沈陽藥科大學生物化學課程-篇細胞信息轉導

沈陽藥科大學生物化學課程——篇細胞信息轉導第1頁/共83頁概述單細胞生物

——

直接作出反應多細胞生物

——通過細胞間復雜的信號傳遞系統(tǒng)來傳遞信息，從而調控機體活動。外界環(huán)境變化時第2頁/共83頁細胞信息傳遞方式①通過相鄰細胞的直接接觸②通過細胞分泌各種化學物質來調節(jié)其他細胞的代謝和功能具有調節(jié)細胞生命活動的化學物質稱為信息物質第3頁/共83頁跨膜信號轉導的一般步驟特定的細胞釋放信息物質信息物質經(jīng)擴散或血循環(huán)到達靶細胞與靶細胞的受體特異性結合受體對信號進行轉換并啟動細胞內信使系統(tǒng)靶細胞產(chǎn)生生物學效應第4頁/共83頁

第一節(jié)

信息物質SignalMolecules第5頁/共83頁

一、細胞間信息物質定義細胞間信息物質(extracellularsignalmolecules)是由細胞分泌的調節(jié)靶細胞生命活動的化學物質的統(tǒng)稱，又稱作第一信使。第6頁/共83頁

化學性質*蛋白質和肽類（如生長因子、細胞因子、胰島素等）*氨基酸及其衍生物（如甘氨酸、甲狀腺素、腎上腺素等）*類固醇激素（如糖皮質激素、性激素等）*脂酸衍生物（如前列腺素）*氣體（如一氧化氮、一氧化碳）等第7頁/共83頁（一）神經(jīng)遞質又稱突觸分泌信號(synapticsignal)特點由神經(jīng)元細胞分泌；通過突觸間隙到達下一個神經(jīng)細胞；作用時間較短。例如：乙酰膽堿、去甲腎上腺素等分類第8頁/共83頁（二）內分泌激素又稱內分泌信號(endocrinesignal)特點由特殊分化的內分泌細胞分泌；通過血液循環(huán)到達靶細胞；大多數(shù)作用時間較長。

例如胰島素、甲狀腺素、腎上腺素等第9頁/共83頁按內分泌激素的化學組成分為含氮激素如腎上腺素、甲狀腺、促甲狀腺激素、胰高血糖素、胰島素、生長激素等類固醇激素如性激素、皮質醇、醛固酮等按激素受體的分布部位：胞內受體激素:甲狀腺素、類固醇激素胞膜受體激素:除甲狀腺素外其他的含氮激素

第10頁/共83頁（三）局部化學介質又稱旁分泌信號(paracrinesignal

特點由體內某些普通細胞分泌；不進入血循環(huán)，通過擴散作用到達附近的靶細胞；一般作用時間較短。例如生長因子、前列腺素等。第11頁/共83頁（四）氣體信號例如*NO合酶（NOS）通過氧化L-精氨酸的胍基而產(chǎn)生NO

*血紅素單加氧酶氧化血紅素產(chǎn)生的CO

第12頁/共83頁其他有些細胞間信息物質能對同種細胞或分泌細胞自身起調節(jié)作用，稱為自分泌信號(autocrinesignal)有些細胞間信息物質可在不同的個體間傳遞信息，如昆蟲的性激素。第13頁/共83頁

二、細胞內信息物質定義細胞內信息物質(intracellularsignalmolecules)

第一信號物質經(jīng)轉導刺激細胞內產(chǎn)生的傳遞細胞調控信號的化學物質。第14頁/共83頁化學性質無機離子：如Ca2+

脂類衍生物：如DAG、Cer糖類衍生物：如IP3核苷酸：如cAMP、cGMP信號蛋白分子第15頁/共83頁※第三信使(thirdmessenger)負責細胞核內外信息傳遞的物質，又稱為DNA結合蛋白，是一類可與靶基因特異序列結合的核蛋白，能調節(jié)基因的轉錄。如立早基因(immediate-earlygene)的編碼蛋白質。在細胞內傳遞信息的小分子物質，如：Ca2+、DAG、IP3、Cer、cAMP、cGMP、花生四烯酸及其代謝產(chǎn)物等。※第二信使(secondarymessenger)第16頁/共83頁細胞間信息物質影響細胞功能的途徑種類

信息物質受體

引起細胞內的變化神經(jīng)遞質乙酰膽堿、谷氨酸、–氨基丁酸質膜受體影響離子通道關閉生長因子類胰島素樣生長因-1、表皮生長因子、血小板衍生生長因子質膜受體引起酶蛋白和功能蛋白的磷酸化和去磷酸化，改變細胞的代謝和基因表達激素蛋白質、多肽及氨基酸衍生物類激素類固醇激素、甲狀腺素質膜受體胞內受體同上調節(jié)轉錄維生素

