生物安全培訓資料

生物安全培訓資料目前一頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點概述生物安全防護（biosafetycontainment）（定義）：指在實驗室環(huán)境下處理和保存感染性物質(zhì)的過程中采用的一系列的防護措施，包括一級防（primarycontainment）

和二級防護（secondary-

containment）。

目前二頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點概述生物安全防護（biosafetycontainment）（目的）：是減低或消除潛在危險因子對實驗人員、實驗室內(nèi)外環(huán)境的污染。（要素）：1、實驗室操作和技術(shù)

2、實驗室安全設(shè)備

3、實驗室設(shè)施設(shè)計其中一級防護與二級防護有別目前三頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點一級防護與二級防護的區(qū)別

一級防護：包括規(guī)范操作技術(shù)與規(guī)程，配置適當?shù)陌踩O(shè)備，保護操作人員和室內(nèi)直接環(huán)境免遭感染性物質(zhì)的污染。二級防護：包括合理的實驗室設(shè)施設(shè)計和嚴格規(guī)范的操作流程，用以保護實驗室外環(huán)境免受感染性物質(zhì)污染。

目前四頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點一、臨床實驗室生物污染的原因及種類原因：致病因子，包括細菌、病毒、真菌寄生蟲及其他。種類：空氣污染、水的污染、人體污染、物體表面的污染。

目前五頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點空氣污染內(nèi)：平面布局、氣流方向——合理死角區(qū)域———————縮小外：直接外排或擴散————高效過濾

————密閉或壓力差目前六頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點水、人體、物體表面污染實驗過程中產(chǎn)生的大量污水

——特殊處理后排放工作人員實驗室感染（接觸、吸入）

——專門防護規(guī)程物體表面污染（濺出、溢出、穿用錯誤等）

——正確實施目前七頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點二、臨床實驗室的生物安全防護概述：1、目的:(p234兩個確保)2、內(nèi)容:(根據(jù)實驗室級別)3、評估:(實驗對象對人或環(huán)境的危害性)目前八頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點（一）實驗室的分類、分級及適用范圍分類：一般生物脊椎動物一級（BSL-1）

分級：二級（BSL-2）三級（BSL-3）四級（BSL-4）適用范圍：級別不同要求不同適用范圍不同(biologicalsafetylabolatory,BSL)目前九頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點分級原則:據(jù)所處理的微生物及其

毒素的危害程度（BSL-1)無致病作用的微生物。（BSL-2）具有中等潛在危害的微生物。（BSL-3)呼吸傳播，使人傳染嚴重甚至是致病微生物及其毒素，傳播途徑明，目前已有疫苗。(BSL-4)高度危險性，通過氣溶膠傳播或傳播途徑不明，目前尚無疫苗或治療方法的致病微生物及其毒素。目前十頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點

不同級實驗室的適用范圍和設(shè)置目前十一頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點一級生物安全防護實驗室

1、適用于：用于教學的普通微生物實驗室2、要求：無須使用生物安全柜目前十二頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點

二級生物安全防護實驗室（BSL-2）

1、適用于：

(1)含漱液、血清和血液等樣品的診斷檢測

(2)溶液、固定或用其他方法處理滅活的病毒和/或無傳染性病毒基因片段

(3）常規(guī)的細菌和毒素檢測

(4）能產(chǎn)生氣溶膠的樣品處理

(5）臨床樣品的包裝、分裝

(6）離心管和離心機轉(zhuǎn)頭的封閉與開啟目前十三頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點

二級生物安全防護實驗室（BSL-2）

2、特殊情況:（1）致病微生物氣溶膠或濺出的操作（2）處理高濃度或大容量感染性材料3、要求：在生物安全柜或物理抑制設(shè)備中進行，并使用個體防護設(shè)備。目前十四頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點

三級生物安全防護實驗室

（BSL-3）或相當于P3實驗室

1、適用于：主要通過呼吸途徑使人傳染上嚴重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素（如禽流感），通常已（可）有預防傳染的疫苗。艾滋病病毒的研究（血清學實驗除外）2、要求：在三級生物安全防護實驗室中進行。目前十五頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點BSL-2（P2）BSL-3（P3）目前十六頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點BSL–4戲稱為魔鬼實驗室

分五個區(qū)有10道門目前十七頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點潔凈臺/生物安全柜(BSCs)目前十八頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點潔凈工作臺1、環(huán)境空氣→工作臺→過濾→樣本→直接吹向操作者→排入室內(nèi)2、保護產(chǎn)品，不保護操作人員及操作環(huán)境3、通過樣本的空氣過濾對直徑大于0.3微米的顆粒，過濾效率99.9%無醫(yī)院藥房或無菌設(shè)備的組裝。目前十九頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點生物安全柜1、環(huán)境空氣→進入工作臺→過濾→樣本→高效過濾→排入室內(nèi)或室外2、經(jīng)過樣本的空氣及排放出的空氣均經(jīng)過濾，對直徑大于0.3微米的顆粒，超高效過濾器的過濾效率為99.999%。3、采用負壓裝置，形成氣幕防護屏障，保護操作人員安全應(yīng)用于有一定生物危險的操作。目前二十頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點潔凈工作臺≠生物安全柜1、環(huán)境空氣（流動/排出方式）2、使用目的（產(chǎn)品、操作人、環(huán)境）3、空氣濾過能力4、氣幕屏障5、應(yīng)用目前二十一頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點生物安全柜工作原理

