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實(shí)驗(yàn)三富營養(yǎng)化湖中藻量的測定(葉綠素a法)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康母粻I養(yǎng)化湖由于水體受到污染,尤以氮磷為甚,致使其中的藻類旺盛生長。此類水體中代表藻類的葉綠素a濃度常大于10微克/升。本實(shí)驗(yàn)通過測定不同水體中藻類葉綠素a濃度,以考查其富營養(yǎng)化情況。二、器材與用品1、分光光度計(jì)(波長選擇大于750nm,精度為0.5-2nm)。2、比色杯(1cm;4cm)。3、臺(tái)式離心機(jī)(3500r/min)4、離心管(15ml具刻度和塞子);冰箱5、勻漿器或小研缽。6、蔡氏濾器;濾膜(0.45微克,直徑47mm)。7、真空泵(最大壓力不超過300kpa)。8、MgCO3懸液:lgMgCO3細(xì)粉懸于100ml蒸餾水中。9、90%的丙酮溶液:90份丙酮+10份蒸餾水。10、水樣:兩種不同污染程度的湖水水樣各2L.三、方法和步驟1、按浮游植物采樣方法,湖泊、水庫采樣500ml,池塘300ml。采樣點(diǎn)及采水時(shí)間同“浮游植物”。2、清洗玻璃儀器:整個(gè)實(shí)驗(yàn)中所使用的玻璃儀器應(yīng)全部用洗滌劑清洗干凈,尤其應(yīng)避免酸性條件下而引起的葉綠素a分解。3、過濾水樣;在蔡氏濾器上裝好濾膜,每種測定水樣取50-500ml減壓過濾。待水樣剩余若干毫升之前加入0.2mlMgCO3懸液、搖勻直至抽干水樣。加入MgCO3可增進(jìn)藻細(xì)胞滯留在濾膜上,同時(shí)還可防止提取過程中葉綠素a被分解。如過濾后的載藻濾膜不能馬上進(jìn)行提取處理,應(yīng)將其置于干燥器內(nèi),放冷(4℃4、提取;將濾膜放于勻漿器或小研缽內(nèi),加2-3ml90%的丙酮溶液,勻漿,以破碎藻細(xì)胞。然后用移液管將勻漿液移入刻度離心管中,用5ml90%丙酮沖洗2次,最后向離心管中補(bǔ)加90%丙酮,使管內(nèi)總體積為10ml。塞緊塞子并在管子外部罩上遮光物,充分振蕩,放冰箱避光提取18-24小時(shí)。5、離心:提取完畢后,置離心管于臺(tái)式離心機(jī)上3500r/min,離心10min,取出離心管,用移液管將上清液移
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