有害殘留物的快速檢測技術研究蒲萬福樣本

資料內容僅供您學習參考，如有不當或者侵權，請聯(lián)系改正或者刪除。本科生畢業(yè)設計(論文)題目:有害殘留物快速檢測技術研究教學單位__化學與環(huán)境保護工程學院姓名_______一樣___學號_一樣年級_______________專業(yè)_________有意義_______指導教師___職稱___副教授有害殘留物快速檢測技術研究哈哈哈(西南民族大學四川成都610041)摘要:在農(nóng)場品生產(chǎn)與加工中,由于人們的不正確使用化學藥劑等導致農(nóng)場品和食品受到污染,農(nóng)場品和食品中的殘留物嚴重威脅著人身健康。綜述有害微生物、化學污染物的快速檢測方法及儀器的研究進展,展望了現(xiàn)場快速分析方法,儀器發(fā)展和市場需求。關鍵詞:農(nóng)產(chǎn)品;有毒有害殘留物;快速檢測NoxiousresiduefastdetectiontechniquesresearchPuWanFuChengdusichuanprovincesouthwestnationaluniversity(610041)Abstract:infarmgoodsproductionandprocessing,becausepeople'sincorrectusechemicalsascontributingtothefarmproductandfoodcontaminated,farmproductandfoodinaseriousthreattohumanhealthresidues.Reviewharmfulorganisms,chemicalcontaminantsfastdetectionmethodsandresearchprogressofinstrument,andprospectsthescenefastanalysismethod,instrumentdevelopmentandmarketdemand.Keywords:agriculturalproducts;Toxicorharmfulresidue;Fastdetection.目錄引言 41農(nóng)藥殘留快速檢測樣本預處理現(xiàn)狀及進展 41.1樣本預處理技術現(xiàn)狀(簡介補寫) 41.2儀器分析技術在農(nóng)藥殘留快速檢測樣本預處理方面的進展 41．2．1固相萃取(SPE)技術和微固項萃取(SPME)技術 41．2．2超臨界流體萃取 51．2．3基質固相分散技術 52.有害微生物快速檢測 52.1免疫親和技術 62.2酶聯(lián)免疫法 62.3ATP生物發(fā)光法【6】 62.4LAMP方法【7】 73化學污染物殘留快速檢測 7(應簡介化學污染物殘留分類,對人體健康影響,檢測的重要性) 錯誤!未定義書簽。3．1有毒有害元素的快速檢測 83．2農(nóng)藥殘留快速檢測 83．3獸藥殘留快速檢測 93．4添加劑和有害化學品殘留物的快速檢測 95結論與展望 105.1結論 105.2展望 10參考文獻 11致謝 13引言農(nóng)產(chǎn)品和食品是否安全是一個全球性的問題,由于農(nóng)業(yè)中不適當使用化肥、農(nóng)藥使得人類賴以生存的土壤、水體等環(huán)境遭受到了嚴重的污染,并呈加劇趨勢。環(huán)境污染造成生態(tài)環(huán)境惡化和農(nóng)產(chǎn)品品質下降,會嚴重影響人體健康。隨著農(nóng)產(chǎn)品和食品生產(chǎn)中新技術、新原料和新產(chǎn)品的采用,造成了農(nóng)產(chǎn)品和食品污染的問題日趨復雜化,而且中國經(jīng)常發(fā)生農(nóng)產(chǎn)品和食品生產(chǎn)流通環(huán)節(jié)中的諸多污染事件。