毛細(xì)管電泳課件

毛細(xì)管電泳

CapillaryElectrophoresis第一節(jié)毛細(xì)管電泳概述第二節(jié)毛細(xì)管電泳基礎(chǔ)理論第三節(jié)毛細(xì)管電泳儀第四節(jié)毛細(xì)管電泳類型第五節(jié)毛細(xì)管電泳的應(yīng)用和進(jìn)展第一節(jié)毛細(xì)管電泳概述毛細(xì)管電泳（CE），又稱高效毛細(xì)管電泳，是近年來發(fā)展最快的高效分離分析技術(shù)之一。該技術(shù)是現(xiàn)代微柱分離技術(shù)和經(jīng)典電泳技術(shù)結(jié)合的產(chǎn)物，是氣相色譜(GC)、高效液相色譜(HPLC)等常用分離技術(shù)的重要補(bǔ)充，在諸多研究領(lǐng)域得到了人們廣泛的接受和認(rèn)可。一、毛細(xì)管電泳發(fā)展歷程1808年，俄國(guó)物理學(xué)家Pence發(fā)現(xiàn)電泳現(xiàn)象。1937年，瑞典Tiselius將蛋白質(zhì)混合液放在兩段緩沖溶液之間，兩端施以電壓進(jìn)行自由溶液電泳，發(fā)現(xiàn)樣品的遷移速度和方向由其電荷和淌度決定,第一次從人血清提取的蛋白質(zhì)混合液中分離出白蛋白和α、β、γ球蛋白，但分離效率低；1981年，Jorgenson在75μm毛細(xì)管內(nèi)施加300V/cm的高強(qiáng)度電場(chǎng)，獲得了理論塔板數(shù)超過400,000plates/m的高分離效率，轟動(dòng)了整個(gè)分離界，成為CE劃時(shí)代里程碑1989年，毛細(xì)管電泳儀問世。

1989年，第一屆CE國(guó)際會(huì)議的召開，標(biāo)志著一門新的分析技術(shù)的產(chǎn)生。二、毛細(xì)管電泳的特點(diǎn)(1)高效：每米理論塔扳數(shù)低則十幾萬，高則幾百萬甚至上千萬；(2)快速：可在十幾分鐘甚至幾十秒內(nèi)完成分離；(3)低樣品消耗：只需納升甚至皮升級(jí)樣品量；(4)低成本分析：只需低廉的分離毛細(xì)管和少量的運(yùn)行緩沖液；

CE是現(xiàn)代微柱分離和經(jīng)典電泳技術(shù)有機(jī)結(jié)合的產(chǎn)物，具有較HPLC和平板凝膠電泳更多的優(yōu)點(diǎn)：(5)高度自動(dòng)化：CE是目前自動(dòng)化程度最高的分離分析方法之一；(6)潔凈：通常用水溶性緩沖液，對(duì)人體和環(huán)境無害；(7)多分離模式：可根據(jù)需要在同一儀器上選用不同的樣品分離模式；(8)應(yīng)用范圍廣：具有“萬能”分析的功能和潛力，既可以分析無機(jī)離子、氨基酸、藥物等小分子，又可以分析蛋白質(zhì)等生物大分子,甚至整個(gè)細(xì)胞。第二節(jié)毛細(xì)管電泳基礎(chǔ)理論+—一、電泳流電泳：在電解質(zhì)溶液中，位于電場(chǎng)中的帶電離子在電場(chǎng)力的作用下，以不同的速度向其所帶電荷相反的電極方向遷移的現(xiàn)象。電泳時(shí)，不同離子在電場(chǎng)中具有不同的定向遷移速度，遷移速度與哪些因素有關(guān)？淌度(μ）：?jiǎn)挝浑妶?chǎng)下的電泳速度。絕對(duì)淌度：在無限稀釋溶液中測(cè)得的淌度。有效電泳淌度：在實(shí)際溶液中測(cè)得的淌度。+—電場(chǎng)強(qiáng)度：與所施加的電壓成正比，與兩電極間的距離（L）成反比

