仿制藥一般流程

仿制藥一般研發(fā)流程

2012.10.101一個(gè)完整的制劑研發(fā)流程應(yīng)該包括的基本內(nèi)容一、文獻(xiàn)調(diào)研和專利查詢二、處方前研究三、原輔料相容性研究四、處方工藝篩選和優(yōu)化五、影響因素實(shí)驗(yàn)六、小試穩(wěn)定性樣品制備和穩(wěn)定性研究七、中試放大和中試穩(wěn)定性研究八、藥品申報(bào)工作（資料撰寫、記錄臺(tái)賬樣品整理）2文獻(xiàn)藥品注冊(cè)狀況調(diào)研和專利查詢（一）藥品注冊(cè)狀況查詢：SFDA、FDA、EMEA（二）文獻(xiàn)檢索：國(guó)內(nèi)數(shù)據(jù)庫(kù)：CNKI、維普、萬方國(guó)外數(shù)據(jù)庫(kù)：Reaxys、Pubmed、CA、SciFinder等（三）專利查詢：中國(guó)專利局、歐洲專利網(wǎng)、美國(guó)專利網(wǎng)、注意：1、在進(jìn)行3.1類申報(bào)時(shí)，F(xiàn)DA的資料一般比較詳細(xì)，會(huì)得到很多有用的信息。特別要注意查詢。3處方前研究1、原料藥的理化性質(zhì)2、原料藥的生物學(xué)性質(zhì)3、劑型選擇41、原料藥的理化性質(zhì)包括原料藥的色澤、嗅味、pH值、pKa、粒度、晶型、比旋度、光學(xué)異構(gòu)體、熔點(diǎn)、水分、溶解度、脂水分配系數(shù)、溶劑化/或水合狀態(tài)，以及原料藥在固態(tài)和/或溶液狀態(tài)下對(duì)光、熱、濕、氧等條件下的穩(wěn)定性情況。有些性質(zhì)可以通過文獻(xiàn)查詢5對(duì)制劑影響較大的一些理化性質(zhì)pH值—注射劑時(shí)要重點(diǎn)考慮pKa—可以了解藥物在一定pH下的解離狀態(tài)，粗略地估計(jì)口服藥物的體內(nèi)吸收粒度—影響藥物的溶出速率和溶解度，難溶性藥物要特別關(guān)注晶型—影響藥物的溶出速率和溶解度，可能會(huì)影響體內(nèi)吸收溶解度—影響制劑的體內(nèi)吸收脂水分配系數(shù)（logP）—影響制劑的體內(nèi)吸收6需要給出研究報(bào)告的一些理化性質(zhì)粒度研究：主要針對(duì)難溶性藥物，可以先考察不同粒度的原料藥的溶出速率的影響，進(jìn)而考慮是否在處方設(shè)計(jì)時(shí)，控制原料藥的粒度。晶型研究：以前重視程度不夠，現(xiàn)在應(yīng)該引起足夠的重視。因?yàn)榛衔锏木蛯?duì)藥物的穩(wěn)定性、溶解度和溶出速率有很大的影響，另外目前存在很多化合物的晶型專利，有時(shí)需要繞開保護(hù)的晶型選擇另一種有效晶型。溶解度和溶出速率研究：溶解度分為特性溶解度和表觀溶解度（平衡溶解度），我們目前測(cè)定的藥物在不同pH值下的溶解度都屬于表觀溶解度。73、劑型選擇仿制藥要盡量選擇與原研藥相同的劑型，如果確實(shí)要改變劑型，一定要給出充分的理由，說明新劑型的突出優(yōu)點(diǎn)。8

原輔料相容性試驗(yàn)方法：HPLC、DSC等

原輔料相容性選擇那些輔料？9

SFDA指導(dǎo)原則與影響因素條件相似。輔料用量較大的（如稀釋劑等），可按主藥：輔料=1：5的比例混合，若用量較小的（如潤(rùn)滑劑等），可按主藥：輔料=20：1的比例混合，取一定量，放置在高濕、高溫、光照條件下10天，重點(diǎn)考察性狀、有關(guān)物質(zhì)等等，必要時(shí)，可用原料藥和輔料分別做平行對(duì)照實(shí)驗(yàn)，以判別是原料藥本身的變化還是輔料的影響。10