農(nóng)產(chǎn)品和食品安全檢測監(jiān)督是解決問題方法的重要措施之一。開展有害殘留物快速檢測技術研究對于保障農(nóng)產(chǎn)品質量、污染環(huán)境修復基準研究具有重要的理論和現(xiàn)實意義一般農(nóng)產(chǎn)品和食品中有毒有害污染物的檢測速度慢,不但需要貴重儀器和專業(yè)實驗人員,而且大都在實驗室中進行,難以實現(xiàn)現(xiàn)場快速檢測。因此準確、快速、便攜和簡便的現(xiàn)場檢測儀器和設備是當前市場迫切需要的。隨著經(jīng)濟的發(fā)展和人民生活水平的不斷改進,人們對環(huán)境質量的要求不斷提高,待測環(huán)境樣品量迅速增加,傳統(tǒng)的檢測技術已無法滿足這種需求,因此,環(huán)境有害殘留物的快速檢測技術應運而生快速檢測技術與傳統(tǒng)檢測技術相比,雖然對環(huán)境有害殘留物的檢測只能定性(或半定量),靈敏度和準確性也低于傳統(tǒng)檢測技術,然而,快速檢測技術所具有的方便、快速、經(jīng)濟的優(yōu)點,非常適合現(xiàn)場檢測。本文綜述了國內外用于現(xiàn)場快速檢測的方法、技術及儀器。1農(nóng)藥殘留快速檢測樣本預處理現(xiàn)狀及進展1.1樣本預處理技術現(xiàn)狀儀器分析技術中的色譜技術被認為是經(jīng)典、最常見的農(nóng)藥殘留檢測技術,多用氣相色譜儀、液相色譜儀、氣質聯(lián)用、液質聯(lián)用等色譜技術。傳統(tǒng)的色譜技術檢測時間長、成本高,近幾年,在預處理技術和檢測技術的研究,使色譜技術在快速檢測方面獲得巨大的突破1.2儀器分析技術在農(nóng)藥殘留快速檢測樣本預處理方面的進展1．2．1固相萃取(SPE)技術和微固項萃取(SPME)技術【1】固相萃取技術,是根據(jù)吸附劑對流經(jīng)的物質吸附能力不同進行凈化、濃縮。一般使用固相結合相(S0lidbondphase),即在硅膠的未反應硅醇基上接上各種官能團,一般有非極性(C6-C18)(反相色譜)、極性(正相色譜)、離子交換三種。如C18小柱,能夠吸附高分子量的非極性干擾物質,特別適用于低脂類果樹蔬菜的凈化。可進行:選擇性淋洗,將農(nóng)藥先淋洗下來,強保留的雜質留下;選擇性洗脫,溶劑強度可使弱保留雜質先洗脫,使農(nóng)藥保留。微固相萃取技術是在固相萃取技術上發(fā)展起來的,其原理與固相萃取基本相同,具有簡單快速、污染少、處理后樣品干擾少、安全等優(yōu)點。1．2．2超臨界流體萃取【2】超臨界流體萃取是利用某些物質(或溶劑)在臨界點以上所具有的特性來提取混合物中可溶性組分的一種新的分離技術。所謂超臨界流體是物質處在臨界溫度和臨界壓力之上的狀態(tài),介于氣態(tài)和液態(tài)之間,兼有氣體和液體的某些物理性狀,如類似于液體具有較大的密度和溶解度,類似于氣體具有較強的穿透能力,稱為超臨界流體或高密度氣體。超臨界流體萃取就是經(jīng)過溫度和壓力的調節(jié)來控制其溶解能力的。其優(yōu)點是前處理時間短,節(jié)省費用,萃取徹底,可進行熱敏感樣本及痕量樣本的萃取,基本解決了溶劑對環(huán)境的影響。這是當前發(fā)展最快的分析技術,應用前景非常光明。1．2．3基質固相分散技術【MSPD】【2】基質固相分散技術的原理就是將樣品和基質直接混勻,研磨成半流體狀,裝柱,選擇合適的溶液淋洗。MSPD對提取、凈化等前處理步驟一步完成,能夠有效地避免待測物的流失,提高檢測速度。另外還有液液分配法(LLE)、分子印跡受體合成技術等。2.有害微生物快速檢測農(nóng)產(chǎn)品微生物污染包括:病原菌毒素類、真菌毒素類、海藻毒素類。致病病原菌:包括真菌、細菌、病毒或其它低等生物,它們是一大類具有生命的物質,一旦環(huán)境條件合適,就會大量繁殖。