內(nèi)蒙古自治區(qū)包頭市三十三中2022-2023學(xué)年生物高二第二學(xué)期期末監(jiān)測模擬試題含解析

2022-2023學(xué)年高二下生物期末模擬試卷注意事項1．考生要認真填寫考場號和座位序號。2．試題所有答案必須填涂或書寫在答題卡上，在試卷上作答無效。第一部分必須用2B鉛筆作答；第二部分必須用黑色字跡的簽字筆作答。3．考試結(jié)束后，考生須將試卷和答題卡放在桌面上，待監(jiān)考員收回。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．下列關(guān)于人體細胞的結(jié)構(gòu)和功能的敘述，正確的是（）A．細胞分化、衰老和癌變都會導(dǎo)致細胞形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能發(fā)生變化B．細胞間傳遞信號的分子都是由細胞內(nèi)的核糖體合成的C．神經(jīng)元處于靜息狀態(tài)時不進行葡萄糖的跨膜運輸D．神經(jīng)細胞軸突末梢有大量突起，有利于接受更多神經(jīng)遞質(zhì)進行信息傳遞2．下列關(guān)于實驗圖示的敘述，正確的是（）A．圖①的四條色素帶中溶解度最大的是Ⅳ-黃綠色的葉綠素bB．清水中的紫色洋蔥表皮細胞經(jīng)圖②所示操作后，顯微鏡下可見液泡體積變小紫色變深C．要將圖③中根尖分生區(qū)細胞移至視野中央，應(yīng)將裝片向右移動D．圖④中將物鏡由甲轉(zhuǎn)換成乙后視野中觀察到的細胞數(shù)目增多3．下列關(guān)于人體中蛋白質(zhì)功能的敘述，錯誤的是A．組成蛋白質(zhì)的氨基酸之間的肽鍵結(jié)構(gòu)式是-NH-CO-B．肌細胞中的某些蛋白質(zhì)參與肌肉收縮的過程C．蛋白質(zhì)結(jié)合Mg2+形成的血紅蛋白參與O2運輸D．細胞核中某些蛋白質(zhì)是染色體的重要組成成分4．關(guān)于單克隆抗體制備與植物體細胞雜交的說法中正確的是()A．單克隆抗體制備與植物體細胞雜交的基本原理相同B．單克隆抗體制備與植物體細胞雜交誘導(dǎo)細胞融合的方法相同C．單克隆抗體制備與植物體細胞雜交在細胞融合前處理過程相同D．單克隆抗體制備與植物體細胞雜交都需要篩選且篩選目的相同5．下列細胞結(jié)構(gòu)中，不能用光學(xué)顯微鏡直接觀察的是()A．細胞壁B．細胞膜C．大液泡D．細胞核6．將發(fā)生了質(zhì)壁分離的紫色洋蔥鱗片葉外表皮細胞放入清水中，其液泡體積的變化如圖所示。下列敘述錯誤的是A．a(chǎn)點時，水分子既可進細胞也可出細胞B．與b點相比，a點時細胞液的滲透壓更大C．c點時原生質(zhì)層兩側(cè)溶液無濃度差D．a(chǎn)c時間段液泡體積增大，但細胞體積基本不變7．圖甲為溫度對酶促反應(yīng)速率影響，圖乙中的實線表示在溫度為a時生成物量與時間的關(guān)系。則當(dāng)溫度增加一倍時生成物量與時間的關(guān)系是()A．曲線1 B．曲線2 C．曲線3 D．曲線48．（10分）從水稻的根尖細胞分離出某細胞器，進行分析，其堿基組成如下表所示：則該細胞器中所完成的生理活動是（）A．mRNA→蛋白質(zhì)B．CO2+H2O→（CH2O）+O2C．C6H12O6＋6H2O＋6O2→6CO2＋12H2O＋能量D．2C3H4O3（丙酮酸）＋4[H]＋6H2O＋6O2→6CO2＋12H2O＋能量二、非選擇題9．（10分）回答下列與酵母菌有關(guān)的問題：（1）分離培養(yǎng)酵母菌通常使用____________（填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“麥芽汁瓊脂”）培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基應(yīng)采用________滅菌法滅菌。若將酵母菌劃線接種在平板上，培養(yǎng)一段時間后會觀察到菌落，菌落的含義是_______________。（2）酵母菌液體培養(yǎng)時，若通入氧氣，可促進______________（填“菌體快速增殖”、“乙醇產(chǎn)生”或“乳酸產(chǎn)生”）；若進行厭氧培養(yǎng)，可促進_________（填“菌體快速增殖”、“乙醇產(chǎn)生”或“乳酸產(chǎn)生”）。（3）制作面包時，為使面包松軟通常要在面粉中添加一定量的酵母菌，酵母菌引起面包松軟的原因是______________________。10．（14分）為了檢測高原訓(xùn)練對運動員體內(nèi)的血紅蛋白含量的影響，需要對運動員訓(xùn)練前后的血紅蛋白進行提取和分離，其步驟如下：（1）在紅細胞的洗滌操作中，血液離心后結(jié)果如圖所示，其中血紅蛋白位于__________（填“上清液”或“沉淀物”）。洗滌紅細胞時，要用相當(dāng)于紅細胞液體體積5倍的___________洗滌紅細胞3次，然后加入蒸餾水到原血液體積，再加40%的_____________，攪拌約10min，使紅細胞破裂，釋放出血紅蛋白。（2）在樣品粗分離操作中，將收集的血紅蛋白溶液放在透析袋中進行透析。透析的目的是_______________。（3）血紅蛋白的純化是通過凝膠色譜法將雜蛋白除去，最后經(jīng)___________電泳進行純度鑒定。研究小組用凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)時，相對分子質(zhì)量___________（填“較大”或“較小”）的蛋白質(zhì)先從層析柱中洗脫出來。在裝填色譜柱時不得有氣泡存在，原因是_______________________。（4）檢測結(jié)果顯示，經(jīng)過高原訓(xùn)練后，運動員體內(nèi)血紅蛋白含量有了明顯升高，試分析其可能的原因______________________。11．（14分）請回答利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法培育轉(zhuǎn)基因植物的相關(guān)問題:（1）培育轉(zhuǎn)基因植物過程的核心步驟是___________,其目的是使目的基因在受體細胞中____,并且可以通過復(fù)制遺傳給下一代,同時使目的基因表達和發(fā)揮作用。