FDA相關(guān)指導(dǎo)原則

主藥：填充劑1：10主藥：崩解劑/粘合劑1：1主藥：潤(rùn)滑劑10：1條件為（1）40℃、RH75%開口；（2）40℃、RH75%閉口；（3）60℃閉口。于兩周、四周取樣檢查外觀性狀及有關(guān)物質(zhì)11處方工藝研究―處方設(shè)計(jì)無專利專利保護(hù)了關(guān)鍵技術(shù)和輔料，只能采用相近的技術(shù)和可替代輔料實(shí)現(xiàn)我們的目標(biāo)處方篩選過程重點(diǎn)要找出評(píng)價(jià)指標(biāo)？12基本要求篩選之前要有方案實(shí)驗(yàn)過程要有記錄--真實(shí)、及時(shí)、完整處方優(yōu)化要有比較和設(shè)定關(guān)鍵指標(biāo)實(shí)驗(yàn)結(jié)果要有分析和總結(jié)13處方篩選和優(yōu)化單因素考察，因素較多時(shí)可以采用正交設(shè)計(jì)和均勻設(shè)明確處方篩選和優(yōu)化的評(píng)價(jià)指標(biāo)，如溶出度、釋放度、有關(guān)物質(zhì)等如果研究過程中發(fā)現(xiàn)影響制劑質(zhì)量、穩(wěn)定性、藥效的重要因素，如原料藥的水分或輔料的某些指標(biāo)，應(yīng)進(jìn)行重點(diǎn)控制，確保藥品質(zhì)量14制劑工藝研究處方篩選后進(jìn)行工藝研究。一般同時(shí)進(jìn)行，但在資料中須分條理整理。一般須研究粘合劑用量范圍，制粒設(shè)備參數(shù)，原料粒徑控制，干燥方式及時(shí)間，整粒方式及參數(shù)，混合強(qiáng)度及時(shí)間，壓片速度，硬度等。一般根據(jù)經(jīng)驗(yàn)值作微調(diào)即可，或是對(duì)關(guān)鍵步驟進(jìn)行考察，不必全部詳細(xì)考察。對(duì)于常規(guī)工藝，經(jīng)過多批樣品驗(yàn)證即可。15工藝設(shè)計(jì)根據(jù)劑型的特點(diǎn)，結(jié)合已掌握的藥物理化性質(zhì)和生物學(xué)性質(zhì)，設(shè)計(jì)幾種基本合理的制劑工藝如果藥物存在多晶型現(xiàn)象，要注意制劑工藝過程中的粉碎、制粒、包衣過程對(duì)藥物晶型的影響。原料藥單獨(dú)晶型研究比較容易，與輔料一起進(jìn)行晶型研究難度較大。如果藥物對(duì)濕不穩(wěn)定，應(yīng)注意對(duì)生產(chǎn)環(huán)境的濕度進(jìn)行控制，制備工藝盡量避免水分的影響，可采用干法制粒。粉末直接壓片工藝等。易氧化藥物可將溶劑加熱放冷后再溶解藥物，可以加惰性氣體保護(hù)，溶劑除氧易揮發(fā)性藥物，最后加入，避免制備過程的損失16影響因素研究樣品批次和規(guī)模

影響因素樣品需要采用最終確定的處方工藝，制備批量滿足測(cè)定要求，一般制備一批，固體制劑批量為1000個(gè)制劑單位左右，注射劑則根據(jù)具體的放樣和測(cè)定要求，一般在幾十個(gè)制劑單位。影響因素批可與小試三批中的一批共用樣品進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。17放置條件

一般將制劑除去外包裝，分散放置于適宜容器中（常用培養(yǎng)皿），分別進(jìn)行高溫、高濕和光照實(shí)驗(yàn)。高溫條件為40℃和60℃；高濕條件為RH90%±5%和RH75%±5%；光照條件為4500Lx±500Lx。分為在以上實(shí)驗(yàn)條件下放置10天，在第5天和第10天取樣檢測(cè)。若供試品性質(zhì)穩(wěn)定，高溫試驗(yàn)可只進(jìn)行60℃條件，高濕試驗(yàn)可只進(jìn)行RH90%±5%。18小試穩(wěn)定性樣品制備和穩(wěn)定性研究樣品批次和規(guī)模

