血栓與止血實(shí)驗(yàn)檢查幻燈

血栓與止血實(shí)驗(yàn)檢查幻燈第1頁(yè)/共41頁(yè)第一節(jié)血栓與止血的篩選檢驗(yàn)一、一期止血缺陷的篩選檢驗(yàn)二、二期止血缺陷的篩選檢驗(yàn)三、纖溶活性增強(qiáng)的的篩選檢驗(yàn)四、抗凝物質(zhì)檢驗(yàn)第2頁(yè)/共41頁(yè)一期止血的篩查檢驗(yàn)

出血時(shí)間測(cè)定血小板計(jì)數(shù)束臂試驗(yàn)血塊收縮試驗(yàn)毛細(xì)血管抵抗力試驗(yàn)

第3頁(yè)/共41頁(yè)

血小板計(jì)數(shù)（plateletcount,PC或plt）

正常值：（100～300）×109/L危險(xiǎn)PC＜20×109/L可引起自發(fā)性出血第4頁(yè)/共41頁(yè)出血時(shí)間測(cè)定

bleedingtime，BT一、原理：測(cè)定在皮膚受特定條件外傷后，出血自然停止所需的時(shí)間即為出血時(shí)間。此過(guò)程反映了毛細(xì)血管與血小板的相互作用，包括內(nèi)皮下組織與血小板粘附（通過(guò)vWF的作用）、血小板的聚集和釋放等反應(yīng)，以及PGI2與TXA2的動(dòng)態(tài)平衡。第5頁(yè)/共41頁(yè)二、方法

Ivy法、出血時(shí)間測(cè)定器法（衛(wèi)生部推薦方法）三、試劑與器材：

1、血壓計(jì)，秒表，干凈濾紙

2、出血時(shí)間測(cè)定器

第6頁(yè)/共41頁(yè)四、操作：

1、

血壓計(jì)袖帶縛于測(cè)定上肢的上臂，加壓并維持在40mmHg,兒童減半。

2、在肘前窩下5cm處的尺側(cè)做局部消毒后，將測(cè)定器垂直貼于皮膚表面，按下按鈕，同時(shí)啟動(dòng)秒表，移開(kāi)測(cè)定器。

3、每隔30s,用干凈濾紙吸去流出的血液，直至流血自然停止，并記錄秒表讀數(shù)。第7頁(yè)/共41頁(yè)五、參考值：2.5-9.5min六、臨床意義：

延長(zhǎng)：

1、出血時(shí)間延長(zhǎng)見(jiàn)于血小板減少癥

2、血小板功能異常

3、血管性血友病

4、血管壁異常

5、某些嚴(yán)重的凝血因子缺乏縮短：高凝狀態(tài)和血栓性疾病第8頁(yè)/共41頁(yè)血小板檢測(cè)一、血小板生存時(shí)間檢測(cè)二、血小板相關(guān)抗體檢測(cè)三、血小板粘附試驗(yàn)四、血小板聚集試驗(yàn)五、血小板第3因子有效性檢測(cè)六、血小板膜糖蛋白檢測(cè)七、血小板活化指標(biāo)檢測(cè)（血漿β-TG、PF4、血小板P選擇素檢測(cè)）第9頁(yè)/共41頁(yè)誘聚劑PPPPRP血小板聚集試驗(yàn)

plateletaggregationtset，PAgT第10頁(yè)/共41頁(yè)第11頁(yè)/共41頁(yè)臨床意義：血小板無(wú)力癥、巨大血小板綜合癥、血小板貯存池病、低（無(wú)）纖維蛋白原血癥、肝硬化、使用血小板抑制劑等。高凝狀態(tài)、血栓形成性疾病、糖尿病、口服避孕藥、人工瓣膜移植術(shù)、吸煙等。聚集率減低聚集率增高第12頁(yè)/共41頁(yè)質(zhì)量控制：

1.采血要順利，避免組織液混入，抗凝劑使用合理（不用

EDTA抗凝）

2.采集后3h內(nèi)室溫下完成

3.試驗(yàn)前十天停用一切抑制血小板聚集的藥物；試驗(yàn)前禁食高脂類食物

4.注意PRP：800~1000r/min離心10minPLT(200~400)X109/LPPP：3000r/min離心20minPLT＜20X109/L第13頁(yè)/共41頁(yè)