（2）構(gòu)建基因表達載體時,可利用DNA連接酶連接被限制酶切開的_____鍵?；虮磉_載體的組成部分包括啟動子、終止子、目的基因、____、復(fù)制原點等。

（3）組成基因表達載體的單體是____?；虮磉_載體中的啟動子是___識別和結(jié)合的部位,這種結(jié)合完成后才能驅(qū)動目的基因通過-----___________________(填過程)合成mRNA。

（4）用兩種限制酶XbaⅠ和SacⅠ(兩種酶切出的黏性末端不同)切割某DNA,獲得含目的基因的片段。若利用該片段構(gòu)建基因表達載體,應(yīng)選用的Ti質(zhì)粒是如圖中的____。12．植物組織培養(yǎng)技術(shù)在科學(xué)研究和生產(chǎn)實踐中得到了廣泛的應(yīng)用?；卮鹣铝袉栴}。（1）植物微型繁殖是植物繁殖的一種途徑。與常規(guī)的種子繁殖方法相比，這種微型繁殖技術(shù)的特點有______________________（答出2點即可）。（2）通過組織培養(yǎng)技術(shù)，可把植物組織細胞培養(yǎng)成胚狀體，再通過人工種皮（人工薄膜）包裝得到人工種子（如圖所示），這種人工種子在適宜條件下可萌發(fā)生長。人工種皮具備透氣性的作用是_______________________________。人工胚乳能夠為胚狀體生長提供所需的物質(zhì)，因此應(yīng)含有植物激素、___________和___________等幾類物質(zhì)（3）用脫毒苗進行繁殖，可以減少作物感染病毒。為了獲得脫毒苗，可以選取植物的___________進行組織培養(yǎng)。（4）植物組織培養(yǎng)技術(shù)可與基因工程技術(shù)相結(jié)合獲得轉(zhuǎn)基因植株。將含有目的基因的細胞培養(yǎng)成一個完整植株的基本程序是______________________________________________（用流程圖表示）。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、A【解析】