其中對食物安全威脅最大的是沙門氏桿菌?，F(xiàn)在發(fā)現(xiàn)有越來越多的病原菌能夠污染食品。如甲肝病毒,0157出血性大腸埃氏茵,禽流感病毒,瘋牛病病原物均引起過人類食物污染的重大事件。真菌毒素類:是一類天然污染物,主要由于農(nóng)產(chǎn)品儲存不當引起的。當前已知的主要有四類:黃曲霉毒素類,鐮刀菌毒素類,青霉菌和曲霉菌毒素類。海藻毒素類:在水圈特別是海洋中生活近百種藻類,主要是雙鞭毛藻、硅藻和藍藻,能分泌一些毒素并對水產(chǎn)品或海產(chǎn)品造成污染,進而威脅食物安全。特別是這些藻類大量繁殖形成”赤潮"時能產(chǎn)生多種毒素(健忘毒素、腹瀉毒素、神經(jīng)毒素麻痹毒素)污染水生貝殼類動物。綜上所述,開展環(huán)境中有害微生物的檢測是十分重要的?！?-5】中國微生物快速檢測技術主要有免疫親和技術和酶聯(lián)免疫法以及ATP生物發(fā)光法、LAMP方法。2.1免疫親和技術乳膠凝集反應-乳膠凝集反應是利用抗原與抗體特異性結合的特性,加上人工大分子的乳膠顆粒而發(fā)生肉眼可見的凝集反應。AureusTest用于食品樣品中金黃色葡萄球菌的檢測,該試劑盒中含有對免疫抗蛋白AIg和鞭毛蛋白敏感的聚苯乙烯乳膠粒子,因細菌蛋白A和IgG結合,凝聚酶和鞭毛抗原結合,因此當含有金黃色葡萄球菌的樣品懸浮液加入含乳膠粒子的試劑盒中時1min內將產(chǎn)生凝集反應。該法的靈敏度和特異性均較高。2.2酶聯(lián)免疫法ELISA是把抗原抗體免疫反應的特異性和酶的高效催化作用有機地結合起來的一種檢測技術,它既可測抗原,也可測抗體。ELISA用固相載體吸附抗體(抗原),加待測抗原(抗體),再與相應的酶標記抗體(抗原)進行抗原抗體的特異免疫反應,生成抗體(抗原)一待測抗原(抗體)—酶標記抗體(抗原)的復合物,最后再與該酶的底物反應生成有色產(chǎn)物,經(jīng)過定性或定量分析有色產(chǎn)物量即可確定樣品中待測物質含量。2.3ATP生物發(fā)光法【6】ATP生物發(fā)光技術的原理是熒光素酶(FireflyLu—ciferase)以D—熒光素(D—Luci~fin)、三磷酸腺苷(ATP)和氧氣為底物,在Mg2+存在時,將化學能轉化為光能,發(fā)出光量子。ATP既是熒光素酶催化發(fā)光的必須底物,又是所有生物生命活動的能量來源。在熒光素酶催化的發(fā)光反應中,ATP在一定的濃度范圍內,其濃度與發(fā)光強度呈線性關系。研究表明,各生長期的細菌均有較恒定水平的ATP含量,因此,提取細菌的ATP,利用生物發(fā)光法測出ATP含量后,即可推算出樣品中的含菌量,整個過程僅為十幾min。由于生物發(fā)光法無需培養(yǎng)過程,操作簡便、靈敏度高,在短時間內即可得到檢測結果,因此具有其它微生物檢測方法無可比擬的優(yōu)勢。2.4LAMP方法【7】LAMP方法的特點是針對靶基因的6個區(qū)域設計4種特異引物,利用一種鏈置換DNA聚合酶(BstDNApolymerase)在恒溫條件(60～65oC)下保溫幾十分鐘,即可完成核酸擴增,根據(jù)反應物磷酸鎂沉淀的濁度進行判斷是否發(fā)生反應。短時問擴增效率可達到106～l010個拷貝。不需要模板的熱變性、長時間溫度循環(huán)、繁瑣的電泳、紫外觀察等過程。在食品微生物檢測及其它領域的實際應用中表現(xiàn)出靈敏度高、速度快、特異性強、簡便、高效等特點。為食品檢測技術的發(fā)展提供了有力的技術支持。在食品衛(wèi)生質量檢驗、臨床疾病診斷及微陣列基因片的開發(fā)等領域具有廣闊的應用前景。開發(fā)相應的診斷試劑盒,LAMP方法將有望成為簡易的常規(guī)檢測手段。3化學污染物殘留快速檢測化學污染物的殘留主要是重金屬、農(nóng)藥和獸藥及亞硝酸鹽。