1.物理屏障

2.高效過濾

3.空氣屏障

4.定向?qū)恿髂壳岸揬總數(shù)一百零一頁\編于二十點生物安全柜的分型CLASSⅠ級生物安全柜CLASSⅡ級生物安全柜：

1、CLASSⅡTAPYA型

2、CLASSⅡTAPYB1型

3、CLASSⅡTAPYB2型

4、CLASSⅡTAPYB3型CLASSⅢ級生物安全柜目前二十三頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點I級生物安全柜保護操作者和操作環(huán)境。樣品沒有得到保護。通過樣品區(qū)的空氣，經(jīng)高效過濾器的過濾之后，100%地排放到實驗室環(huán)境中。目前二十四頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點II級生物安全柜–A型(B3)30%外排進入環(huán)境30%外界空氣補充70%經(jīng)過濾后循環(huán)使用目前二十五頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點II級生物安全柜–B1型70%

外排進入環(huán)境70%

外界空氣補充30%

過濾后循環(huán)使用目前二十六頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點II級生物安全柜–B2型100%外排進入環(huán)境100%外界空氣補充無循環(huán)使用的氣流目前二十七頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點III級生物安全柜樣品、操作者、操作環(huán)境都得到保護（操作時戴全密封手套）100%外排進入環(huán)境100%外界空氣補充無循環(huán)使用的氣流目前二十八頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點(二)實驗室生物安全的個人防護

目前二十九頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點一級生物安全防護實驗室

無須使用生物安全柜和專用特殊設(shè)備等。應(yīng)穿工作服，手上有皮膚破損戴手套。操作中可能有危險物濺出應(yīng)有適當防護。目前三十頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點二級生物安全防護實驗室

（1）可能產(chǎn)生病菌氣溶膠、濺出的用生物安全柜（2）當操作不能在安全柜內(nèi)進行，必須外部操作時，必須使用面部保護（護目鏡、面罩、個體呼吸保護用品或其他防濺出保護設(shè)備）。（3）應(yīng)穿工作服或罩衫，離開時，不得穿著外出，應(yīng)先在實驗室中消毒，然后統(tǒng)一洗滌或丟棄。（4）當手可能接觸感染材料，應(yīng)戴手套。如可能發(fā)生溢出或濺出，應(yīng)戴兩副手套，一次性手套不得清洗和再次使用。目前三十一頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點三級生物安全防護實驗室

（1）必須安裝Ⅱ級或以上生物安全柜，感染性材料的操作應(yīng)在生物安全柜中進行。（2）當操作不得不在柜外進行時，必須個體防護與使用物理抑制設(shè)備綜合防護措施（3）在進行感染性組織培養(yǎng)、有可能產(chǎn)生感染性氣溶膠的操作時，必須使用個體防護設(shè)備（如呼吸保護裝置等）。（4）入室工作前/后有專用更衣室，室內(nèi)有必備品（消毒劑、沖洗液、藥品等）。目前三十二頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點四級生物安全防護實驗室1、在Ⅲ級生物安全柜中進行操作。2、入室必須換上全套實驗室服裝。3、實驗室必備的配套裝置與裝備。目前三十三頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點臨床實驗室的消毒與滅菌

消毒滅菌方法：熱力滅菌物理—輻射消毒超聲消毒濾過除菌干燥或低溫抑菌化學—消毒防腐

目前三十四頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點手衛(wèi)生目的：控制醫(yī)院性感染的最重要最簡便易行的措施之一。（包括保護個人自己）目前三十五頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點手衛(wèi)生依據(jù)：

常居菌的存在（大部分人體皮膚上能分離到的，如凝固酶陰性葡萄球菌、棒狀桿菌類、不動桿菌屬、丙酸菌屬及某些腸道細菌族成員等），固有，不易被機械性的摩擦清除。目前三十六頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點手衛(wèi)生暫居菌的存在（接觸病人或被污染的物體表面時獲得）。如果沒有通過肥皂和水的沖洗和機械摩擦或者用消毒手刷將其破壞，它可隨時通過手傳播。目前三十七頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點手衛(wèi)生種類：洗手（handwashing）手消毒（handantisepsis）外科手消毒（surgicalhandantisepsis）目前三十八頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點手衛(wèi)生設(shè)施：