1、關(guān)于“細胞分化”，考生可以從以下幾方面把握：（1）細胞分化是指在個體發(fā)育中，由一個或一種細胞增殖產(chǎn)生的后代，在形態(tài)，結(jié)構(gòu)和生理功能上發(fā)生穩(wěn)定性差異的過程。（2）細胞分化的特點：普遍性、穩(wěn)定性、不可逆性。（3）細胞分化的實質(zhì)：基因的選擇性表達。（4）細胞分化的結(jié)果：使細胞的種類增多，功能趨于專門化。2、核糖體：合成蛋白質(zhì)的場所。3、人體細胞無氧呼吸的場所是細胞質(zhì)基質(zhì)，有氧呼吸的場所是細胞質(zhì)基質(zhì)和線粒體?！驹斀狻緼、細胞分化、衰老和癌變都會導(dǎo)致細胞形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能發(fā)生變化，A正確；B、細胞間傳遞信號的分子不都是由細胞內(nèi)的核糖體合成的，如神經(jīng)遞質(zhì)，B錯誤；C、神經(jīng)元細胞處于靜息狀態(tài)時仍進行葡萄糖的跨膜運輸，C錯誤；D、神經(jīng)細胞軸突末梢有大量突起，有利于釋放更多神經(jīng)遞質(zhì)進行信息傳遞，D錯誤。故選A。2、B【解析】

分析圖①：濾紙條從上到下依次是：胡蘿卜素（橙黃色）、葉黃素（黃色）、葉綠素a（藍綠色）、葉綠素b（黃綠色）。

分析圖②，在蓋玻片的一側(cè)滴蔗糖溶液，一側(cè)用吸水紙吸引，重復(fù)多次，觀察質(zhì)壁分離。

分析圖③，根尖分生區(qū)細胞成正方形，排列緊密，位于左側(cè)。

分析圖④，兩個鏡頭都有螺旋，屬于物鏡，物鏡越長，放大倍數(shù)越大?！驹斀狻緼、色素在層析液中的溶解度越大，在濾紙條上擴散速度越快，因此圖①的四條色素帶中溶解度最小的是Ⅳ-黃綠色的葉綠素b，溶解度最大的是Ⅰ--橙黃色的胡蘿卜素，A錯誤；

B、經(jīng)圖②所示操作后，由于蔗糖溶液的濃度大于細胞液的濃度，細胞失水，所以顯微鏡下可見液泡體積變小紫色變深，B正確；

C、根尖分生區(qū)細胞為正方形，位于視野的左方，要將圖③中根尖分生區(qū)細胞移至視野中央，應(yīng)將裝片向左移動，C錯誤；

D、目鏡越長，放大倍數(shù)越小，物鏡越長，放大倍數(shù)越大，圖④中將物鏡由甲轉(zhuǎn)換成乙后，放大倍數(shù)增大，所以視野中觀察到的細胞數(shù)目減少，視野變暗，D錯誤。

