血細胞分析演示文稿

血細胞分析演示文稿目前一頁\總數(shù)六十八頁\編于點優(yōu)選血細胞分析目前二頁\總數(shù)六十八頁\編于點內(nèi)容提要血液的常識儀器原理臨床應用常見故障及維修目前三頁\總數(shù)六十八頁\編于點血液概況理化特征： 紅色（血紅蛋白）不透明，含量占體重的7-9%，約5L。

PH值為7.35~7.45

比重為1.05~1.06

相對粘度為4~5

滲透壓為2.6~3.9kPa目前四頁\總數(shù)六十八頁\編于點血液的功能通過循環(huán)系統(tǒng)與全身各個組織器官密切聯(lián)系。參與機體呼吸：攜氧和排出二氧化碳。運輸：將營養(yǎng)物質(zhì)運送到器官組織，將體內(nèi)代謝廢物運往腎、肺等器官排出體外。防御：血液中白細胞和抗體參與機體抗感染和其他免疫反應。調(diào)節(jié)：調(diào)節(jié)體液滲透壓、酸堿平衡和體溫平衡。目前五頁\總數(shù)六十八頁\編于點將正常血液抗凝離心后得到沉淀的血液。目前六頁\總數(shù)六十八頁\編于點液體的血漿占50-60%血細胞占40-60%（白細胞、血小板、紅細胞）。

血液的基本組成血漿白細胞和血小板紅細胞目前七頁\總數(shù)六十八頁\編于點

白細胞紅細胞血小板壽命：7天120天

8天體積：60~120fl120~1000fl2~30fl直徑：(20um)(6.7~7.7um)(2~3um)功能：抗感染，免疫攜氧，代謝產(chǎn)物凝血功能目前八頁\總數(shù)六十八頁\編于點白細胞的種類

中性粒細胞（70%）單核細胞（5%）淋巴細胞（25%）嗜酸性粒細胞嗜堿性粒細胞

經(jīng)過瑞氏染色后的各種白細胞目前九頁\總數(shù)六十八頁\編于點血液分析儀器是臨床實驗室最常用的分析儀器，包括：血細胞分析儀血液凝固分析儀血液流變學分析儀目前十頁\總數(shù)六十八頁\編于點歷史手工法計數(shù)儀器簡單計數(shù)兩分群三分群五分群五分群＋網(wǎng)織紅目前十一頁\總數(shù)六十八頁\編于點手工法檢驗的過程1、細胞計數(shù)（紅細胞、白細胞、血小板等血細胞的顯微鏡下計數(shù)）2、定量血紅蛋白3、白細胞分類（瑞氏染色）4、其它：血細胞比積、紅細胞形態(tài)、嗜酸性粒細胞計數(shù)等目前十二頁\總數(shù)六十八頁\編于點血細胞分析儀發(fā)展50年代~80年代（半自動）：需將樣本經(jīng)機外稀釋后才能檢測，易受干擾，隨機誤差也大。F820血細胞分析儀（兩分群）目前十三頁\總數(shù)六十八頁\編于點血細胞分析儀發(fā)展80年代后（全自動）：血液直接被吸入血液細胞分析儀后，在機內(nèi)自動稀釋、自動加溶血素、定時檢測，有較高的精確度和準確性。SysmexXS-1000i五分類血細胞分析儀目前十四頁\總數(shù)六十八頁\編于點血細胞分析儀發(fā)展近年（聯(lián)合型血液細胞分析系統(tǒng)）：將血細胞分析、涂片機、染片機、網(wǎng)織紅細胞計數(shù)儀串聯(lián)在一起。自動加樣系統(tǒng)和真空采血管的應用，避免實驗室的隨機誤差，提高工作效率，成為儀器發(fā)展和使用的潮流。SysmexHST530全自動血液分析流水線目前十五頁\總數(shù)六十八頁\編于點一、粒子檢出原理1、電阻抗原理（Coulter原理）2、激光散射光檢出原理3、交流（電阻）檢出原理血細胞檢測基本原理目前十六頁\總數(shù)六十八頁\編于點庫爾特原理：將血液按一定比例稀釋于等滲溶液中，在小孔電極的兩側(cè)加一恒流源。在負壓作用下，使稀釋的血細胞通過小孔。當細胞通過截面時會由于電阻增大產(chǎn)生相應的脈沖，其脈沖的幅度與細胞的體積成正比，脈沖的頻度與細胞的數(shù)量成正比。這便是著名的庫爾特原理或稱變阻脈沖原理。1、電阻抗原理（Coulter原理）目前十七頁\總數(shù)六十八頁\編于點目前十八頁\總數(shù)六十八頁\編于點2、激光散射光檢出原理明確兩個概念： 什么是激光？ 什么是散射？目前十九頁\總數(shù)六十八頁\編于點什么是激光？激光最初的中文名叫做“鐳射”、“萊塞”，是它的英文名稱LASER的音譯。意思是“通過受激發(fā)射光”。激光是20世紀以來，繼原子能、計算機、半導體之后，人類的又一重大發(fā)明。激光應用很廣泛，主要有光纖通信、激光光譜、激光測距、激光雷達、激光切割、激光武器、激光唱片、激光指示器、激光矯視、激光美容、激光掃描等等。目前二十頁\總數(shù)六十八頁\編于點激光的特點定向發(fā)光 普通光源是向四面八方發(fā)光。激光器發(fā)射的激光，天生就是朝一個方向射出，光束的發(fā)散度極小，大約只有0.001弧度，接近平行。目前二十一頁\總數(shù)六十八頁\編于點亮度極高