1、流動水、非手觸式龍頭開關(guān)

2、洗手清潔劑—普通皂/液（plainsoapanddetergent）抗菌皂（antimicrobialsoap）手消毒劑（handdisinfector）

3、干手設(shè)施（紙巾、干手器、專用毛巾）目前三十九頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點手衛(wèi)生洗手指征：直接接觸病人前后無菌操作前后穿脫工作服等前后再進入清潔區(qū)前接觸特殊易感病人前后接觸或處理病人的血液、體液、分泌物后等等

目前四十頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點1.消毒去除或殺滅傳播媒介上病原微生物，使其達到無害化的處理

2.滅菌殺滅或去除傳播媒介上一切微生物的處理

3．消毒劑用于殺滅傳播媒介上的微生物使其達消毒或滅菌要求的制劑

4.滅菌劑

可殺滅一切微生物使其達到滅菌要求的制劑

-消毒和滅菌為兩個不同概念

-消毒處理不一定都能達到滅菌要求 而滅菌一定都能達到消毒目的

基本概念

消毒和滅菌目前四十一頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點5．抗菌采用化學或物理方法殺滅細菌或妨礙細菌生長繁殖及其活性的過程6.抗菌劑能夠殺滅或去除微生物或抑制其生長和繁殖的制劑7.抑菌采用化學或物理方法抑制或妨礙細菌生長繁殖及其活性的過程8.防腐用化學或物理方法殺滅或清除或抑制無生命有機物內(nèi)的微生物，防止其腐敗的處理9．防腐劑 能夠抑制微生物生長和繁殖但不足以殺滅的化學物質(zhì)基本概念

目前四十二頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點基本概念熏蒸消毒

在密閉空間內(nèi)進行熏蒸以達到消毒目的的一種方法（污染的空氣、表面）清潔與預清潔—去垢/污劑

指去除污垢、灰塵、有機物和污漬清潔的過程主要依靠機械作用

清除污染

指去除/殺死微生物的任何過程，清除污染的應(yīng)用范圍更廣目前四十三頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點消毒與滅菌的方法

化學消毒滅菌

通過化學消毒劑殺滅微生物繁殖體或芽孢消毒對象：包括物體表面、空氣和污染物等 方式：有擦拭、噴灑（霧）、熏蒸和浸泡等。

物理消毒滅菌 紫外線 熱力消毒（干熱/焚燒、濕熱、微波)

等離子體

HEPA過濾除菌

目前四十四頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點常用的消毒方法物理消毒方法（1）機械除菌用機械的方法從物體表面、空氣中除去有害病原微生物，以降低其數(shù)量，減少感染機會。如流動水洗手、開窗通風、過濾除菌、物體表面沖刷、擦拭等。（2）熱力滅菌又分為干熱滅菌和濕熱滅菌兩種。目前四十五頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點包括干烤消毒和焚燒消毒，前者適用于高溫下不損壞、不變質(zhì)物品的消毒，如玻璃和金屬制品；后者適用于無保留價值的醫(yī)用垃圾和廢棄物。濕熱滅菌：常用的有煮沸和壓力蒸汽滅菌，適用于耐熱耐濕物品和液體的消毒。（3）紫外線消毒：適用于空氣、污染物體表面消毒。目前四十六頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點化學消毒方法利用化學藥物殺滅病原微生物的方法，稱為化學消毒方法。用于消毒的化學藥物被稱為化學消毒劑。常用的化學消毒劑有：戊二醛、過氧乙酸、含氯消毒劑、過氧化氫、碘和碘制劑、75％乙醇等。目前四十七頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點

使用方法： 刷、吸、干擦、洗滌 或用浸泡肥皂水或清潔劑的濕墩布擦洗嚴重污染的物品會影響除污染劑的殺菌作用，不能被迅速地消毒或滅菌；許多殺菌劑只對經(jīng)過預清潔的物品才具有殺菌活性。

注意?。?！預清潔時必須謹慎，以避免暴露于感染性物質(zhì);必須使用與以后使用的殺菌劑化學上相容的物質(zhì);通常采用相同的清洗消毒劑進行預清潔和消毒;清洗消毒劑通常由化學消毒劑和洗滌劑或除垢劑以及助洗劑、穩(wěn)定劑、緩蝕劑等成分組成；是否進行預清潔應(yīng)根據(jù)工作性質(zhì)和需要來決定化學方法