制備批量一般為三批，固體制劑批量為1000個(gè)制劑單位，注射劑則根據(jù)放樣和測(cè)定要求放樣，一般每個(gè)批次在幾十個(gè)制劑單位。19放置條件分為長(zhǎng)期和加速條件放樣，分別采用擬上市包裝三批進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。加速實(shí)驗(yàn)一般選擇40℃±2℃、75%±5%條件進(jìn)行6個(gè)月試驗(yàn)，在第0、1、2、3、6個(gè)月末取樣測(cè)定。若6個(gè)月內(nèi)樣品經(jīng)檢測(cè)有不符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)現(xiàn)象，應(yīng)在30℃±2℃、65%±5%條件下同法進(jìn)行6個(gè)月試驗(yàn)。長(zhǎng)期實(shí)驗(yàn)一般選擇25℃±2℃、60%±5%條件進(jìn)行36個(gè)月試驗(yàn)，在第0、3、6、9、12、18、24、36個(gè)月末取樣測(cè)定。20藥品申報(bào)工作內(nèi)容申報(bào)資料撰寫研發(fā)原始記錄整理樣品制備批記錄、中控記錄、檢驗(yàn)記錄整理研發(fā)儀器和設(shè)備臺(tái)帳整理穩(wěn)定性樣品留取樣臺(tái)賬整理樣品、對(duì)照品使用情況統(tǒng)計(jì)及剩余樣品整理樣品出入庫(kù)臺(tái)賬21制劑質(zhì)量研究項(xiàng)目性狀鑒別檢查含量均勻度溶出度釋放度雜質(zhì)殘留溶劑其他含量2023/4/1922性狀制劑的性狀是考察樣品的外形和顏色。片劑應(yīng)描述是什么顏色的壓制片或包衣片（包薄膜衣或糖衣），除去包衣后片芯的顏色，以及片子的形狀，如異形片（長(zhǎng)條形，橢圓形，三角形等）；片面有無印字或刻痕或有商標(biāo)記號(hào)等也應(yīng)描述。硬膠囊劑應(yīng)描述內(nèi)容物的顏色、形狀等。注射液一般為澄明液體（水溶液），但也有混懸液或粘稠性溶液，需注意對(duì)顏色的描述，還應(yīng)考察貯藏過程中性狀是否有變化。23鑒別通常采用靈敏度較高、專屬性較強(qiáng)、操作較簡(jiǎn)便、不受輔料干擾的方法對(duì)制劑進(jìn)行鑒別。一般采用HPLC法：在含量測(cè)定項(xiàng)下記錄的色譜圖中，供試品溶液中主峰的保留時(shí)間與對(duì)照品溶液中主峰的保留時(shí)間一致2023/4/1924檢查口服片劑、膠囊劑除按制劑通則檢查外，一般還應(yīng)進(jìn)行溶出度、雜質(zhì)（或已知雜質(zhì)）等檢查；緩控釋制劑、腸溶制劑、透皮吸收制劑等應(yīng)進(jìn)行釋放度檢查；小劑量制劑（主藥含量低）應(yīng)進(jìn)行含量均勻度檢查；注射劑應(yīng)進(jìn)行pH值、顏色（或溶液的顏色）、雜質(zhì)（或已知雜質(zhì)）檢查；注射用粉末或凍干品還應(yīng)檢查干燥失重或水分；大體積注射液檢查重金屬與不溶性微粒等。2023/4/1925含量均勻度化學(xué)藥物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)建立的規(guī)范化過程技術(shù)指導(dǎo)原則含量均勻度系指小劑量口服固體制劑、粉霧劑或注射用無菌粉末等制劑中每片（個(gè)）含量偏離標(biāo)示量的程度；片劑、膠囊劑或注射用無菌粉末，規(guī)格小于10mg（含10mg）的品種或主藥含量小于每片（個(gè)）重量5%的品種；其它制劑，標(biāo)示量小于2mg或主藥含量小于每個(gè)重量2%的品種；復(fù)方制劑應(yīng)對(duì)符合上述條件的組分進(jìn)行含量均勻度檢查。對(duì)于藥物的有效濃度與毒副反應(yīng)濃度比較接近的品種或混勻工藝較困難的品種，每片（個(gè)）標(biāo)示量不大于25mg者，應(yīng)進(jìn)行含量均勻度研究。2010版中國(guó)藥典附錄XE含量均勻度系指小劑量或單劑量的固體制劑、半固體制劑和非均相液體制劑的每片（個(gè)）含量偏離標(biāo)示量的程度。片劑、硬膠囊劑或注射用無菌粉末，每片（個(gè)）標(biāo)示量不大于25mg或主藥含量不大于每片（個(gè)）重量25%者；內(nèi)容物非均一溶液的軟膠囊、單劑量包裝的口服混懸液、透皮貼劑、吸入劑和栓劑；復(fù)方制劑僅檢查符合上述條件的組分；凡檢查含量均勻度的制劑，一般不再檢查重（裝）量差異2023/4/1926含量均勻度限度取10片（個(gè)）計(jì)算：A+1.80S≤15.0，供試品符合規(guī)定；A+S>15.0，不符合規(guī)定；如A+1.80S>15.0，A+S≤15.0，另取20片（個(gè)）復(fù)試。依據(jù)30片（個(gè)）數(shù)據(jù)計(jì)算：A+1.45S≤15.0，符合規(guī)定；A+1.45S>15.0，不符合規(guī)定。單劑量包裝的口服混懸劑、內(nèi)充混懸物的軟膠囊劑、膠囊型或泡囊型粉霧劑、單劑量包裝的眼用、耳用、鼻用混懸劑、固體或半固體制劑，其限度應(yīng)為±20%；透皮貼劑、栓劑限度應(yīng)為±25%.2023/4/1927溶出度凡檢查溶出度的制劑，不再進(jìn)行崩解時(shí)限的檢查。溶出度研究應(yīng)測(cè)定至少三批樣品，考察其溶出曲線和溶出均一性。對(duì)易溶于水的藥物，在質(zhì)量研究中亦應(yīng)考察其溶出度，但溶出度檢查不一定訂入質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

2023/4/1928釋放度緩釋制劑、控釋制劑、腸溶制劑、透皮貼劑均應(yīng)進(jìn)行釋放度研究。通常應(yīng)測(cè)定至少三批樣品，考察其釋放曲線和釋放均一性，并對(duì)釋藥模式（零級(jí)、一級(jí)、Higuchi方程等）進(jìn)行分析。

凡檢查釋放度的制劑，不再進(jìn)行崩解時(shí)限的檢查。2023/4/1929溶出度/釋放度對(duì)測(cè)定方法進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證，主要從以下幾方面進(jìn)行考慮：1、溶出及釋放的方法，主要考察溶出介質(zhì)的選擇、溶出條件的選擇（槳法或轉(zhuǎn)籃法）、轉(zhuǎn)速的選擇，主要通過溶出曲線進(jìn)行評(píng)價(jià)。

2、對(duì)溶出的檢測(cè)方法進(jìn)行驗(yàn)證，從專屬性和準(zhǔn)確性進(jìn)行評(píng)價(jià)

（1）需要進(jìn)行輔料的干擾試驗(yàn)

（2）進(jìn)行檢測(cè)方法的系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

（3）進(jìn)行回收率試驗(yàn)

3、對(duì)試驗(yàn)方法進(jìn)行驗(yàn)證

（1）需要進(jìn)行進(jìn)樣精密度試驗(yàn)