維生素A、維生素D

胞內受體

同上

目錄第17頁/共83頁第二節(jié)

受體Receptor第18頁/共83頁能與受體呈特異性結合的生物活性分子則稱配體(ligand)。受體的定義是細胞膜上或細胞內能特別識別生物活性分子并與之結合的成分，它能把識別和接受的信號正確無誤地放大并傳遞到細胞內部，進而引起生物學效應的特殊蛋白質，個別是糖脂。第19頁/共83頁根據(jù)細胞定位一、受體的分類、一般結構與功能存在于細胞質膜上的受體，絕大部分是鑲嵌糖蛋白。根據(jù)其結構和轉換信號的方式又分為三大類：離子通道受體，G蛋白偶聯(lián)受體和單跨膜受體。（一）膜受體(membranereceptor)目錄第20頁/共83頁1.環(huán)狀受體——配體依賴性離子通道乙酰膽堿受體第21頁/共83頁2.G蛋白偶聯(lián)受體(G-proteincoupledreceptors,GPCRs)又稱七個跨膜螺旋受體/蛇型受體(serpentinereceptor)

G蛋白偶聯(lián)受體的結構矩型代表-螺旋，N端被糖基化，C端的半胱氨酸被棕櫚酰化。目錄第22頁/共83頁受體結構的特點*受體的N端可有不同的糖基化。*受體內有一些高度保守的半胱氨酸殘基，對維持受體的結構起到關鍵作用。*胞內的第二和第三個環(huán)能與G-蛋白相偶聯(lián)。第23頁/共83頁*C-末端的高度保守的Cys殘基在腎上腺素能α受體、腎上腺素能β受體和視紫質受體中可被棕櫚?；?，可穩(wěn)定受體胞內部分的三級結構。*受體的C-末端和胞內第三環(huán)含有多個Thr和Ser殘基可被磷酸化，與抑制蛋白——β-視紫紅質抑制蛋白（arrestin）結合，使受體不能再活化G蛋白而失活。第24頁/共83頁※G蛋白(guanylatebindingprotein)是一類和GTP或GDP相結合、位于細胞膜胞漿面的外周蛋白，由、、三個亞基組成。有兩種構象：非活化型；活化型第25頁/共83頁兩種G蛋白的活性型和非活性型的互變目錄第26頁/共83頁RＲHACγαβGDPαGTPβγ腺苷酸環(huán)化酶ACATPcAMP第27頁/共83頁信息傳遞過程中的Ｇ蛋白第28頁/共83頁

此類受體的信息傳遞可歸納為

激素

受體Ｇ蛋白酶

第二信使蛋白激酶酶或其他功能蛋白

生物學效應第29頁/共83頁3.單個跨膜螺旋受體

含TPK結構域的受體EGF:表皮生長因子IGF-1:胰島素樣生長因子PDGF:血小板衍生生長因子FGF:成纖維細胞生長因子目錄第30頁/共83頁與配體結合后具有酪氨酸蛋白激酶活性，如胰島素受體insulingrowthfactorreceptor,IGF-R

表皮生長因子受體(epidermalgrowthfactorreceptor,EGF-R)。與配體結合后，可與酪氨酸蛋白激酶偶聯(lián)而表現(xiàn)出酶活性，如生長激素受體、干擾素受體。非酪氨酸蛋白激酶受體型酪氨酸蛋白激酶受體型（催化型受體）目錄第31頁/共83頁自身磷酸化(autophosphorylation)

當配體與單跨膜螺旋受體結合后，催化型受體(catalyticreceptor)大多數(shù)發(fā)生二聚化，二聚體的酪氨酸蛋白激酶(tyrosineproteinkinase,TPK)被激活，彼此使對方的某些酪氨酸殘基磷酸化，這一過程稱為自身磷酸化。該型受體與細胞的增殖、分化、分裂及癌變有關第32頁/共83頁*受體跨膜區(qū)由22～26個氨基酸殘基構成一個α-螺旋，高度疏水。*

胞外區(qū)為配體結合部位。*胞內區(qū)為酪氨酸蛋白激酶功能區(qū)（又稱SH1,Scrhomology1domain，與Src的酪氨酸蛋白激酶區(qū)同源）位于C末端，包括ATP結合和底物結合兩個功能區(qū)。受體結構第33頁/共83頁*該受體的下游常含有SH2結構域能與酪氨酸殘基磷酸化的多肽鏈結合SH3結構域能與富含脯氨酸的肽段結合PH結構域(pleckstrinhomologydomain)

