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文檔簡(jiǎn)介
生物餌料培養(yǎng)學(xué)備課講義
緒論
一、基本概念:
飼料?:特指飼養(yǎng)陸生動(dòng)物(家畜、家禽等)的食物。
餌料指魚、蝦、蟹、貝等水產(chǎn)動(dòng)物的食物,水產(chǎn)上應(yīng)用的所謂配合飼料嚴(yán)格稱為配合餌
料或人工餌料。
餌料生物和生物餌料
餌料生物(preyfood)是指生活在海洋、江河、湖泊等水域中,可供水產(chǎn)動(dòng)物食用的
各種水生微生物、動(dòng)、植物,如:細(xì)菌、酵母、單細(xì)胞藻類,輪蟲,鹵蟲、等。
生物餌料(livingfood)特指經(jīng)過人工篩選的、可進(jìn)行人工培養(yǎng)的、適合養(yǎng)殖對(duì)象食
用的優(yōu)質(zhì)的餌料生物。生物餌料可分為植物性生物餌料(光合細(xì)菌及單細(xì)胞藻類)和動(dòng)物性
生物餌料(輪蟲、鹵蟲、枝角類等)兩類。
生物餌料培養(yǎng)學(xué)(livefoodcultivatology):主要研究生物餌料的篩選、培養(yǎng)及其
營(yíng)養(yǎng)價(jià)值評(píng)價(jià)的一門應(yīng)用學(xué)科。主要內(nèi)容和任務(wù):1)生物餌料的篩選;2)生物餌料規(guī)?;?/p>
或大量培養(yǎng)技術(shù)研究;3)生物餌料的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值評(píng)價(jià)。
二、優(yōu)良生物餌料所應(yīng)具備的條件
1、優(yōu)良生物餌料所應(yīng)具備的條件
餌料生物要成為優(yōu)良的生物餌料,必須具備以下條件:
1、生物餌料的個(gè)體大小必須適合養(yǎng)殖對(duì)象的攝食。不同的動(dòng)物及動(dòng)物的不同發(fā)育階段,其
口徑的大小不一樣,所要求的餌料的大小也不一樣,餌料過大,養(yǎng)殖對(duì)象不能吞咽;餌
料過小,養(yǎng)殖對(duì)象不攝食或攝食效率低,從而引起養(yǎng)殖對(duì)象生長(zhǎng)停滯或死亡。如,暗紋
東方豚開口餌料為輪蟲(大小150-250微米),用鹵蟲無(wú)節(jié)幼體(500微米左右)或單
細(xì)胞藻類皆不適口。
2、生物餌料在水中的運(yùn)動(dòng)速度與在水層中的分布情況,應(yīng)便與養(yǎng)殖動(dòng)物的攝食。
3、生物餌料的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高,容易被養(yǎng)殖對(duì)象消化吸收。
4、生物餌料及其代謝產(chǎn)物無(wú)毒或毒性小,不危及養(yǎng)殖對(duì)象的健康。
5、生物餌料的生命周期短,生長(zhǎng)繁殖迅速。
6、生物餌料對(duì)環(huán)境的適應(yīng)能力強(qiáng),易于大量培養(yǎng)。
三、生物餌料的優(yōu)點(diǎn)及水產(chǎn)上的地位
生物餌料作為養(yǎng)殖水產(chǎn)動(dòng)物(主要是苗種培育階段)的餌料,與人工配合餌料相比,
具有如下優(yōu)點(diǎn):
1、對(duì)水環(huán)境的影響:使用生物餌料,對(duì)養(yǎng)殖水體的水質(zhì)影響較小。微生物及植物性生物餌
料,同時(shí)有改善水質(zhì)的作用,動(dòng)物性的生物餌料是活的生物,一般不會(huì)影響到養(yǎng)殖水體
的水質(zhì),而使用人工配合餌料對(duì)水質(zhì)的影響則不同。
2、營(yíng)養(yǎng)組成:生物餌料的營(yíng)養(yǎng)豐富,能滿足水產(chǎn)動(dòng)物的營(yíng)養(yǎng)需求。生物餌料大多含未知的
生物活性物質(zhì),對(duì)養(yǎng)殖對(duì)象的生長(zhǎng)有利;可篩選特定的生物餌料,滿足特定培養(yǎng)對(duì)象的
營(yíng)養(yǎng)需求:可通過改變培養(yǎng)條件來(lái)改善或強(qiáng)化生物餌料的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。
3、規(guī)格:生物餌料的大小可滿足養(yǎng)殖對(duì)象的需求,不同生物餌料可組合成系列餌料,滿足
養(yǎng)殖對(duì)象不同生長(zhǎng)階段的具體需求。而人工微粒子配合餌料(小于300微米)的研究還
有待提高。
4、可消化性:大多數(shù)水產(chǎn)動(dòng)物喜食生物餌料.,而且容易消化。自身含消化酶,可彌補(bǔ)幼體
消化能力的不足。
5、可獲得性:大多數(shù)水產(chǎn)動(dòng)物能方便的攝食生物餌料,可針對(duì)養(yǎng)殖對(duì)象的運(yùn)動(dòng)和棲息習(xí)性,
選擇運(yùn)動(dòng)能力和分布水層都適合培養(yǎng)對(duì)象的種類。
鑒于生物餌料具有以上優(yōu)點(diǎn),其對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物養(yǎng)殖(尤其在苗種培育階段)的重要性是不
言而喻的。在許多水產(chǎn)動(dòng)物的苗種生產(chǎn)中,都離不開生物餌料。近十兒年,盡管微粒子配合
餌料的生產(chǎn)有很大的發(fā)展,但是,85%以上的水產(chǎn)動(dòng)物的苗種生產(chǎn)都需要鹵蟲無(wú)節(jié)幼體。生
物餌料的培養(yǎng)情況,生物餌料的供應(yīng)量,很大程度上決定著苗種生產(chǎn)的成敗及經(jīng)濟(jì)效益。因
此,一個(gè)水產(chǎn)動(dòng)物育苗技術(shù)員的技術(shù)水平的高低,很大程度上取決與該技術(shù)員在生物餌料的
生產(chǎn)上的水平。
四、生物餌料培養(yǎng)未來(lái)發(fā)展方向
(一)、生物餌料培養(yǎng)的中長(zhǎng)期目標(biāo)
隨著水產(chǎn)養(yǎng)殖的發(fā)展,在今后相當(dāng)長(zhǎng)一段時(shí)間,生物餌料規(guī)模化、穩(wěn)定性培養(yǎng)技術(shù),餌
料的營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化,新型生物餌料的篩選(主要通過生物技術(shù)手段,篩選優(yōu)良品系)仍然是生物餌
料培養(yǎng)學(xué)的主要研究方向。藻類是自然界中能合成HUFA的主要生物,且其合成的HUFA
與魚油相比,氧化穩(wěn)定性好,沒有腥臭味。因此,今后在微藻培養(yǎng)方面,通過研究藻類中脂
肪酸的組成及合成機(jī)制,最終選擇富含HUFA的藻種和藻種品系,以滿足經(jīng)濟(jì)動(dòng)物幼體發(fā)
育和餌料營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化所需,被公認(rèn)是替代魚油生產(chǎn)EPA和DHA的最有效途徑。
在生物餌料培養(yǎng)過程中,由于是高密度培養(yǎng),其水環(huán)境無(wú)疑會(huì)存在大量的細(xì)菌(水質(zhì)
條件比水產(chǎn)動(dòng)物幼體培育水質(zhì)差),這些細(xì)菌極易被生物餌料攝取,如Minko汗&Broadhurst
(1994)發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)輪蟲的水體中,細(xì)菌含量通常在為1X1O4~1X1O7CFU(colony-forming
units)/mL而輪蟲體內(nèi)的好氧性細(xì)菌?般在lX107-ixi()i°CFU/g,在單個(gè)輪蟲的腸道中積聚
的細(xì)菌可達(dá)IXlO'cFU。這些細(xì)菌絕大部分不會(huì)造成生物餌料病害,但有些細(xì)菌可能對(duì)水
產(chǎn)經(jīng)濟(jì)動(dòng)物幼體是有害的或就是其病原菌,在生物餌料培養(yǎng)過程中,也同樣會(huì)被生物餌料攝
取和攜帶,如Makridisetal(2000)將輪蟲和鹵蟲培養(yǎng)于從水產(chǎn)動(dòng)物體中分離出病原微生物懸
液中,這些病原微生物群落很快被攝取并可在這些生物餌料中存活4-24h,這些致病菌通過
食物鏈,傳遞給培育的水產(chǎn)動(dòng)物幼體,必將造成病害(Dhert1996,2001)?對(duì)此問題當(dāng)前還
沒有很好的解決辦法,很多人嘗試用消毒的方法或通過沖洗方法,來(lái)減少生物餌料攜帶的細(xì)
菌數(shù)量,但實(shí)際的效果都不好。Gatesoupe(1991)用抗生素處理培養(yǎng)輪蟲,然后投喂海水魚幼
體,可顯著提高幼體的成活率。但抗生素的應(yīng)用也存在爭(zhēng)議,如攜帶抗生素的餌料生物會(huì)引
起水產(chǎn)動(dòng)物幼體正常腸道微生物群落的紊亂,產(chǎn)生其它環(huán)境問題等。微生態(tài)制劑在生物餌料
培養(yǎng)的應(yīng)用可能會(huì)成為解決生物餌料培養(yǎng)衛(wèi)生性問題的關(guān)鍵途徑,它不僅可以提高生物餌料
的生長(zhǎng)和繁殖,而且能抑制有害細(xì)菌的繁育,降低水質(zhì)污染(Leeetal,1997),更重要的是
生物餌料可以作為微生態(tài)制劑的載體生物,當(dāng)被培育的水產(chǎn)動(dòng)物幼體攝取后,不僅作為餌料