血小板粘附試驗(yàn)

plateletadhensiontest,PAdT原理：受檢者血液一定速度通過(guò)一定量玻璃珠的塑料管，測(cè)定通過(guò)玻璃珠前后血液中血小板數(shù)的差值，即為粘附于玻珠和塑料管的血小板數(shù)，由此可計(jì)算出其占血小板總數(shù)的百分比，即為血小板粘附率。方法：玻球法、玻璃濾器法、玻珠法第14頁(yè)/共41頁(yè)臨床意義：

血管性血友病、巨大血小板綜合癥、血小板無(wú)力癥、肝硬化、MDS、急性白血病、服用抗血小板藥物等見(jiàn)于血栓前狀態(tài)和血栓性疾病、妊高癥、口服避孕藥等粘附率減低粘附率增高第15頁(yè)/共41頁(yè)二期止血缺陷的篩選檢驗(yàn)

全血凝固時(shí)間測(cè)定活化部分凝血活酶時(shí)間測(cè)定血漿凝血酶原時(shí)間測(cè)定第16頁(yè)/共41頁(yè)活化部分凝血活酶時(shí)間測(cè)定

activatedpartialthromboplastintime，APTT一、原理第17頁(yè)/共41頁(yè)APTT

Ca2+腦磷脂白陶土

Ca2+腦磷脂部分凝血活酶第18頁(yè)/共41頁(yè)

二、操作（一）APTT手工法(試管法）血漿0.1ml＋APTT試劑各0.1ml+CaCl20.1ml

（混勻計(jì)時(shí)）結(jié)果觀察：緩慢傾斜試管，觀察液體流動(dòng)狀態(tài)，流動(dòng)停止停止計(jì)時(shí)

參考值25～45s(二）儀器法

37℃水浴5min37℃溫浴第19頁(yè)/共41頁(yè)APTT延長(zhǎng)縮短因子VIII、IX、XI活性減低高凝狀態(tài)三、臨床意義

肝素抗凝監(jiān)測(cè)第20頁(yè)/共41頁(yè)APTT糾正試驗(yàn)

于患者血漿中分別加入1/4的正常新鮮血漿、硫酸鋇吸附血漿、正常血清，再作APTT試驗(yàn)。硫酸鋇吸附血漿VIII、XI、XII

正常血清IX、XI、XII

新鮮血漿VIII、IX、XI、XII第21頁(yè)/共41頁(yè)血友病甲血友病乙FⅪ缺乏正常血漿硫酸鋇吸附血漿（缺Ⅸ）正常血清(缺Ⅷ)APTT糾正試驗(yàn)----血友病糾正不糾正糾正糾正糾正糾正不糾正患者血漿糾正糾正第22頁(yè)/共41頁(yè)凝血酶原時(shí)間測(cè)定Prothrombintime，PT一、原理

Ca2+腦磷脂PT組織因子Ca2+

磷脂第23頁(yè)/共41頁(yè)

1、直接報(bào)告患者及正常對(duì)照的PT秒數(shù)

2、報(bào)告凝血酶原時(shí)間比值（PTR）

PTR=受檢者PT（秒）/正常對(duì)照PT（秒）

3、報(bào)告國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化比值（INR）

INR=PTRISI二、報(bào)告方式第24頁(yè)/共41頁(yè)P(yáng)T延長(zhǎng)縮短因子II、V、VII、X、Fg活性減低高凝狀態(tài)三、臨床意義

口服雙香豆素類抗凝藥物監(jiān)測(cè)第25頁(yè)/共41頁(yè)要保證止凝血檢驗(yàn)的質(zhì)量

必須做好以下十點(diǎn)：1.采血須順利，盡量用大號(hào)針頭，動(dòng)作要輕柔；2.標(biāo)本用加蓋有刻度標(biāo)記的塑料試管或硅化管收集；3.抗凝劑用109mmol/L的枸櫞酸鈉，抗凝劑與血液的比例為1:9；第26頁(yè)/共41頁(yè)當(dāng)Hct增高>55%或<25%時(shí)，務(wù)必對(duì)抗凝劑用量或濃度進(jìn)行調(diào)整：抗凝劑用量(ml)=0.00185x全血量(ml)x[1-Hct(%)]紅細(xì)胞壓積（%）枸櫞酸鈉溶液（%）＜105.6310-205.3220-553.1355-602.6960-702.19＞701.57第27頁(yè)/共41頁(yè)4.標(biāo)本采集至檢驗(yàn)時(shí)間PT＜4小時(shí)，APTT＜2

