據(jù)的剔除、測量結(jié)果不確定度的評定等等。第49頁/共95頁實(shí)驗(yàn)室SOP的編制格式和內(nèi)容應(yīng)符合GB/T1.1-2009《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第一部分標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)構(gòu)和編寫規(guī)則》和GB/T20001.4-2001《標(biāo)準(zhǔn)編寫規(guī)則第4部分化學(xué)分析方法》的規(guī)定。避免以論文和規(guī)章制度的形式書寫。第50頁/共95頁4、方法驗(yàn)證與方法確認(rèn)正確理解方法的驗(yàn)證和確認(rèn)驗(yàn)證

verification——針對的是標(biāo)準(zhǔn)方法?！?yàn)證實(shí)驗(yàn)室人員、設(shè)備、材料和樣品、方法文本環(huán)境等資源和條件滿足標(biāo)準(zhǔn)要求的能力，以及操作標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)際能力。第51頁/共95頁確認(rèn)

confirmation——針對非標(biāo)準(zhǔn)方法、實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)（制定）的方法、超出其預(yù)定范圍使用的標(biāo)準(zhǔn)方法、擴(kuò)充和修改過的標(biāo)準(zhǔn)方法?！_認(rèn)實(shí)驗(yàn)室制定的非標(biāo)準(zhǔn)方法、實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)（制定）的方法、超出其預(yù)定范圍使用的標(biāo)準(zhǔn)方法、擴(kuò)充和修改過的標(biāo)準(zhǔn)方法是否具有方法的科學(xué)性、有效性和適用性。第52頁/共95頁方法驗(yàn)證——文本評價——關(guān)鍵性技術(shù)能力重現(xiàn)。方法確認(rèn)——實(shí)驗(yàn)——技術(shù)參數(shù)確立——與經(jīng)典方法比較或?qū)嶒?yàn)比對——形成SOP。第53頁/共95頁方法確認(rèn)的技術(shù)性確認(rèn)涉及安全、衛(wèi)生、環(huán)保等低含量檢測項(xiàng)目時，要考慮檢測方法的最低檢出限（LOD值）是否能夠達(dá)到該物質(zhì)的最高殘留限量值（MRL值），如方法的LOD值>MRL值，則不能將該方法作為檢測方法使用，必須重新選擇檢測靈敏度更高的方法。第54頁/共95頁方法確認(rèn)試驗(yàn)——做方法的標(biāo)準(zhǔn)曲線、添加標(biāo)準(zhǔn)回收率試驗(yàn)、最低檢出限試驗(yàn)和精密度試驗(yàn)等，并考慮方法的特異性和耐用性，如果可能，還應(yīng)進(jìn)行不確定度評估。應(yīng)用實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)真實(shí)地證明方法的適用性、準(zhǔn)確性和靈敏性。第55頁/共95頁化學(xué)分析方法確認(rèn)的具體技術(shù)指標(biāo)校準(zhǔn)曲線——數(shù)學(xué)方程以及校準(zhǔn)曲線的工作范圍，濃度范圍盡可能覆蓋一個數(shù)量級，至少作5個點(diǎn)（不包括空白）。對于篩選方法，線性回歸方程的相關(guān)系數(shù)不應(yīng)低于0.98，對于確證方法，相關(guān)系數(shù)不應(yīng)低于0.99。測試溶液中被測組分濃度必須在校準(zhǔn)曲線的線性范圍內(nèi)。第56頁/共95頁回收率試驗(yàn)——對于禁用物質(zhì)，回收率應(yīng)在方法測定低限、兩倍方法測定低限和十倍方法測定低限進(jìn)行三水平試驗(yàn)；對已制定最高殘留限量MRL的，回收率應(yīng)在方法測定低限、MRL、選一合適點(diǎn)進(jìn)行三水平試驗(yàn)；對于未制定MRL的，回收率應(yīng)在方法測定低限、常見限量指標(biāo)、選一合適點(diǎn)進(jìn)行三水平試驗(yàn)。

第57頁/共95頁被測組分含量回收率范圍（mg/kg）（%）＞10095～1051～10090～1100.1～180～110

＜0.160～120第58頁/共95頁精密度試驗(yàn)——對于禁用物質(zhì)，精密度試驗(yàn)應(yīng)在方法測定低限、兩倍方法測定低限和十倍方法測定低限三個水平進(jìn)行；對于已制定MRL的，精密度試驗(yàn)應(yīng)在方法測定低限、MRL、選一合適點(diǎn)三個水平進(jìn)行；對于未制定MRL的，精密度試驗(yàn)應(yīng)在方法測定低限、常見限量指標(biāo)、選一合適點(diǎn)三個水平進(jìn)行。重復(fù)測定次數(shù)>6。第59頁/共95頁被測組分含量室內(nèi)變異系數(shù)（CV，%）

1μg/kg3010μg/kg21100μg/kg151mg/kg1110mg/kg7.5100mg/kg5.31000mg/kg3.81%2.710%2.0100%1.3第60頁/共95頁測定低限——方法的測定低限按下式計(jì)算：