消化吸收,而且能夠提高幼體的抗病能力和成活率。今后要加強(qiáng)相關(guān)方面的研究。
生物餌料培養(yǎng)學(xué)的另一動(dòng)向也應(yīng)引起注意,就是生物餌料在自然條件下(主要在池塘)
的人工培養(yǎng)和增殖。其實(shí)我國(guó)在育苗培育過程中,很早就注意和利用了這種方法,即向池塘
施放有機(jī)肥料,以繁殖適量的餌料生物(輪蟲,枝角類),待生物餌料高峰期再下塘育苗的
方法。目前我國(guó)科技工作者,在魚蝦蟹的人工繁殖中,特別在蟹的育苗過程中,因地制宜選
擇池塘進(jìn)行人工生態(tài)育苗,同時(shí)相應(yīng)促進(jìn)了池塘生物餌料的規(guī)?;囵B(yǎng)。比如輪蟲的池塘規(guī)
?;囵B(yǎng),這方面還需進(jìn)行一些基礎(chǔ)研究,以便穩(wěn)定和提高池塘人工生物餌料培養(yǎng)的產(chǎn)量。
其他有關(guān)生物餌料的研究展望如下:
1,優(yōu)質(zhì)、低廉的光生物反應(yīng)器的研制。
2.單胞藻螯合微量元素(碘、硒、錯(cuò)等)技術(shù)及其在保健制劑中的應(yīng)用
3.高濃度硅藻抑制槎足類繁殖的生理機(jī)制
4,營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化(HUFA)技術(shù)與營(yíng)養(yǎng)需求的生理生化機(jī)制
5.休眠(卵)在生物餌料培養(yǎng)生產(chǎn)中的作用
6.低等甲殼動(dòng)物生殖量及其影響因子的研究
7.產(chǎn)業(yè)化的生物餌料精養(yǎng)系統(tǒng)的建立
8.養(yǎng)殖動(dòng)物對(duì)餌料生物利用的行為生態(tài)研究
9.低溫冷藏生物餌料的研究
(二)、生物餌料培養(yǎng)的終極目標(biāo):微粒飼料的完全取代
水產(chǎn)動(dòng)物苗種生產(chǎn)過程中的餌料環(huán)節(jié)是關(guān)鍵因素之一,由于苗種幼小、攝食能力低、
食料范圍窄、營(yíng)養(yǎng)要求高、生長(zhǎng)快、變態(tài)周期短、對(duì)外界環(huán)境變化和敵害侵襲的應(yīng)付能力差
等原因,對(duì)苗種生物餌料的生產(chǎn)和培養(yǎng)提出了很高的要求。在傳統(tǒng)的人工繁育苗種領(lǐng)域內(nèi),
一般采用天然餌料(如微藻、輪蟲、鹵蟲無(wú)節(jié)幼體等)和一些代用餌料(如雞蛋黃、豆?jié){等)。
此外,通過池塘施肥所培育的生物餌料有時(shí)帶有病原微生物或在營(yíng)養(yǎng)上不全價(jià),常引起苗種
大量死亡或生長(zhǎng)畸形。隨著水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展和育苗規(guī)模的擴(kuò)大,生產(chǎn)中生物餌料時(shí)常出現(xiàn)
供不應(yīng)求的局面,而代用餌料也山于養(yǎng)分流失多、浪費(fèi)甚大和易污染水質(zhì)等弊端,不宜大量
使用。所以苗種的餌料問題已成為水產(chǎn)苗種規(guī)?;彤a(chǎn)業(yè)化的一個(gè)主要制約因素。因此,對(duì)
幼體階段營(yíng)養(yǎng)需求進(jìn)行研究,最終配制出適應(yīng)于幼體營(yíng)養(yǎng)需求的全價(jià)微粒飼料,以替代目前
育苗生產(chǎn)上主要依靠生物餌料的現(xiàn)狀,是擴(kuò)大經(jīng)濟(jì)魚蝦類養(yǎng)殖的最終途徑。近年來(lái),科研人
員對(duì)魚蝦幼體的營(yíng)養(yǎng)需求進(jìn)行了較為廣泛和深入研究,并不斷地探索配制適應(yīng)于幼體營(yíng)養(yǎng)需
求的全價(jià)飼料(微粒或微囊飼料見下),以替代育苗生產(chǎn)上主要依靠的活餌料?。商業(yè)性的
微囊飼料在蝦蟹和淡水魚育苗階段應(yīng)用,從20世紀(jì)80年代開始,在國(guó)內(nèi)外都有取得明顯的
成功的例子(Stottup&McEvoy,2003),但在海水魚幼體培育階段,雖然這種努力已進(jìn)行
了20多年,但直到現(xiàn)在,人們?nèi)匀徽J(rèn)為,在海水魚幼體培育過程中,用微囊飼料完全替代
生物餌料,似乎是不可能的。
現(xiàn)市場(chǎng)上微粒飼料的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)組成,根據(jù)不同幼魚的營(yíng)養(yǎng)需求和代謝特點(diǎn)而有所不
同,但由于目前的資料所限,所以飼料的蛋白源常選用一些高營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的蛋白質(zhì),如魚靡、
觥魚靡、軟體動(dòng)物勻漿液、鰭魚卵勻漿液、雞蛋、牛奶、酪蛋白和動(dòng)物明膠等。其他營(yíng)養(yǎng)成
分常添加磷脂如卵磷脂,n3HUFA,維生素和礦物質(zhì)等?
雖然微粒飼料現(xiàn)尚不能完全替代生物餌料,但很多研究證實(shí),微粒飼料可替代部分生
物餌料,而且采用微粒飼料與生物餌料混飼,比單純用活餌料或微粒子餌料的效果要好,比
如,Trandleretal(1991)用混飼方法培育10日齡的金頭酗,獲得80%的成活率。Kolkovski
etal(1997)用同位素標(biāo)記證實(shí)混飼(鹵蟲)極大地增加了妒魚對(duì)MD的消化吸收(與單純
用MD相比)。而且用這些微粒飼料,對(duì)于海水魚幼體,已能完全替代海水魚幼體孵化后發(fā)
育幾周后的幼體的生物餌料。但早期的發(fā)育仍不能脫離生物餌料。
不過,隨著海水魚營(yíng)養(yǎng)研究的深入和微粒飼料營(yíng)養(yǎng)成分的改進(jìn),替代海水魚幼體發(fā)育
的生物餌料的時(shí)間在逐步向早期階段發(fā)展。如通常微粒飼料替代歐洲舌齒妒的生物餌料是從
孵化后的第55天開始,Person等(1993)用MD將此時(shí)間提早到第40天。1997年,Zambonino
等又將此時(shí)間提早到第20天。Cahu等(1998)報(bào)道單純用微粒飼料投喂歐洲舌齒妒,35%的
幼體可存活到第28天,而正常情況下不投喂餌料的幼體最多存活到第15天。金頭蜩
(Femandez-DiazefR,1997)和真蜩(Takeuchietal,2001)幼體的開口階段僅投喂MD也能有部
分幼體成活。所以說,生物餌料最終被微粒飼料替代雖然還需漫長(zhǎng)的時(shí)間,但它只是時(shí)間問
題。即使微粒飼料能完全替代生物餌料,但它并不能終極生物餌料的培養(yǎng),這是因?yàn)樯镳D
料培養(yǎng)的目的不僅僅是為了魚蝦蟹貝的育苗生產(chǎn),而各地魚蝦蟹貝育苗的生產(chǎn)也不可能采用
一種程式(生物餌料或微粒飼料),單純用微粒飼料,或單純用生物餌料或兩者兼而有之的
模式在水產(chǎn)動(dòng)物魚蝦蟹貝育苗生產(chǎn)中會(huì)長(zhǎng)期依存。
第一章光合細(xì)菌的培養(yǎng)
光合細(xì)菌(Phot。SyntheticBacteria,PSB)是地球上最早出現(xiàn)的具有原始光能合成體系
的原核生物,在不同的自然環(huán)境下,具有多種異養(yǎng)功能(固氮、脫氮、固碳、硫化物氧化等),
與自然界中的物質(zhì)循環(huán)(氮、磷、硫)有密切關(guān)系,在自然凈化過程中,起重要作用,是一
大類在厭氧條件下進(jìn)行不放氧光合作用的細(xì)菌的總稱。其最本質(zhì)的特點(diǎn)是能在厭氧和光照條
件下進(jìn)行不產(chǎn)氧的光合作用。
第一節(jié)光合細(xì)菌的生物學(xué)
一、生態(tài)分布
廣泛分布與地球生物圈的各處,在所有光能可供利用的地方皆可生存,在水環(huán)境中最為
豐富。從南極冰封海岸到90度的溫泉,從淡水到鹽度為300的鹽湖,從高山到一2000米的
海溝。
二、分類
1、舊的分類系統(tǒng)
廣義光合細(xì)菌分產(chǎn)氧(藍(lán)細(xì)菌)和不產(chǎn)氧(狹義光合細(xì)菌)兩類。
狹義光合細(xì)菌分紫細(xì)菌和綠細(xì)菌兩類及兩個(gè)獨(dú)立的屬:日光桿菌屬和紅色桿菌屬。
紫細(xì)菌包括紅螺菌科、著色菌科和外硫紅螺菌科三個(gè)科共16屬,49種。
綠細(xì)菌包括綠菌科和綠色絲狀菌科兩個(gè)科共9屬,17種。
2、最新分類系統(tǒng)
狹義光合細(xì)菌分產(chǎn)氧光合細(xì)菌藍(lán)細(xì)菌門
(產(chǎn)氧光養(yǎng)細(xì)菌)
光合細(xì)菌<
r綠曲撓菌門:綠曲撓菌綱
、1綠茵門
不產(chǎn)氧光合細(xì)菌厚壁菌門:螺旋桿菌科
(不產(chǎn)氧光養(yǎng)細(xì)時(shí)「著色菌著色菌科
r紫色硫細(xì)#
變形菌門J1外硫紅螺菌科
1(紫色細(xì)菌)好氧不產(chǎn)氧光養(yǎng)細(xì)菌
紫色非硫細(xì)菌
水產(chǎn)用途的光合細(xì)菌最好是紅螺菌科的菌種。
三、培養(yǎng)物顏色及細(xì)胞形態(tài)大小
不同的光合細(xì)菌培養(yǎng)物(菌落)的顏色不一樣。主要是由菌體內(nèi)的色素種類及含量的
多少?zèng)Q定。類胡蘿卜素含量高的菌種,顏色多為橙黃色或紫色,而細(xì)菌葉綠素含量高的種類
一般為綠色。每種光合細(xì)菌的顏色在固定的培養(yǎng)條件下是一定的,但是在培養(yǎng)條件變化時(shí),
顏色也會(huì)改變。如:紅螺菌科的R.Oapsulata,在厭氣條件下為褐色,在半好氣條件下為深
紅或紫紅色。