在過去20年來,中國農(nóng)業(yè)生產(chǎn)普遍存在著以農(nóng)產(chǎn)品增產(chǎn)、高產(chǎn)為目標,注重農(nóng)業(yè)投入的產(chǎn)量效應,忽視環(huán)境效應的傾向。改革開放以來,隨著農(nóng)業(yè)集約化水平的提高,農(nóng)業(yè)加大投入,農(nóng)業(yè)生產(chǎn)取得了突破性進展,解決了溫飽問題。但隨著工業(yè)快速發(fā)展,農(nóng)業(yè)集約化水平的提高,化肥、農(nóng)藥等農(nóng)用化學品的大量投入,農(nóng)業(yè)環(huán)境污染日趨嚴重,生態(tài)環(huán)境質量退化、農(nóng)產(chǎn)品安全性的問題正日益嚴重地暴露出來了。在大田作物中,農(nóng)產(chǎn)品的主要污染物為重金屬類,其中以鉛、鎘、汞、銅最為突出。茶葉及糧食作物中有機氯、有機磷和菊酯類農(nóng)藥殘留較普遍;人乳中六六六和DDT含量也有一定的檢出率。在經(jīng)濟利益的驅使下,一些國家明令禁止使用或規(guī)定了使用范圍的藥物被廣泛使用于實際生產(chǎn)中,造成嚴重后果。近年來,瘋牛病、口蹄疫、禽流感等重大食品安全事件的爆發(fā)和流行已經(jīng)對世界各國經(jīng)濟和社會發(fā)展產(chǎn)生了不利的影響?，F(xiàn)已發(fā)現(xiàn)許多藥物具有致畸、致癌、致突變作用,如雌激素、硝基呋喃類和喹嗯啉類等已被證明具有致癌作用。蔬菜中硝酸鹽及亞硝酸鹽超標也十分嚴重。硝酸鹽在農(nóng)產(chǎn)品中污染成為潛在危險的”化學定時炸彈”,為保證消費者健康,中國在食品添加劑標準中規(guī)定了二氧化硫類物質在食品中的使用范圍、使用量及允許最大殘留量。如硫磺只限于熏蒸蜜餞、干果、干菜、粉絲和食糖;低亞硫酸鈉可用于蜜餞、干果、干菜、粉絲、葡萄糖、食糖、冰糖、飴糖、．果糖、液體葡萄糖、竹筍、蘑菇及蘑菇罐頭,最大使用量為0.409／kg;二氧化硫可用于葡萄酒、果酒等,最大使用量不應超過0.259／kg。竹筍、蜜餞、蘑菇及蘑菇罐頭、葡萄、葡萄酒和果酒等二氧化硫殘留量均不得超過0.059／kg。餅干、食糖和粉絲殘留量不得超過0.1／kg。聯(lián)合國糧農(nóng)組織和世界衛(wèi)生組織聯(lián)合食品添加劑專家委員會對二氧化硫類物質作為食品添加劑的危險性評估為:二氧化硫的日容許攝入量為0.7mg／kg體重,即一個60kg體重的成人,每天二氧化硫的攝入量不超過42mg?！?】由此可看出,對中國農(nóng)場品中化學污染物殘留的檢測是十分的重要的。3．1有毒有害元素的快速檢測食品中的有害元素砷、汞、鉛、鉻、鎘快速檢測技術不斷地出現(xiàn),其中原子熒光光譜儀是中國的標準檢測方法,是中國科技工作者研發(fā)的一種高效、靈敏快速的有害元素污染物分析儀器。酶抑制法測定重金屬的基本原理就是重金屬離子與形成酶活性中心的巰基或甲巰基結合后,改變了酶活性中心的結構與性質,引起酶活力下降,從而使底物一酶系統(tǒng)中的顯色劑顏色、pH、電導率和吸光度等發(fā)生變化,這些變化能夠直接經(jīng)過肉眼或借助于電信號、光信號等加以區(qū)別。與傳統(tǒng)的重金屬分析方法相比,酶抑制法具有快速、簡便、對所分析的樣品需要量少等優(yōu)點;使用傳感器件還能放大重金屬離子對酶的抑制效應,從而大幅度提高檢測靈敏度;另外,重金屬對酶的抑制效應往往與它們的生物毒性相關．因此酶抑制法還可用于對污染環(huán)境重金屬的風險評價?！?-10】Pirutoiu等成功地檢測了污染環(huán)境中痕量Hg濃度,她們將葡萄糖氧化酶和過氧化氫酶聯(lián)合固定在可控微孔玻璃珠(CPG)上,耦聯(lián)了帶有連續(xù)流測溫傳感器的FIA系統(tǒng)來跟蹤酶的活性變化。