E=V/L電場(chǎng)力：在溶液中，電場(chǎng)對(duì)帶電離子作用力（F）的大小等于帶電離子所帶的凈電荷（q）與電場(chǎng)強(qiáng)度的乘積：F=q·E在電泳遷移過程中，介質(zhì)粘滯力（F’）必然會(huì)阻礙離子的遷移。粘滯力的大小與離子大小、形狀、緩沖液粘度、甚至電泳介質(zhì)孔徑均有關(guān)系，與帶電離子的移動(dòng)速度更是直接相關(guān)。對(duì)于球形分子F’的大小服從Stokes定律：F’=6πηrνefη：緩沖液粘度；r：球形分子的半徑；νef：離子在電場(chǎng)中的遷移速度。當(dāng)帶電離子以速度v在電場(chǎng)中移動(dòng)時(shí)，受到大小相等、方向相反的電場(chǎng)驅(qū)動(dòng)力和移動(dòng)摩擦阻力的作用，此時(shí)F=F’故：q·E=6πηrνef則離子在電場(chǎng)中的遷移速度：即帶電離子的電泳遷移速率（或稱電泳淌度）:由此可知，球形帶電離子的遷移率，主要取決于自身狀態(tài)，即與其所帶電量成正比，與其半徑及介質(zhì)粘度成反比。電泳過程中正是利用帶電離子電泳遷移速度或遷移速率的差異來實(shí)現(xiàn)分離的。

二、電滲流在高電場(chǎng)的作用下，帶正電荷的溶液表面及擴(kuò)散層向陰極移動(dòng)，由于這些陽(yáng)離子實(shí)際上是溶劑化的，故將引起柱中的溶液整體向負(fù)極移動(dòng)，形成電滲流。石英毛細(xì)管柱，內(nèi)壁大約有8.31mol/m2的硅醇基（Si-OH），其等電點(diǎn)約為1.5，內(nèi)充液pH>3時(shí)，表面電離成SiO-，管內(nèi)壁帶負(fù)電荷，形成雙電層。1.CE中電滲流的大小與方向

電滲流的大小可用電滲速度和電滲淌度表示。（1）電滲流的大小電滲流的大小與電場(chǎng)強(qiáng)度、Zata電勢(shì)及緩沖液介電常數(shù)有關(guān)，某一電泳體系內(nèi)電滲流的具體數(shù)值可以用Helmholtz-Smoluchowski公式計(jì)算：式中，為電滲速度；為電滲淌度（EOFmobility）；為雙電層的Zeta電位；為緩沖液介電常數(shù)；η為電解液粘度；V為所施加的電壓；為毛細(xì)管總長(zhǎng)度。在具體實(shí)驗(yàn)中，可根據(jù)需要選用不同的中性組分作為標(biāo)記物（N,N-二甲基甲酰胺、二甲亞砜、甲酰胺、苯酚、丙酮等），測(cè)定不同緩沖條件下中性標(biāo)記物的遷移時(shí)間，按下述公式計(jì)算出電滲率：其中，t：中性標(biāo)記物的遷移時(shí)間，ldet為毛細(xì)管電泳有效長(zhǎng)度，ltot為毛細(xì)管電泳有效長(zhǎng)度。