一.清潔的作用目前四十八頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點化學消毒劑種類

（按標簽說明使用）（1）高效（水平）消毒劑：指可殺滅一切細菌繁殖體（包括分枝桿菌）、病毒、真菌及其孢子等，對細菌芽孢（致病性芽孢菌）也有一定殺滅作用，達到高水平消毒要求的制劑。主要有環(huán)氧乙烷、過氧乙酸、過氧化氫、戊二醛、二氧化氯、次氯酸鈉等；其中環(huán)氧乙烷、戊二醛可作為滅菌劑（2）中效消毒劑：指僅可殺滅分枝桿菌、病毒、真菌及細菌繁殖體等微生物，達到消毒要求的制劑。主要有酚類消毒劑、乙醇、碘伏等（3）低效消毒劑：指僅可殺滅細菌繁殖體及親脂病毒，達到消毒要求的制劑。主要有季銨鹽（苯扎溴銨、杜米芬等）、氯己啶等目前四十九頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點化學消毒劑理想的消毒劑快速的殺菌效果快速的溶解作用有一定去污洗滌作用有警示顏色刺激性味道小不易燃易爆較好的穩(wěn)定性對物體的損壞作用小對人體無毒、副作用合理的價格方便運輸目前五十頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點常用化學消毒劑的性能比較消毒劑使用濃度消毒水平被滅活微生物特征（％）細菌包膜病毒無包膜病毒結(jié)核分枝桿菌細菌芽孢含氯

高效+++++/-過氧乙酸0.001～0.2

高效+++++戊二醛2化學滅菌/高效+++++甲醛3～8高效/中效+++++/-酒精～

70%中效++-+-季胺鹽0.4～1.6低效++---目前五十一頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點常用化學消毒劑的安全性及特征

消毒劑腐蝕性殘留物有害被有機物滅活皮膚、眼刺激性呼吸道刺激性含氯

++++-過氧乙酸

+-++-戊二醛-+-++甲醛-+-++酒精+/--++-季胺鹽--++-目前五十二頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點防止過度使用消毒劑!

正確使用化學消毒劑以確保實驗場所的安全，減少來自感染性物質(zhì)的危險

-選擇合適的化學消毒劑

應(yīng)考慮經(jīng)濟、控制庫存以及限制環(huán)境污染等因素，盡可能減少化學消毒劑的使用量化學消毒劑的作用時間因品種和廠商而異應(yīng)按產(chǎn)品說明書配制和使用 消毒劑的濃度（濃度越高,消毒效果越好？） 消毒劑的作用時間

注意消毒劑有效期！-消毒劑的有效期 消毒劑使用的有效期限目前五十三頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點（一）表面消毒含氯消毒劑特性:含氯消毒劑是指溶于水后能產(chǎn)生次氯酸的消毒劑。其品種較多，可分為有機化合物類和無機化合物類，最常用的有次氯酸鈉、次氯酸鈣、漂白粉、二氯異氰尿酸鈉、三氯異氰尿酸、氯胺等。目前五十四頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點（1）次氯酸鈉（分子式為NaOCl）作為消毒劑/漂白劑使用時為強堿性，具金屬腐蝕性

1）更換頻率取決于

有機物（蛋白質(zhì)）

開口容器(無蓋)

工作液的初始濃度(儲藏高濃度或使用濃度)

使用頻率和特性 室內(nèi)條件(高溫時能釋放氯氣)2）有效氯濃度常規(guī)實驗室用于消毒的有效氯濃度應(yīng)為1g/L。感染性物質(zhì)的溢出以及含有大量有機物的物質(zhì)，推薦使用更強作用的含5g/L有效氯的溶液來處理。

一般情況：一天多次浸泡、含高濃度有機物的材料，應(yīng)每天至少更換一次；使用頻率較低的溶液，則可以維持一周時間。目前五十五頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點（2）次氯酸鈣次氯酸鈣［Ca（ClO）2］的顆粒或片劑一般含有70%的有效氯； 其有效氯濃度分別為1g/L和5g/L； 用顆?；蚱瑒┡渲茲舛?.4g/L或7.0g/L溶液不要把漂白劑當作防腐劑使用 可以用作普通目的的消毒劑用于浸泡非金屬類的污染材料在緊急情況下可用終濃度含1～2mg/L有效氯的漂白劑消毒飲用水目前五十六頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點注意事項1）氯氣具有強毒性！ 因此只能在通風良好的地方儲存和使用。2）漂白劑也不能與酸混合以避免氯氣快速釋放。3）氯的許多副產(chǎn)物可能對人體及環(huán)境有害，避免濫用含氯消毒劑，特別是漂白劑。目前五十七頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點（3）二氯異氰尿酸鈉二氯異氰尿酸鈉（NaDCC）的粉劑含有60%的有效氯。用NaDCC粉劑配制的濃度為1.7g/L和8.5g/L的溶液將分別含有1g/L和5g/L的有效氯

NaDCC粉劑和片劑儲存方便、安全血液或其他生物危害性液體溢出時，可以使用固體NaDCC，并使其作用至少10min后再除去，然后對污染區(qū)進行進一步的清理。目前五十八頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點（4）氯胺氯胺粉劑含有大約25％的有效氯