故選B。3、C【解析】

1、構(gòu)成蛋白質(zhì)的基本單位是氨基酸，其結(jié)構(gòu)通式是，即每種氨基酸分子至少都含有一個氨基和一個羧基，且都有一個氨基和一個羧基連接在同一個碳原子上，這個碳原子還連接一個氫和一個R基，氨基酸的不同在于R基的不同。2、氨基酸在核糖體中通過脫水縮合形成多肽鏈，而脫水縮合是指一個氨基酸分子的羧基（-COOH）和另一個氨基酸分子的氨基（-NH2）相連接，同時脫出一分子水的過程；連接兩個氨基酸的化學(xué)鍵是肽鍵，其結(jié)構(gòu)式是-CO-NH-。3、構(gòu)成蛋白質(zhì)的氨基酸中有8種氨基酸是人體細胞不能合成的（嬰兒有9種，比成人多的一種是組氨酸），必需從外界環(huán)境中獲得，稱為必需氨基酸，其它（12種）氨基酸在人體細胞中能夠合成，稱為非必需氨基酸?！驹斀狻拷M成蛋白質(zhì)的氨基酸之間的肽鍵結(jié)構(gòu)式是-NH-CO-，A正確；蛋白質(zhì)是生命活動的承擔(dān)者，故肌細胞中的某些蛋白質(zhì)參與肌肉收縮的過程，B正確；蛋白質(zhì)結(jié)合Fe2＋形成的血紅蛋白參與O2的運輸，C錯誤；染色體是細胞核的結(jié)構(gòu)之一，染色體主要由DNA和蛋白質(zhì)組成，D正確；故選C。4、D【解析】

1、單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細胞；誘導(dǎo)B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞；進行抗體檢測，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞；進行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。2、兩次篩選：①篩選得到雜交瘤細胞（去掉未雜交的細胞以及自身融合的細胞）；②篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的細胞群。3、誘導(dǎo)動物細胞融合的方法有：物理法（離心、振動）、化學(xué)法（聚乙二醇）、生物法（滅活的病毒）。4、植物的體細胞雜交是將不同植物的細胞通過細胞融合技術(shù)形成雜種細胞，進而利用植物的組織培養(yǎng)將雜種細胞培育成多倍體的雜種植株。在進行植物體細胞雜交時需要使用纖維素酶和果膠酶去掉植物細胞的細胞壁，使用化學(xué)方法（聚乙二醇）或物理方法誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，不能用滅活的病毒誘導(dǎo)。可根據(jù)植物細胞的質(zhì)壁分離和復(fù)原鑒定雜種細胞是否再生細胞壁，從而確定原生質(zhì)體融合是否完成。【詳解】A、單克隆抗體制備所用技術(shù)手段是動物細胞融合、動物細胞培養(yǎng)，原理是細胞膜的流動性、細胞的增殖，植物體細胞雜交的所用技術(shù)手段是植物原生質(zhì)體融合、植物組織培養(yǎng)，原理是細胞膜的流動性、細胞的全能性，A錯誤；B、誘導(dǎo)動物細胞融合的方法有：物理法（離心、振動）、化學(xué)法（聚乙二醇）、生物法（滅活的病毒），而誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合，使用化學(xué)方法（聚乙二醇）或物理方法誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，不能用滅活的病毒誘導(dǎo)，B錯誤；C、植物細胞有細胞壁，誘導(dǎo)植物細胞融合前要去除細胞壁，誘導(dǎo)動物細胞融合則不需要，C錯誤；D、將鼠的骨髓瘤細胞與B淋巴細胞融合，考慮兩兩融合，形成的雜種細胞有三種，骨髓瘤細胞自身融合的細胞、B淋巴細胞自身融合的細胞、雜交瘤細胞，需要篩選出能產(chǎn)生抗體的雜交瘤細胞，制備單克隆抗體，植物體細胞雜交技術(shù)形成的雜種細胞也是三種，需要篩選培符合要求的細胞，D正確。故選D。5、B【解析】