光合細(xì)菌的形態(tài)多樣,不同的菌種有不同的形態(tài),同種的不同培養(yǎng)條件及不同生長(zhǎng)階
段形態(tài)也不同,有球形、桿形、弧形、螺旋形等。
光合細(xì)菌的大小也隨種類而有較大的變異。一般講,紅螺菌科的細(xì)胞大小為0.6-0.7X
1-10微米,著色菌科細(xì)胞大小為1-3X2-15微米,綠桿菌科細(xì)胞大小為0.7-1X1-2微米,
綠色絲狀菌科的細(xì)胞可達(dá)300微米。
四、光合細(xì)菌的色素及光合作用的器官
光合細(xì)菌的色素主要有菌綠素a,b,c,d,e及類胡蘿卜素。在不同的菌種內(nèi)含量不
同。菌綠素是光合細(xì)菌進(jìn)行光合磷酸化,將光能轉(zhuǎn)變成化學(xué)能的媒介,而類胡蘿卜素的主要
作用是捕獲光能(天線色素)及起光氧化的保護(hù)劑作用(防止菌綠素受光氧化損傷)。
光合細(xì)菌的色素主要存在細(xì)胞內(nèi)的載色體或綠色包囊中,載色體或綠色包囊是光合細(xì)
菌進(jìn)行光合磷酸化的部位(細(xì)胞器)。
載色體存于與紅螺菌科和著色菌科,由細(xì)胞膜陷入細(xì)胞質(zhì)內(nèi)而形成,并與細(xì)胞膜相連。
綠色包囊存在于綠桿菌科和綠色絲狀菌科,分散附著于細(xì)胞膜下面,是一個(gè)獨(dú)立的球
形細(xì)胞器。
五、光合細(xì)菌的生長(zhǎng)及營(yíng)養(yǎng)素
根據(jù)光合細(xì)菌進(jìn)行光合作用時(shí)供氫體的不同,光合反應(yīng)可分為三類:
1)以硫化氫為供氫體,還原二氧化碳,如著色菌科和綠桿菌科;
2)以硫代硫酸鹽為供氫體,還原二氧化碳;
3)以有機(jī)物為供氫體,如紅螺菌科和綠色絲狀菌科。
光合細(xì)菌獲得代謝所需的能量的形式有三種:
1)光照厭氣條件下,通過光合作用獲得能量,
2)黑暗厭氣條件下,通過脫氮或發(fā)酵獲得能量,
3)黑暗有氧條件下,通過呼吸作用獲得能量。
大多數(shù)光合細(xì)菌的繁殖以二分裂的方式進(jìn)行,少數(shù)種類以出芽分裂方式或極性伸長(zhǎng)分
裂方式進(jìn)行繁殖。
光合細(xì)菌生長(zhǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)素有碳源(二氧化碳或有機(jī)物)、氮源(鏤鹽、氨基氮、氮
氣)及生長(zhǎng)因子(主要為某些B族維生素,B|、B5>B7等)。
第二節(jié)光合細(xì)菌在水產(chǎn)上的應(yīng)用
一、光合細(xì)菌在水產(chǎn)上的應(yīng)用
1、作為養(yǎng)殖水體的水質(zhì)凈化劑
光合細(xì)菌能降解小分子有機(jī)物,降低水體中的COD,氨氮,從而改善水質(zhì),提高養(yǎng)殖
產(chǎn)量。大連水院,對(duì)蝦養(yǎng)殖,增產(chǎn)23.1%。
2、作為人工配合餌料的添加劑
光合細(xì)菌菌體富含營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),粗蛋白含量(65.45%)超過大豆,同時(shí)含有豐富的B族
維生素。富含生物體內(nèi)重要的生理活性物質(zhì)輔酶Q及大量的維生素K。東海所,中國(guó)對(duì)蝦,
餌料添加1.2%,增產(chǎn)16.2%。
3、作為魚、蝦、貝幼體的促生長(zhǎng)因子。促進(jìn)幼體生長(zhǎng)、變態(tài),提高成活率。
原因:改善水質(zhì),提高營(yíng)養(yǎng)。日本東京大學(xué),黃蓋鰥仔魚,120ppm,50天,增長(zhǎng)24%,
增重73%。東海所,脊尾白蝦育苗,1000—1400ppm,成活率提高9.5—19.3%。河北水校,
海灣扇貝育苗,成活率提高24.3%,生長(zhǎng)45.9%。
4、作為動(dòng)物性生物餌料的餌料
用于培養(yǎng)輪蟲、鹵蟲、枝角類等動(dòng)物性生物餌料
5、病害的防治作用
防治鯉魚爛鯉病、瞎眼病,金魚的水霉病,黑媚的爛尾病,鰻魚的水霉病和赤鰭病。
二、光合細(xì)菌在應(yīng)用中存在的問題
1、菌種的特異性問題不同菌種使用效果不同
2、培養(yǎng)方法和生產(chǎn)工藝生產(chǎn)出的菌液質(zhì)量問題
3、使用范圍及使用方法
4、使用劑量
5、提高養(yǎng)殖對(duì)象免疫機(jī)能的機(jī)理研究
6、光合細(xì)菌紅色色素的綜合利用
三、光合細(xì)菌在其他領(lǐng)域中的應(yīng)用
1、光合細(xì)菌在禽畜飼養(yǎng)中的應(yīng)用
光合細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值極高,消化率好,作為禽畜飼料的營(yíng)養(yǎng)添加劑,使用后可提高飼料
效率,提高養(yǎng)殖效益。在肉雞的飼養(yǎng)中使用光合細(xì)菌,可提高成活率5%?7%,肉雞增重
15%?17%,料肉比降低33%左右,經(jīng)濟(jì)效益可提高50%以匕在蛋雞養(yǎng)殖中,應(yīng)用光合細(xì)
菌可提高產(chǎn)蛋率12.7%,降低料蛋比12.2%,并且蛋黃中類胡蘿卜素和維生素A的含量提高
20%左右,同時(shí)淡季的換羽期、產(chǎn)蛋期延長(zhǎng)。在豬飼料中添加光合細(xì)菌,可提高增重率13%,
降低發(fā)病率25%,同時(shí)提高瘦肉率。在鶴鶉飼養(yǎng)試驗(yàn)中,添加光合細(xì)菌同樣獲得了高增重
率。
2、光合細(xì)菌在種植業(yè)中的應(yīng)用
光合細(xì)菌被證明是一種優(yōu)質(zhì)的有機(jī)肥料?,又能增強(qiáng)植物的抗病力,可作為底肥或以拌
種和葉面噴施等方式應(yīng)用。光合細(xì)菌可提高土壤肥力。光合細(xì)菌能有效固定大氣中的氮?dú)猓?/p>
從而提高土壤的氮素水平。另外,光合細(xì)菌能有效降解或氧化土壤中的殘留農(nóng)藥,硫化氫和
胺類等有毒化合物,對(duì)土壤起一定解毒作用。光合細(xì)菌還能提高植物的抗病能力。,作為瓜
果的保鮮劑,能延長(zhǎng)瓜果的存放期。
3、光合細(xì)菌在有機(jī)廢水處理中的應(yīng)用
光合細(xì)菌可把廢水中的有機(jī)物轉(zhuǎn)化為簡(jiǎn)單的無(wú)機(jī)物,降低化學(xué)耗氧量和生物耗氧量,減
少水體污染,改善水質(zhì)。用光合細(xì)菌處理豆制品廢水(COD高達(dá)52800mg/L),12小時(shí)后
COD的去除率達(dá)92.7%;用光合細(xì)菌處理淀粉廢水(COD高達(dá)3864mg/L),72小時(shí)后COD
的去除率達(dá)99.5%。目前,應(yīng)用于高濃度有機(jī)廢水處理的光合細(xì)菌主要是紅假單胞菌屬和紅
螺菌屬的菌株。
4、光合細(xì)菌在食品、化妝品、醫(yī)藥保健業(yè)中的應(yīng)用
光合細(xì)菌富含色素。有報(bào)道光合細(xì)菌中細(xì)菌葉綠素含量達(dá)64.5mg/g,類胡蘿卜素含量達(dá)
34.8mg/g?來(lái)源于光合細(xì)菌的類胡蘿卜素作為一種天然色素,在食品、化妝品等工業(yè)中,作
為著色劑有廣泛的應(yīng)用前景。
5、光合細(xì)菌在開發(fā)新能源中的應(yīng)用
氫作為一種理想而無(wú)污染的未來(lái)能源日益受到人們的關(guān)注。生物制氫是開發(fā)新能源的
一個(gè)方向,歐美、日本等均在研究和開發(fā)生物制氫技術(shù)。光合細(xì)菌中許多種類,如紅螺菌屬、
紅假單胞菌屬、莢硫菌屬、硫螺旋菌屬等的光合細(xì)菌在代謝過程中都能放出氫氣。目前研究
較多的是深紅紅螺菌(R.rubrum),它分解有機(jī)物進(jìn)行光合產(chǎn)氫,產(chǎn)氫量高達(dá)65ml/(h?L)
(培養(yǎng)液),比藍(lán)細(xì)菌產(chǎn)氫量高一倍多。
第三節(jié)光合細(xì)菌的分離、培養(yǎng)及保藏
一、光合細(xì)菌的分離方法
光合細(xì)菌菌種的分離是開展光合細(xì)菌培養(yǎng)和應(yīng)用研究的前提。分離的步驟主要有:
1)采樣。根據(jù)光合細(xì)菌生長(zhǎng)所需的條件,有選擇的采集含光合細(xì)菌的水樣和土樣。一般在
有機(jī)物污染嚴(yán)重,缺氧的環(huán)境中采樣。
2)富集培養(yǎng)。光合細(xì)菌分離成功的關(guān)鍵,在于選擇適宜的富集和分離的培養(yǎng)基,提供符合
光合細(xì)菌生長(zhǎng)需要的厭氧環(huán)境,適宜的溫度(25-35℃),一定的光照(5000—100001x)?一
般采用液體富集培養(yǎng)基,重復(fù)多次富集培養(yǎng)。
3)分離純種。將富集后的菌液進(jìn)行固體培養(yǎng)基涂布或劃線培養(yǎng),挑取單菌落,重復(fù)多次分
離,可得純培養(yǎng)(僅有一個(gè)微生物種生長(zhǎng)在培養(yǎng)基中的培養(yǎng))。
二、光合細(xì)菌的培養(yǎng)
1、培養(yǎng)的主要種類
水產(chǎn)上應(yīng)用價(jià)值大的紅螺菌科的紅假單胞菌屬(RJiodopseudomonas)
2、培養(yǎng)方式
1)全封閉式厭氣光照培養(yǎng)主要用于小規(guī)模培養(yǎng)
2)開放式微氣光照培養(yǎng)可用于生產(chǎn)性大規(guī)模培養(yǎng)
3、培養(yǎng)設(shè)施及培養(yǎng)基
1)常規(guī)培養(yǎng)儀器
!滅菌器(烘箱、高壓蒸汽鍋、)!無(wú)菌箱、無(wú)菌室和超凈工作臺(tái)!恒溫光照培養(yǎng)箱!