-氯胺釋放氯的速度比次氯酸慢因此如果需要獲得與次氯酸相同的效力，就需要較高的初始濃度。

-有機物對氯胺溶液的影響沒有次氯酸溶液那么大在“清潔”和“污染”情況下都推薦使用20g/L的濃度。

-在氯胺中浸泡過的物品必須要徹底清洗，以除去加入到氯胺-T（甲苯磺酰氯醛甲酰胺鈉）粉劑中的填充劑的殘留物。目前五十九頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點（5）二氧化氯二氧化氯是一種高效快速消毒劑。氣態(tài)的二氧化氯不穩(wěn)定，可分解為氯氣（Cl2）和氧氣（O2），并釋放熱。二氧化氯溶于水，在水溶液中穩(wěn)定。有兩種方法可獲得二氧化氯：

1）將鹽酸（HCl）和亞氯酸鈉（NaClO2）兩種單獨成分混合時即可生成；

2）訂購其穩(wěn)定態(tài)，然后在需要時隨時活化生成。目前六十頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點

常規(guī)含氯消毒劑的推薦使用濃度“清潔”條件下a“污染”條件下b所需有效氯濃度0.1%（1g/L）0.5%（5g/L）次氯酸鈉溶液（含5%有效氯）20mL/L100mL/L次氯酸鈣（含70%有效氯）1.4g/L7.0g/L二氯異氰尿酸鈉粉劑（含60%有效氯）1.7g/L8.5g/L二氯異氰尿酸鈉片劑（每片含1.5g有效氯）每升1片每升4片氯胺（含25%有效氯）20g/L20g/La去除大部分污染材料后b溢流情況（如血液）或大量污染材料沒有除去時目前六十一頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點2．乙醇（1）特性乙醇稱酒精，無色透明液體，屬中效消毒劑，可殺滅分枝桿菌，病毒，但所有濃度對細菌芽孢均無效。具有速效、無毒、對皮膚粘膜有刺激性、對金屬無腐蝕性，受有機物影響很大，易揮發(fā)、不穩(wěn)定等特點。乙醇作為其他消毒劑的助溶劑和增效劑使用，如乙醇與氯己定、碘、苯扎溴銨等復配，其效果更佳。（2）適用范圍適用于皮膚、環(huán)境表面及醫(yī)療器械的消毒等。目前六十二頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點（3）使用方法消毒處理：常用消毒方法有浸泡法和擦拭法。1）浸泡法。將待消毒的物品放入裝有乙醇溶液的容器中，加蓋。對細菌繁殖體污染醫(yī)療器械等物品的消毒，用75%的乙醇溶液浸泡10min以上；個別對其它消毒劑過敏者，可用75%的乙醇溶液浸泡5min。2）擦拭法。對皮膚的消毒,用75%乙醇棉球擦拭。目前六十三頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點

（4）注意事項1）乙醇易燃，忌明火；必須使用醫(yī)用乙醇，嚴禁使用工業(yè)乙醇消毒和作為原材料配制消毒劑。2)對酒精過敏者慎用。目前六十四頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點3.戊二醛（1）特性呈無色或淡黃色液體，揮發(fā)性低，有醛的氣味。常用消毒滅菌濃度為2%。

國外還有2.5%和3.4%。具有廣譜、高效殺菌作用。對金屬腐蝕性小，受有機物影響小等特點。（2）適用范圍適用于不耐熱的醫(yī)療器械和精密儀器等消毒與滅菌。目前六十五頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點（3）使用方法1)滅菌處理：常用浸泡法。將清洗、晾干待滅菌處理的醫(yī)療器械及物品浸沒于裝有戊二醛的容器中，加蓋，浸泡10h后，無菌操作取出，用無菌水沖洗干凈，并無菌擦干后使用。2)消毒處理：用浸泡法，將清洗、晾干的待消毒處理醫(yī)療器械及物品浸沒于裝有戊二醛的容器中，加蓋，一般20min～45min，取出后用滅菌水沖洗干凈并擦干。3）2%的戊二醛一般可連續(xù)使用7-14天，3.4%的戊二醛可連續(xù)使用28天。目前六十六頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點（4）注意事項1)戊二醛對手術(shù)刀片等碳鋼制品有腐蝕性，使用前應(yīng)先加入0.5%亞硝酸鈉防銹。2)戊二醛對皮膚粘膜有刺激性，接觸戊二醛溶液時應(yīng)戴橡膠手套，防止濺入眼內(nèi)或吸入體內(nèi)。3)盛裝戊二醛消毒液的容器應(yīng)加蓋，放于通風良好處。目前六十七頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點4.過氧乙酸