（2）進(jìn)行溶出液穩(wěn)定性試驗(yàn)

4、對(duì)批內(nèi)及批間差異進(jìn)行驗(yàn)證

（1）進(jìn)行溶出重復(fù)性試驗(yàn)

（2）進(jìn)行溶出均一性試驗(yàn)2023/4/1930溶出度/釋放度溶出度/釋放度方法的確立方法學(xué)驗(yàn)證2023/4/1931方法的確立

參考上市產(chǎn)品的溶出度測(cè)定條件溶出方法的選擇：籃法、漿法、小杯法溶出介質(zhì)篩選：自制與參比制劑在pH1.0鹽酸、pH4.5醋酸鹽緩沖液、pH6.8磷酸鹽緩沖液、純化水中的溶出曲線要相似，用相似因子（f2）判斷。不同溶出介質(zhì)中溶出曲線，并非溶出越快越好，而應(yīng)該是對(duì)產(chǎn)品有較強(qiáng)的區(qū)分能力，而亦能在一定程度上反應(yīng)體內(nèi)實(shí)際吸收情況

2023/4/1932方法的確立溶出介質(zhì)體積的選擇：使藥物符合漏槽條件漏槽條件：即所用介質(zhì)的體積應(yīng)達(dá)到被測(cè)物質(zhì)在37℃時(shí)在此介質(zhì)中達(dá)到飽和溶液濃度的體積的3～10倍。指溶出到介質(zhì)中的藥物很快被介質(zhì)稀釋帶走，藥物的溶出不受溶出介質(zhì)中藥物濃度的影響，亦即濃度差不是藥物溶出的限速步驟。轉(zhuǎn)速的選擇：一般從50轉(zhuǎn)開始，若速度提高須有充分理由。

2023/4/1933方法的確立溶出度指標(biāo)制定：在選擇的方法及溶出介質(zhì)和預(yù)選的轉(zhuǎn)速下測(cè)定不同時(shí)間的溶出量，建立溶出曲線，從圖譜上來確定取樣液時(shí)間，一般溶出曲線的拐點(diǎn)處后推10-15分鐘。溶出度均勻性試驗(yàn)（批內(nèi)）：確定工藝的穩(wěn)定性在確定的條件下測(cè)定6片（粒）樣品的溶出曲線，6條溶出曲線進(jìn)行比較，應(yīng)基本均勻一致。

2023/4/1934方法的確立溶出曲線試驗(yàn)（重現(xiàn)性，批間）：考察方法設(shè)定的取樣時(shí)間以及限度是否合理。通過溶出曲線也可以看出藥物在何時(shí)能達(dá)到最大釋放，以及是否能達(dá)到最大釋放。

2023/4/19溶出曲線的RSD要求時(shí)間點(diǎn)溶出結(jié)果的RSD第一時(shí)間點(diǎn)<20%自第二時(shí)間點(diǎn)至最后時(shí)間點(diǎn)<10%35方法學(xué)驗(yàn)證--只考察一種介質(zhì)的HPLC法或UV法若用UV須進(jìn)行紫外方法學(xué)考察：最大吸收波長(zhǎng)掃描、輔料干擾試驗(yàn)、濾膜吸附、線性、回收率試驗(yàn)、進(jìn)樣精密度、溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)

若用HPLC測(cè)定須進(jìn)行HPLC方法學(xué)考察：色譜條件、濾膜吸附、線性、進(jìn)樣精密度、回收率試驗(yàn)、溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)

2023/4/1936輔料干擾試驗(yàn)測(cè)定方法：取對(duì)照品溶液掃描，一份同等濃度的樣品或樣品濃度略低于對(duì)照品溶液。如果沒有干擾，二條紫外掃描圖基本重合，如果有干擾，供試品的掃描圖會(huì)高于對(duì)照品溶液。

2023/4/1937濾膜吸附試驗(yàn)注意事項(xiàng)：(1)過濾時(shí)濾膜與主成分間存在著一個(gè)吸附飽和過程，濾膜吸附一定量后達(dá)到飽和，不再吸附。(2)吸附量2%以下時(shí)可忽略不計(jì)；超過2%應(yīng)注意。(3)0.45μm濾膜吸附率高于0.80μm。(4)煮沸1.5h處理提高微孔濾膜的通透性,減小吸附作用效果好于浸泡24h。方法：（1）取溶出液，分別過濾不同體積的初濾液后測(cè)定，觀察響應(yīng)值的變化情況，以知曉被測(cè)藥物與濾膜的吸附情況。

(2)取樣后一份不過濾，直接采用高速離心，取上清液，與過濾掉一定體積后的另一份續(xù)濾液比較，觀察兩者間的測(cè)定數(shù)據(jù)是否存在顯著性差異。判定自動(dòng)取樣溶出儀的固有濾膜是否存在吸附時(shí)，一般采用該法。

