血凝實驗真菌檢查法

血凝實驗真菌檢查法第一頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期一1、血凝試驗

（1份/人）2、真菌檢查法（1份/人）3、真菌大小培養(yǎng)觀察4、觀察梅毒螺旋體形態(tài)（示教）5、性病防治（錄像）實驗內(nèi)容第二頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期一掌握真菌檢查實驗原理及方法掌握血凝實驗原理及方法

熟悉螺旋體及支原體形態(tài)學觀察方法

二、教學目的及教學要求第三頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期一（一）、病毒血凝實驗原理：某些病毒由于表面有由糖蛋白組成的血凝素（HA），在一定條件下，能與某些動物或人的紅細胞表面的糖蛋白受體結(jié)合產(chǎn)生凝集，稱為紅細胞凝集試驗或血凝試驗，能形成血凝現(xiàn)象的病毒有：流感病毒、腮腺炎病毒、麻疹病毒、乙腦病毒等。第四頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期一操作步驟試管號123456789生理鹽水（ml）1:10病毒液（ml）0.50.25+0.250.25+0.250.25+0.250.25+0.250.25+0.250.25+0.250.25+0.250.25--病毒稀釋度1∶101∶201∶401∶801∶1601∶3201∶6401:1280對照0.5%雞紅細胞懸液（ml）每管0.25ml

搖勻后，靜置室溫30-60min,觀察結(jié)果棄去0.25ml*觀察結(jié)果時要輕拿、勿搖動第五頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期一血凝試驗結(jié)果判定結(jié)果觀察：凝集特別顯著：“＋＋＋＋”凝集現(xiàn)象次之：“＋＋＋”凝集清楚可見：“＋＋”稍顯凝集者：“＋”血凝效價：呈“＋＋”凝集時的最高稀釋度為最終滴度。第六頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期一意義檢查病毒的存在。滴定病毒的血凝效價，采用一定的病毒量進行其他實驗，通常采用4個血凝單位。第七頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期一（二）、真菌檢查法（1份/人）

概念：真菌是一大類具有細胞壁和典型細胞核不含葉綠素，不分根、莖、葉的真核細胞型微生物。分類：單細胞和多細胞第八頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期一單細胞真菌：呈圓形或卵圓形常見于酵母菌，類酵母菌以出芽方式繁殖。卵圓形G+，著色不一可見假菌絲白假絲酵母第九頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期一多細胞真菌形態(tài)菌絲孢子第十頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期一真菌基本形態(tài)單細胞真菌：白假絲酵母，卵圓形，革蘭染色陽性，著色不一，可見假菌絲。多細胞真菌：絲狀菌或霉菌，有菌絲和孢子。煙曲霉白假絲酵母第十一頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期一菌落特征:

酵母型真菌類酵母型真菌

絲狀菌落單細胞多細胞第十二頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期一

酵母型菌落類酵母型菌落第十三頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期一酵母型菌落類酵母型菌落第十四頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期一真菌的菌落白假絲酵母：菌落圓形，較大，白色菌落底層有假菌絲多細胞真菌：觀察氣生菌絲，營養(yǎng)菌絲，表面隆起，淺溝及菌落基底顏色。白假絲酵母(血平板)黃曲霉第十五頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期一1、營養(yǎng)要求不高，常用沙保弱培養(yǎng)基培養(yǎng)。2、生長緩慢，培養(yǎng)1—4周才出現(xiàn)典型菌落。3、培養(yǎng)溫度為22--28℃，但某些深部真菌最適生長溫度為37℃。4、最適酸堿度為PH4.0—6.0。5、濕度要求較高。真菌培養(yǎng)特性第十六頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期一原理直接涂片檢查用顯微鏡直接檢查標本中有無菌絲及孢子的存在，對皮膚絲狀菌的感染可作初步診斷，本法簡單迅速易行。

第十七頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期一

材料

標本:腳皮等試劑:10％KOH

器具:玻片、鑷子、酒精燈等第十八頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期一方法

KOH透明法（1）取腳皮少許于玻片上，加二滴10%K0H溶液，覆蓋一蓋玻片，置火焰上微微加熱，以加速角質(zhì)溶解，使標本透明，然后微微加壓，使成薄片，并需驅(qū)去氣泡，用吸水紙吸去周圍溢液，（如為毛發(fā)標本，切忌加熱加壓過甚，以保持毛發(fā)原形為宜，便于觀察真菌與毛發(fā)的關(guān)系）顯微鏡檢查。（2）將已制備的標本片，先用低倍鏡檢查，然后再用高倍鏡證實第十九頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期一注意：蓋玻片傾斜45度慢慢蓋上，不能產(chǎn)生氣泡！標本片制備第二十頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期一真菌檢查鏡下觀報告：“找到菌絲或孢子”“找到發(fā)外孢子”“找到發(fā)內(nèi)菌絲”第二十一頁，共二十三頁，編輯于2023年，星期一

（三）、支原體支原體是一類沒有細胞壁，呈多形性，能在無生命的培養(yǎng)基中生長繁殖的最小微生物。大小介于細菌和病毒之間。普通染色不易著色，用Giemsa染色著色較淺。革蘭染色為陰性。營養(yǎng)要求較高，需要在含10～20%馬血清和酵母浸液的培養(yǎng)基上生長。最適的pH7.8～

8.0.生長緩慢,在固