本題考查細胞的結(jié)構(gòu)，考查對細胞結(jié)構(gòu)的理解和識記。解答此題，可根據(jù)各細胞結(jié)構(gòu)的位置、特點判斷其能否用光學(xué)顯微鏡直接觀察?！驹斀狻考毎谑侵参锛毎钔鈱拥慕Y(jié)構(gòu)，部分大液泡含有色素，細胞核折光性較強，三者均可在光學(xué)顯微鏡下觀察到，細胞膜是緊貼細胞壁的一層透明薄層，光學(xué)顯微鏡下看不到，只能用光學(xué)顯微鏡觀察到細胞的邊界，選B。【點睛】細胞的顯微結(jié)構(gòu)與亞顯微結(jié)構(gòu)：（1）顯微結(jié)構(gòu)：光學(xué)顯微鏡下看到的細胞結(jié)構(gòu)，可以看到細胞核、葉綠體、線粒體等結(jié)構(gòu)，但不能看到其內(nèi)部結(jié)構(gòu)，不能看到核糖體、中心體等細胞器。看不到細胞膜，但可根據(jù)細胞的邊界推測細胞膜的存在。（2）亞顯微結(jié)構(gòu)：電子顯微鏡下看到的細胞結(jié)構(gòu)，如核糖體、中心體、葉綠體、線粒體內(nèi)部結(jié)構(gòu)、細胞核具體結(jié)構(gòu)等。6、C【解析】

本題以圖表結(jié)合為情境，考查學(xué)生對植物細胞的失水與吸水的相關(guān)知識的識記和理解能力，以及獲取信息、分析問題的能力。【詳解】依題意可知，在a點時，在單位時間內(nèi)，單位體積內(nèi)的水分子由清水進入液泡中的比由液泡進入清水中的多，即a點時，水分子既可進細胞也可出細胞，A正確；題圖顯示：將發(fā)生質(zhì)壁分離的紫色洋蔥外表皮細胞放入清水中，隨著時間的推移，液泡的體積逐漸變大直至保持相對穩(wěn)定，所以與b點相比，a點時細胞的吸水量較少，細胞液的滲透壓更大，B正確；與b點相比，c點時液泡的體積不再增加，說明水分進出細胞達到動態(tài)平衡，但因細胞液中含有一定量的溶質(zhì)，其濃度大于清水，所以c點時原生質(zhì)層兩側(cè)溶液存在濃度差，C錯誤；由于細胞壁的伸縮性有限，所以ac時間段液泡體積增大，但細胞體積基本不變，D正確?！军c睛】有關(guān)此題曲線圖的分析，關(guān)鍵在于熟練掌握植物細胞的失水和吸水的條件及其原因，明確橫縱坐標(biāo)的含義以及曲線的變化趨勢、起點、轉(zhuǎn)折點、終點等點的含義。7、B【解析】

酶是活細胞產(chǎn)生的具有生物催化能力的有機物，大多數(shù)是蛋白質(zhì)，少數(shù)是RNA；酶的催化具有高效性（酶的催化效率遠遠高于無機催化劑）、專一性（一種酶只能催化一種或一類化學(xué)反應(yīng)的進行）、需要適宜的溫度和pH值（在最適條件下，酶的催化活性是最高的）。【詳解】由甲圖可知，當(dāng)溫度增加一倍時酶活性會提高，酶促反應(yīng)速率會加快，達到平衡點的時間會縮短，但不改變反應(yīng)的平衡點，對應(yīng)曲線2。綜上所述，ACD不符合題意，B符合題意。故選B。8、A【解析】表格中T的含量為0，而T是DNA特有的堿基，說明該細胞器不含DNA；題干中U的含量為15%，U是RNA特有的堿基，說明該細胞器含有RNA，因此該細胞器含有RNA不含DNA?！癿RNA→蛋白質(zhì)”表示翻譯過程，場所是核糖體，核糖體中含有RNA不含DNA，A正確；“6CO2+12H2O→C6H12O6+6O2+6H2O”表示光合作用過程，場所在葉綠體，葉綠體基質(zhì)中含少量DNA和RNA，B錯誤；“C6H12O6+6H2O+6O2→6CO2+12H2O+能量”表示有氧呼吸過程，場所在細胞質(zhì)基質(zhì)和線粒體，細胞質(zhì)基質(zhì)不是細胞器，線粒體基質(zhì)中含少量DNA和RNA，C錯誤；“2C3H4O3（丙酮酸）+6H2O→6CO2+20[H]+能量”表示有氧呼吸第二階段過程，場所在線粒體，線粒體基質(zhì)中含少量DNA和RNA，D錯誤。【考點定位】細胞器的種類和功能二、非選擇題9、麥芽汁瓊脂高壓蒸汽由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體菌體快速增殖乙醇產(chǎn)生酵母菌分解葡萄糖會產(chǎn)生CO2，CO2使面包松軟【解析】