（1）特性：為無色透明弱酸性液體，易揮發(fā)、有很強的揮發(fā)性氣味，腐蝕性強，有漂白作用。性質(zhì)不穩(wěn)定?？蓺缂毦敝丑w、真菌、病毒分枝桿菌和細菌芽孢。具有廣譜、高效、低毒、對金屬及織物有腐蝕性，受有機物影響大，穩(wěn)定性差等特點。其濃度為16%～20%(g/100ml)。目前六十八頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點(2)適用范圍:適用于耐腐蝕物品滅菌、環(huán)境及空氣等的消毒。(3)使用方法1)消毒液配制：過氧乙酸一般為二元包裝，A液為冰醋酸液和硫酸的混合液，B液為過氧化氫，使用前按產(chǎn)品使用說明書要求將A、B兩液混合后產(chǎn)生過氧乙酸，在室溫放置24-48小時后即可使用。

目前六十九頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點2)消毒處理：常用的施藥方法有噴霧、浸泡、擦拭、噴灑。①噴霧法：用氣溶膠噴霧器以濃度為0.1%-0.5%的過氧乙酸，以20ml/m3

的用量對室內(nèi)空氣和物體表面進行噴霧消毒，作用1小時。②浸泡法：將清洗、晾干的待消毒物品浸沒于裝有0.2-0.5%過氧乙酸的容器中，加蓋,浸泡30min。③擦拭法：對大件物品或其它不能用浸泡法消毒的物品用0.2%～0.5%過氧乙酸擦拭作用30min。④噴灑法：對一般污染表面的消毒用0.2%～0.4%過氧乙酸噴灑作用30min～60min。目前七十頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點(4)

注意事項：1)過氧乙酸不穩(wěn)定，應(yīng)貯存于通風陰涼處，用前應(yīng)測定有效含量，原液濃度低于12%時禁止使用。2)稀釋液臨用前配制。3)配制溶液時，忌與堿或有機物相混合。4)過氧乙酸對金屬有腐蝕性，對織物有漂白作用。金屬制品與織物經(jīng)浸泡消毒后，及時用清水沖洗干凈。5)使用濃溶液時，謹防濺入眼內(nèi)或皮膚粘膜上，一旦濺上，即時用清水沖洗。6)消毒被血液、膿液等污染的物品時，需適當延長作用時間。目前七十一頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點5.季胺鹽類化合物屬于低效消毒劑通常用于環(huán)境衛(wèi)生消毒，如地面、家具、及墻壁?？蓺缯婢?、細菌、包膜病毒；不能殺滅芽孢、結(jié)核分枝桿菌及無包膜病毒。 有機物 水的硬度 影響其消毒效果 陰離子去污劑使用時，選擇預清潔劑的品種目前七十二頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點（二）空氣熏蒸多使用甲醛（HCHO）進行空氣熏蒸在溫度高于20℃時，甲醛是一種能夠殺滅所有微生物及其孢子的氣體

甲醛對朊病毒沒有殺滅活性市場上出售的產(chǎn)品：

甲醛多聚體（固體）甲醛（福爾馬林）[甲醛濃度約為370g/L（37％）的氣體水溶液，其中含甲醇（100mL/L）作為穩(wěn)定劑]

目前七十三頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點甲醛兩種產(chǎn)品經(jīng)加熱都可以產(chǎn)生氣體，用于封閉空間（如生物安全柜和房間）的清除污染和消毒甲醛是一種致畸、致癌物質(zhì)，具有刺鼻的氣味，其氣體能夠刺激眼睛和黏膜； 因此必須在通風櫥或通風良好的地方儲存和使用； 甲醛的使用必須遵守國家化學品安全規(guī)定；目前七十四頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點1.產(chǎn)生甲醛氣體的方法（1）加熱法：在150～200可使甲醛很快釋放，將甲醛直接均勻鋪放于耐熱容器內(nèi)置于熱源上加熱蒸發(fā)。為保證甲醛用量和滅菌時間的控制，最好使用甲醛發(fā)生器。（2）化學反應(yīng)法：常用的反應(yīng)劑有高錳酸鉀、重鉻酸鉀等氧化劑，最通用是高錳酸鉀與甲醛反應(yīng)，常用反應(yīng)比例為甲醛2份對1份高錳酸鉀。2.室內(nèi)空氣消毒在常溫下，相對濕度70％左右，使用甲醛25ml/m3或多聚甲醛10g/m3。用加熱或化學法釋放甲醛氣體，密閉門窗作用12h以上可達到消毒要求。3.中和殘余甲醛以25％氨水按25ml/m3加熱蒸發(fā)即可。目前七十五頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點

