水產(chǎn)動(dòng)物的免疫學(xué)診斷

水產(chǎn)動(dòng)物的免疫學(xué)診斷免疫診斷技術(shù)，又稱血清學(xué)檢測(cè)技術(shù)。利用已知的病原生物或其產(chǎn)物可以制備成診斷抗原或診斷血清。用免疫技術(shù)診斷水產(chǎn)動(dòng)物疾病的方法有兩種:①用診斷血清與從患病動(dòng)物體上分離的病原體在體外進(jìn)行免疫反應(yīng)，可用于診斷病原體的種類；②用診斷抗原與待檢水產(chǎn)動(dòng)物血清中的抗體在體外進(jìn)行免疫反應(yīng)，可確定該動(dòng)物體內(nèi)抗體的種類，從而間接診斷引起被檢動(dòng)物所感染的病原體。此種方法僅適合被病原體感染后能產(chǎn)生抗體的動(dòng)物。無論是應(yīng)用診斷抗原追蹤抗體，還是應(yīng)用診斷血清檢測(cè)抗原，都是利用免疫學(xué)原理，即抗原和抗體在適宜條件下可以發(fā)生特異性反應(yīng)的特性。人們通過凝集試驗(yàn)、沉淀試驗(yàn)、免疫酶技術(shù)以及放射性免疫測(cè)定等技術(shù)，研制出一系列快速診斷水產(chǎn)動(dòng)物疾病的方法和制劑。單克隆抗體是由一個(gè)抗體產(chǎn)生細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，產(chǎn)生雜交瘤細(xì)胞，再經(jīng)大量繁殖而來的細(xì)胞群所產(chǎn)生的抗體。與常規(guī)血清抗體相比，其特異性強(qiáng)，親和性一致，還具有識(shí)別單一抗原決定簇的特性。1.單克隆抗體技術(shù)ELISA的基本原理為受檢物中的抗原或抗體與固相表面的抗體或抗原發(fā)生免疫反應(yīng)并結(jié)合在固相表面，此抗原抗體結(jié)合物又能結(jié)合相應(yīng)的酶標(biāo)記物，用洗滌法去除未結(jié)合而游離的酶標(biāo)記物，繼而加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化為有色產(chǎn)物，顯色的程度與受檢物中的抗原或抗體的量直接相關(guān)，由此可根據(jù)顯色的深淺進(jìn)行定性或定量的測(cè)定。2.酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA法）免疫熒光抗體技術(shù)是以熒光素標(biāo)記抗體或抗原，使其與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后，借熒光檢測(cè)儀器查看熒光現(xiàn)象或檢測(cè)熒光強(qiáng)度，從而判斷抗原或抗體的存在、定位、分布情況或檢測(cè)樣本中抗原或抗體含量。3.免疫熒光抗體技術(shù)Dot–ELISA技術(shù)是以硝酸纖維膜NCM代替反應(yīng)板，用不溶性供氫體顯色。由于硝酸纖維膜NCM對(duì)蛋白質(zhì)具有高度的親和力，所以克服了常規(guī)ELISA抗原抗體復(fù)合物結(jié)合過程中存在的明顯的泄露和解吸附現(xiàn)象。4.酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)法（Dot–ELISA）SPA技術(shù)應(yīng)用較多的是協(xié)同凝集反應(yīng)，它能在那些顆粒透明或很小、沉淀不明顯的凝集反應(yīng)中起載體和放大作用，提高實(shí)驗(yàn)的敏感性。該技