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大小鼠眼眶取血方法附圖演示文稿目前一頁(yè)\總數(shù)二十二頁(yè)\編于十八點(diǎn)交流提綱實(shí)驗(yàn)環(huán)境實(shí)驗(yàn)材料動(dòng)物處理取血容量時(shí)間安排具體操作.血樣處理問題討論大鼠PK取血目前二頁(yè)\總數(shù)二十二頁(yè)\編于十八點(diǎn)環(huán)境材料B毛細(xì)管
0.9mm×100mm,看個(gè)人習(xí)慣使用,經(jīng)常一管三斷,30mm/管,棄去中間段。EP管加入0.1%肝素鈉(>150U/mg)0.1mL,均勻潤(rùn)濕,50℃以下干燥;適用1mL全血的抗凝,效果良好。取血時(shí)必須提前檢查管的質(zhì)量,標(biāo)號(hào)分組,適當(dāng)多備。C抗凝EP管D計(jì)時(shí)工具A通風(fēng)臺(tái)面長(zhǎng)時(shí)間操作,透氣通風(fēng)寬敞臺(tái)面,便于多組多步驟同時(shí)操作Page
3目前三頁(yè)\總數(shù)二十二頁(yè)\編于十八點(diǎn)Page
4動(dòng)物處理實(shí)驗(yàn)期間,補(bǔ)充體液,目前常規(guī)為:取血后灌胃給予等統(tǒng)計(jì)生理鹽水/葡萄糖溶液。動(dòng)物體重要求一般不低于250g給藥前禁食12-24h,給藥前提前0.5-1.0h按0.5-1.0%(V/W)給水實(shí)驗(yàn)之后,外用消炎藥涂布眼部目前四頁(yè)\總數(shù)二十二頁(yè)\編于十八點(diǎn)Page
5容量時(shí)間注射一般呈現(xiàn)降低趨勢(shì),給藥后較短時(shí)間內(nèi)采集的點(diǎn)數(shù)適當(dāng)增加;灌胃存在Cmax-tmax,需通過考察tmax,根據(jù)一般原則,適當(dāng)調(diào)整時(shí)間間隔。取血容量時(shí)間安排選點(diǎn)一般原則預(yù)實(shí)驗(yàn)建立藥物性質(zhì)給藥途徑分布相3-4個(gè)點(diǎn)吸收相3-4個(gè)點(diǎn)吸收相3-4個(gè)點(diǎn)
一般12h內(nèi)取血不超過動(dòng)物質(zhì)量2.0%(v/w)
每次0.25-0.5mL目前五頁(yè)\總數(shù)二十二頁(yè)\編于十八點(diǎn)Page
6大鼠眼眶取血流程6樣品搖勻1.將大鼠按壓在鼠籠上,拇+中+食指固定住頭部3.右手持毛細(xì)管從眼內(nèi)眥部,與鼠面成45
℃夾角,旋轉(zhuǎn)刺入2.緊握頸部,壓迫頸兩側(cè),使眼突出,眶后靜脈叢充血4.固定身體,壓住后肢,放松手指,調(diào)整毛細(xì)管,流暢出血。5.取血完成,立即除去頸部壓力,將采血器拔出,按壓止血。6血樣管輕輕混勻,防止凝血、溶血。2壓迫頸部3旋轉(zhuǎn)刺入4固定采血5去管止血1左手保定目前六頁(yè)\總數(shù)二十二頁(yè)\編于十八點(diǎn)1左手保定Step1.將大鼠按壓在鼠籠上,拇+中+食指固定住頭部Step1A建議籠子內(nèi)放置重物防止搖晃;B一定要帶手套;C開始必須牢牢固定住頭部
頭部亂動(dòng),扎位置容易得偏離,且易被咬傷;D可在此時(shí)將大鼠取血側(cè)的胡須剪掉,防止接觸凝血。Page
7大鼠眼眶取血流程目前七頁(yè)\總數(shù)二十二頁(yè)\編于十八點(diǎn)2壓迫頸部Step2.緊握頸部,壓迫頸兩側(cè),使眼突出,眶后靜脈叢充血Step2A可用管試探性觸碰眼球是否已經(jīng)突出;B此時(shí)大鼠反抗掙扎最厲害,保證抓緊的同時(shí),不能太過,使其窒息死亡。Page
