島津紫外分光光度計UVPROBE說明書

UVPROBE簡易操作手冊第1章：初始畫面第2章：裝置的連接第3章：測定第4章：光譜測定方式4-1參數(shù)和顯示的設(shè)置4-2光譜測定4-3數(shù)據(jù)處理功能1．波長范圍和縱軸范圍的變更2．峰谷檢測3．光譜線色彩的改變等4．面積計算5．數(shù)據(jù)計算6．其他第5章：光度分析方式5-l參數(shù)和顯示的設(shè)置5-2定量測定第6章：動力學方式第1章：初始畫面啟動UVPROBE以后，出現(xiàn)上示的對話窗口，需要輸入設(shè)定的用戶名和密碼，然后點擊確定健。第2章：裝置的連接首先從下拉式菜單的儀器項上追加需要的儀器。操作完畢如下圖①所示，加裝了UV-1650、UV-2550、UV-2450以及UV-3150；使用時點擊實際連接的儀器，例如下圖的UV-2450，然后點擊上圖的連接鍵②，這樣裝置與PC機連接（當然，中間的通訊電纜的連接、通訊口的指定等都是必須的，此處不再贅述）并開始下示的初始化面。①②①②初始化大約需要5分鐘左右，進行一系列的檢查和初置，如一切順利通過就可以開始測定。第3章：測定首先選擇測定的方式，在主菜單上能發(fā)現(xiàn)右圖所示的各鍵，自左至右分別為：1．報告生成器：用于制作各種格式的報告。2．動力學測定方式：一般測定吸收值隨時間的變化，通常用于酶反應隨時間的變化。3．光度測定（定量）方式：可進行多波長、單波長、峰高或峰面積定量。校準曲線可使用多點、單點、K因子等方法。由于具有自定義方程的功能，DNA/蛋白質(zhì)測定等以前需要特殊選購的軟件才能進行的工作，使用UVPROBE可自編程序進行測定。4．光譜測定方式：可進行紫外可見區(qū)的光譜測定。第4章光譜測定方式4-1參數(shù)和顯示的設(shè)置1．參數(shù)的設(shè)定點擊菜單欄上的鍵，即可出現(xiàn)如下圖所示的選擇測定條件的畫面：在此對話框中可選擇波長測定的范圍、掃描的速度、采樣間隔等條件。點擊圖中［試樣準備］標簽，可輸入重量、體積、稀釋因子、光程長等信息。點擊圖中［儀器參數(shù)］標簽，可選擇測定種類（吸收值、透射率、能量、反射率）以及通帶（狹逢）等條件。但是UV-1600／1700的通帶分別固定為2nm/lnm不可選擇。如果使用多聯(lián)地或注射式抽吸裝置等附件時，可點未附件標簽，在此設(shè)置各附件相關(guān)的參數(shù)條件。2，顯示設(shè)置點擊主菜單上的鍵，可分別開關(guān)圖象面板（圖中的左鍵）、數(shù)據(jù)處理面板（中）以及方法面板（右鍵）。數(shù)據(jù)處理面板方法面板圖象面板數(shù)據(jù)處理面板方法面板圖象面板4-2光譜測定①②③④①②③④⑤首先點擊上圖的=2\*GB3②進行基線校正，然后點擊③波長設(shè)置到500nm，再點擊①自動調(diào)零。為何要如此做？原因非常簡單，由于一般的分光光度計的能量在500nm左右最強，在此自動調(diào)零可得到最正確的基線。通常上述操作在開機后進行一次就足夠了。此后，設(shè)置樣品點擊④鍵即可開始測定。4-3數(shù)據(jù)處理功能1．波長范圍以及縱軸范圍的變更變更范圍十分簡單，只需在點擊圖象上最大和最小的位置，然后輸入適當?shù)臄?shù)字即可。這表示可以隨意地放大和縮小圖象的標尺。點擊需要變更的位置，然后輸入需要的數(shù)值就可改變范圍點擊需要變更的位置，然后輸入需要的數(shù)值就可改變范圍得到新設(shè)置范圍的光譜此外，在圖象上點擊鼠標右鍵，在出現(xiàn)的快捷菜單上選擇自動標尺也能使標尺設(shè)置到適當?shù)拇笮　?/p>