小時(shí)，一些因子活性檢測(cè)要求即刻試驗(yàn)；5.使用儀器推薦或配套的試劑，使用時(shí)嚴(yán)格按照說(shuō)明書，注意有效期和穩(wěn)定性；6.反應(yīng)溫度控制在（37±1）℃；7.手工操作必須做正常對(duì)照，復(fù)管檢測(cè)；8.正確使用正常對(duì)照血漿及參比血漿；9.每天堅(jiān)持室內(nèi)質(zhì)控，積極參加室間質(zhì)評(píng)；10.建立本實(shí)驗(yàn)室的參考范圍。第28頁(yè)/共41頁(yè)凝血因子檢驗(yàn)一、凝血酶原消耗試驗(yàn)及其糾正試驗(yàn)二、簡(jiǎn)易凝血活酶生成試驗(yàn)及糾正試驗(yàn)三、血漿因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ促凝活性檢測(cè)四、血漿因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ促凝活性檢測(cè)五、凝血因子ⅩIII定性試驗(yàn)和亞基抗原檢測(cè)第29頁(yè)/共41頁(yè)纖溶活性篩選檢驗(yàn)優(yōu)球蛋白溶解時(shí)間血清纖維蛋白（原）降解產(chǎn)物檢測(cè)血漿D-二聚體檢測(cè)血漿硫酸魚(yú)精蛋白副凝固試驗(yàn)第30頁(yè)/共41頁(yè)血清纖維蛋白（原）降解產(chǎn)物測(cè)定

fibrin/fibrinogenproduct，F(xiàn)DP一、原理：膠乳凝集法：在受檢血清中加入特異性抗纖維蛋白（原）D、E片段抗體標(biāo)記的膠乳顆粒懸液，如果血清中含有纖維蛋白（原）降解產(chǎn)物（FDP），特別是D、E片段，即可發(fā)生抗原抗體反應(yīng)，導(dǎo)致膠乳顆粒凝集。第31頁(yè)/共41頁(yè)二、臨床意義：

1、血清FDP輕度增高10-40mg/L，見(jiàn)于急性靜脈血栓、急性心梗、嚴(yán)重肺炎大手術(shù)后、惡性腫瘤、休克等。

2、血清FDP明顯增高>40mg/L，見(jiàn)于原發(fā)性纖溶癥、DIC、M3、應(yīng)用鏈激酶等溶栓治療時(shí)。第32頁(yè)/共41頁(yè)血漿D-二聚體測(cè)定

D-Dimer一、原理：

1、膠乳凝集法

2、ELISA法二、臨床意義：

1、DIC時(shí)呈陽(yáng)性或明顯增高，另見(jiàn)深靜脈血栓、心梗、肺栓塞、重癥肝炎等

2、可作為原發(fā)纖溶和繼發(fā)纖溶鑒別的重要依據(jù)。第33頁(yè)/共41頁(yè)第34頁(yè)/共41頁(yè)生理性抗凝蛋白檢驗(yàn)一、抗凝血酶檢測(cè)

1、血漿抗凝血酶活性檢測(cè)

2、血漿抗凝血酶抗原檢測(cè)二、蛋白C檢測(cè)

1、血漿蛋白C活性檢測(cè)

2、血漿蛋白C抗原檢測(cè)三、血漿蛋白S抗原檢測(cè)四、組織因子途徑抑制物檢測(cè)第35頁(yè)/共41頁(yè)病理性抗凝物質(zhì)檢驗(yàn)一、復(fù)鈣交叉試驗(yàn)二、凝血酶時(shí)間檢測(cè)及甲苯胺藍(lán)糾正試驗(yàn)三、普通肝素和低相對(duì)分子質(zhì)量肝素檢測(cè)四、凝血因子Ⅷ抑制物檢測(cè)五、狼瘡抗凝物質(zhì)的篩選試驗(yàn)和確診試驗(yàn)第36頁(yè)/共41頁(yè)凝血酶時(shí)間測(cè)定及甲苯胺藍(lán)糾正試驗(yàn)

thrombintime,TT

一、原理:

凝血酶TT第37頁(yè)/共41頁(yè)二、結(jié)果判斷：

正常人凝血酶時(shí)間一般在16-18s，超過(guò)正常對(duì)照3s或在20s以上視為延長(zhǎng)；如正常對(duì)照在20s以上，則超過(guò)5s為延長(zhǎng)。