亮度約為太陽光的100億倍。激光亮度極高的主要原因是定向發(fā)光。大量光子集中在一個極小的空間范圍內(nèi)射出，能量密度自然極高。目前二十二頁\總數(shù)六十八頁\編于點什么是散射？物質(zhì)中存在的不均勻團塊使進入物質(zhì)的光偏離入射方向而向四面八方散開，這種現(xiàn)象稱為光的散射，向四面八方散開的光，就是散射光。通過散射光的測量可以了解到散射粒子的濃度、大小、形狀及取向等，在物理、化學、氣象等許多方面的研究中得到應用。目前二十三頁\總數(shù)六十八頁\編于點鞘流技術(shù)為了能夠更好的從物理上最大限度地減少重合現(xiàn)象，開發(fā)了鞘流法。具體方法為：用一毛細管對準小孔管，細胞單純懸液從毛細管噴嘴噴出，同時與四周流出的鞘液一起流過敏感區(qū)，保證細胞懸液在中間形成單個排列的細胞液，四周被鞘液包繞。目前二十四頁\總數(shù)六十八頁\編于點鞘流技術(shù)示意圖前鞘流后鞘流檢測窗目前二十五頁\總數(shù)六十八頁\編于點鞘流技術(shù)示意圖目前二十六頁\總數(shù)六十八頁\編于點3、交流（電阻）檢出原理也叫射頻檢測原理

細胞壁不能使低頻電流通過，能通過高頻電流。細胞核的大小和密度不同，它們對高頻電流的阻抗也不同，因此可以用來區(qū)分白細胞。目前二十七頁\總數(shù)六十八頁\編于點二、HCT體積測定原理血細胞比容（紅細胞壓積）（Hct、Ht、HCT或PCV）是指在一定條件下，經(jīng)離心沉淀壓緊的紅細胞在全血樣本中所占比值。目前二十八頁\總數(shù)六十八頁\編于點1、手工檢測----毛細血管離心法包括溫氏法（Wintrobe法）、微量法：是將抗凝血置于孔徑統(tǒng)一的溫氏管或毛細玻管中，以一定轉(zhuǎn)速離心一定時間后，計算紅細胞層占全血的體積比。目前二十九頁\總數(shù)六十八頁\編于點HCT值=（RBC總體積/血液總體積）X100%目前三十頁\總數(shù)六十八頁\編于點2、血細胞分析儀檢測法原理是當細胞通過計數(shù)小孔時，形成相應大小的脈沖，脈沖的多少即為細胞數(shù)量，脈沖高度為細胞體積，通過紅細胞平均體積（MCV）和紅細胞計數(shù)（RBC）即求得血細胞比容：

HCT=MCV×RBC目前三十一頁\總數(shù)六十八頁\編于點三、HGB濃度的測定原理比色法：氰化高鐵血紅蛋白（HiCN）測定法十二烷基硫酸鈉血紅蛋白（SDS）測定法