2．峰谷檢測點擊主菜單上的［數(shù)據(jù)處理——峰值檢測］，出現(xiàn)如下畫面。①①此處的數(shù)據(jù)處理面板中出現(xiàn)峰谷的表，需要說明的是該結(jié)果使用了上一次設(shè)置的檢測條件，當然用戶還可根據(jù)自己的需要加以改變。如果圖中有多條光譜的話，這些光譜的峰谷表都將出現(xiàn)在數(shù)據(jù)處理的面板中，點擊表格下的標簽①，即可切換。在數(shù)據(jù)處理面板上點擊鼠標右鍵，出現(xiàn)快捷菜單，在此菜單中可選擇是否在圖象中顯示峰谷的標記等等，左下圖，在快捷菜單上點擊屬性，出現(xiàn)右下圖。在屬性對話框中可設(shè)置閾值，改變峰谷檢測的靈敏度。如果點未峰的標簽，出現(xiàn)下圖：用戶可選擇在圖中標注的內(nèi)容和形式。下圖是上述選擇后的圖象。圖中峰谷都有編號，而且分別用向下和向上的箭頭表示其位置。3．光譜顏色的變更在圖象面板上點擊鼠標右鍵，出現(xiàn)如左下菜單，如果在其中選擇自定義后，將出現(xiàn)右下圖：由右上圖可見，光譜的顏色、線的類型、線的粗細等等均可自由地設(shè)置，十分方便。如果在快捷菜單上選擇十字游標，光譜面板中出現(xiàn)十字游標，可自由移動，便于讀取峰谷的位置及強度。如果選取圖例的話，圖中就可出現(xiàn)光譜的圖例。如下圖：4．面積計算如果要計算光譜的面積，請在主菜單中選擇［數(shù)據(jù)處理——面積計算］②①②①讀數(shù)條上圖①是讀數(shù)條，左右移動決定光譜面積計算的范圍，②是計算結(jié)果的顯示。③③上圖中積分區(qū)域的圖象格式及色彩可以改變，點擊圖中③所指的區(qū)域出現(xiàn)下圖：在此，即可選擇顏色和網(wǎng)格等格式。面積計算可反復進行，沒有限制。如果計算面積的區(qū)域想刪除，可在欲刪除的區(qū)域中點擊鼠標右鍵，從出現(xiàn)的菜單中選擇刪除。此外，上圖中面積計算到了基線，如果希望改變，從菜單上選擇屬性：在基線到零的選擇框中取消標記，圖象和數(shù)據(jù)處理面板上的結(jié)果都將改變。5．數(shù)據(jù)處理測定得到的光譜可進行各種計算。從主菜單上選擇［數(shù)據(jù)處理——計算］即可：如果圖象上不止一條光譜，需先選擇需要處理的數(shù)據(jù)集，然后選擇運算的算符及常數(shù)，最后點擊計算鍵。輸入保存結(jié)果的文件名，點擊確定鍵，新的經(jīng)過計算的光譜（數(shù)據(jù)集）將重疊顯示在圖象面板中。6．其他．選點檢測選點檢測可以從已經(jīng)得到的光譜中選取任意多個點的數(shù)據(jù)，選擇時只要拖動讀數(shù)條或在下圖的波長列中手動鍵入波長值即可。．數(shù)據(jù)打印測定的光譜可使之數(shù)字化（表格化）表格的數(shù)據(jù)與實際采集的范圍和間隔相同。如果想改變，點擊鼠標右鍵調(diào)出屬性菜單，然后可設(shè)置表格的范圍以及顯示的間隔。此外，無論是數(shù)據(jù)面板上的表格或圖象面板內(nèi)的光譜都可用復制粘貼的辦法將數(shù)據(jù)或圖象轉(zhuǎn)移到其他市售的軟件中去，例如［MSWORD］和［Excel］等。