8大鼠眼眶取血流程目前八頁(yè)\總數(shù)二十二頁(yè)\編于十八點(diǎn)3旋轉(zhuǎn)刺入Step3.眼內(nèi)眥部,45
℃夾角,旋轉(zhuǎn)刺入,旋轉(zhuǎn)退出。Step3A針頭斜面先向眼球,刺入后再轉(zhuǎn)一定角度使斜面對(duì)著眼眶后界;B刺入深度,小鼠約2-3mm,大鼠約4-5mm。當(dāng)感到有阻力時(shí)即停止推進(jìn),同時(shí),管退出約0.1-0.5mm,邊退邊旋轉(zhuǎn);C不要使用管的尖銳鋒利端插入,易留玻璃碎片在眼內(nèi),造成持續(xù)傷害,使得下次反抗增加;D拿管的手要保持干凈,帶血漬的手指不要接觸管的兩端,易造成凝血,可用醇水擦洗。Page
9大鼠眼眶取血流程目前九頁(yè)\總數(shù)二十二頁(yè)\編于十八點(diǎn)4固定采血Step4.固定身體,壓住后肢,放松手指,調(diào)整毛細(xì)管,流暢出血。Step4A一般血流速度快,證明插破了眼眶動(dòng)脈,如果血流速度慢,證明要調(diào)整毛細(xì)管的位置,血液都流到組織中了,沒順毛細(xì)管流出來(lái);B出血過程中如遇到出血不暢不用著急拔毛細(xì)管可以調(diào)整一下毛細(xì)管的扎入位置或深或淺的挑正一下血會(huì)重新流出;C如看見血液已經(jīng)在毛細(xì)管中凝固必須迅速拔除毛細(xì)管,再搽干凈眼睛,重新?lián)Q管扎針;D等到出血后將力道轉(zhuǎn)移到大鼠的身體上大鼠出現(xiàn)亂動(dòng)的情況很大的一部分力是他的后肢使出來(lái)的保證她的后肢無(wú)法亂蹬就能很好的保定大鼠,然后將中指和食指處解除一半的力道,可以保證血液的順暢Page
10大鼠眼眶取血流程目前十頁(yè)\總數(shù)二十二頁(yè)\編于十八點(diǎn)5去管止血Step5.取血完成,立即除去頸部壓力,將采血器拔出,按壓止血Step5A當(dāng)?shù)玫剿璧难亢?,即除去加于頸部的壓力,同時(shí),將采血器拔出,以防止術(shù)后穿刺孔出血。B盡量把眼睛周圍的血漬搽干凈,避免結(jié)塊影響下次取血。6樣品搖勻Step6.血樣管輕輕混勻,防止凝血、溶血Page
11大鼠眼眶取血流程目前十一頁(yè)\總數(shù)二十二頁(yè)\編于十八點(diǎn)大鼠眼眶取血流程Page
12目前十二頁(yè)\總數(shù)二十二頁(yè)\編于十八點(diǎn)大鼠眼眶取血流程Page
13目前十三頁(yè)\總數(shù)二十二頁(yè)\編于十八點(diǎn)大鼠眼眶取血流程Page
14目前十四頁(yè)\總數(shù)二十二頁(yè)\編于十八點(diǎn)Page
15目前十五頁(yè)\總數(shù)二十二頁(yè)\編于十八點(diǎn)大鼠眼眶取血流程Page
16目前十六頁(yè)\總數(shù)二十二頁(yè)\編于十八點(diǎn)Page
17大鼠眼眶取血流程目前十七頁(yè)\總數(shù)二十二頁(yè)\編于十八點(diǎn)Page
18大鼠眼眶取血流程目前十八頁(yè)\總數(shù)二十二頁(yè)\編于十八點(diǎn)Page
19大鼠眼眶取血流程目前十九頁(yè)\總數(shù)二十二頁(yè)\編于十八點(diǎn)大鼠眼眶取血流程Page
20目前二十頁(yè)\總數(shù)二十二頁(yè)\編于十八點(diǎn)大鼠眼眶取血流程Page
21目前二十一頁(yè)\總數(shù)二十二頁(yè)\編于十八點(diǎn)血樣處理
血樣處理血清不抗凝血漿肝素鈉抗凝A全血37℃水浴0.5~1h,短時(shí)間內(nèi)(<30min)低速(<4000)離心(10min)
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