(3)對(duì)照品溶液，經(jīng)濾膜過濾一定體積后，與原溶液進(jìn)行比較，觀察測(cè)定前后數(shù)據(jù)的變化情況。2023/4/1938線性要求：溶出度測(cè)定以釋放量的10%～120%間選取≥5個(gè)點(diǎn)即可,每個(gè)濃度進(jìn)3針?！羁山邮軜?biāo)準(zhǔn)(常量):R≥0.998(0.990),Y軸截距在100％響應(yīng)值的2%(25%)以內(nèi),響應(yīng)因子RSD≤2.0%(10%)。Y＝KX+b如果和含量測(cè)定方法一樣，可不做；如果和含量測(cè)定的濃度不同，增加線性范圍；如果和含量定方法不一樣，要求要做此項(xiàng)。2023/4/1939分別配制濃度為80％、100％和120％的供試品溶液各三份，分別測(cè)定其含量，將實(shí)測(cè)值與理論值比較，計(jì)算回收率☆可接受標(biāo)準(zhǔn)：98.0～102.0%RSD≤2.0(n=9)每個(gè)樣品進(jìn)3針，共9針

2023/4/19回收率試驗(yàn)40當(dāng)和含量的溶劑不同時(shí)，須重新考察。主成分溶解于溶出介質(zhì)后，因進(jìn)行穩(wěn)定性考察。(1)如不穩(wěn)定，則應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)中注明取樣后立即測(cè)定；(2)溶液不穩(wěn)定時(shí)一般采用對(duì)照品平行操作法。每個(gè)樣1針

2023/4/19溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)41精密度同含量測(cè)定連續(xù)進(jìn)6針

2023/4/19精密度42含量測(cè)定方法學(xué)驗(yàn)證HPLC法考察：系統(tǒng)適用性、專屬性、線性、進(jìn)樣精密度、溶液穩(wěn)定性、耐用性、重復(fù)性、回收率。

2023/4/1943系統(tǒng)適用性是一份樣品連續(xù)進(jìn)樣6針，在沒有特殊規(guī)定的條件下，一般是取有關(guān)物質(zhì)項(xiàng)下的供試品溶液連續(xù)進(jìn)樣6針，主峰峰面積的RSD<2.0%，主峰保留時(shí)間的RSD<1.0%。另外，主峰的拖尾因子不得大于2.0，主峰與雜質(zhì)峰必須達(dá)到基線分離，主峰的理論塔板數(shù)應(yīng)符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定。共6針

2023/4/1944專屬性（陰性對(duì)照試驗(yàn)）配制空白輔料，與樣品相同的溶劑溶解，考察輔料是否干擾主藥測(cè)定?？山邮艿臉?biāo)準(zhǔn)為：空白對(duì)照應(yīng)無干擾，主成分與各有關(guān)物質(zhì)應(yīng)能完全分離，分離度不得小于2.0。以二極管陣列檢測(cè)器進(jìn)行純度分析時(shí)，主峰的純度因子應(yīng)大于980。

2023/4/1945系統(tǒng)適用性與專屬性的區(qū)別和聯(lián)系聯(lián)系：建立方法的時(shí)候，必須要通過系統(tǒng)實(shí)用性及專屬性試驗(yàn)。系統(tǒng)適用性中也有對(duì)分離度進(jìn)行要求的，但是是主要峰；專屬性試驗(yàn)中也對(duì)分離度等進(jìn)行了要求，比置系統(tǒng)實(shí)用性中要求的更全面和嚴(yán)格。區(qū)別：系統(tǒng)實(shí)用性在每次檢測(cè)時(shí)，必須要做，并且要必須合格。

專屬性則在方法建立及方法學(xué)中研究，做一次即可。

2023/4/1946線性對(duì)照品配制，線性范圍至少5個(gè)點(diǎn)以上，濃度范圍可為供試濃度的50%-150%（或者80％-120％），至少包含回收率的最低和最高濃度，分別測(cè)定其主峰的面積，計(jì)算相應(yīng)的含量。以含量為橫坐標(biāo)（X），峰面積為縱坐標(biāo)（Y），進(jìn)行線性回歸分析?？山邮艿臉?biāo)準(zhǔn)為：回歸線的相關(guān)系數(shù)（R）不得小于0.998，Y軸截距應(yīng)在100％響應(yīng)值的2％以內(nèi)，響應(yīng)因子的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差應(yīng)不大于2.0%。每個(gè)樣進(jìn)3針2023/4/1947進(jìn)樣精密度具體操作：一般可取線性關(guān)系試驗(yàn)項(xiàng)下中間濃度溶液，連續(xù)進(jìn)樣?？山邮艿臉?biāo)準(zhǔn)為：RSD<2.0%。進(jìn)6針2023/4/1948溶液穩(wěn)定性取供試品溶液，規(guī)定條件下放置8h，分別于0、2、4、6、8h進(jìn)樣，記錄色譜圖，觀察主峰面積（及主要雜質(zhì)及總雜質(zhì)峰面積）變化，并計(jì)算RSD?？山邮艿臉?biāo)準(zhǔn)為：RSD<2.0%。每個(gè)樣進(jìn)1針2023/4/1949耐用性分別考察流動(dòng)相比例變化±5％、流動(dòng)相pH值變化±0.2、柱溫變化±5℃、流速相對(duì)值變化±20％時(shí)，儀器色譜行為的變化?？山邮艿臉?biāo)準(zhǔn)為：主峰的拖尾因子不得大于2.0，主峰與雜質(zhì)峰必須達(dá)到基線分離；各條件下的含量數(shù)據(jù)（n=6）的RSD<2.0%。每個(gè)條件進(jìn)1針2023/4/1950重復(fù)性（用中試的樣品）是配制6份含量測(cè)定項(xiàng)下的供試品溶液，分別進(jìn)樣，并計(jì)算每針的含量，并計(jì)算其RSD?？山邮艿臉?biāo)準(zhǔn)為：RSD<2.0。進(jìn)8針2023/4/1951回收率驗(yàn)證時(shí)一般要求分別配制濃度為80％、100％和120％的供試品溶液各三份，分別測(cè)定其含量，將實(shí)測(cè)值與理論值比較，計(jì)算回收率?？山邮艿臉?biāo)準(zhǔn)為：各濃度下的平均回收率均應(yīng)在98.0%-102.0%之間，9個(gè)回收率數(shù)據(jù)的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差（RSD）應(yīng)不大于2.0%。每個(gè)樣進(jìn)3針2023/4/1952定量限：主峰與噪音峰信號(hào)的強(qiáng)度比應(yīng)不得小于10

