高中生物人教版高中選修生物技術(shù)實(shí)踐專(zhuān)題DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)血紅蛋白的提取和分離課時(shí)_第1頁(yè)
高中生物人教版高中選修生物技術(shù)實(shí)踐專(zhuān)題DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)血紅蛋白的提取和分離課時(shí)_第2頁(yè)
高中生物人教版高中選修生物技術(shù)實(shí)踐專(zhuān)題DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)血紅蛋白的提取和分離課時(shí)_第3頁(yè)
高中生物人教版高中選修生物技術(shù)實(shí)踐專(zhuān)題DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)血紅蛋白的提取和分離課時(shí)_第4頁(yè)
高中生物人教版高中選修生物技術(shù)實(shí)踐專(zhuān)題DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)血紅蛋白的提取和分離課時(shí)_第5頁(yè)
已閱讀5頁(yè),還剩17頁(yè)未讀, 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說(shuō)明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡(jiǎn)介

2014年我國(guó)蛋白質(zhì)組計(jì)劃正式啟動(dòng)血液血漿水分固體物質(zhì):血漿蛋白、無(wú)機(jī)鹽、磷脂、葡萄糖等血細(xì)胞白細(xì)胞血小板紅細(xì)胞(最多)血紅蛋白(90%)血液有哪些成分?血紅蛋白兩個(gè)α-肽鏈兩個(gè)β一肽鏈每個(gè)肽鏈環(huán)繞一個(gè)亞鐵血紅素基團(tuán),此基團(tuán)可攜帶一分子O2或一分子CO2,血紅蛋白因含有血紅素而呈紅色。血紅蛋白的特點(diǎn):

實(shí)驗(yàn)操作樣品處理→粗分離→純化→純度鑒定(一)蛋白質(zhì)提取和分離步驟選什么做提取血紅蛋白的實(shí)驗(yàn)材料?用豬、牛、羊等哺乳動(dòng)物成熟紅細(xì)胞提取血紅蛋白哺乳動(dòng)物成熟紅細(xì)胞無(wú)細(xì)胞核,結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,血紅蛋白含量豐富,便于提取血紅蛋白。1.洗滌紅細(xì)胞閱讀思考:洗滌的目的是什么,洗滌方法,洗滌干凈的標(biāo)準(zhǔn)?血液100mL3g檸檬酸鈉低速離心2min紅細(xì)胞血漿吸出血漿紅細(xì)胞5倍體積生理鹽水緩慢攪拌10min重復(fù)洗滌3次,直至上清液沒(méi)有黃色(二)操作過(guò)程2.釋放血紅蛋白閱讀思考:釋放血紅蛋白過(guò)程中,在洗滌好的紅細(xì)胞加入了哪些物質(zhì)?為了加速釋放過(guò)程,采取了什么措施?①目的分析:②蒸餾水的作用是______________________________。③加入甲苯的作用是____________________________。④充分?jǐn)嚢璧哪康氖莀___________________________。使紅細(xì)胞大量吸水脹裂溶解紅細(xì)胞的細(xì)胞膜加速紅細(xì)胞的破裂磁力攪拌器返回3.分離血紅蛋白分離過(guò)程紅細(xì)胞混合液高速離心10min離心管濾紙過(guò)濾脂類(lèi)物質(zhì)燒杯緩沖溶液

能夠抵制外界的酸和堿對(duì)溶液PH值的影響,維持PH基本不變。進(jìn)行體外實(shí)驗(yàn)時(shí),可以防止蛋白質(zhì)發(fā)生變性。1.作用:2.緩沖溶液的配制:

通常由1-2種緩沖劑溶解于水中配制而成。調(diào)節(jié)緩沖劑的使用比例就可以制得在不同PH范圍內(nèi)使用的緩沖液。3.在本課題中使用的緩沖液是:磷酸緩沖液(pH為7.0),成分:磷酸二氫鈉與磷酸氫二鈉

①透析目的:除去樣品中分子量較小的雜質(zhì)。用緩沖液取代樣品中的溶液。

②過(guò)程:取1ml的血紅蛋白溶液裝入透析袋中,將透析袋放入盛有300ml的物質(zhì)的量濃度為20mmol/l的磷酸緩沖液中(pH為7.0),透析12小時(shí)。4.透析凝膠色譜法(分配色譜法)2.凝膠:

大多數(shù)凝膠是由多糖類(lèi)化合物(如葡聚糖或瓊脂糖)構(gòu)成的多孔小球體,內(nèi)部有許多貫穿的通道。

根據(jù)被分離物質(zhì)的蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量的大小,利用具有網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的凝膠,來(lái)進(jìn)行分離。1.概念:3.凝膠色譜法的原理①相對(duì)分子量較小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道,路程較長(zhǎng),移動(dòng)速度較慢;②相對(duì)分子量較大的蛋白質(zhì)無(wú)法進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道,只能在凝膠外部移動(dòng),路程較短,移動(dòng)速度較快。相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)分子因此得以分離。分離過(guò)程

混合物上柱洗脫大分子流動(dòng)快小分子流動(dòng)慢收集大分子收集小分子

洗脫:從色譜柱上端不斷注入緩沖液,促使蛋白質(zhì)分子的差速流動(dòng)。

蛋白質(zhì)提取和分離步驟1.樣品處理2.粗分離3.純化:凝膠色譜法4.純度鑒定:SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳血紅蛋白的提取和分離各操作的主要目的操作目的紅細(xì)胞的洗滌血紅蛋白的釋放

分離血紅蛋白溶液透析純化血紅蛋白的提取和分離各操作的主要目的操作目的紅細(xì)胞的洗滌去除雜蛋白,如血漿蛋白血紅蛋白的釋放使紅細(xì)胞破裂,釋放血紅蛋白

分離血紅蛋白溶液經(jīng)過(guò)離心使血紅蛋白與其他雜質(zhì)分離開(kāi)透析除去樣品中相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)純化除去相對(duì)分子質(zhì)量較大的雜質(zhì)蛋白質(zhì)鞏固提升1.下列有關(guān)“血紅蛋白的提取和分離”的敘述,正確的是()A.血紅蛋白的提取和分離一般分為樣品處理、粗分離、純化和純度鑒定B.將血紅蛋白溶液進(jìn)行透析,透析時(shí)間至少為1~2h,時(shí)間過(guò)長(zhǎng)血紅蛋白也會(huì)滲漏出去C.血紅蛋白釋放時(shí)加入有機(jī)溶劑,其目的是使血紅蛋白溶于有機(jī)溶劑D.用蒸餾水進(jìn)行紅細(xì)胞的洗滌,其目的是去除細(xì)胞表面的雜蛋白A2.下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是()A.在釋放紅細(xì)胞中的血紅蛋白時(shí),加蒸餾水到原血液的體積,再加40%體積的甲苯,充分?jǐn)嚢?0min,紅細(xì)胞破裂釋放出血紅蛋白B.血紅蛋白溶液離心后分為4層,第1層為白色薄層固體C.血紅蛋白溶液離心后分為4層,第4層為暗紅色沉淀物D.血紅蛋白溶液離心后分為4層,第3層為紅色透明液體,這是血紅蛋白的水溶液B鞏固提升3.在蛋白質(zhì)的提取和分離中,下列關(guān)于對(duì)樣品處理過(guò)程的分析,無(wú)誤的是()A.洗滌紅細(xì)胞的目的是去除血漿中的葡萄糖、無(wú)機(jī)鹽B.洗滌時(shí)離心速度過(guò)低,時(shí)間過(guò)短,白細(xì)胞等會(huì)沉淀,達(dá)不到分離的效果C.洗滌過(guò)程選用0.1%的生理鹽水D.透析的目的是去除樣品中相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)D鞏固提升4.下關(guān)于豬血紅蛋白提純的描述,不正確的是()A.洗滌紅細(xì)胞時(shí),使用生理鹽水可防止紅細(xì)胞破裂B.豬成熟紅細(xì)胞中沒(méi)有細(xì)胞器和細(xì)胞核,提純時(shí)雜蛋白較少C.血紅蛋白的顏色可用于凝膠色譜法分離過(guò)程的監(jiān)測(cè)D.在凝膠色譜法分離過(guò)程中,血紅蛋白比相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜蛋白移動(dòng)慢D鞏固提升5.下列有關(guān)提取和分離血紅蛋白的程序,敘述錯(cuò)誤的是()A.樣品的處理就是通過(guò)一系列操作收集到血紅蛋白溶液B.通過(guò)透析可以去除樣品中相對(duì)分子質(zhì)量較大的雜質(zhì),此為樣品的

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒(méi)有圖紙預(yù)覽就沒(méi)有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 人人文庫(kù)網(wǎng)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評(píng)論

0/150

提交評(píng)論