本題主要考查酵母菌培養(yǎng)和分離的有關(guān)知識。酵母菌是兼性厭氧型的單細胞真菌，在有氧條件下，進行有氧呼吸產(chǎn)生H2O和CO2，釋放能量多，細胞增殖快；在無氧條件下，進行無氧呼吸，產(chǎn)生酒精和CO2，釋放能量少，細胞增殖慢；常用的滅菌方法有：灼燒滅菌（主要用于接種工具滅菌）、干熱滅菌（用于待檢滅菌的物品如金屬、玻璃、陶瓷制品）、高壓蒸汽滅菌（適用于培養(yǎng)基滅菌）；平板劃線法是通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。在數(shù)次劃線后，就可以得到由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體，這就是菌落；牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基屬于細菌培養(yǎng)基，麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基適合培養(yǎng)真菌，MS培養(yǎng)基是植物組織培養(yǎng)使用的培養(yǎng)基。【詳解】（1）麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基的碳氮比較高，而且含糖量高，更適合酵母菌；該培養(yǎng)基應(yīng)采用高壓蒸汽滅菌法滅菌；若將酵母菌劃線接種在平板上，培養(yǎng)一段時間后可觀察到由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體，這就是菌落。（2）酵母菌液體培養(yǎng)時，若通入氧氣，進行有氧呼吸產(chǎn)生H2O和CO2，釋放能量多，細胞增殖快；若進行無氧培養(yǎng)，進行無氧呼吸，產(chǎn)生酒精和CO2，釋放能量少，增殖慢。（3）制作面包時，在面粉中添加一定量的酵母菌，因酵母菌可以分解面粉中的葡萄糖，產(chǎn)生二氧化碳，二氧化碳是氣體，遇熱膨脹而形成小孔，使得面包松軟多孔?！军c睛】要注意區(qū)別三種培養(yǎng)基的用途；要知道酵母菌的無氧呼吸產(chǎn)生酒精和CO2，不是乳酸。10、沉淀物生理鹽水甲苯去除分子量較小的雜質(zhì)SDS—聚丙烯酰胺凝膠較大氣泡會擾亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，使得到的紅色帶區(qū)歪曲、散亂，降低分離效果高原環(huán)境空氣稀薄，氧氣含量低，血紅蛋白含量會增加【解析】