物理方法

一.紫外線

紫外線適用于空氣、物體表面等消毒消毒使用的紫外線是C波紫外線，波長范圍是100nm～280nm

殺菌作用最強的波段是250nm～280nm

紫外線光源必須使用能夠產(chǎn)生達到國家標準的輻照值殺菌紫外燈普通30W

直管紫外燈在距離燈管1m處檢測的輻射253.7nm紫外線強度不得低于70uW/cm2

室內(nèi)安裝紫外燈的數(shù)量為平均每m3不少于1.5W，照射時間不少于30min。

目前七十六頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點二.高壓蒸汽滅菌和其他加熱滅菌消毒加熱是最常用的清除病原體污染的物理手段?！案伞睙釠]有腐蝕性，可用來處理實驗器材中許多可耐受160℃或更高溫度2～4h的物品燃燒或焚化也是一種干熱方式濕熱高壓滅菌則最為有效煮沸消毒具有方法簡單、使用方便，并不一定能殺滅所有的微生物或病原體，但在其他方法（化學殺菌、清除污染、高壓滅菌）不可行或沒有條件時，可以作為一種有效的消毒措施。

目前七十七頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點滅菌后的物品必須小心操作并保存，以保證在使用之前不被污染。壓力飽和蒸汽滅菌（高壓蒸汽滅菌）是對實驗材料進行滅菌的最有效和最可靠的方法 對于大多數(shù)目的，下列組合可以確保正確裝載的高壓滅菌器的滅菌效果：

1.134℃3min

2.126℃10min

3.121℃15min

4.115℃25min目前七十八頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點1.預真空式高壓滅菌器

蒸汽進入前使空氣從滅菌器排出。氣體是通過一個裝有HEPA過濾器的排氣閥排出。在滅菌結(jié)束時，蒸汽自動排出。這種高壓滅菌可以在134℃下進行，因此滅菌周期可以縮短至3min。預真空式高壓滅菌器對于多孔性物品的滅菌很理想，但由于要抽真空而不能用于液體的高壓滅菌。目前七十九頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點2.重力置換式（“下排氣式”）

高壓蒸汽滅菌器

蒸汽在壓力作用下進入滅菌器，由上而下置換較重（冷）的空氣并通過滅菌器的排氣閥（裝有HEPA過濾器）排出。目前八十頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點3.脈動真空蒸汽內(nèi)循環(huán)高壓滅菌器

脈動真空壓力蒸汽滅菌器利用真空控制系統(tǒng)、經(jīng)預抽真空及有限次脈動抽取，通過壓力蒸汽循環(huán)，強制以飽和蒸汽替換殘余空氣，可將柜內(nèi)冷空氣抽除98％以上；避免了因內(nèi)部冷空氣排除不徹底而存在的滅菌效果不穩(wěn)定等問題。滅菌后真空加溫熱烘干，可快速干燥滅菌物品。目前八十一頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點（二）高壓蒸汽滅菌器的裝載高壓蒸汽滅菌器的： 待滅菌物品應(yīng)松散包裝放置在滅菌器內(nèi)： 上下左右均應(yīng)有空隙； 不能接觸器壁； 物品應(yīng)放在金屬網(wǎng)狀籃筐內(nèi)或金屬網(wǎng)架上； 物品裝載量不應(yīng)超過滅菌器內(nèi)總體積的80% --利于蒸汽的滲透和空氣排出

--使蒸汽能夠作用到其內(nèi)容物；目前八十二頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點壓力蒸汽滅菌包內(nèi)化學指示卡/條目前八十三頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點（三）高壓蒸汽滅菌質(zhì)量保證的生物指標1.干熱滅菌常用滅菌時間和溫度是170℃,60min；160℃,120min;150℃,150min。應(yīng)用枯草桿菌黑色變種芽孢（ATCC9372，菌片含菌量為5.0×105cfu/片～5.0×106cfu/片）監(jiān)測滅菌效果。監(jiān)測培養(yǎng)物應(yīng)置35℃～37℃培養(yǎng)24～48h后觀察。2.高壓蒸汽滅菌指示菌株為耐熱嗜熱脂肪芽孢桿菌（ATCC7953，菌片含菌量為5.0×105cfu/片～5.0×106cfu/片）監(jiān)測滅菌效果。監(jiān)測培養(yǎng)物應(yīng)置55℃培養(yǎng)24～48h后觀察（自含式生物指示物按說明書執(zhí)行）。目前八十四頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點（四）高壓滅菌器使用注意事項下列規(guī)定能夠減少操作壓力容器時可能發(fā)生的危害：1.

應(yīng)由受過良好培訓人員負責高壓滅菌器的操作和維護。2.

預防性的維護程序應(yīng)包括：由有資質(zhì)人員定期檢查滅菌器柜腔、門的密封性以及所有的儀表和控制器。3.

應(yīng)使用不含腐蝕性抑制劑或其他化學品飽和蒸汽，否則可能污染滅菌的物品。4.

所有需要高壓蒸汽滅菌的物品都應(yīng)放在空氣能夠排出并具有良好熱滲透性的容器中；滅菌器柜腔裝載要松散，以便蒸汽可以均勻作用于裝載物。5.

當滅菌器內(nèi)部加壓時，互鎖安全裝置可以防止門被打開，而沒有互鎖裝置的高壓蒸汽滅菌器，應(yīng)當關(guān)閉主蒸汽閥并待溫度下降到80℃以下時再打開門。??！目前八十五頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點（四）高壓滅菌器使用注意事項6.