玻璃器皿(試管、培養(yǎng)皿、移液管、錐形瓶、等)!冰箱或冰柜!顯微鏡和接種環(huán)!
離心機(jī)!真空泵!分析天平!搖床或震蕩器!分光光度計(jì)等。
2)培養(yǎng)基
!富集用基礎(chǔ)培養(yǎng)基!Sawad培養(yǎng)基(分離用)
!酵母膏、蛋白陳培養(yǎng)基(一般富集、分離和培養(yǎng))
!RCVBN培養(yǎng)基(富集、分離和菌種保存)
!矢木修身培養(yǎng)基!VanNeil培養(yǎng)基(用于富集培養(yǎng))
4、培養(yǎng)方法及管理
1)容器和工具的消毒(同藻類培養(yǎng))
2)培養(yǎng)基的配制
!選擇培養(yǎng)基!配制培養(yǎng)基!培養(yǎng)基的滅菌和消毒
3)接種
接種比例:菌種母液:新培養(yǎng)液=1:4—1:1,
4)培養(yǎng)管理
①日常管理和測(cè)試
!攪拌和充氣要求:保持菌體懸浮,并有機(jī)會(huì)接受光照,同時(shí)溶氧小于lmg/1。
!調(diào)節(jié)光照強(qiáng)度要求:?般2000—50001X,高密度5000—lOOOOlx。
!溫度調(diào)節(jié)要求:23-39℃
!酸度測(cè)定和調(diào)節(jié):隨菌液的繁殖,pH會(huì)升高,從而抑制菌體的進(jìn)一步繁殖。必須用酸
調(diào)節(jié)PH,使之界于7-8。
!測(cè)定光密度(O.D.)了解生長(zhǎng)情況。
②生長(zhǎng)情況的觀察檢查
!菌液的顏色變化!O.D.值
③問題的分析和處理
三、光合細(xì)菌的保種
菌種保藏的目的就是把菌株的原始性狀和優(yōu)良性狀保存下來(lái),防止死亡、退化或雜菌
污染。菌種保藏方法很多,現(xiàn)介紹幾種:
(一)低溫保藏法
固體斜面培養(yǎng)或液體培養(yǎng)的菌種用4℃左右低溫冰箱保存,時(shí)間在30-60d,也可在
棉塞上浸蠟,一般可達(dá)3?4個(gè)月,至半年之久。
(-)低溫定期移植保存法
這是一種經(jīng)典的簡(jiǎn)易保存法,即菌種接種于所要求的斜面培養(yǎng)基上,置最適溫度下培養(yǎng),
至菌落形成后,置于低溫、干燥處保存,每隔3?6個(gè)月移植培養(yǎng)一次。
(三)液體石蠟法
選用優(yōu)質(zhì)純凈的液體石峭,經(jīng)121°C高壓滅菌2h,然后用170°C干熱處理1?2h,以
除水分。冷卻后加到斜面上,覆蓋以超過斜面為宜,菌種用的試管用橡皮塞,并用蠟封上,
放陰涼室溫即可。
(四)冷凍干燥法
這是菌種保存比較理想的一種方法,它具有變異少,保臧時(shí)間長(zhǎng),輸送儲(chǔ)存方便等優(yōu)
點(diǎn)。具體操作方法如下:
1.先將內(nèi)徑8mm、長(zhǎng)度100mm以上的安瓶管消毒(2NHCI浸泡、水洗、烘干)
干凈,打印標(biāo)簽裝入安瓶管,塞好棉塞,高壓滅菌。
2.將脫脂牛奶分裝試管,高壓滅菌、冷卻。
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3.培養(yǎng)的菌種培養(yǎng)物分裝到脫脂牛奶試管,制備菌懸液(10~10cell/ml)o
4.用滅菌過的長(zhǎng)的毛細(xì)滴管吸菌懸液(108~109celI/ml),滴入安甑;管0.2ml。
5.安甑管預(yù)冷凍(-30-40℃、0.3-1h)o
6.真空干燥(26.6Pa,真空度:1.5%?3%含水量)。
7.安甑管高溫下拉成細(xì)徑,抽真空、封管,檢查真空度,低溫(4°C)保藏。
(五)氮超低溫保藏
這是一種保藏菌種的好方法,國(guó)內(nèi)外已廣泛使用。具體方法是:將欲保藏的菌種懸液或
菌塊(常用保護(hù)劑為10%甘油或5%?10%二甲基亞硼)密封于安瓶瓶?jī)?nèi),先控制致冷速度,
預(yù)凍后,儲(chǔ)臧于-150~-196℃液態(tài)冰箱中保存,保存期間需注意及時(shí)補(bǔ)充液氮。需恢復(fù)培養(yǎng)
時(shí),取出安瓶瓶急速放入35?40℃溫水中,使其迅速融化后,打開,移種。
第二章單細(xì)胞藻類的培養(yǎng)
單細(xì)胞藻類,通常指只有單個(gè)細(xì)胞組成的藻類個(gè)體,簡(jiǎn)稱單胞藻或微藻。某些單胞藻,
如骨條藻,角毛藻,在生活狀態(tài)下,通常會(huì)有多個(gè)細(xì)胞聚集在一起生長(zhǎng)。單胞藻在水產(chǎn)養(yǎng)殖
上不僅具有營(yíng)養(yǎng)功能,而且還具有調(diào)節(jié)改善水質(zhì),促進(jìn)水體形成穩(wěn)定的藻——菌微生態(tài)系,
抑制致病菌的滋生等功能。在這一章中,主要介紹我國(guó)當(dāng)前水產(chǎn)苗種生產(chǎn)中常用的單細(xì)胞藻
類的培養(yǎng)生態(tài)和應(yīng)用,單細(xì)胞藻類的生長(zhǎng)特點(diǎn)和培養(yǎng)條件,重點(diǎn)介紹單細(xì)胞藻類的培養(yǎng)方法。
第一節(jié)常用單細(xì)胞藻類
在我國(guó),水產(chǎn)養(yǎng)殖上常用的單細(xì)胞藻類主要有綠藻門、硅藻門、金藻門和藍(lán)藻門的種類。
下面介紹我國(guó)水產(chǎn)養(yǎng)殖中常用的單胞藻的培養(yǎng)生態(tài)和應(yīng)用情況。
1、小球藻適宜培養(yǎng)條件:溫度:10~35℃:鹽度:可馴化;最適光強(qiáng):lOOOOlx;最適pH:
6~8
應(yīng)用:培養(yǎng)動(dòng)物性生物餌料,水色及水質(zhì)的調(diào)控。
2微綠球藻(眼點(diǎn)擬微球藻)
適宜培養(yǎng)條件:溫度:25~30℃;鹽度:4-36;最適光強(qiáng):100001X;最適pH:7.5?8.5
應(yīng)用:貝類育苗,河蟹幼體及動(dòng)物性生物餌料,水色及水質(zhì)的調(diào)控。
3、亞心形扁藻
適宜培養(yǎng)條件:溫度:20?28℃;鹽度:30?40;光強(qiáng):5000-10000lx;最適pH:7.5?8.5
應(yīng)用:貝類育苗,輪蟲培養(yǎng)
4、三角褐指藻
適宜培養(yǎng)條件:溫度:10~15℃;鹽度:25~32;光強(qiáng):3000?50001x;最適pH:7.5?8.5
應(yīng)用:甲殼類、貝類及棘皮動(dòng)物的幼體餌料
5、小新月菱形藻適宜培養(yǎng)條件:溫度15?20℃;鹽度:25?32;光強(qiáng):3000-8000lx;最
適pH:7.5?8.5
應(yīng)用:甲殼類、貝類及棘皮動(dòng)物的幼體餌料
6、牟氏角毛藻
適宜培養(yǎng)條件:最適溫度:30℃;鹽度:10-15;光強(qiáng):10000?15000lx;最適pH:
8.0-8.9
應(yīng)用:斑節(jié)對(duì)蝦、泥蚪育苗
7、中肋骨條藻適宜培養(yǎng)條件:溫度:20-30℃;鹽度:15~30;光強(qiáng):5000lx:最適pH:
7.5?8.5
應(yīng)用:斑節(jié)對(duì)蝦、河蟹育苗
8、等鞭金藻3011適宜培養(yǎng)條件:最適溫度:20?30℃;鹽度:10~30;光強(qiáng):7000?9000lx;
最適pH:7.5~8.5
應(yīng)用:貝類及棘皮動(dòng)物的育苗9、湛江等鞭金藻適宜培養(yǎng)條件:最適溫度:25-32℃;
鹽度:22.7-35.8;光強(qiáng):5000-1lOOOIx;最適pH:7.5?8.5應(yīng)用:貝類及棘皮動(dòng)物的育苗
10、鈍頂螺旋藻
適宜培養(yǎng)條件:最適溫度:30?37℃;鹽度:可馴化;光強(qiáng):30000-350001X;最適pH:
8.6?9.5應(yīng)用:觀賞魚配合餌料、貝類和甲殼類育苗
第二節(jié)單細(xì)胞藻類的培養(yǎng)方式和培養(yǎng)設(shè)施
細(xì)胞藻類的培養(yǎng)方式
從不同的角度,單細(xì)胞藻類的培養(yǎng)方式可有多種分法0