Hg抑制酶的活性,使葡萄糖氧化酶-過氧化氫酶的反應減弱,對應于100的酶活性給出一個溫度變化,用熱敏傳感器進行測定,這可在5～8Otag／L的濃度范圍內檢測Hg,而且測定一個樣品只需2～6min【11】3．2農(nóng)藥殘留快速檢測中國常見的方法:活體檢測法、化學檢測法、酶抑制法、免疫分析法、儀器分析法等法。酶抑制法測定有機磷農(nóng)藥殘留是根據(jù)有機磷農(nóng)藥的毒性對酶分解底物的抑制作用進行的。中國常采用膽堿酯酶抑制的生物化學技術用于檢測有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥。當前國內市場上應用較多的是農(nóng)藥速測卡和農(nóng)藥速測光度計。國內外已研究出多種方法,如速測卡法、速測片法和農(nóng)藥殘毒光度計法。農(nóng)藥殘留快速檢測方法中主要采用的技術是免疫分析技術、生物化學技術和生物傳感器技術。當前對于免疫分析技術在農(nóng)藥快速檢測的應用研究十分活躍,國外已研制出有機磷類、氨基甲酸酯類、硫代氨基甲酸酯類、有機氯類、三嗪類、擬除蟲菊酯類和酰胺類等幾十種農(nóng)藥的酶免疫檢測試劑盒【12】。這些試劑盒檢測靈敏度高,檢測快速(一次測樣只需10分鐘),成本低,使用簡便,安全可靠,操作人員不需特殊培訓,樣品不需凈化,若配備小型光度計,在一小時內即可同時完成20多個樣品的檢測,其可信度可達95％以上。美國環(huán)?？偸鸷娃r(nóng)業(yè)部食品檢驗司已制定了農(nóng)藥殘留免疫學檢驗商品試劑盒評定和認可標準。由于上述試劑盒價格較高,當前在國內尚不能普及應用。國內對該試劑盒研制起步較晚,商品化產(chǎn)品較少。3．3獸藥殘留快速檢測獸藥殘留包括抗生素和鹽酸克倫特羅(瘦肉精)等。其中抗生素包括D-內酰胺類、磺氨類、四環(huán)素類、氨基糖苷類、大環(huán)內酯類和氯霉素類共六大類50余種。用于抗生素殘留的快速檢測方法主要有酶聯(lián)免疫吸附檢測法(ELISA)、放射免疫檢測法、免疫傳感器和生物芯片等方法?！笔萑饩庇址Q鹽酸克倫特羅,屬于D一興奮劑類藥物是一種白色或類白色的結晶粉末,豬食用后在代謝過程中能夠促進蛋白質合成,加速脂肪的轉化和分解,提高豬肉的瘦肉率。含有”瘦肉精”的豬肉如果被人食用后,發(fā)生急性中毒會表現(xiàn)出心悸,面頸、四肢肌肉顫動,手抖甚至不能站立,頭暈、乏力等癥狀【13-17】。ELISA檢測試劑盒能夠用于特異性檢出(氨基二甲基嘧啶基苯磺酰胺)或者一群相關的復合物(磺胺類藥物)。一個檢測試劑盒能夠用來檢測很多樣品,而且不需要精密的儀器,在很短的時間內得到精確的檢測結果。ELISA檢測試劑盒對肉品中的泰樂菌素和四環(huán)素類、氯霉素類、硝基咪唑、磺胺類藥物,鎮(zhèn)定藥物的檢測起到了很好的效果。3．4添加劑和有害化學品殘留物的快速檢測雖然國外某些發(fā)達國家對食品添加劑和有害化學品的管理比中國先進很多,可是也發(fā)生過瘋牛病,二惡英,禽流感等惡性食品安全事故。當前國外農(nóng)產(chǎn)品和食品安全基礎管理設施和管理水平遠遠高于中國,有關食品安全的相關法律法規(guī)趨于完善,市場已經(jīng)完全規(guī)范化運作。中國當前經(jīng)常發(fā)生在生產(chǎn)流通等環(huán)節(jié)中的諸多食品安全問題,相關檢測大都在實驗室進行,因此中國應加強這個方面的研究力度,確保中國的食品安全。德國默克公司研制開發(fā)出用于現(xiàn)場質量控制檢測的反射式食品測試儀,經(jīng)過濾紙條顯色后,在反射式光度計上可檢測出50種參數(shù)。中國農(nóng)產(chǎn)品中化學有害物質和食品中添加劑的快速檢測大都采用比色法,經(jīng)過試紙或試管中被檢測樣品的溶液顏色變化實現(xiàn)樣品定性或定量檢測,如食品中砷、汞、氰化物、氟化物、加碘鹽中碘、食用油中非食用油、酸價和過氧化值、食品中亞硝酸鹽、雙氧水、甲醛和吊白塊等。