。檢測(cè)限：主峰與噪音峰信號(hào)的強(qiáng)度比應(yīng)不得小于3。都可以不做

2023/4/1953雜質(zhì)藥品中的雜質(zhì)按其理化性質(zhì)一般分為三類：有機(jī)雜質(zhì)、無機(jī)雜質(zhì)及殘留溶劑。有機(jī)雜質(zhì)包括工藝中引入的雜質(zhì)和降解產(chǎn)物等，可能是已知的或未知的。由于這類雜質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu)一般與活性成分類似或具淵源關(guān)系，故通常又可稱之為有關(guān)物質(zhì)。無機(jī)雜質(zhì)是指在原料藥及制劑生產(chǎn)或傳遞過程中產(chǎn)生的雜質(zhì)，這些雜質(zhì)通常是已知的，主要包括：反應(yīng)試劑、配位體、催化劑、重金屬、其它殘留的金屬、無機(jī)鹽、助濾劑、活性炭等。殘留溶劑是指在原料藥及制劑生產(chǎn)過程中使用的有機(jī)溶劑。制劑中雜質(zhì)的考察重點(diǎn)是降解產(chǎn)物。2023/4/1954有關(guān)物質(zhì)方法學(xué)驗(yàn)證--已知雜質(zhì)（定量）參照標(biāo)準(zhǔn)用HPLC法測(cè)定系統(tǒng)適用性、專屬性、線性、檢測(cè)限與定量限、精密度、溶液穩(wěn)定性、回收率、耐用性2023/4/1955已知雜質(zhì)（定量）采用HPLC法，須采用峰面積法，具體定量方法有：外標(biāo)法（雜質(zhì)對(duì)照品法）加校正因子的主成分自身對(duì)照法不加校正因子的主成分自身對(duì)照法峰面積歸一化法。①法定量比較準(zhǔn)確，采用時(shí)應(yīng)對(duì)對(duì)照品進(jìn)行評(píng)估和確認(rèn)，并制訂質(zhì)量要求。②法應(yīng)對(duì)校正因子進(jìn)行嚴(yán)格測(cè)定，僅適用于已知雜質(zhì)的控制。③法的前提是假定雜質(zhì)與主成分的響應(yīng)因子基本相同。一般情況下，如雜質(zhì)與主成分的分子結(jié)構(gòu)相似，其響應(yīng)因子差別不會(huì)太大。④法簡(jiǎn)便快捷，但因各雜質(zhì)與主成分響應(yīng)因子不一定相同、雜質(zhì)量與主成分量不一定在同一線性范圍內(nèi)、儀器對(duì)微量雜質(zhì)和常量主成分的積分精度及準(zhǔn)確度不相同等因素，所以在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中采用有一定的局限性。2023/4/1956系統(tǒng)適用性配置6份相同濃度的雜質(zhì)對(duì)照品溶液進(jìn)行分析，該雜質(zhì)峰面積的RSD<2.0%，主峰保留時(shí)間的RSD<1.0%。另外，分離度應(yīng)大于2.0或符合規(guī)定、拖尾因子應(yīng)0.8-1.2或符合規(guī)定。共6針2023/4/1957專屬性空白溶劑干擾試驗(yàn)

取溶解樣品用的溶劑，進(jìn)樣?？瞻纵o料干擾試驗(yàn)（有輔料時(shí)做）降解試驗(yàn)：酸、堿、熱、光照、氧化降解對(duì)照品溶液：取樣品，按有關(guān)物質(zhì)供試品濃度配制溶液已知雜質(zhì)定位試驗(yàn)取已知雜質(zhì)配成一定濃度，進(jìn)樣。取降解對(duì)照品溶液，加入少量已知雜質(zhì)對(duì)照品進(jìn)樣?？山邮艿臉?biāo)準(zhǔn)：空白對(duì)照應(yīng)無干擾，主峰與雜質(zhì)峰應(yīng)完全分離，已知雜質(zhì)峰與其它峰應(yīng)能完全分離，分離度不得小于2.0。

2023/4/1958強(qiáng)制降解試驗(yàn)酸降解試驗(yàn)：一般選擇0.1N的鹽酸，在室溫或加熱條件下進(jìn)行考察。一般破壞24h。再用堿中和。堿降解試驗(yàn)：一般選擇0.1N的氫氧化鈉溶液，在室溫或加熱條件下進(jìn)行考察。一般破壞24h。再用酸中和。高溫降解試驗(yàn)：可分別在固體和溶液狀態(tài)下進(jìn)行考察，具體的考察溫度與時(shí)間均可根據(jù)具體品種。例如，在110℃考察24小時(shí)。光降解試驗(yàn)：