從培養(yǎng)的純度看,有純培養(yǎng)、單種培養(yǎng)利混合培養(yǎng)之分。純培養(yǎng):即無(wú)菌培養(yǎng),是指排
除了包括細(xì)菌在內(nèi)的一切生物的條件下進(jìn)行的培養(yǎng)。純培養(yǎng)的要求最為嚴(yán)格。生產(chǎn)性培養(yǎng)中
很難做到。單種培養(yǎng)指可有細(xì)菌存在但無(wú)其他藻類存在的培養(yǎng)。水產(chǎn)上室內(nèi)水泥池培養(yǎng)一般
多為單種培養(yǎng)。混合培養(yǎng),也稱多種培養(yǎng),是指一培養(yǎng)體系中同時(shí)存在兩種以上的微藻細(xì)胞,
各種微藻細(xì)胞同時(shí)生長(zhǎng)。在室外土池施肥培養(yǎng)單細(xì)胞藻類是一典型的混合培養(yǎng)。
按培養(yǎng)體系的密閉性,則可分開放式培養(yǎng)和封閉式培養(yǎng)。開放式培養(yǎng)指藻液直接與外界
空氣相通的一種培養(yǎng)方式,是目前水產(chǎn)用途單胞藻培養(yǎng)的主要形式,培養(yǎng)設(shè)備簡(jiǎn)單,培養(yǎng)體
系可大可小,但培養(yǎng)過程中易受敵害生物的污染。封閉式培養(yǎng)指在一相對(duì)封閉的體系中培養(yǎng)
單胞藻,這種培養(yǎng)方式主要用于保種,有時(shí)也用于生產(chǎn)性培養(yǎng)中藻種級(jí)培養(yǎng)。
按采收的方式,則有一次性培養(yǎng)、半連續(xù)培養(yǎng)和連續(xù)培養(yǎng)之分。
按培養(yǎng)的目的和規(guī)模,則可分藻種培養(yǎng)(?級(jí)培養(yǎng))、中繼培養(yǎng)(二級(jí)培養(yǎng))和生產(chǎn)
性培養(yǎng)(三級(jí)培養(yǎng))。藻種培養(yǎng)(一級(jí)培養(yǎng)),指以保存藻種為目的藻類培養(yǎng),多采用封閉式
不充氣培養(yǎng)方式培養(yǎng)。中繼培養(yǎng)(二級(jí)培養(yǎng)),指為生產(chǎn)性培養(yǎng)提供大量藻種為目的藻類培
養(yǎng),可采用封閉式或開放式培養(yǎng)方式。生產(chǎn)性培養(yǎng)(三級(jí)培養(yǎng))是以大量生產(chǎn)藻細(xì)胞為目的
培養(yǎng),多采用開放式(封閉式)充氣培養(yǎng)。
二、單細(xì)胞藻類的培養(yǎng)設(shè)施
完整的單細(xì)胞藻類培養(yǎng)設(shè)施一般包括如下幾部分:
1、藻種室:藻種室是進(jìn)行藻種的分離、培養(yǎng)及保存的場(chǎng)所。也是開展藻類生長(zhǎng)情況微
觀檢查的場(chǎng)所。面積一般不超過10平方米,保溫性能良好,一般要求內(nèi)墻面及臺(tái)面鋪設(shè)白
色瓷磚,易清潔消毒,防污染能力強(qiáng),應(yīng)配有恒溫光照培養(yǎng)箱、顯微鏡、酒精燈、接種針、
人工光源、操作平臺(tái)等設(shè)備,以及三角燒瓶等玻璃器皿和各種營(yíng)養(yǎng)鹽及試劑。
2、清洗消毒室:是進(jìn)行培養(yǎng)器皿和工具清洗及消毒的場(chǎng)所。面積一般在10?15平方米。
應(yīng)配備有清洗水池、消毒池等設(shè)施和烘箱、高壓蒸汽滅菌鍋、爐灶等設(shè)備。
3、培養(yǎng)室:進(jìn)行藻類的中繼培養(yǎng)和生產(chǎn)性培養(yǎng)的場(chǎng)所。裝配有培養(yǎng)容器、培養(yǎng)架和培
養(yǎng)池等設(shè)施。設(shè)計(jì)上要求采光好,屋頂一般用透光的玻璃鋼波紋板覆蓋,最好東西走向。配
備有人工光源,最好可調(diào)溫。
4、培養(yǎng)容器:主要有各種規(guī)格的三角燒瓶、廣口玻璃缸、細(xì)口玻璃瓶、透明塑料袋等。
主要用于小型培養(yǎng)和中繼培養(yǎng)。
5、培養(yǎng)池:用于生產(chǎn)性培養(yǎng)用,一般池深80厘米,面積在2—10平方米。池內(nèi)壁貼白
色瓷磚。
6、水處理系統(tǒng):?jiǎn)渭?xì)胞藻類培養(yǎng)比苗種培養(yǎng)對(duì)用水的要求更嚴(yán)格。在單胞藻培養(yǎng)用水
處理系統(tǒng)中通常需配備過濾裝置和消毒池。最常用的過濾裝置為沙濾池。
7、充氣系統(tǒng):在生產(chǎn)性培養(yǎng)中,為了促進(jìn)藻類生長(zhǎng),常需往培養(yǎng)池中充氣,可利用育
苗池的充氣系統(tǒng)。但為了預(yù)防敵害生物通過空氣污染藻液,空氣在注入藻液之前最好經(jīng)過空
氣過濾器或洗氣裝置。
第三節(jié)單細(xì)胞藻類的繁殖特性及影響藻類繁殖的因子
一、一次性培養(yǎng)中單細(xì)胞藻類生長(zhǎng)繁殖特性
在一次性培養(yǎng)中,藻類的生長(zhǎng)繁殖表現(xiàn)出一特定的模式曲線(圖1),自接種后,藻類
的生長(zhǎng)繁殖可依次分成五個(gè)時(shí)期,依次為延緩期,指數(shù)生長(zhǎng)期,相對(duì)生長(zhǎng)下降期,靜止期利
死亡期。
(一)、延緩期
延緩期藻類的生長(zhǎng)特點(diǎn):接種后的短時(shí)間內(nèi)藻類繁殖緩慢,細(xì)胞數(shù)無(wú)明顯改變。
為什么會(huì)出現(xiàn)延緩期,推測(cè)原因有三個(gè):
1、藻種質(zhì)量問題。接種的藻種來(lái)自不良環(huán)境或藻種“老化”,其新陳代謝慢,部分藻細(xì)
胞酶活力低下,不能分裂繁殖,表現(xiàn)為群體細(xì)胞數(shù)目增加不明顯。
2、藻種數(shù)量問題。接種的藻種數(shù)量偏少,培養(yǎng)液中缺乏一定數(shù)量的由生活藻細(xì)胞自身
產(chǎn)生的能夠促生長(zhǎng)繁殖的生物活性物質(zhì)。
3、新舊培養(yǎng)液成分的差異。藻類細(xì)胞由舊的環(huán)境轉(zhuǎn)移到新環(huán)境中,所處的環(huán)境條件變
化過大,此時(shí)藻細(xì)胞必須重建某些醐成分,以適應(yīng)新的生長(zhǎng)環(huán)境。
(二)、指數(shù)生長(zhǎng)期
指數(shù)生長(zhǎng)期藻類的生長(zhǎng)特點(diǎn):細(xì)胞迅速生長(zhǎng)繁殖,藻細(xì)胞數(shù)量隨培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)呈幾何
級(jí)數(shù)遞增。其生長(zhǎng)繁殖效率可用相對(duì)生長(zhǎng)常數(shù)K表示。
K=(InN—lnN(,)/T
影響藻類生長(zhǎng)繁殖效率有:
1、培養(yǎng)條件。對(duì)于特定的藻類,在最適宜的培養(yǎng)條件下,藻類具有最高的生長(zhǎng)繁殖效
率。
2、藻的品種。同一個(gè)品系的藻,在相同的培養(yǎng)條件下有基本恒定的K值。而不同的藻
類或同?種藻的不同品系,在相同的培養(yǎng)條件下一般有不同的K值。
5
1:延Z熔帝加一死亡期
(三)、相對(duì)生長(zhǎng)下降期
相對(duì)生長(zhǎng)下降期藻類的生長(zhǎng)特點(diǎn):藻細(xì)胞繁殖趨緩,細(xì)胞數(shù)量增加速度減慢。
相對(duì)生長(zhǎng)下降期產(chǎn)生的原因是隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng),培養(yǎng)液中產(chǎn)生了藻類生長(zhǎng)限制因
子,主要有以下幾個(gè)方面:
1、營(yíng)養(yǎng)鹽耗凈。培養(yǎng)液中剩余的營(yíng)養(yǎng)鹽已不足以支持藻細(xì)胞繼續(xù)快速生長(zhǎng)繁殖。
2、二氧化碳供應(yīng)不足。由于藻類的生長(zhǎng)是通過光合作用利用二氧化碳和水進(jìn)行的,
經(jīng)過指數(shù)生長(zhǎng)期之后,藻細(xì)胞密度增高,光合作用強(qiáng),而二氧化碳的供應(yīng)不足,限制了光合