當對液體高壓蒸汽滅菌時，由于取出液體時可能因過熱而沸騰，故應(yīng)采用慢排式設(shè)置。7.

即使溫度下降到80℃以下，操作者打開門時也應(yīng)當戴適當?shù)氖痔缀兔嬲謥磉M行防護。8.

在進行高壓滅菌效果的常規(guī)監(jiān)測中，生物指示劑或熱電偶計應(yīng)置于每件高壓滅菌物品的中心。最好在滿載時用熱偶計和記錄儀進行定時監(jiān)測，以確定滅菌程序是否恰當。(或用化學指示條)9.

如果有滅菌器的排水過濾器應(yīng)當每天拆下清洗。10.

應(yīng)當注意保持高壓滅菌器安全閥的通暢。目前八十六頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點三.焚燒在處理經(jīng)或未經(jīng)清除污染的動物尸體以及解剖組織或其他實驗室廢棄物時，焚燒是一種有效的方法。 只有在實驗室可以控制焚燒爐的條件下，才能用焚燒代替高壓滅菌來處理感染性物質(zhì)。 需要有效控制溫度，并配備二級焚燒室時才能實現(xiàn)徹底焚燒。 許多焚燒爐，尤其是那些只有單個焚燒室的，不能滿足處理感染性物質(zhì)、動物尸體和塑料制品的要求，微生物、有毒化學品和煙塵可能通過煙囪排放而污染大氣

理想的是一級焚燒室的溫度至少應(yīng)達到800℃

二級焚燒室的溫度至少應(yīng)達到1000℃目前八十七頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點HEPA過濾HEPA濾器更換程序：1．HEPA濾器消毒

1）福爾馬林熏蒸(同生物安全柜消毒步驟)2）或用過氧乙酸對HEPA濾器的濾膜、外周和濾器后方檢測孔處噴霧消毒,消毒時間依所用消毒劑種類而定。2．HEPA濾器卸載

卸載HEPA濾器時，根據(jù)所從事的病原微生物的分類來對操作人員進行相應(yīng)的防護。將HEPA濾器裝入醫(yī)用廢物塑料袋。3．高壓滅菌

壓力及時間依病原微生物種類而定。4．焚燒

高壓滅菌完成后，用醫(yī)用廢物塑料袋包裝后送焚燒。目前八十八頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點第四節(jié)實驗室消毒滅菌的應(yīng)用

清除局部環(huán)境污染生物安全柜的清除廢物的處理目前八十九頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點

一.清除局部環(huán)境污染（一）表面污染的清除使用次氯酸鈉（NaOCl）溶液含有1％有效氯的溶液適于普通的環(huán)境衛(wèi)生設(shè)備當處理高危環(huán)境時:

建議使用高濃度（5g/L）溶液。用于清除環(huán)境污染時

目前九十頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點（二）一般實驗器材的消毒

凡直接或間接接觸臨床標本或?qū)嶒炍⑸锏钠鞑木鶓?yīng)視為有傳染性，均應(yīng)作消毒處理。

1．金屬器材、玻璃器皿可用壓力蒸汽和干熱滅菌的方法適用于耐高溫、高濕的醫(yī)用器械和物品的滅菌。1）壓力蒸汽滅菌器的種類：下排氣壓力蒸汽滅菌器，預真空壓力蒸汽滅菌器和脈動真空壓力蒸汽滅菌器。

目前九十一頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點2．玻璃器材使用過的玻璃吸管、試管、離心管、玻片、玻璃棒、三角瓶和平皿等應(yīng)立即浸入0.5%過氧乙酸噴灑或有效氯為2000mg/L的含氯消毒劑中1小時以上，消毒后用超聲波清洗的方法洗凈瀝干，使用前再進行高壓滅菌處理。目前九十二頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點

3．塑料、橡膠、無紡布制品

1）一次性帽子、口罩、手套、帽子工作服、防護服等使用后應(yīng)放入污物袋內(nèi)集中銷毀。

2）耐熱的塑料器材可用0.5%—1.0%肥皂液或洗滌劑溶液煮沸15-30分鐘，然后清水洗地瀝干后，121℃，15分鐘高壓滅菌處理。目前九十三頁\總數(shù)一百零一頁\編于二十點

3）不耐熱的塑料器材可用0.5%過氧乙酸噴灑或有效氯為2000mg/L的含氯消毒劑中浸泡1小時以上，然后清水洗滌瀝干后，用環(huán)氧乙烷消毒柜，在溫度為54℃，相對濕度為80%，環(huán)氧乙烷氣體濃度為800mg/L的條件下，作用4～6h。

4）一般血清學反應(yīng)使用過的塑料板，可直接浸入1%鹽酸溶液中