如果打開的光譜較多，既可以全部一起顯示也可以選擇顯示，選擇時在數(shù)據(jù)面板上點擊鼠標右鍵，然后選擇屬性，在此取舍顯示與否。見下圖：先點擊要隱藏的數(shù)據(jù)集，然后按隱藏鍵即可。注意，此操作只從圖象上消除了該數(shù)據(jù)集，實際上數(shù)據(jù)集仍然在計算機的內(nèi)存中。．圖象面板上圖象的刪除欲刪除圖象面板中的圖象，先在主菜單上選擇［文件——屬性］。得到下圖：．改變坐標軸的顯示位數(shù)選擇［顯示——設(shè)置］出現(xiàn)下圖，可在圖中的劃圈部分改變位數(shù)。第5章光度測定方式5-l參數(shù)及顯示的設(shè)置1．參數(shù)的設(shè)置點擊菜單欄中的鍵，出現(xiàn)下圖：測定的方式測定的方式選擇測定波長的列名選擇和登錄波長登錄后的波長顯示區(qū)此處顯示的波長類型是“點”表示測定高度，如果選擇的是范圍，則需輸入起始和結(jié)束波長，并可選擇最大、最小、峰、谷或面積等作為定量的依據(jù)。無論如何選擇，波長都是必須的，并要加入以后才有效。2．顯示設(shè)置在某單欄上有右列各鍵，點擊以后分別出現(xiàn)標準表（最左）、樣品表（左2）、工作曲線圖（右2）和樣品圖（最右）。樣品圖工作曲線樣品表標準表樣品圖工作曲線樣品表標準表5-2定量測定1．光度測定首先如前所述，選擇了點及波長，然后在方法中選擇校準，在此決定用工作曲線法定量，并選擇多點、單點或K因子法等。關(guān)閉方法畫面后出現(xiàn)如下圖象進行定量測定也需要基線校正和自動調(diào)零，方法如前面所述。此后，樣品室內(nèi)逐個放入標準，點擊上圖下方的讀數(shù)鍵即可。注意，無論是測定標準或未知樣品，必須輸入名稱才有效。標準測定完畢，工作曲線自動顯示。接下去就可測定未知樣品的濃度了。有時不測定濃度，只測定某些波長的讀數(shù)，則在校準方法中選擇“原始數(shù)據(jù)”，在登錄時選擇若干需要的波長，即可測定各波長的讀數(shù)。在工作曲線圖象上點擊鼠標右鍵，選擇屬性，可從該圖象上得到許多有用的信息，見下圖：只需在這些顯示的項目中做標記，相應的信息即出現(xiàn)在工作曲線圖象的左下方。見下圖的劃圈部分：2．K因子法所謂K因子法實際上可稱為已知工作曲線法（而且不局限于直線），即工作曲線回歸方程的系數(shù)和次數(shù)已知，故而只要輸入這些系數(shù)以及工作曲線的次數(shù)。這一方法對工作曲線較為穩(wěn)定的日常分析非常有效。設(shè)置方法見下圖：第6章動力學6-1參數(shù)和顯示的設(shè)置1．參數(shù)的設(shè)置在菜單欄中點擊方法鍵，得到如下圖象：此處的計時方式選擇的是“自動”，時間總量中需手動設(shè)置測定的時間。由于是自動計時方式，所以采樣步長（圖中為時間周期）和讀數(shù)次數(shù)將根據(jù)時間總量自動設(shè)置。此外可設(shè)置波長以及活度計算的開始和結(jié)束時間。設(shè)置大短的活度范圍會出現(xiàn)錯誤信息。相反，如果計時方式選擇的是手動的話，則可輸入時間周期和讀取次數(shù)，而時間總量（測定時間）會根據(jù)輸入的時間周期和讀取次數(shù)自動計算得到?；疃确秶糜诿阜磻S時間的變化，如果單純進行時間掃描的話，則可不考慮活度范圍。測定的波