反應(yīng)的進(jìn)行,最終導(dǎo)致了藻細(xì)胞生長(zhǎng)速度的下降。
3、培養(yǎng)液酸堿度改變。由于藻類的生長(zhǎng)需要利用水體中的二氧化碳才能有效進(jìn)行光合
作用,而藻細(xì)胞的呼吸作用是釋放二氧化碳。二氧化碳在水體中還起到緩沖培養(yǎng)液酸堿度的
作用。在藻細(xì)胞密度高的情況下,藻類呼吸作用和光合作用引起的pH的變化很明顯,往往
超出了藻細(xì)胞能夠正常生長(zhǎng)的耐受范圍,最終使藻細(xì)胞的生長(zhǎng)速度降慢。
另外,由于培養(yǎng)液中某些特殊的營(yíng)養(yǎng)鹽成分被優(yōu)先吸收,也會(huì)使培養(yǎng)液的pH發(fā)生變化,
超出藻細(xì)胞正常的生長(zhǎng)范圍而影響藻的生長(zhǎng)。如,當(dāng)培養(yǎng)液中只添加硝酸鈉作為氮源,藻細(xì)
胞大量吸收利用硝酸根,會(huì)使培養(yǎng)液的pH上升。相反,當(dāng)只使用硫酸鐵為氮源,藻細(xì)胞吸
收利用鏤根,使培養(yǎng)液的pH下降。
4、藻類細(xì)胞濃度過密,光照不足。致使藻液內(nèi)部的藻細(xì)胞不能獲取足夠的光照進(jìn)行繁
殖?導(dǎo)致整體增長(zhǎng)速度減慢。
5、藻類代謝廢物的自體抑制。藻類生長(zhǎng)過程中分泌的某些代謝產(chǎn)物在培養(yǎng)液中積累到
?定濃度,對(duì)藻自身生長(zhǎng)繁殖有抑制作用。
在單細(xì)胞藻類的一次性培養(yǎng)過程中,由于上述限制因子的產(chǎn)生是必然的,因此指數(shù)生長(zhǎng)
期不能無(wú)限持續(xù),藻類細(xì)胞的增長(zhǎng)必然會(huì)進(jìn)入相對(duì)生長(zhǎng)下降期。
(四)、靜止期
在相對(duì)生長(zhǎng)下降期內(nèi),由于限制因子的作用不斷增加,藻類生長(zhǎng)逐漸下降,最終生長(zhǎng)停
止,進(jìn)入靜止期。在靜止期,新生的藻細(xì)胞數(shù)和死亡的藻細(xì)胞數(shù)趨于平衡,藻液中藻細(xì)胞數(shù)
保持相對(duì)恒定。
(五)、死亡期
在死亡期內(nèi),藻細(xì)胞大量老化死亡,細(xì)胞數(shù)量迅速減少。不同的藻類及不同的培養(yǎng)條件,
死亡期出現(xiàn)的時(shí)間有很大的差異。有些藻類(如小球藻)的靜止期可持續(xù)兒星期甚至幾月,
而另一些藻類(如有鞭毛金藻)在進(jìn)入相對(duì)生長(zhǎng)下降期后不久,即出現(xiàn)大量死亡。
二、單細(xì)胞藻類生長(zhǎng)繁殖特性在培養(yǎng)生產(chǎn)中的應(yīng)用
單細(xì)胞藻類一次性培養(yǎng)的生長(zhǎng)特點(diǎn),可用于指導(dǎo)實(shí)際的藻類培養(yǎng)工作。為了能夠在有限
的時(shí)間內(nèi)培養(yǎng)出最大的藻細(xì)胞數(shù)量,如何縮短甚至消除藻類接種后出現(xiàn)延緩期,如何增加藻
類在指數(shù)生長(zhǎng)期的生長(zhǎng)效率,如何延長(zhǎng)指數(shù)生長(zhǎng)期,推遲相對(duì)生長(zhǎng)下降期的出現(xiàn),是成功進(jìn)
行藻類培養(yǎng)必需面對(duì)的問題。
(一)、如何縮短或消除延緩期的出現(xiàn)
1、縮短延緩期在藻類培養(yǎng)上的重要性
單細(xì)胞藻類接種后延緩期的長(zhǎng)短,很大程度上決定著隨后培養(yǎng)的成敗。接種后延緩期越
短,接種培養(yǎng)成功的可能性越大。反之,若接種后藻細(xì)胞遲遲不能進(jìn)入指數(shù)生長(zhǎng)期,則培養(yǎng)
失敗的風(fēng)險(xiǎn)也越大。因此,生產(chǎn)上必需采取有效措施,來(lái)縮短甚至消除單胞藻接種后出現(xiàn)的
延緩期。
2、縮短或消除藻類接種后出現(xiàn)延緩期的措施,主要有三條:
1)選擇處于新陳代謝快,生長(zhǎng)旺盛(處于指數(shù)生長(zhǎng)期)的藻細(xì)胞作藻種。
2)接種時(shí)保證藻種的濃度達(dá)到一定的數(shù)量,選擇偏高濃度接種。
3)選擇合適的培養(yǎng)液(包括配方組成及營(yíng)養(yǎng)鹽濃度),減少新舊培養(yǎng)液之間的營(yíng)養(yǎng)鹽差
異。
(二)、如何增加指數(shù)生長(zhǎng)期的生長(zhǎng)效率
指數(shù)生長(zhǎng)期藻類的生長(zhǎng)效率,與藻的種類、品系和培養(yǎng)條件有關(guān)。因此,對(duì)于一特定的
培養(yǎng)種類,要選擇生長(zhǎng)性能優(yōu)良的品系,同時(shí)提供其生長(zhǎng)的最佳環(huán)境和營(yíng)養(yǎng)水平。
(三)、如何延長(zhǎng)指數(shù)生長(zhǎng)期,推遲相對(duì)生長(zhǎng)下降期出現(xiàn)
根據(jù)培養(yǎng)中藻類相對(duì)生長(zhǎng)下降期產(chǎn)生的原因,推遲相對(duì)生長(zhǎng)下降期出現(xiàn)(即延長(zhǎng)指數(shù)生
長(zhǎng)期)的措施可有:
1、適時(shí)添加營(yíng)養(yǎng)鹽,保證培養(yǎng)液中充足的營(yíng)養(yǎng)。
2、人工充二氧化碳,保證藻液中二氧化碳不成為生長(zhǎng)的限制因子。在生產(chǎn)中可間歇充
含1%~5%二氧化碳的混合空氣,以達(dá)到補(bǔ)充二氧化碳的目的。
3、定期檢測(cè)并調(diào)整培養(yǎng)液的pH,使之處于藻類生長(zhǎng)的適宜范圍。
4、增強(qiáng)光照強(qiáng)度,保證充足的光照。
5、改變培養(yǎng)方式,變一次性培養(yǎng)為半連續(xù)培養(yǎng),及時(shí)稀釋培養(yǎng)液中的有自體抑制作用
的代謝廢物。
三、影響單細(xì)胞藻類生長(zhǎng)的環(huán)境因子
單細(xì)胞藻類和其他生物一樣,與生活環(huán)境有密切關(guān)系。影響培養(yǎng)單細(xì)胞藻類生長(zhǎng)的外界
環(huán)境因子主要有以下幾個(gè)。
(一)、光照
單細(xì)胞藻類同所有綠色植物一樣,只有在光照的條件下才能進(jìn)行光合作用。光照是影響
單胞藻生長(zhǎng)繁殖最重要的因子之一。光照對(duì)單細(xì)胞藻類的影響通過光源、光質(zhì)(光的波長(zhǎng))、
光量(光照強(qiáng)度)、光周期和供光方式等途徑來(lái)實(shí)現(xiàn)。
(二)、溫度
在一定的溫度范圍內(nèi),某種單細(xì)胞藻類的生長(zhǎng)繁殖等生命活動(dòng)才能正常進(jìn)行,這一溫度
范圍稱為該藻的適宜溫度范圍。在適溫范圍內(nèi),藻類生長(zhǎng)繁殖最快,生命活動(dòng)最旺盛的溫度
幅度,為該藻的最適溫度。不同藻類有不同的適應(yīng)溫度范圍和最適溫度。某種藻類的適溫范
圍還可能受其它培養(yǎng)條件(營(yíng)養(yǎng)鹽濃度、光照等)的影響。根據(jù)藻類對(duì)溫度的適應(yīng)范圍的大
小,可分為廣溫性藻類、狹溫性藻類。根據(jù)藻類對(duì)適應(yīng)溫度的高低,可分為高溫性藻類和低
溫性藻類。
(三)、鹽度
同溫度一樣,每一種藻類都存在適宜鹽度范圍和最適鹽度。根據(jù)藻類對(duì)鹽度適應(yīng)范圍的
大小,可分廣鹽性藻和狹鹽性藻。
(四)、營(yíng)養(yǎng)
藻類生長(zhǎng)繁殖所必需的營(yíng)養(yǎng)元素有常量元素(碳、氫、氧、氮、硫、磷、鉀、鈣、鎂、
鐵等),微量元素(硼、錦、鋅、銅、鉗、鈉、硅、鉆、機(jī)、錮等),輔助生長(zhǎng)因子(一些溶
解性的有機(jī)物,主要指??些維生素,VB|2、VB|、VH、生物素、檸檬酸、葉酸等),土壤抽
出液(土壤抽出液中含有單細(xì)胞藻類生長(zhǎng)需要的微量元素和輔助生長(zhǎng)有機(jī)物質(zhì),添加適量的