根據(jù)蛋白質(zhì)的物化理性質(zhì)：形狀、大小、電荷性質(zhì)和多少、溶解度、吸附性質(zhì)、親和力等千差萬別，由此提取和分離各種蛋白質(zhì)。血紅蛋白的提取與分離的實驗步驟主要有：（1）樣品處理：①紅細胞的洗滌（低速短時間離心），②血紅蛋白的釋放（需要加入蒸餾水和甲苯），③分離血紅蛋白（中速長時間離心）。（2）粗分離：①分離血紅蛋白溶液，②透析。（3）純化：調(diào)節(jié)緩沖液面→加入蛋白質(zhì)樣品→調(diào)節(jié)緩沖液面→洗脫→收集分裝蛋白質(zhì)。（4）純度鑒定--SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳。凝膠色譜法（分配色譜法）：①原理：分子量大的分子通過多孔凝膠顆粒的間隙，路程短，流動快；分子量小的分子穿過多孔凝膠顆粒內(nèi)部，路程長，流動慢。②凝膠材料：多孔性，多糖類化合物，如葡聚糖、瓊脂糖。③分離過程：混合物上柱→洗脫→大分子流動快、小分子流動慢→收集大分子→收集小分子。洗脫：從色譜柱上端不斷注入緩沖液，促使蛋白質(zhì)分子的差速流動。④作用：分離蛋白質(zhì)，測定生物大分子分子量，蛋白質(zhì)的脫鹽等?！驹斀狻浚?）血紅蛋白在紅細胞內(nèi)，而血液離心后的各種血細胞主要存在于沉淀物中，因此血紅蛋白位于沉淀物中。洗滌紅細胞時，生理鹽水可以保持紅細胞不破裂，而5倍體積洗滌3次可以去除雜蛋白，得到更純的紅細胞。加入蒸餾水，紅細胞吸水破裂，加入40%的甲苯，溶解紅細胞膜，最終使紅細胞破裂，釋放出血紅蛋白。（2）透析袋能使小分子自由進出，而大分子則保留在袋內(nèi)，因此透析可以去除相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)。（3）血紅蛋白的純化是通過凝膠色譜法將雜蛋白除去，最后經(jīng)SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳進行純度鑒定。分子量大的分子通過多孔凝膠顆粒的間隙，路程短，流動快；分子量小的分子穿過多孔凝膠顆粒內(nèi)部，路程長，流動慢。因此，研究小組用凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)時，相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)先從層析柱中洗脫出來。如果凝膠裝填得不夠緊密、均勻，就會在色譜柱內(nèi)部形成無效的空隙，使本該進入凝膠內(nèi)部的樣品分子從這些空隙中通過，攪亂洗脫液的流動次序，影響分離的效果，因此在裝填色譜柱時不得有氣泡存在。（4）高原空氣稀薄，氧氣含量低，為了利用更多的氧氣進行有氧呼吸，運動員體內(nèi)血紅蛋白含量有了明顯升高?！军c睛】本題結(jié)合圖解，考查蛋白質(zhì)的提取和分離，對于此類試題，需要考生注意的細節(jié)較多，如實驗的原理、實驗步驟，實驗采用的試劑及試劑的作用，能結(jié)合所學(xué)的知識準確答題，屬于考綱識記和理解層次的考查。11、構(gòu)建基因表達載體穩(wěn)定存在磷酸二酯標(biāo)記基因脫氧核苷酸RNA聚合酶轉(zhuǎn)錄甲【解析】

（1）基因工程的核心步驟是構(gòu)建基因表達載體，其目的是使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在，并且可以通過復(fù)制遺傳給下一代，同時，使目的基因表達和發(fā)揮作用。（2）DNA連接酶連接限制酶打開的磷酸二酯鍵，基因表達載體的組成部分包括啟動子、終止子、目的基因、標(biāo)記基因、復(fù)制原點等。（3）組成基因表達載體的單體是脫氧核苷酸?；虮磉_載體中的啟動子是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，這種結(jié)合完成后才能驅(qū)動目的基因通過轉(zhuǎn)錄合成mRNA。（4）用兩種限制酶XbaⅠ和SacⅠ（兩種酶切出的黏性末端不同）切割某DNA，獲得含目的基因的片段。要確保質(zhì)粒上也有這兩種酶的切點，選甲。【點睛】確定限制酶的種類（1）根據(jù)目的基因兩端的限制酶切點確定限制酶的種類①應(yīng)選擇切點位于目的基因兩端的限制酶，如圖甲可選擇PstⅠ。②不能選擇切點位于目的基因內(nèi)部的限制酶，如圖甲不能選擇SmaⅠ。③為避免目的基因和質(zhì)粒的自身環(huán)化和隨意連接，也可使用不同的限制酶切割目的基因和質(zhì)粒，如圖甲也可選