CL=3Sb/b

式中：CL

——方法的測定低限；Sb

——空白值標(biāo)準(zhǔn)偏差（一般平行測定20次得到）；b

——方法校準(zhǔn)曲線的斜率。也可采用標(biāo)準(zhǔn)加入試驗(yàn)法確定。第61頁/共95頁準(zhǔn)確度——重復(fù)分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（實(shí)物標(biāo)樣）或水平測試樣品，測定含量（經(jīng)回收率校正后），得出平均值與真值的偏差（變異系數(shù)）。

第62頁/共95頁真值含量（mg/kg）變異系數(shù)（%）＜0.001-50～

+200.001～0.01-30～+100.010～10-20～+1010～1000＜151000～10000＜10

＞10000＜5第63頁/共95頁特異性試驗(yàn)——對于檢測篩選方法和確證方法特異性必須予以規(guī)定，尤其對于確證方法必須盡可能清楚地提供待測物的化學(xué)結(jié)構(gòu)信息，僅基于色譜分析而沒有使用分子光譜測定的方法，不能用于確證方法。

第64頁/共95頁確證方法：（1）氣相色譜-質(zhì)譜；（2）液相色譜-質(zhì)譜；（3）免疫親和色譜/氣相色譜-質(zhì)譜；（4）氣相色譜-紅外光譜；（5）液相色譜-免疫層析；（6）標(biāo)準(zhǔn)菌株；（7）特征生化鑒別。第65頁/共95頁用于驗(yàn)證和確認(rèn)食品微生物檢驗(yàn)方法性能的試驗(yàn)技術(shù)包括：

①使用標(biāo)準(zhǔn)/參考菌株進(jìn)行核實(shí)；②與其他方法所得的結(jié)果進(jìn)行比較；③實(shí)驗(yàn)室間比對；④對影響結(jié)果的因素作系統(tǒng)性評審；⑤根據(jù)對方法的理論原理和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)的科學(xué)理解，對所得結(jié)果不確定度進(jìn)行評定。第66頁/共95頁以上驗(yàn)證和確認(rèn)食品微生物檢驗(yàn)方法性能的試驗(yàn)技術(shù)，可概略分為兩大類：實(shí)驗(yàn)室間驗(yàn)證/確認(rèn)試驗(yàn)（協(xié)作試驗(yàn)）和實(shí)驗(yàn)室內(nèi)驗(yàn)證/確認(rèn)試驗(yàn)（單一試驗(yàn)）。

實(shí)驗(yàn)室間驗(yàn)證/確認(rèn)試驗(yàn)是指在若干實(shí)驗(yàn)室內(nèi)由不同操作者進(jìn)行的驗(yàn)證/確認(rèn)試驗(yàn)，而實(shí)驗(yàn)室內(nèi)確認(rèn)試驗(yàn)是僅在特定的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行的驗(yàn)證/確認(rèn)試驗(yàn)。

第67頁/共95頁食品微生物檢驗(yàn)方法的驗(yàn)證建議實(shí)驗(yàn)室在以下情況下對檢驗(yàn)方法進(jìn)行嚴(yán)格的驗(yàn)證：

1.擬用經(jīng)過完整確認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn)方法以及經(jīng)過嚴(yán)格確認(rèn)的并被審批的非標(biāo)準(zhǔn)方法時；

2.培養(yǎng)基供應(yīng)商、人員、設(shè)備、儀器/試劑盒等發(fā)生變動時。

第68頁/共95頁微生物檢驗(yàn)方法驗(yàn)證和確認(rèn)的依據(jù)①美國官方分析化學(xué)家協(xié)會(AOAC)，執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)為：“AOACInternationalMethodsCommmitteeGuidelinesforValidationofQualitativeandQuantitativeFoodMicrobiologicalOfficialMethodsofAnlysis-2002”；②國際標(biāo)準(zhǔn)化組織(ISO)，執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)為：ISO/TR13843：2000《Waterquality--Guidanceonvalidationofmicrobiologicalmethods》和ISO16140:2003《Microbiologyoffoodandanimalfeedingstuffs--Protocolforthevalidationofalternativemethods》；第69頁/共95頁③NordVal：NV-DOC.D–2005-01-01《Protocolforthevalidationofalternativemicrobiologicalmethods》；④新加坡認(rèn)可委員會(SAC)：C&BandENV002《MethodValidationofMicrobiologicalMethods》。第70頁/共95頁5、非標(biāo)方法的控制和使用下列情況時，需要制訂非標(biāo)準(zhǔn)方法：——經(jīng)檢索無發(fā)布的標(biāo)準(zhǔn)方法和經(jīng)批準(zhǔn)使用的非標(biāo)準(zhǔn)方法可供選用；——對現(xiàn)有的標(biāo)準(zhǔn)方法作較大改動；——需要制定快速測試方法。第71頁/共95頁6、正確掌握不確定度評估的方法實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立測量不確定度評定程序，根據(jù)需要進(jìn)行不確定度評定。測量不確定度的評定與表示方法按《