4000Lx+（-）500Lx照度下放置10天。氧化降解試驗(yàn)：主要在溶液狀態(tài)下進(jìn)行考察，用10％或15％的雙氧水溶液雙氧水破壞24小時(shí)。制劑和空白輔料同時(shí)做2023/4/1959進(jìn)行破壞性試驗(yàn)時(shí)的關(guān)注點(diǎn)和存在的問題在選定的破壞條件下，藥物應(yīng)有一定量的降解。以主成分計(jì)算，一般降解10％左右。分離度與峰純度分析：破壞性試驗(yàn)產(chǎn)生的降解產(chǎn)物的個(gè)數(shù)比較多，采用HPLC法測(cè)定時(shí)，需考慮主成分與降解產(chǎn)物之間、降解產(chǎn)物相互之間的分離度，保證降解產(chǎn)物峰與主峰、降解產(chǎn)物峰之間有良好的分離度。推薦色譜分析時(shí)采用梯度洗脫，以有效分離降解產(chǎn)物。有關(guān)物質(zhì)濃度的考慮：如濃度太大，峰面積平頭，將樣品用流動(dòng)相稀釋至峰高為100mA或峰面積為1~2萬之間。0.1N的濃度酸堿對(duì)于一些較為穩(wěn)定的藥物來說，是破壞不出什么的東西，做法有兩種：

1.梯度性增加酸堿濃度，如：0.5N、1.0N、1.5N等

2.用水浴加熱輔助。但這種加熱法存在一個(gè)問題，破壞出來的雜質(zhì)是算熱破壞的還是純粹是酸堿破壞的呢？個(gè)人覺得是都有，所以雜質(zhì)又變得不專屬了。2023/4/1960線性從定量限濃度起，至雜質(zhì)對(duì)照品溶液濃度的120%或更高，配制6份濃度不同的供試液?？山邮艿臉?biāo)準(zhǔn)為：回歸線的相關(guān)系數(shù)（R）不得小于0.990。

2023/4/1961檢測(cè)線與定量限定量限：雜質(zhì)峰與噪音峰信號(hào)的強(qiáng)度比應(yīng)不得小于10。檢測(cè)限：雜質(zhì)峰與噪音峰信號(hào)的強(qiáng)度比應(yīng)不得小于3。另外：配制6份最低定量限濃度的溶液，所測(cè)6份溶液雜質(zhì)峰保留時(shí)間的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差應(yīng)不大于2.0%，峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差應(yīng)不大于5.0%。（線性的最低點(diǎn)，也可作為進(jìn)樣精密度）

2023/4/1962精密度重復(fù)性：分別配置雜質(zhì)對(duì)照品儲(chǔ)備液與供試品儲(chǔ)備液，然后取供試品儲(chǔ)備液適量稀釋定容，平行制備6份雜質(zhì)濃度（一般為0.1%），進(jìn)樣，再進(jìn)雜質(zhì)對(duì)照品，計(jì)算含量及RSD，RSD<2.0%。中間精密度：配制6份雜質(zhì)濃度（一般為0.1%）相同的供試品溶液，分別由兩個(gè)分析人員使用不同的儀器進(jìn)行測(cè)試，所得含量數(shù)據(jù)的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差應(yīng)不大于2.0%。進(jìn)樣精密度注：0.1%指的單個(gè)雜質(zhì)，如果某一單個(gè)雜質(zhì)的量大于0.1％，一般會(huì)被要求做鑒定。定量測(cè)定的基礎(chǔ)是雜質(zhì)的“含量”，既用雜質(zhì)對(duì)照品測(cè)定雜質(zhì)的含量，此時(shí)的重復(fù)性與含量重復(fù)性的做法一致。

2023/4/1963溶液穩(wěn)定性與含量測(cè)定同一個(gè)色譜條件只做雜質(zhì)濃度。取雜質(zhì)對(duì)照品溶液，規(guī)定條件下放置8小時(shí)，分別于0、2、4、6、8小時(shí)進(jìn)樣，觀察雜質(zhì)峰面積變化并計(jì)算RSD?？山邮艿臉?biāo)準(zhǔn)為：雜質(zhì)含量的絕對(duì)值在±0.1％以內(nèi)，并不得出現(xiàn)新的大于報(bào)告限度的雜質(zhì)。

2023/4/1964回收率一般采用加樣回收率來做。LOQ、100%、120%是比較理想的，實(shí)際操作中LOQ這個(gè)點(diǎn)不太好做，我們一般規(guī)定限度的50%（或更低，例如：20%）直接作為定量限（S/N>10就可以了）、100%、120%（可以高點(diǎn)），一般建議和線性對(duì)應(yīng)，這樣范圍更明確。一般做50%，100%，150%也可以接受要。例如某雜質(zhì)的限度為0.2%，取已知雜質(zhì)含量的樣品適量9份（一般為樣品取樣量的一半），分別加入該雜質(zhì)濃度為0.1％、0.2％和0.3％的雜質(zhì)溶液，稀釋到有關(guān)物質(zhì)供試品溶液濃度。另取雜質(zhì)對(duì)照品，按照標(biāo)準(zhǔn)配制成雜質(zhì)對(duì)照品溶液，分別測(cè)定其含量，計(jì)算回收率。該項(xiàng)目的可接受的標(biāo)準(zhǔn)為：各濃度下的平均回收率均應(yīng)在80%-120%之間，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差應(yīng)不大于10%?；厥章实淖畹忘c(diǎn)為定量限時(shí)，可放寬至70%-130%。