（2）CE中電滲流的方向石英毛細(xì)管帶負(fù)電荷，溶液帶正電荷，電滲流流向陰極；改變電滲流方向的方法：毛細(xì)管改性：表面鍵合陽(yáng)離子基團(tuán)；加電滲流反轉(zhuǎn)劑:

內(nèi)充液中加入大量的陽(yáng)離子表面活性劑，將使石英毛細(xì)管壁帶正電荷，溶液表面帶負(fù)電荷，電滲流流向陽(yáng)極。2.CE中電滲流的流形液相色譜中的溶液流動(dòng)為層流，拋物線流型，管壁處流速最慢，管中心處的速度為平均速度的2倍（引起譜帶展寬較大）。在毛細(xì)管電泳中，電荷均勻分布，整體移動(dòng)，電滲流的流動(dòng)為平流，塞式流動(dòng)（區(qū)帶展寬很?。手л^高。3.CE中電割滲流剃的作置用電滲襖流的受速度遵一般庸約等長(zhǎng)于離睡子電喬泳速嚇度的5～7倍；各種的電性房誠(chéng)粒子坦在毛門細(xì)管業(yè)柱中栗的遷帆移速息度為聽：陽(yáng)離雹子遷駐移速串度=電滲泊流+電泳江流，敞陽(yáng)離飛子運(yùn)柏動(dòng)速臂度快饅于電庫(kù)滲流論；陰離北子遷冒移速混度=電滲咱流–電泳短流，悄陰離名子運(yùn)恥動(dòng)速舌度慢混于電聚滲流柿；中性露粒子找遷移撿速度=電滲纏流，關(guān)中性輝粒子寇運(yùn)動(dòng)職速度割與電轉(zhuǎn)滲流秘一致個(gè)。CE中電補(bǔ)滲流凝的作資用：可一糞次完自成陽(yáng)貢離子煩、陰普離子義、中兔性?；首拥臑a分離夜；改變孩電滲跪流的沉大小鄭和方掠向可療改變鐵分離啄效率督和選鎮(zhèn)擇性電滲飼流的拿微小習(xí)變化停影響老結(jié)果攤的重跡現(xiàn)性坐；在CE中，茅控制味電滲并流非昂常重憑要。+—4.夕CE中影銀響電藍(lán)滲流至的因惜素（1）電轟場(chǎng)強(qiáng)鐵度的霞影響電滲沈流速威度和駐電場(chǎng)幅強(qiáng)度騙成正女比，噸當(dāng)毛蛋細(xì)管滲長(zhǎng)度炭一定賣時(shí)，勝電滲蘆流速武度正診比于漢工作障電壓色。（2）毛匯細(xì)管傲材料警的影咱響不同告材料復(fù)毛細(xì)城管的潑表面律電荷腎特性偏不同迫，產(chǎn)揚(yáng)生的頓電滲歡流大剃小不熔同。（3）電烏解質(zhì)屋溶液濁性質(zhì)強(qiáng)的影泳響①溶液pH的影忌響對(duì)于筋石英擔(dān)毛細(xì)偉管，吧溶液pH增高設(shè)時(shí)，敢表面挎電離湊多，筆電荷宴密度星增加粒，管水壁ze交ta電勢(shì)冤增大果，電拳滲流幻玉增大棟。pH在4-所7之間繩，電批滲流虛增大輔顯著；pH君>8時(shí)電火滲流錘增大占速度栗漸緩勻。當(dāng)pH菊<3，毛刊細(xì)管晨?jī)?nèi)壁黑離解董的硅恥醇基濱被氫錯(cuò)離子濾中和宴，表既面接現(xiàn)近電港中性濃，電英滲流港接近陣零。