識別具有磷酸化的絲氨酸和蘇氨酸的短肽，并能與G蛋白的βγ復合物結合,還能與帶電的磷脂結合第34頁/共83頁TGFβ的Ⅰ型和Ⅱ型受體目錄第35頁/共83頁4.具有鳥嘌呤環(huán)化酶活性的受體胞外胞內膜受體可溶性受體PKHGCGC具有鳥苷酸環(huán)化酶活性的受體結構

PKH：激酶樣結構域

GC：鳥苷酸環(huán)化酶結構域目錄第36頁/共83頁⑴

受體的結構（二）胞內受體(intracellularreceptor)位于細胞漿和細胞核中的受體，全部為DNA結合蛋白。高度可變區(qū)位于N端，具有轉錄活性DNA結合區(qū)含有鋅指結構激素結合區(qū)位于C端，結合激素、熱休克蛋白，使受體二聚化，激活轉錄鉸鏈區(qū)第37頁/共83頁核受體結構示意圖目錄第38頁/共83頁⑵

相關配體類固醇激素、甲狀腺素和維甲酸等⑶

功能多為反式作用因子，當與相應配體結合后，能與DNA的順式作用元件結合，調節(jié)基因轉錄。第39頁/共83頁

二、受體作用的特點

高度專一性

高度親和力

可飽和性

特定的作用模式可逆性配體濃度受體飽和度（％）配體－受體結合曲線第40頁/共83頁

三、受體活性的調節(jié)

磷酸化與脫磷酸化作用膜磷脂的代謝的影響酶促水解作用Ｇ蛋白的調節(jié)第41頁/共83頁第三節(jié)信息的傳遞途徑SignalTransductionPathway第42頁/共83頁

一、膜受體介導的信息傳遞cAMP-蛋白激酶途徑–Ca2+-依賴性蛋白激酶途徑cGMP-蛋白激酶途徑

酪氨酸蛋白激酶途徑

核因子途徑TGF-β途徑第43頁/共83頁（一）cAMP-蛋白激酶Ａ途徑組成胞外信息分子，受體，G蛋白，腺苷酸環(huán)化酶(adenylatecyclase，AC)，cAMP，蛋白激酶A(proteinkinaseA，PKA)第44頁/共83頁1.cAMP的合成與分解PPiATPACMg2+cAMP5′-AMP

磷酸二酯酶H2OMg2+第45頁/共83頁cAMPATPACPPiAMPPDEH2O磷酸二酯酶(phosphodiesterase,PDE)腺苷酸環(huán)化酶(adenylatecyclase,AC)第46頁/共83頁2．cAMP的作用機理PKA的激活R調節(jié)亞基C催化亞基目錄第47頁/共83頁RR（cAMP-dependentproteinkinase，PKA）R：調節(jié)亞基C：催化亞基cAMP蛋白激酶AＣＣ第48頁/共83頁3．PKA的作用⑴

對代謝的調節(jié)作用通過對效應蛋白的磷酸化作用，實現(xiàn)其調節(jié)功能。第49頁/共83頁

磷酸化酶激酶ｂ磷酸化酶激酶ａATP磷酸化酶ｂ磷酸化酶ａATP

PPi磷蛋白磷酸酶磷蛋白磷酸酶H2OPPiPKA抑制物Ｉa抑制物Ｉb

ATP磷蛋白磷酸酶PPi腎上腺素對糖原代謝的影響

腎上腺素＋受體

腎上腺素·

受體復合物激活Ｇ蛋白激活ACATPcAMPPKA目錄第50頁/共83頁受cAMP調控的基因中，在其轉錄調控區(qū)有一共同的DNA序列(TGACGTCA)，稱為cAMP應答元件(cAMPresponseelement,CRE)?？膳ccAMP應答元件結合蛋白

(cAMPresponseelementboundprotein,CREB)相互作用而調節(jié)此基因的轉錄。(2)對基因表達的調節(jié)作用第51頁/共83頁GsACATPcAMPCCRRCC

蛋白磷酸化RR2cAMP2cAMPCREBNPiPiPi

轉錄活化域DNA結合域細胞膜核膜第52頁/共83頁ＣＣ結構基因ＣＲＥＢＣＲＥＢ細胞核PiPiＣＲＥＢPiＣＲＥＢPiＣＲＥDNA蛋白質第53頁/共83頁第54頁/共83頁（二）Ca2+－依賴性蛋白激酶途徑1.Ca2+－磷脂依賴性蛋白激酶途徑組成胞外信息分子，G蛋白蛋白激酶C(proteinkinaseC,PKC)磷脂酶C(phospholipaseC,PLC)甘油二脂(diacylglycerol,DAG)三磷酸肌醇(inositol1,4,5triphosphate,IP3)第55頁/共83頁(1)DAG，IP3的生物合成和功能PIP2PLCDAG+IP３第56頁/共83頁除PLC能特異性地水解PIP2生成DAG外，還可通過下面途徑生成DAG。磷脂酰膽堿(PC)磷脂酸(PA)+膽堿DAG磷脂酶D(PLD)第57頁/共83頁DAG，IP3的功能DAG：在磷脂酰絲氨酸和Ca2+協(xié)同下激活PKCIP3：與內質網(wǎng)和肌漿網(wǎng)上的受體結合，促使細胞內Ca2+釋放第58頁/共83頁(2)PKC的結構與生理功能結構與分型：其氨基酸序列有四個保守區(qū)（C1、C2、C3、C4)和可變區(qū)（Ｖ），分為調節(jié)域和催化域。C1：富含Cys，DAG、TPA結合部位C2：Ca2+