JJF1059-1999測量不確定度評定與表示》進(jìn)行。

ISO/TS19036食品和動物飼料微生物學(xué)–定量檢驗(yàn)的不確定度評估指南第72頁/共95頁需要進(jìn)行不確定評估，并在檢測報告中給出不確定度值——：檢測方法有要求；測量不確定度與檢測結(jié)果的有效性或應(yīng)用領(lǐng)域有關(guān)；客戶提出要求；當(dāng)測試結(jié)果處于規(guī)定指標(biāo)臨界值附近時，測量不確定度對判斷結(jié)果符合性會產(chǎn)生影響。

第73頁/共95頁五、設(shè)施和環(huán)境條件的質(zhì)量控制1、設(shè)施和環(huán)境條件的評價重點(diǎn)關(guān)注——檢測標(biāo)準(zhǔn)對環(huán)境的要求、監(jiān)控設(shè)施和使用記錄、區(qū)域隔離和進(jìn)入。確認(rèn)證據(jù)——現(xiàn)場檢查、監(jiān)控記錄。第74頁/共95頁實(shí)驗(yàn)室的設(shè)施及環(huán)境條件的控制主要應(yīng)考慮足夠的空間、合理的布局、條件的控制和安全低風(fēng)險等。易忽視——區(qū)域隔離、限制進(jìn)入、監(jiān)控設(shè)施有效性確認(rèn)和使用記錄。第75頁/共95頁實(shí)驗(yàn)室應(yīng)具有進(jìn)行食品微生物和化學(xué)檢測所需的適宜、充分的設(shè)施條件。典型的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有檢測設(shè)施（專用于微生物、化學(xué)檢測和相關(guān)活動）及輔助設(shè)施（大門、走廊、管理區(qū)、樣品室、清潔間、儲存室、試劑室、氣體室、文檔室等）。某些檢測設(shè)備可能需要特殊的環(huán)境條件,并對其環(huán)境條件進(jìn)行監(jiān)控。第76頁/共95頁依據(jù)所檢測微生物的不同等級，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)對授權(quán)進(jìn)入的人員采取嚴(yán)格限制措施，并明確告知有關(guān)人員相關(guān)內(nèi)容。應(yīng)根據(jù)具體檢測活動（如檢測種類和數(shù)量等），有效分隔不相容的業(yè)務(wù)活動。應(yīng)采取措施將交叉污染的風(fēng)險降低到最小。第77頁/共95頁日常檢查——良好的通風(fēng)和采光、溫濕度監(jiān)控、相互干擾區(qū)域的隔離、檢驗(yàn)廢棄物的處置等。第78頁/共95頁

實(shí)驗(yàn)室應(yīng)制訂科學(xué)合理的微生物實(shí)驗(yàn)室環(huán)境監(jiān)測程序（如空氣落菌平板計(jì)數(shù)和表面棉拭子涂抹計(jì)數(shù)）。設(shè)定可接受的背景菌落數(shù)量，并且有文件化的程序來處理背景菌落總數(shù)超標(biāo)情況。數(shù)據(jù)分析應(yīng)傾向于能夠確定污染水平。重點(diǎn)監(jiān)測區(qū)域：樣品接收和儲藏區(qū)；樣品前處理區(qū)（如應(yīng)在被隔離的區(qū)域處理極易被嚴(yán)重污染的粉狀產(chǎn)品）；無菌區(qū)/生物安全柜。第79頁/共95頁六、實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制的實(shí)施質(zhì)量控制（qualitycontrol）是指為達(dá)到質(zhì)量要求所采取的作業(yè)技術(shù)和活動。質(zhì)量控制的目的——控制樣品檢測的各個環(huán)節(jié)和服務(wù)產(chǎn)生、形成或?qū)崿F(xiàn)過程中的各個程序并使它們達(dá)到規(guī)定的要求，把不符合控制在其形成的早期并加以消除。

第80頁/共95頁

檢測實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量控制應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行實(shí)驗(yàn)室的各項(xiàng)程序文件的規(guī)定和檢測工作的作業(yè)指導(dǎo)書。不僅控制檢測過程的結(jié)果，而且應(yīng)控制影響檢測結(jié)果產(chǎn)生過程質(zhì)量的各種因素，尤其是要控制其中的關(guān)鍵因素，如人員的能力、環(huán)境的條件、設(shè)備的準(zhǔn)確度、外部采購供應(yīng)的材料等。

第81頁/共95頁內(nèi)部質(zhì)量控制——技術(shù)質(zhì)量控制和工作質(zhì)量控制。技術(shù)質(zhì)量控制包括：測定方法、操作水平、儀器設(shè)備校準(zhǔn)、材料核查、實(shí)驗(yàn)環(huán)境等。工作質(zhì)量控制包括：遵守實(shí)驗(yàn)室程序文件規(guī)定、下一道工序?qū)ι弦坏拦ば虻臋z查、及時糾