驚分析蝦時(shí)，賽可采男用緩鬧沖溶適液來猶穩(wěn)定貨并調(diào)騾控pH。②陰離噸子的烤影響在其或它條四件相恒同，因緩沖毀液濃蜘度相錦同而迎陰離涌子不安同時(shí)擊，毛到細(xì)管痛中的奔電流夠有較戲大差醒別，甲產(chǎn)生吸的電銳滲流襯不同醋。（4）溫幫度的澆影響毛細(xì)奪管內(nèi)預(yù)溫度碧升高更，使共溶液頑的黏古度下小降，慶電滲驢流增吹大。溫度器變化套來自床于“吼焦耳吩熱”息；焦耳饑熱：毛址細(xì)管楚溶液炸中有恭電流朵通過據(jù)時(shí)，飯產(chǎn)生雕的熱練量；CE中的忽焦耳許熱與奔背景潮電解萄質(zhì)的診摩爾禾電導(dǎo)澆、濃腹度及晨電場(chǎng)牙強(qiáng)度市成正斃比。溫度閑每變期化1度，海將引坐起背飯景電皺解質(zhì)鑒溶液澆黏度冤變化2%～3%；（5）添總加劑質(zhì)的影須響加入糊濃度鳴較大施的中豬性鹽扔，如K2SO4，溶搭液離鍛子強(qiáng)頌度增渴大，那使溶卡液的蠶黏度晝?cè)龃竽兀婁P滲流吊減小蛋。加入級(jí)表面扶活性保劑，味可改蜻變電橡滲流晶的大眠小和鬧方向夏；加入誦不同運(yùn)陽(yáng)離借子表禮面活愚性劑聞來控斧制電頭滲流塞。加入編陰離秧子表稱面活明性劑馬，如符十二響烷基魂硫酸采鈉（SD退S），采可以密使壁知表面出負(fù)電洪荷增怎加，ze競(jìng)ta電勢(shì)勵(lì)增大駁，電冬滲流巧增大衛(wèi)；加入績(jī)有機(jī)洗溶劑注如甲討醇、戲乙腈趟，使冷電滲中流增駁大。三、CE中的級(jí)參數(shù)數(shù)與關(guān)刑系式1.遷移每時(shí)間向（保驕留時(shí)決間）CE兼具坊有電狗化學(xué)阻的特鼓性和捏色譜什分析槍的特熄性。敏有關(guān)鬼色譜焰理論考也適羽用。Vap是表尚觀遷戶移速使度；μap是表預(yù)觀淌你度；lde翠t是毛皺細(xì)管肯有效井長(zhǎng)度肢；lto悔t是毛灶細(xì)管奮總長(zhǎng)翁度2.分離腔效率準(zhǔn)（塔怕板數(shù)拒）在CE中，掘僅存挺在縱螞向擴(kuò)場(chǎng)散，σ2=2Dt擴(kuò)散繩系數(shù)帖小的洞溶質(zhì)盤比擴(kuò)因散系份數(shù)大鞋的分土離效足率高埋，這寶是分冬離生倒物大銅分子吧的依旨據(jù)。3.分離組度四、終影響保分離航效率壓的因拆素—區(qū)帶壟展寬1.縱向柜擴(kuò)散意的影巧響在CE中，闊縱向竄擴(kuò)散陷引起協(xié)的峰徐展寬您：σ2=2Dt由擴(kuò)閘散系塌數(shù)和卸遷移獎(jiǎng)時(shí)間席決定喪。大向分子薄的擴(kuò)毫散系戀數(shù)小吧，可獲得趣更高利的分辮離效央率。2.進(jìn)樣廚的影寄響當(dāng)進(jìn)隸樣塞事長(zhǎng)度鑼太大葛時(shí)，歡引起勉的峰父展寬雷大于珍縱向墻擴(kuò)散贏。分冤離效虹率明辰顯下獅降；俘理想林情況皆下，麗進(jìn)樣給塞長(zhǎng)流度：Win鞭j=刪(2采4D適t)1/膜2實(shí)際膛操作朗時(shí)進(jìn)疊樣塞摘長(zhǎng)度映小于梨或等躲于毛襪細(xì)管潔總長(zhǎng)車度的1%～2%。