生物化學(xué)檢驗(yàn)【課堂】載脂蛋白ApoA和ApoB檢測_第1頁
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文檔簡介

職業(yè)教育醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)專業(yè)教學(xué)資源庫生物化學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)載脂蛋白ApoAI和ApoB檢測BASICCLINICALLABORATORYMEDICINE2載脂蛋白的種類與功能載脂蛋白是非均一的蛋白質(zhì),是脂類與蛋白質(zhì)的復(fù)合體。種類:主要有A、A1、B、C、E等。功能:它參與組織或細(xì)胞間脂類的運(yùn)輸和重分配;維持脂蛋白顆粒的結(jié)構(gòu);能與細(xì)胞膜上特異受體結(jié)合,影響脂類的攝取。血清ApoAI和ApoB測定方法參考方法目前尚無公認(rèn)的方法臨床實(shí)驗(yàn)室測定方法早期多采用火箭免疫電泳測定血清中ApoAI、ApoB的含量,以后相繼出現(xiàn)包括RIA、ELISA、免疫濁度法(INA和ITA)等。建議:

免疫濁度法作為臨床實(shí)驗(yàn)室測定血清ApoAI、ApoB的常規(guī)方法,首選ITA法,其次為INA法。血清ApoAI及B測定原理血清ApoAI或ApoB與試劑中ApoAI或ApoB抗體相結(jié)合,在一定條件下形成不溶性免疫復(fù)合物,使溶液混濁,混濁度與ApoAI或ApoB的量成正比,即濁度與吸光度成正比。注意事項(xiàng)

1.購買效價高、單價特異的ApoAI、ApoB抗血清。

2.為了準(zhǔn)確測定ApoAI、ApoB,必須作標(biāo)準(zhǔn)曲線。

3.免疫透射比濁法應(yīng)以多點(diǎn)(5~7點(diǎn))定標(biāo),按曲線回歸運(yùn)算。加入物(ml)空白管標(biāo)準(zhǔn)管測定管蒸餾水0.02標(biāo)準(zhǔn)液0.02血清0.02抗體3.03.03.0操作混勻,37℃水浴保溫5分鐘,340nm比色,空白管調(diào)零,讀取標(biāo)準(zhǔn)管及測定管吸光度。血清ApoAI(g/L)=A測/A標(biāo)×1.02

計(jì)算血清ApoB(g/L)=A測/A標(biāo)×0.56

臨床意義參考值:ApoAI1.40~1.45g/L。ApoB0.80~1.00g/LApoAI/ApoB:1.0-2.5一般情況下,血清ApoAI可以代表HDL水平,與HDL-C呈明顯正相關(guān)。冠心病患者、腦血管患者ApoAI偏低。ApoAⅠ是HDL的主要結(jié)構(gòu)蛋白,ApoB是LDL的主要結(jié)構(gòu)蛋白,因此,ApoAⅠ和ApoB可直接反映HDL和LDL的含量。但在某些病理情況下,ApoAⅠ與HDL和ApoB

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