土壤抽出液于藻類培養(yǎng)液中,對(duì)藻類的培養(yǎng)有促進(jìn)作用)以及植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑(植物生長(zhǎng)激
素等)幾類。在單細(xì)胞藻類培養(yǎng)中,根據(jù)培養(yǎng)對(duì)象的營(yíng)養(yǎng)需求,采用合理的配方,配成對(duì)藻
類生長(zhǎng)繁殖最有利的培養(yǎng)液,對(duì)提高培養(yǎng)效率是十分重要的。
(五)、二氧化碳
對(duì)單胞藻而言,二氧化碳是一種比較特殊的碳營(yíng)養(yǎng)素。二氧化碳的供給,不但是藻類生
長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)所需,也是維持藻液酸堿度平衡的重要措施。在藻類培養(yǎng)過程中,通過攪拌或
晃動(dòng)藻液,或給培養(yǎng)的藻液充氣,都能提供?定二氧化碳。但在高密度培養(yǎng)藻類時(shí),上述措
施不能提供足夠的二氧化碳,必須充含1%~5%二氧化碳的混合氣體。此外,也可在某些培
養(yǎng)液中添加碳酸氫鈉作為補(bǔ)充碳源。必須注意,培養(yǎng)液中過多的二氧化碳對(duì)藻細(xì)胞有毒害作
用。
(六)、酸堿度
各種單胞藻對(duì)酸堿度各有一定的適應(yīng)范圍。新配制的培養(yǎng)液的pH必須適合培養(yǎng)藻類的
要求。
(七)、生物因子
生物因子的存在,對(duì)藻類培養(yǎng)的影響有兩方面,一是互利共生,另一是種間斗爭(zhēng)。生物
因子的存在,通常是造成單細(xì)胞藻類培養(yǎng)過程中污染發(fā)生、培養(yǎng)失敗的最常見原因。
在單細(xì)胞藻類的實(shí)際培養(yǎng)中,以上各種影響因子對(duì)單細(xì)胞藻類的影響作用并不是孤立
的,相互之間存在協(xié)同作用或頡頑作用。如,溫度會(huì)影響藻類的最適光強(qiáng)和最適光周期,營(yíng)
養(yǎng)因素也會(huì)影響藻類的適宜光照條件和適宜的溫度條件。因此,在選擇培養(yǎng)條件時(shí),因統(tǒng)籌
考慮,抓住影響培養(yǎng)效果的主要因子,進(jìn)行必要的調(diào)整。
第四節(jié)單細(xì)胞藻類的培養(yǎng)方法
單細(xì)胞藻類的培養(yǎng)過程可分為容器和工具的消毒,培養(yǎng)液的配制,接種、培養(yǎng)管理及采
收五個(gè)步驟。
一、容器和工具的消毒
消毒的目的是為了消滅培養(yǎng)藻類的捕食者和競(jìng)爭(zhēng)者。藻種級(jí)培養(yǎng)(純培養(yǎng))需滅菌,可
將容器和工具放入高壓滅菌鍋115℃滅菌15分鐘?30分鐘。生產(chǎn)性藻類培養(yǎng)(單種培養(yǎng))通
常采用消毒。常見的消毒方法有:
(一)、加熱消毒法
此法只限用于耐高溫的容器和工具的消毒。具體有如下四種:
1、高壓滅菌
2、直接灼燒滅菌。適用于小型金屬或玻璃工具的消毒。
3、煮沸消毒。將待消毒的工具放入沸水中煮5分鐘~10分鐘。適用于小型容器或工具
4、烘箱干燥消毒。將待消毒的工具用牛皮紙包扎后放入烘箱,在120℃?160℃恒溫烘
烤2小時(shí),待烘箱溫度自然降至60℃以下可拿出。
(二)、化學(xué)藥品消毒法
此法應(yīng)用于生產(chǎn)性培養(yǎng)中大型容器,工具及水池的消毒。常采用如下四種方法:
1、用70%濃度的酒精溶液涂抹消毒10分鐘。
2、用濃度為300mg/L高鎰酸鉀溶液浸泡淋洗5分鐘~10分鐘。
3、用3%?5%濃度的苯酚溶液浸泡消毒30分鐘。
4、用10%的工業(yè)鹽酸浸泡消毒5分鐘。
凡是用化學(xué)藥品消毒好的容器和工具,在使用前應(yīng)用消毒水沖洗2?3次,以消除殘留在
器具上的化學(xué)藥品。
二、培養(yǎng)液的配制
培養(yǎng)液的配制是指根據(jù)培養(yǎng)藻類對(duì)各種營(yíng)養(yǎng)鹽的需求水平,在經(jīng)消毒的培養(yǎng)用水中添加
適量營(yíng)養(yǎng)鹽及生長(zhǎng)因子。配制合適的培養(yǎng)液是開展藻類培養(yǎng)的基礎(chǔ)。包括培養(yǎng)用水的消毒,
配方的選擇和營(yíng)養(yǎng)鹽的計(jì)算,營(yíng)養(yǎng)鹽的添加等步驟。
培養(yǎng)用水的消毒通??刹捎靡韵路椒ǎ?/p>
1、加熱消毒法,加熱消毒法多在藻種培養(yǎng)中應(yīng)用。
2、過濾除害法,二次過濾或采用雙層300目篩絹網(wǎng)(中間夾一層脫脂棉)過濾,只在
三級(jí)培養(yǎng)中應(yīng)用。
3、有效氯消毒法,過濾水用20?100毫克/升的有效氯處理6-8小時(shí)后,用25毫克/升
大蘇打還原,并充分暴氣4?6小時(shí),用酸性碘化鉀——淀粉試劑測(cè)定無(wú)余氯存在即
可使用。次氯酸鈉消毒法一般用于中繼培養(yǎng)和生產(chǎn)性培養(yǎng)中。
根據(jù)培養(yǎng)藻類對(duì)營(yíng)養(yǎng)鹽的需求,選擇合適的培養(yǎng)液配方。不同的藻類,對(duì)營(yíng)養(yǎng)鹽的需求
水平不同。配方的選擇見教材,83?86頁(yè)。
為了使用方便,通常將培養(yǎng)液配方中的營(yíng)養(yǎng)鹽先配成高濃度的母液。在配制培養(yǎng)液的使
用液時(shí),只需吸取一定量的各種營(yíng)養(yǎng)鹽母液添加到消毒后的培養(yǎng)用水中,使培養(yǎng)用水中各營(yíng)
養(yǎng)鹽達(dá)到配方所需的水平。
在往消毒后的培養(yǎng)水中添加營(yíng)養(yǎng)鹽時(shí),應(yīng)待消毒海水正常后,逐一加入營(yíng)養(yǎng)鹽,并在下
一種營(yíng)養(yǎng)鹽加入之前進(jìn)行充分?jǐn)嚢?。營(yíng)養(yǎng)鹽加入的順序:先氮后磷再鐵……,直至所有營(yíng)養(yǎng)
鹽都按需加入到消毒水中。
三、接種
藻類接種,就是選好的藻種添加到新配好的培養(yǎng)液中。成功接種的關(guān)鍵是把握好藻種的
質(zhì)量、藻種的數(shù)量和接種的時(shí)間。
作為藻種的藻液,在質(zhì)量上要求:無(wú)敵害生物污染、生活力強(qiáng)、生長(zhǎng)旺盛,處于指數(shù)生
長(zhǎng)期階段;藻液的外觀顏色正常,無(wú)大量沉淀和明顯附壁現(xiàn)象。對(duì)于有運(yùn)動(dòng)能力的種類,還
要求上浮明顯。
接種時(shí)藻種的數(shù)量,要求:藻種的藻細(xì)胞濃度達(dá)到或接近藻液的采收濃度,并掌握好藻
種量和培養(yǎng)液量的比例。在條件許可時(shí),藻種量盡可能大,藻種級(jí)培養(yǎng)時(shí)藻種量與培養(yǎng)液量
之比為1:2~1:3,中繼培養(yǎng)和生產(chǎn)性培養(yǎng)的接種比例一般不小于1:10-1:20。按接種后
藻液的細(xì)胞濃度算,金藻和硅藻的接種密度應(yīng)在50萬(wàn)細(xì)胞/亳升以上,扁藻的接種密度應(yīng)在
10萬(wàn)細(xì)胞/毫升以匕小球藻和微綠球藻的接種密度應(yīng)在100萬(wàn)細(xì)胞/毫升左右。培養(yǎng)池容量
大,藻種量不夠時(shí),可采取分次添加培養(yǎng)液的方法,來(lái)保證高比例接種。
藻類接種時(shí)間,一般應(yīng)選擇在晴天上午8時(shí)?10時(shí)接種,這樣能夠把上浮的、運(yùn)動(dòng)能力
強(qiáng)的、生命力旺盛的藻細(xì)胞選作藻種,以縮短接種后的延緩期。
四、單細(xì)胞藻的培養(yǎng)管理
單細(xì)胞藻類的培養(yǎng)管理工作可分為兩大部分,即日常管理和敵害生物的防治。有關(guān)單細(xì)
胞藻類培養(yǎng)過程中敵害生物的防治,將在后面介紹。培養(yǎng)過程中的日常管理工作包括兩大塊:
1、藻細(xì)胞生長(zhǎng)環(huán)境因子的監(jiān)測(cè)和調(diào)控。如,定期攪拌和充氣,以供給二氧化碳,防止
藻細(xì)胞下沉,防止藻液面形成菌膜;調(diào)節(jié)光照、調(diào)節(jié)溫度、調(diào)節(jié)pH(多選用1N的鹽酸或
氫氧化鈉)等以維持藻類最佳的生長(zhǎng)環(huán)境。
2、藻液生長(zhǎng)情況檢查。宏觀上,可檢查藻液的顏色、藻細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)或懸浮的情況、有
無(wú)藻細(xì)胞沉淀或附壁,有無(wú)菌膜或敵害的產(chǎn)生等。微觀上,可在顯微鏡下檢查藻細(xì)胞的形態(tài)
有無(wú)異常,有無(wú)敵害生物的出現(xiàn),藻細(xì)胞數(shù)量增加情況等。
五、單細(xì)胞藻類的采收
正常情況下,當(dāng)培養(yǎng)的藻類進(jìn)入相對(duì)生長(zhǎng)下降期,即可考慮采收。為了準(zhǔn)確界定所培養(yǎng)
的藻類是否進(jìn)入相對(duì)生長(zhǎng)下降期,在培養(yǎng)過程中必需測(cè)定藻細(xì)胞的增長(zhǎng)數(shù)量。準(zhǔn)確掌握所培
養(yǎng)藻類的細(xì)胞密度,既是培養(yǎng)管理所需,也是單胞藻作為餌料投喂時(shí)所應(yīng)了解的。
(一)、單細(xì)胞藻類的定量方法
1、細(xì)胞計(jì)數(shù)法:用血球計(jì)數(shù)板計(jì)算培養(yǎng)液中藻細(xì)胞的數(shù)量是目前最常用的一種定量方
法。
2、光密度法:在一定培養(yǎng)條件下,藻液在特定波長(zhǎng)下的吸光度與細(xì)胞密度成正比。
3、重量法:?jiǎn)挝惑w積藻液中藻細(xì)胞的干重。
4、濃縮細(xì)胞體積法:?jiǎn)挝惑w積藻液離心后下沉藻細(xì)胞的體積。
(二)、單胞藻的采收
當(dāng)前水產(chǎn)養(yǎng)殖上單胞藻的使用基本上是現(xiàn)培養(yǎng)現(xiàn)用,使用時(shí)連同大量的培養(yǎng)液一起投喂
到種苗培育池。這樣的使用方式一方面影響培苗效果,另一方面也不利于藻液的運(yùn)輸和存儲(chǔ)。
因此,改變單胞藻的采收和使用方式,變的越來(lái)越重要。藻細(xì)胞的采收有以下兒種方法:
1、使用連續(xù)式離心分離機(jī):設(shè)備貴,能耗大,產(chǎn)品好。
2、過濾收集:只適合采收大型的單胞藻或集群?jiǎn)渭?xì)胞藻類
3、沉淀收集:對(duì)綠藻較為適用。具體可分黑暗自然沉降和藥物沉降兩種,前者效率低,
后者影響產(chǎn)品質(zhì)量。
第五節(jié)單細(xì)胞藻類生產(chǎn)中的敵害防治
敵害生物的污染和危害是造成當(dāng)前單胞藻培養(yǎng)不穩(wěn)定的主要原因。
一、單胞藻培養(yǎng)過程中敵害生物的危害
敵害生物對(duì)單胞藻的危害有兩方面:?是掠食,如輪蟲、游仆蟲、尖鼻蟲、變形蟲等。
另一方面,有些敵害生物通過分泌有害物質(zhì)對(duì)單胞藻起抑制和毒害作用。這種危害往往比直
接掠食的危害程度更嚴(yán)重。
二、單胞藻培養(yǎng)過程中敵害生物的污染途徑
有六條:1、培養(yǎng)用水;2、空氣傳播;3、容器和工具;4、肥料或營(yíng)養(yǎng)鹽;5、某些昆
蟲;6、不嚴(yán)格的操作。
三、單胞藻培養(yǎng)過程中敵害生物的預(yù)防
對(duì)待單胞藻培養(yǎng)過程中敵害生物的污染,應(yīng)采取以防為主,防治結(jié)合的措施。在實(shí)際培
養(yǎng)中,堅(jiān)持以下措施,可有效預(yù)防敵害生物的污染:
1、培養(yǎng)室嚴(yán)禁非工作人員進(jìn)入。工作人員必須穿水靴,培養(yǎng)室門口應(yīng)設(shè)置水靴消毒池,
池內(nèi)裝有100毫克/升以上有效氯濃度的次氯酸鈉溶液水或300毫克/升的高缽酸鉀溶液,進(jìn)
培養(yǎng)室水靴要消毒。
2、加強(qiáng)操作人員的防污染意識(shí),做到消毒海水中和前、施肥前、接種及添加培養(yǎng)液前
必須洗手。嚴(yán)禁用手直接接觸藻液。
3、培養(yǎng)池及培養(yǎng)用水需經(jīng)足量消毒后方可使用。
4、水泵等工具必須每天消毒,消毒后的水泵及工具在使用前嚴(yán)禁放在未經(jīng)消毒的地方。
5、不同藻、不同池的用具在未經(jīng)消毒前嚴(yán)禁混用,以免交叉污染。
6、在水溫較高時(shí)適當(dāng)提高消毒用藥濃度并把好接種關(guān)(藻種的質(zhì)、量、接種時(shí)間),保
持培養(yǎng)藻類的生長(zhǎng)優(yōu)勢(shì)和數(shù)量?jī)?yōu)勢(shì),防止敵害生物的繁殖。
7、調(diào)節(jié)培養(yǎng)的環(huán)境條件,使之盡可能滿足藻類的適宜生長(zhǎng)的要求。
8、做好藻種的分離、培養(yǎng)和供應(yīng)工作,對(duì)一些培養(yǎng)時(shí)間長(zhǎng)的藻種要及時(shí)進(jìn)行提純和復(fù)
壯。
9、發(fā)生嚴(yán)重?cái)澈ι镂廴镜脑逡?,要先?00毫克/升有效氯殺滅后在放掉,以免污染
水道。
四、清除、抑制或殺滅藻液中的敵害生物的方法
在某些情況下,如生產(chǎn)性培養(yǎng)后期,在采收前發(fā)現(xiàn)藻液有輕度污染,可選擇以下方法清
除、抑制和殺滅敵害生物:
1、過濾法清除大型敵害生物。
2、使用藥物抑制或殺滅敵害生物。
3、改變環(huán)境條件殺滅敵害生物。
第六節(jié)微藻的營(yíng)養(yǎng)作用
一、微藻的生化成分
微藻的生化成分與其生長(zhǎng)階段、培養(yǎng)條件如光照強(qiáng)度和頻率、溫度、培養(yǎng)液等密切相關(guān)。
總的來(lái)說,微藻蛋白質(zhì)的含量為15%?40%DW,脂肪含量為5%?20%DW,碳水化合物含
量為5%~12%DW(表1)。
二、微藻的脂類營(yíng)養(yǎng)
1.微藻的脂類含量和脂肪酸組成特點(diǎn)
微藻的脂類主要分為兩大類,中性脂和極性脂。前者主要由甘油三酯,固醇酯類,游離
脂肪酸組成。后者主要由磷脂和糖脂組成。總脂的含量一般在7%~20%(表1和2),磷脂
占總脂的40%?70%(表2)。微藻的極性脂中,相當(dāng)部分是磷脂,磷脂對(duì)于魚蝦蟹幼體的發(fā)
育和生長(zhǎng)具有重要的作用,微藻中如此高的磷脂含量(魚油,山于主要來(lái)源于儲(chǔ)存脂,幾乎
都是甘油三酯,沒有磷脂)決定了其對(duì)魚蝦蟹幼體高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。
大多數(shù)的微藻類富含動(dòng)物所必需的多不飽和脂肪酸,表2列出了部分常規(guī)培養(yǎng)藻類的脂
肪酸組成。
表1在水產(chǎn)養(yǎng)殖中常用的微藻的蛋白質(zhì)、脂肪、碳水化合物和葉綠素a的含量
(弓I自Lavens&Sorgeloos,1996)
藻種v干重蛋白質(zhì)脂肪碳水化合物葉綠素a
pg/cellpg/cell%pg/cell%pg/cell%pg/cell%DW
DWDWDW
硅藻綱
鈣質(zhì)角毛藻11.33.833.61.815.90.686.00.343
纖細(xì)角毛藻74.89.0125.272.02.70.781
小新月菱形藻-----
三角褐指藻76.723.03010.7146.48.30.410.5
中肋骨條藻.52.213.125.15.09.62.44.60.631.2
海鏈藻28.49.734.25.519.42.58.80.271
T.pseudonana
綠藻綱
鹽藻99.920.02015.01512.212.21.731.7
D.tertiolecta
微綠球藻21.46.429.94.5215.023.40.0800.4
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