3.焦耳馳熱與端溫度辭梯度脖的影駱響電泳炎過程化產(chǎn)生罷的焦叼耳熱劍可由酸下式顧計(jì)算掠：m：電解盤質(zhì)溶恰液的量摩爾宵電導(dǎo)故；I：工候作電投流：cm：電仇解質(zhì)質(zhì)濃度琴；散熱堵過程紅中，報(bào)在毛杏細(xì)管脖內(nèi)形漲成溫祖度梯論度（偉中心器溫度巧高）克，破辰壞了秒塞流攀，導(dǎo)算致區(qū)規(guī)帶展攜寬。改善焰方法流：（1）減焦小毛糊細(xì)管宿內(nèi)徑驗(yàn)；（2）控悉制散氣熱；4.溶質(zhì)奇與管鐘壁間蜘的相德互作努用蛋白浴質(zhì)、彈多肽呈帶電角荷數(shù)陶多，仆吸附臘問題良特別尺嚴(yán)重莖，是頸目前湊分離奇分析株該類負(fù)物質(zhì)仁的一蘋大難題。細(xì)內(nèi)僅徑毛頸細(xì)管塑柱，暫一方塘面有罵利于兼散熱泳，另瞞一方得面比鑒表面蒸積大皇，又姓增加賤了溶統(tǒng)質(zhì)吸奧附的迷機(jī)會(huì)捕。減小擊吸附你的方瞞法和筐途徑：加入寇兩性谷離子海代替鵲強(qiáng)電鄭解質(zhì)室，兩福性離篇子一局端帶撞正電及，另氣一端優(yōu)帶負(fù)棉電，寶帶正征電一私端與卷管壁草負(fù)電鳴中心慌作用柜，濃罩度約硬為溶被質(zhì)的10視0-脹10樓00倍時(shí)敏，抑法制對(duì)磨蛋白陣質(zhì)吸蹈附，勻又不覺增加午溶液蕩電導(dǎo)磨，對(duì)緣瑞電滲臺(tái)流影粒響不幅大。第三療節(jié)術(shù)毛細(xì)摸管電斤泳儀一、勸儀器傍主要歇部件1.高壓鼓電源（1）0～30kV穩(wěn)定處、連梨續(xù)可昌調(diào)的飼直流洽電源烈；（2）具知有恒熊壓、鄭恒流躲、恒清功率睜輸出稈；（3）電扔場(chǎng)強(qiáng)剪度程沈序控科制系革統(tǒng)；（4）電餐壓穩(wěn)茄定性款：0.兆1隊(duì)%；（5）電破源極盼性易米轉(zhuǎn)換；2.毛細(xì)喜管毛細(xì)縱管是CE分離伍的心慕臟。液理想借的毛潮細(xì)管碗必須就是電串絕緣抬、紫謝外/可見錯(cuò)光透吩明且桃富有弟彈性竄的，引目前點(diǎn)可以曬使用往的有古玻璃既、熔湖融石另英或殘聚四旋氟乙犯烯塑蠻料等形。毛錘細(xì)管制內(nèi)徑蘆一般差為20～10朵0μm。3.緩沖夸液池化學(xué)癢惰性摸，機(jī)苗械穩(wěn)約定性富好；4.檢測(cè)沃器要求緣瑞：具蹤蝶有極膠高靈碗敏度用，可渾柱端衫檢測(cè)堡；檢測(cè)策器、飛數(shù)據(jù)店采集積與計(jì)泊算機(jī)沫數(shù)據(jù)泰處理紫一體喇化；類型專檢測(cè)巡壽限/m散ol特點(diǎn)紫外-可見10-1果3～10-1齊5加二烤極管爹陣列致，光徒譜信壯息熒光10-1深5～10-1掘7靈敏愉度高虜，樣拋品需敵衍生激光牙誘導(dǎo)瓶熒光10-1膨8～10-2等0靈敏緣瑞度極飄高，灰樣品剖需衍稅生電導(dǎo)10-1桌8～10-1妨9離子勢(shì)靈敏券，需練專用典的裝陸置；二、族毛細(xì)椒管電筋泳的給進(jìn)樣游方式進(jìn)樣線量：嚷毛細(xì)買管長(zhǎng)頌度的1-西2%；納靜升級(jí)恩、非敞常小蠶；1.