目前三十二頁\總數(shù)六十八頁\編于點五、血液定量方法臨床上的細胞計數(shù)是指單位體積內(nèi)的細胞數(shù)。通常紅細胞、白細胞和血小板的計量均指每升細胞數(shù)量。設(shè)被測血量的體積為Y（一般20μl），稀釋倍數(shù)為C，計數(shù)結(jié)果為S，則每升內(nèi)細胞數(shù)X為：

X=CS/Y目前三十三頁\總數(shù)六十八頁\編于點1、樣品旋轉(zhuǎn)閥SRV：優(yōu)點：故障率低.血液吸引管內(nèi)的一點點堵塞不影響定量，由于取的是中段血，血液定量很穩(wěn)定。缺點：血液樣品有浪費，需要血液量較多，制作成本高。分閥血目前三十四頁\總數(shù)六十八頁\編于點標本分配技術(shù)：SRV閥(SYSMEX專利)進樣針前片后片中片(旋轉(zhuǎn)片)恒定的、精確的體積SRV中有高精度的小孔，閥門中片的全血(或稀釋血)傳輸至檢測器，在每次檢測后，SRV閥對內(nèi)部小孔進行清洗目前三十五頁\總數(shù)六十八頁\編于點2、注射式優(yōu)點：馬達轉(zhuǎn)速控制簡單，流速、定量都可改變，用于微量血液定量，需要血液量較少，成本低。缺點：密封問題較難解決，2-3年需更換密封裝置。目前三十六頁\總數(shù)六十八頁\編于點氣泡或殘留物由于全血標本粘度比血清高，當注射器針筒中有氣泡或殘留物時，其分血精度不準確。注射器式目前三十七頁\總數(shù)六十八頁\編于點3、薄膜泵(DP方式)優(yōu)點：耐用，穩(wěn)定，4-5年也不需更換；缺點：不容易控制容積，需正、負壓，成本較高。目前三十八頁\總數(shù)六十八頁\編于點薄膜泵絕對定量真空正壓標本計數(shù)的體積不會因為小孔的半堵塞而發(fā)生變化。通常狀態(tài)吸液狀態(tài)排液狀態(tài)目前三十九頁\總數(shù)六十八頁\編于點五分類血細胞分析儀檢測方法1、阻抗、激光散射和熒光染色檢測法2、電阻抗和射頻電導聯(lián)合檢測法3、多角度激光偏振光散射檢測法4、電容、電導、光散射（VCS）白細胞分類法。5、激光散射和細胞化學染色技術(shù)目前四十頁\總數(shù)六十八頁\編于點1、采用阻抗、激光散射和熒光染色技術(shù)檢測法希森美康公司的核酸熒光染色激光原理，代表機型XE21002、電阻抗和射頻電導聯(lián)合檢測法希森美康公司代表機型SE90003、多角度激光偏振光散射檢測法雅培的MAPSS原理，代表機型CD37004、電容、電導、光散射（VCS）白細胞分類法貝克曼庫爾特公司的VCS原理，代表機型MAXM目前四十一頁\總數(shù)六十八頁\編于點1、采用阻抗、激光散射和熒光染色技術(shù)檢測法主要用于SYSMEX開發(fā)的儀器中。XT-1800iXS-1000i目前四十二頁\總數(shù)六十八頁\編于點2、電阻抗和射頻電導聯(lián)合檢測法典型機型如SysmexSE-9000/SE-9500/XE-2100等。這類儀器共有四個不同的檢測系統(tǒng)，將標本用特殊細胞染色技術(shù)處理后再應用RF和DC技術(shù)對白細胞進行分類和計數(shù)。目前四十三頁\總數(shù)六十八頁\編于點嗜酸性粒細胞檢測系統(tǒng)：溶血劑+電阻抗法嗜堿性粒細胞檢測系統(tǒng)：溶血劑+電阻抗法淋巴、單核、粒細胞（中性粒細胞、嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞）檢測系統(tǒng)：電阻抗與射頻聯(lián)合檢測方式，使用作用較溫和的溶血劑幼稚細胞檢測系統(tǒng)：溶血劑+電阻抗法目前四十四頁\總數(shù)六十八頁\編于點3、多角度激光偏振光散射檢測法美國雅培公司（ABBOTT）推出的血細胞分析儀，在白細胞分類中采用獨特的多角度偏振光散射（MAPSS）技術(shù)。目前四十五頁\總數(shù)六十八頁\編于點該技術(shù)基本原理是細胞在激光束的照射下，在多個角度都產(chǎn)生散射光，儀器在四個角度的四個檢測器將接收到的相應的散射光信號，然后經(jīng)過微處理器分析處理，將各類細胞安置在散點圖上的相應位置，并計算出白細胞分類結(jié)果。目前四十六頁\總數(shù)六十八頁\編于點1）0°為前向角散射光，可粗略地測定細胞大??；2）10°為狹角散射光，可測細胞結(jié)構(gòu)及其復雜性的相對特征；3）90°垂直光散射，主要對細胞內(nèi)部顆粒進行測量。4）90°消偏振光散射，基于顆?？梢詫⒋怪苯嵌鹊钠窦す庀竦奶匦?，將酸嗜細胞從中性粒細胞和其它細胞中分離出來。5）這四個角度進行測量和分析后，可將白細胞劃分為嗜酸性粒細胞、中性粒細胞、嗜堿性粒細胞、淋巴細胞和單核細胞5種。目前四十七頁\總數(shù)六十八頁\編于點4、電容、電導、光散射（VCS）白細胞分類法這是Beckman-Coulter公司血細胞分析儀的經(jīng)典分析方法標本的處理：此技術(shù)首先加入紅細胞溶血劑溶解掉紅細胞，然后加入穩(wěn)定劑來中和紅細胞溶解劑的作用，使白細胞表面、胞漿和細胞體積保持穩(wěn)定不變。然后應用鞘流技術(shù)將細胞推進到流動細胞計數(shù)池（Flowcell）中，接受儀器VCS三種技術(shù)的檢測。目前四十八頁\總數(shù)六十八頁\編于點容量、電導、光散射檢測技術(shù)（VCS）