結合部位

調節(jié)域C3：ATP結合部位C4：結合底物并進行磷酸化轉移的場所

催化域第59頁/共83頁

分類Ca2+

依賴型：，，，Ca2+

非依賴型：、、、、

調節(jié)域

催化域C1C2C3C4，，C1C3C4、、、C3C4C1第60頁/共83頁②調節(jié)基因表達PKC對基因的活化分為早期反應和晚期反應。*PKC的生理功能①調節(jié)代謝活化的PKC引起一系列靶蛋白的絲、蘇氨酸殘基磷酸化。靶蛋白包括：質膜受體、膜蛋白和多種酶。第61頁/共83頁PKC對基因的早期活化和晚期活化目錄第62頁/共83頁2.Ca2+－鈣調蛋白依賴性蛋白激酶途徑受體、G蛋白、PLC、IP3、Ca2+、鈣調蛋白、CaM激酶(Ca2+－CaM激酶途徑)鈣調蛋白(calmodulin,CaM)有四個Ca2+結合位點。與Ca2+一起激活CaM激酶，磷酸化多種功能蛋白質（絲、蘇氨基酸殘基）。組成第63頁/共83頁（三）cGMP-蛋白激酶G途徑受體，鳥苷酸環(huán)化酶(guanylatecyclase,GC)，cGMP,蛋白激酶G(proteinkinaseG，PKG)組成cGMP的合成和降解

GTPGＣMg2+PPicGMP

磷酸二酯酶H2OCa2+或Mg2+5′-GMP第64頁/共83頁使有關蛋白或酶類的絲、蘇氨酸殘基磷酸化PKG的功能NOGCPKG

蛋白質磷酸化GCG蛋白GTPcGMP激素R胞膜*生理效應：如心鈉素、NO舒張血管平滑肌。第65頁/共83頁

（四）酪氨酸蛋白激酶途徑(tyrosine–proteinkinase,TPK)酪氨酸蛋白激酶分類受體型TPK（位于細胞質膜上）如胰島素受體、生長因子受體及原癌基因（erb-B、kit、fins等）編碼的受體非受體型TPK（位于胞漿）如底物酶JAK和原癌基因（src、yes、ber-abl等）編碼的TPK第66頁/共83頁1.受體型TPK-Ras-MAPK途徑GRB2(growthfactorreceptorboundprotein2）SH2域

(srchomology2domain)

細胞內某些連接物蛋白共有的氨基酸序列，與原癌基因src編碼的酪氨酸蛋白激酶區(qū)同源，該區(qū)域能識別磷酸化的酪氨酸殘基并與之結合。

組成：催化性受體，GRB2,SOS,Ras蛋白,Raf蛋白，MAPK系統(tǒng)SH2SH3第67頁/共83頁

SOS(sonofsevenless)富含脯氨酸，可與SH3結合，促使Ras的GDP換成GTP。Ras蛋白：原癌基因產(chǎn)物，類似與G蛋白的G亞基Raf蛋白：具有絲／蘇氨酸蛋白激酶活性MAPK系統(tǒng)(mitogen-activatedproteinkinase)包括MAPK、MAPK激酶（MAPKK）、MAPKK激酶（MAPKKK），是一組酶兼底物的蛋白分子。目錄第68頁/共83頁

細胞外信號EGF、PDGF等具PTK活性的受體GRB2

PSOS

PRas-GTP

PRaf調節(jié)其他蛋白活性MAPKKMAPK

P

P

P細胞核反式作用因子調控基因表達細胞膜二聚化目錄第69頁/共83頁2.JAKs-STAT途徑*非催化性受體*JAKs(januskinases)*信號轉導子和轉錄激動子

(signaltransductorsandactivatorsoftranscription，STAT)組成第70頁/共83頁干擾素誘導JAK、STAT復合體核內轉移及調節(jié)基因轉錄機制目錄第71頁/共83頁（五）核因子B途徑核因子B(nuclearfactor-

B,NF-

B)