流體痛力學(xué)俯進(jìn)樣托方式（1）進(jìn)感樣端綁加壓（2）出芹口端涂抽真縱空（3）虹律吸進(jìn)腔樣毛細(xì)暗管一痛端插燈入樣日品瓶積，加色電壓腔；2.電動(dòng)盒進(jìn)樣荒方式進(jìn)樣旁不均：電改歧視頭現(xiàn)象其，淌匪度大狼的離販子比寶淌度切小的旦進(jìn)樣撫量大夠；離子吩丟失：淌捏度大忍且與與電滲勿流方券向相賓反的市離子告可能個(gè)進(jìn)不降去；特別深適合推黏度摟大的含試樣地。3.擴(kuò)散雷進(jìn)樣試樣搏通過矩?cái)U(kuò)散研作用爆進(jìn)入通分離宰柱端班口處廁。第四能節(jié)譽(yù)毛細(xì)甘管電栽泳類郵型常用貿(mào)的六李種電閉泳分形離模絲式式；根據(jù)鍋試樣任性質(zhì)俯不同紐奉，采填用不場(chǎng)同的捐分離隙類型秧；每種蛛機(jī)理嚼的選屑擇性躁不同型；一、俱毛細(xì)題管區(qū)縣帶電緞?dòng)荆–a女pi判l(wèi)l名ar宇y勢(shì)zo樸ne優(yōu)e拼le會(huì)ct筆ro河ph缺or輔es妥is馳,丸C柱ZE）帶電抄粒子匙的遷尿移速叛度=電泳卻和電太滲流堤速度拴的矢枯量和尺。正離寶子：兩事種效偏應(yīng)的漢運(yùn)動(dòng)牢方向致一致喜，在員負(fù)極縣最先使流出默；中性駛粒子：無因電泳察現(xiàn)象旺，受惑電滲慣流影咬響，喝在陽(yáng)步離子農(nóng)后流谷出；陰離屬子：兩殊種效頌應(yīng)的柄運(yùn)動(dòng)掙方向鍵相反終；ν電滲丹流>ν電泳時(shí),陰離聯(lián)子在占負(fù)極廚最后桃流出,在這涂種情扭況下,不但榆可以云按類墓分離,同種窄類離蠢子由擠于差速擠遷移被相初互分經(jīng)離。CZ結(jié)E是最狐基本繡、應(yīng)櫻用廣援的分凝離模傘式；二、付毛細(xì)框管凝擠膠電示泳Ca受pi王ll乓ar頂y鹿ge野l(fā)虛el屠ec牌tr哀op羅ho渠re修si勿s，CG賢E將聚器丙烯我酰胺滔等在粒毛細(xì)寧管柱竊內(nèi)交話聯(lián)生閉成凝燒膠。其具襪有多戲孔性蘆，類弱似分膠子篩知的作允用，水試樣動(dòng)分子已按大公小分寸離。所能夠遮有效械減小用組分塞擴(kuò)散狐，所討得峰闊型尖獵銳，逆分離設(shè)效率栽高。蛋白害質(zhì)、DN聚A等的慶電荷/質(zhì)量室比與些分子黃大小毛無關(guān)勾，CZ羽E模式抵很難繼分離斃，采俊用CG榜E能獲嘉得良怠好分繁離，DN號(hào)A排序冊(cè)的重躁要手仁段。特點(diǎn)：抗對(duì)穗流性漁好，持散熱專性好率，分躲離度走極高獵。無膠要篩分皂技術(shù)：采用膜低粘維度的匆線性情聚合清物溶梢液代牧替高逢粘度合交聯(lián)政聚丙左烯酰問胺，番柱便雷宜、延易制淚備。1.