回收率=（（測(cè)得對(duì)照品量+樣品中已知含量）-樣品中已知含量）/加入對(duì)照品量x100%=測(cè)得對(duì)照品量/加入對(duì)照品量x100%2023/4/1965耐用性分別考察流動(dòng)相比例變化±5％、流動(dòng)相pH值變化±0.2、柱溫變化±5℃、檢測(cè)波長(zhǎng)變化±5nm、流速相對(duì)值變化±20％以及采用三根不同批號(hào)的色譜柱進(jìn)行測(cè)定時(shí)，儀器色譜行為的變化，每個(gè)條件下各測(cè)試兩次?？山邮艿臉?biāo)準(zhǔn)為：各雜質(zhì)峰的拖尾因子不得大于2.0，雜質(zhì)峰與其他成分峰必須達(dá)到基線分離；各條件下的雜質(zhì)含量數(shù)據(jù)（n=6）的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差應(yīng)不大于2.0%，雜質(zhì)含量的絕對(duì)值在±0.1％以內(nèi)。2023/4/1966有關(guān)物質(zhì)方法學(xué)驗(yàn)證—未知雜質(zhì)（限度檢查）用HPLC法測(cè)定系統(tǒng)適用性、專屬性、檢測(cè)限、精密度、溶液穩(wěn)定性、耐用性2023/4/1967系統(tǒng)適用性取樣品，按照有關(guān)物質(zhì)供試品濃度配制溶液，進(jìn)樣?？山邮艿臉?biāo)準(zhǔn)為：理論踏板數(shù)應(yīng)符合規(guī)定，分離度應(yīng)大于2.0或符合規(guī)定，拖尾因子應(yīng)0.8-1.2或符合規(guī)定。2023/4/1968專屬性空白溶劑干擾試驗(yàn)

取溶解樣品用的溶劑，進(jìn)樣?？瞻纵o料干擾試驗(yàn)（有輔料時(shí)做）降解試驗(yàn)：酸、堿、熱、光照、氧化降解對(duì)照品溶液：取樣品，按有關(guān)物質(zhì)供試品濃度配制溶液可接受的標(biāo)準(zhǔn)：空白對(duì)照應(yīng)無干擾，主峰與雜質(zhì)峰應(yīng)完全分離。2023/4/1969檢測(cè)線檢測(cè)限：雜質(zhì)峰與噪音峰信號(hào)的強(qiáng)度比應(yīng)不得小于3。

2023/4/1970精密度重復(fù)性：取樣品，配置成自身對(duì)照濃度，由同一人員在相同操作條件下進(jìn)樣6次，計(jì)算含量及RSD，RSD<2.0%。中間精密度進(jìn)樣精密度

2023/4/1971溶液穩(wěn)定性與含量測(cè)定同一個(gè)色譜條件只做雜質(zhì)濃度。取自身對(duì)照液溶液，規(guī)定條件下放置8小時(shí)，分別于0、2、4、6、8小時(shí)進(jìn)樣，觀察雜質(zhì)及總雜質(zhì)峰面積變化并計(jì)算RSD?？山邮艿臉?biāo)準(zhǔn)為：雜質(zhì)含量的絕對(duì)值在±0.1％以內(nèi)，并不得出現(xiàn)新的大于報(bào)告限度的雜質(zhì)。

2023/4/1972耐用性分別考察流動(dòng)相比例變化±5％、流動(dòng)相pH值變化±0.2、柱溫變化±5℃、檢測(cè)波長(zhǎng)變化±5nm、流速相對(duì)值變化±20％以及采用三根不同批號(hào)的色譜柱進(jìn)行測(cè)定時(shí)，儀器色譜行為的變化，每個(gè)條件下各測(cè)試兩次?？山邮艿臉?biāo)準(zhǔn)為：各雜質(zhì)峰的拖尾因子不得大于2.0，雜質(zhì)峰與其他成分峰必須達(dá)到基線分離；各條件下的雜質(zhì)含量數(shù)據(jù)（n=6）的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差應(yīng)不大于2.0%，雜質(zhì)含量的絕對(duì)值在±0.1％以內(nèi)。2023/4/1973制劑的雜質(zhì)限度對(duì)于仿制已有國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的藥品，可以根據(jù)已有的標(biāo)準(zhǔn)制訂相應(yīng)的雜質(zhì)限度。如果該標(biāo)準(zhǔn)中未規(guī)定雜質(zhì)的限度，應(yīng)與已上市同品種藥品（建議首選原研發(fā)企業(yè)在有效期內(nèi)的產(chǎn)品）進(jìn)行全面的質(zhì)量對(duì)比研究，分析其雜質(zhì)的種類與含量，根據(jù)研究的結(jié)果，以及穩(wěn)定性考察的結(jié)果，決定是否需在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)雜質(zhì)進(jìn)行控制。如果難以獲得已上市同品種的標(biāo)準(zhǔn)，但有相同原料藥的其它劑型上市，則在制訂雜質(zhì)限度時(shí)，可參考此上市產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)雜質(zhì)進(jìn)行控制。2023/4/1974制劑的雜質(zhì)限度由于