這些方法雖然快速,操作簡便,但由于未經(jīng)過樣品前處理,干擾大,難以定量測定,實現(xiàn)對大多數(shù)農(nóng)產(chǎn)品和食品的初篩均較困難。中國以研發(fā)出能在30分鐘內現(xiàn)場測定農(nóng)產(chǎn)品和食品中亞硝酸鹽、硝酸鹽、二氧化硫、甲醛檢測的儀器及其相關技術、檢測結果與國標法符合率達95％,已經(jīng)投入使用。【18-21】5結論與展望5.1結論有害殘留物快速檢測技術都各自表現(xiàn)出很多優(yōu)點,但也還存在著不足,需要國內外研究者不斷地完善和改進現(xiàn)有的檢測技術。同時,建立更靈敏、更有效、更可靠、更簡便的有害殘留物檢測技術也是保證食品安全的迫切需求和食品快速檢測技術的發(fā)展趨勢5.2展望現(xiàn)場快速檢測方法與國家標準方法和儀器法相比具有操作簡單、快速的優(yōu)點,但由于大多數(shù)快速檢測方法在食品樣品前處理,操作規(guī)范性方面尚存在共性的不足,當前還只能作為快速篩選的手段而不能作為最終診斷的依據(jù),兼具快速和準確兩大優(yōu)點是快速檢測方法追求的目標。當前的食品現(xiàn)場快速檢測主要呈現(xiàn)四大趨勢:(1)由于高新技術的應用,檢測能力不斷提高,檢測靈敏度越來越高(2)檢測速度不斷加快,智能化芯片和高速電子器件與檢測器的使用,使食品安全檢測周期大大縮短;(3)選擇性不斷提高,高效分離分段、各種化學和生物選擇性傳感器的使用,使在復雜混合體中直接進行污染物選擇性測定成為可能;(4)由于微電子技術、生物傳感器、智能制造技術的應用,檢測儀器向小型化、便攜化方向發(fā)展,使實時、現(xiàn)場、動態(tài)、快速檢測正在成為現(xiàn)實。針對中國的特殊國情,當前中國基層單位很多速測技術的應用還只處于定性或半定量水平,易用型的小型化儀器的應用是當前和今后快速檢測技術的發(fā)展趨勢。另外食品樣品復雜多樣,前處理煩瑣費時,建立快速檢測方法同時進一步完善樣品的前處理方法,研制適合的小型前處理裝置,對于縮短現(xiàn)場快速測定時間及提高測定的準確性具有重要的意義。參考文獻【1】黎其萬,等．農(nóng)藥殘留免疫分析方法及其在應用研究進展．西南農(nóng)業(yè)學報,,17(2):248~252．【2】吳俐勤,等．固相萃取技術在農(nóng)藥殘留測定中的應用．農(nóng)藥科學與管理,1999增刊:18~250．【3】McLaughlm,MJ.,parker,DR．a(chǎn)ndClarke,J．M．,Metalandmicronutrients—foodsafetyissues．FieldCropResearch,1999,60:143-163【4】YangX．EandRoemheldVphysiologicalofagriculturaldevelopment:acasestudyfromtheGreenRevolutionstateofHavana,IndiaAgriculture,EcosystemsandEnvironment,,82(1):97-103【5】SinghR．BEnvironmentalconsequencesofagriculturaldevelopment:acasestudyfromtheGreenRevolutionstateofHaryana,IndiaAgriculture,EcosystemsandEnvironment,,82(1):97-103【6】張菊梅,吳清平,李程思,等．生物發(fā)光法微生物快速檢測試劑的性質及其影響因素研究Ⅲ．微生物學通報,,33(3):36—41【7】《中國水產(chǎn)》第8期【8】王麗麗,紀淑娟,李順.食品中二氧化硫及亞硫酸鹽的作用與檢測方法[J].食品與