緩沖錫溶液評(píng)中加舒入離召子型合表面昆活性毀劑，御其濃捎度達(dá)阻到臨零界濃撞度，紀(jì)形成化一疏沒水內(nèi)粉核、襲外部突帶負(fù)羊電的悲膠束黎。三、姥膠梯束電悠動(dòng)毛鳳細(xì)管欺色譜樹（ME抖CC，ME畢KC）Mi闖ce區(qū)ll踏ar泳e慶le柔ct漢ro悄ki厭ne足ti覽c視ca坦pi看ll牌ar味y片ch諸ro悄ma邪to移gr香ap敞hy量,恨ME廟KC在電介場(chǎng)力踏的作蠅用下尼，膠簡(jiǎn)束在形柱中蘿移動(dòng)羅。2.電泳蔽流和睡電滲出流的長(zhǎng)方向砍相反賽，且ν電滲榜流>ν電泳，負(fù)獎(jiǎng)電膠漠束以齊較慢皮的速聽度向染負(fù)極風(fēng)移動(dòng)漫；5.色譜談與電診泳分扣離模椅式的忍結(jié)合姿。3.中性慈分子枝在膠打束相符和溶懇液（買水相撿）間后分配退，疏塑水性銜強(qiáng)的辨組分神與膠慢束結(jié)邁合的斑較牢諷，流儉出時(shí)吹間長(zhǎng)絞；4.可用錫來分輕離中薯性物躁質(zhì)，寺擴(kuò)展舊了高壩效毛屑細(xì)管膠電泳縮慧的應(yīng)廁用范仇圍；根據(jù)素等電朗點(diǎn)差傳別分懸離生今物大樸分子絨的高夜分辨尋率電電泳技北術(shù)；2.毛細(xì)偽管內(nèi)謎充有預(yù)兩性牌電解阻質(zhì)（呀合成待的具嘆有不柜同等覺電點(diǎn)逐范圍飲的脂吊肪族啞多胺偷基多凍羧酸景混合鮮物）凳，當(dāng)幫施加增直流主電壓彎（6～8.0籮k蛋V）時(shí)拍，管所內(nèi)將槐建立皂一個(gè)薦由陽(yáng)窮極到框陰極猜逐步并升高政的pH梯度餡；3.氨基行酸、敢蛋白袍質(zhì)、慣多肽截等的粒所帶獵電荷英與溶檔液pH有關(guān)煌，在院酸性頌溶液壇中帶甩正電銹荷，記反之扁帶負(fù)德電荷大。在址其等燥電點(diǎn)餅時(shí)，貍呈電盡中性植，淌退度為尊零；四、袋毛細(xì)軟管等豎電聚殖焦Ca銜pi瞧ll商ar也y胃is聽oe如le向ct機(jī)ri徒c命fo沖cu虹si把ng映,象CI勝EF4.聚焦德：具耳有不提同等凍電點(diǎn)您的生彈物試洲樣在火電場(chǎng)歲力的芝作用挽下遷粉移，葛分別巡壽到達(dá)繁滿足情其等桂電點(diǎn)pH的位吼置時(shí)致，呈者電中巧性，脊停止系移動(dòng)遮，形特成窄師溶質(zhì)碗帶而本相互矩分離頌；5.陽(yáng)極肥端裝臉稀磷您酸溶謀液，童陰極惱端裝刷稀Na聾OH溶液賴；6.加壓篇將毛界細(xì)管赤內(nèi)分譽(yù)離后埋的溶哨液推卡出經(jīng)腿過檢陽(yáng)測(cè)器年檢測(cè)功；7.電滲背流在CI書EF中不拳利，柱應(yīng)消僻除或取減小敢。1.將兩支種淌句度差塔別很摘大的淹緩沖蹄液分詳別作性為前凝導(dǎo)離索子(充滿腫毛細(xì)嗚管)和尾豆隨離善子，剃試樣服離子蝴的淌壩度全果部位勤于兩辭者之租間，會(huì)并以掀同一球速度犁移動(dòng)秘。2.負(fù)離肥子分倘析時(shí)澡，前趨導(dǎo)電融解質(zhì)全的淌竟度大較于試男樣中堡所有給負(fù)離饞子的始。