小鼠抗體的分類及生產(chǎn)技術(shù)介紹

———小鼠抗體的分類及生產(chǎn)技術(shù)介紹

小鼠抗體是科研實(shí)驗(yàn)中常用的一種抗體，它主要有IgA、IgD、IgE、IgG和IgM五種類型，下面我就小鼠抗體分類及使用實(shí)驗(yàn)室儀器進(jìn)行小鼠抗體生產(chǎn)技術(shù)做一下簡單介紹：

小鼠抗體同種型/類、亞類和小鼠抗體同種型

與人類相同，小鼠有五種抗體同種型（IgA、IgD、IgE、IgG和IgM）。每個(gè)同種型都有不同的重鏈。同種型也稱為類?？贵w的另一個(gè)名稱是免疫球蛋白，因此后綴"Ig'表示抗體類別和亞類。幼稚B細(xì)胞產(chǎn)生IgM和IgD。在B細(xì)胞成熟過程中，通過同種型轉(zhuǎn)換，成熟的B細(xì)胞將產(chǎn)生IgG、IgA或IgE同種型和亞類中的一種。不同的同種型在體內(nèi)具有不同的半衰期，從12小時(shí)到8天不等。

小鼠同種型基因

每條重鏈由可變區(qū)和恒定區(qū)組成。恒定區(qū)被指定為不同的基因，盡管它們僅構(gòu)成免疫球蛋白重鏈的一部分。

對(duì)于IgG2a和IgG2c同種型：具有Igh1-b等位基因的近交小鼠品系具有IgG2c同種型，而不是IgG2a。除其他同種型外，鼠類重鏈基因座僅具有這兩種同種型基因中的一種。小鼠IgG2a支架有時(shí)用于重組抗體表達(dá)。

表1列出了小鼠抗體類別、子類、基因名稱以及NCBI和IMGT基因數(shù)據(jù)庫的鏈接。

表2列出了實(shí)驗(yàn)室中一些常用動(dòng)物物種的不同同種型和亞類基因組。IgG2a在某些小鼠品系中不存在，例如C57BL、SJL和NOD小鼠，它們具有IgG2c。

小鼠抗體分子量

IgA、IgD和IgG的重鏈具有一個(gè)具有三個(gè)免疫球蛋白(Ig)結(jié)構(gòu)域的恒定區(qū)。例如小鼠IgA重鏈恒定區(qū)有344個(gè)氨基酸，小鼠IgG1恒定區(qū)有324個(gè)氨基酸。其他類型的重鏈可能具有不同數(shù)量的免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域。例如，分泌型和膜結(jié)合型IgD重鏈恒定區(qū)有兩個(gè)Ig結(jié)構(gòu)域。IgE和IgM的重鏈有一個(gè)帶有四個(gè)免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域的恒定區(qū)。小鼠IgM重鏈恒定區(qū)有475個(gè)氨基酸。來自所有同種型的重鏈都有一個(gè)帶有單個(gè)免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域的可變區(qū)。每個(gè)免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域長約110個(gè)氨基酸。每條IgD和IgG重鏈約450個(gè)氨基酸，每條IgE和IgM重鏈約550個(gè)氨基酸。每條輕鏈（kappa或lambda）都有一個(gè)恒定的免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域和一個(gè)可變的免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域，大約有211到217個(gè)氨基酸。常見的IgG同種型的分子量為150KD。在還原條件下，每條重鏈約為50KD，每條輕鏈約為25KD。IgM往往以五聚體或六聚體形式存在，其中IgM分子通過二硫鍵共價(jià)連接，從而產(chǎn)生970KD的分子量。由于免疫球蛋白是糖基化的，因此表觀分子量可能與標(biāo)稱分子量不同，有時(shí)甚至區(qū)別較大。

小鼠抗體生產(chǎn)

小鼠是單克隆抗體產(chǎn)生的主要?jiǎng)游锼拗?，也是多克隆抗體產(chǎn)生的宿主。小鼠單克隆抗體生產(chǎn)也會(huì)涉及到實(shí)驗(yàn)室儀器、實(shí)驗(yàn)耗材及一些科研試劑。比如：用外源抗原以及常用的弗氏佐劑或新型水溶性QuickAntibody對(duì)小鼠（通常是BALB/c小鼠，進(jìn)行免疫。小鼠單克隆抗體也可以通過將來自特定小鼠品系的未免疫脾細(xì)胞與自身抗體融合直接獲得，如抗SMY12抗體的情況。其他菌株，如C57BL/6、NMRI、C3H和SJL，以及其他佐劑如殼聚糖、LQ或不完全弗氏佐劑，以及過表達(dá)免疫原的埃文細(xì)胞，也可以使用?；蚬こ绦∈笃废狄部梢宰鳛樗拗鏖_發(fā)特異性抗體，例如通過3Gn-T5基因敲除小鼠開發(fā)了一種對(duì)GM3神經(jīng)節(jié)苷脂具有高結(jié)合特異性的IgG單克隆抗體。截至2023年6月5日，科研數(shù)據(jù)庫列出了針對(duì)12039個(gè)人類基因、7144個(gè)小鼠基因、6475個(gè)大鼠基因以及來自其他156個(gè)物種的11079個(gè)基因的254742個(gè)小鼠單克隆抗體。

大多數(shù)單克隆抗體是在