(Volume、conductivity、lightscatter)1987年美國BECKMANCOULTER

公司發(fā)明VCS技術(shù)。光散射電導性電阻抗目前四十九頁\總數(shù)六十八頁\編于點第三節(jié)血細胞分析臨床應用WBC、RBC、PLT相關(guān)項目(P20)WBC、RBC、PLT直方圖(P24)目前五十頁\總數(shù)六十八頁\編于點1、白細胞檢測相關(guān)項目WBC白細胞109/L4-10NE%中性粒細胞比率%50-75LY%淋巴細胞比率%20-40MO%單核細胞比率%3-8EO%嗜酸性粒細胞比率%0-3BA%嗜堿性粒細胞比率%0-2NE#中性粒細胞109/L2-7LY#淋巴細胞109/L0.8-4MO#單核細胞109/L0.12-1EO#嗜酸性粒細胞109/L0-0.3BA#嗜堿性粒細胞109/L0-0.2目前五十一頁\總數(shù)六十八頁\編于點2、紅細胞檢測相關(guān)項目RBC紅細胞1012/L3.5-5.5HGB血紅蛋白g/L110-160HCT紅細胞壓積0.37-0.50MCV紅細胞平均體積fl80-92MCH平均紅細胞血紅蛋白量pg27-31MCHC平均紅細胞血紅蛋白濃度g/L320-360RDW-CV紅細胞分布寬度變異系數(shù)%11.5-16.5RDW-SD紅細胞分布寬度標準差fl37-54目前五十二頁\總數(shù)六十八頁\編于點3、血小板檢測相關(guān)項目PLT血小板109/L100-300MPV平均血小板體積fl5-10PCT血小板壓積0.15-0.3PDW-CV血小板平均分布寬度CV%9-17P-LCR大血小板比例%19-47目前五十三頁\總數(shù)六十八頁\編于點血細胞直方圖直方圖是血細胞分析儀用電阻抗原理對血細胞進行檢測，以細胞體積為橫坐標，細胞的相對數(shù)量為縱坐標，表示某一種細胞數(shù)量分布情況，可反映細胞體積大小異質(zhì)性。目前五十四頁\總數(shù)六十八頁\編于點1、WBC正常直方圖儀器在3-300fl范圍內(nèi)分析WBC采用四條與縱坐標平行的虛線（P25），劃分三個區(qū)域來鑒別小型WBC(定為淋巴細胞)，中型WBC(定為單核細胞、嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