所遇有試溫樣都蓬按前晴導(dǎo)離贊子的優(yōu)速度對(duì)等速芹向陽(yáng)潔極前并進(jìn)，支逐漸塑形成嚇各自胃獨(dú)立隸的區(qū)運(yùn)帶而閥分離誕。陰陪極進(jìn)僅樣，炭陽(yáng)極態(tài)檢測(cè)膏。五、譽(yù)毛細(xì)陶管等譜速電雖泳Ca悶pi形ll巡壽ar冬y刑is屢ot音ac滿ho計(jì)ph漸or會(huì)es每is，CI孝TP3.不同緞離子巴的淌軋度不稼同，隸所形娘成區(qū)般帶的址電場(chǎng)趟強(qiáng)度朱不同(ν=盡μE)，淌尺度大戀的離肺子區(qū)貼帶電反場(chǎng)強(qiáng)難度小轎。沿出晌口到鈔進(jìn)口糠，將聚不同呆區(qū)帶胞依次伏排序1、2、3、4證啊睛電場(chǎng)西強(qiáng)度演依次職增大羞。假濃設(shè)“2”號(hào)中拐離子析擴(kuò)散副到“3”號(hào)，上該區(qū)汗電場(chǎng)碎強(qiáng)度振大，莊離子立被加央速，愚返回懂到“2”區(qū)；車當(dāng)“2”號(hào)中崗離子禽跑到怕“1”號(hào)區(qū)偷，離查子被計(jì)減速鐵使之晴歸隊(duì)堂；4.特點(diǎn)稍：界拒面明遷顯，雜富集秒、濃梢縮作惕用。在毛禁細(xì)管鎖壁上件鍵合庫(kù)或涂喝漬高繪效液羞相色腰譜的皺固定賽液，勺以含呢有機(jī)襖物的驕緩沖肥液為靠流動(dòng)風(fēng)相，啊以電凡滲流剪為驅(qū)顫動(dòng)力垮，試換樣組滋分在蛙兩相更間的溉分配畜為分俗離機(jī)窗理的撿電動(dòng)暈色譜禮過程命；六、她毛細(xì)掃管電棋色譜Ca返pi怒ll川ar努y綠el紙ec邀tr池oo炸sm備os讓ti莖c繼ch澡ro英ma比to奸gr夢(mèng)ap銹hy，CE而C一、蹄離子扶分析陽(yáng)離難子分詠析遷移柜方向奇和電疾滲流錦方向?yàn)跻恢掳桑?.府5網(wǎng)mi毅n內(nèi)分炸離了24種金燈屬離圣子；陽(yáng)極懶進(jìn)樣殊，陰滅極檢文測(cè)；具有擁很高韻的靈碰敏度什。第五福節(jié)靜毛細(xì)綁管電古泳的匠應(yīng)用往與進(jìn)綁展陰離傅子分笛析陰離駁子電產(chǎn)泳方脂向和功電滲蒼流方暑向相無反、奶速度說接近沒，分足析時(shí)凝間長(zhǎng)帥、效襯率低肢；質(zhì)量需小、替電荷衡密度巷大的我離子本如：SO42-、Cl-、F-等，敲電泳懼速率歪大于移電滲撫流，字陽(yáng)極不端流傭出，榴在陰準(zhǔn)極端遇無法天檢測(cè)資；加入蹦電滲乒流改匪性劑心，十剩六烷沖基三禽甲基偉溴化乎胺等抗，使彈電泳港方向休和電慢滲流勝方向紗一致然，可岸在3.退1母mi肚n內(nèi)分字離36種陰次離子元；陰退極進(jìn)納樣，責(zé)陽(yáng)極遍檢測(cè)羊；離子謠價(jià)態(tài)胃及存壯在形咽態(tài)分蔑析；二、傘藥物局分析檢測(cè)畢體液嶺或細(xì)希胞中只某些何代謝聾產(chǎn)物括的分驗(yàn)析；尿液隊(duì)中的飾氨基揉酸含書量作呈為臨盈床診立斷糖盞尿病郵