白血病淋巴瘤免疫分型課件

1流式細(xì)胞術(shù)的基本概念流式細(xì)胞術(shù)（FlowCytometry,簡稱FCM）是一種可以快速、準(zhǔn)確、客觀，并且同時(shí)檢測單個(gè)微粒（通常是細(xì)胞）的多項(xiàng)特性的技術(shù)，同時(shí)可以對特定群體加以分選研究對象為生物顆粒，如各種細(xì)胞、微生物及人工合成微球等研究的微粒特性包括多種物理及生物學(xué)特征，并加以定量2散射光信號和熒光信號前向角散射光（FSC,ForwardScatter） 入射激光的前向散射光信號 細(xì)胞相對大小及其表面積側(cè)向角散射光（SSC,SideScatter） 入射激光90角的散射光信號 細(xì)胞粒度及細(xì)胞內(nèi)相對復(fù)雜性熒光素與特異抗體結(jié)合，熒光抗體與細(xì)胞抗原結(jié)合越多，產(chǎn)生的熒光信號越強(qiáng)。3CD45/SS示意圖4實(shí)驗(yàn)對照的設(shè)計(jì)空白對照：ALL陰性對照：常用同型抗體對照單色分析：設(shè)同型抗體對照多色分析：同型對照，單陽性對照（用于儀器校正）陽性對照：檢測陰性時(shí)5空白對照和陰性對照的比較：6CD3CD8需要用多少的標(biāo)志來確證感興趣的細(xì)胞群?它們在細(xì)胞上的分布是不是很近?它們是否在不同的細(xì)胞上表達(dá)不同?他們表達(dá)強(qiáng)還是弱?抗原表達(dá)

CD3CD4CD3CD87抗原分布

表面,胞漿,核內(nèi)是共同檢測還是分別檢測?表面胞漿核內(nèi)CD3,CD4,CD8,tetramercytokinesDNACD3,4,8,tetramer+CytokinesCD3,4,8,tetramer+DNACytokines+DNACD3,4,8,tetramer+Cytokines+DNACD4+CD8-+++++——流式細(xì)胞術(shù)（FlowCytometry,簡稱FCM）是一種可以快速、準(zhǔn)確、客觀，并且同時(shí)檢測單個(gè)微粒（通常是細(xì)胞）的多項(xiàng)特性的技術(shù)，同時(shí)可以對特定群體加以分選5TdTTdTCD14根據(jù)白血病細(xì)胞表達(dá)的系列相關(guān)抗原，確定其系列來源。T-CellLGLLCD24CD7CD15CD3,CD4,CD8,tetramerCLLandNon-HodgkinsLymphomaCD4+CD8+——+/-+/-—如：M6、M7、M0等。確定腫瘤細(xì)胞的系列：T、B、組織細(xì)胞、髓系、非造血系。B-CellLineageLGL某些情況下還需要進(jìn)行免疫組化、分子/細(xì)胞遺傳學(xué)檢查。CD20CD5CD13慢性淋巴細(xì)胞增殖性疾病

（ChronicLymphoproliferativeDisease）CD10CD8CD33HairyCellLeukemiaCD3,4,8,tetramer確定淋巴瘤的分期：檢測有否血液、骨髓和體液的累及。8設(shè)門08-033079設(shè)門全部細(xì)胞門內(nèi)細(xì)胞08-03307疾病監(jiān)測：微小殘留病的監(jiān)測，判斷療效（血液、骨髓、細(xì)針穿刺標(biāo)本），確定瘤細(xì)胞表型變化，監(jiān)測Retuximab(抗CD20)治療前后的CD20定量變化，自體干細(xì)胞移植中干細(xì)胞收獲時(shí)的瘤細(xì)胞檢測等等.SIg+/-+++++++CD20CD5CD13根據(jù)白血病細(xì)胞表達(dá)的系列相關(guān)抗原，確定其系列來源。CD13+and/orCD117+and/orCD33+如：淋系T/B、粒單系、紅系、巨核系等。某些情況下還需要進(jìn)行免疫組化、分子/細(xì)胞遺傳學(xué)檢查。淋巴瘤免疫分型可以區(qū)分反應(yīng)性與瘤性細(xì)胞：活檢、細(xì)針穿刺與體液標(biāo)本均可；某些情況下還需要進(jìn)行免疫組化、分子/細(xì)胞遺傳學(xué)檢查。6、沒有異常免疫表型的T細(xì)胞淋巴瘤也可能很難檢測。B-CLL：3-5分；雖然是惡性腫瘤細(xì)胞，但仍能表達(dá)正常血細(xì)胞所具有的抗原，因而仍可依據(jù)其抗原的表達(dá)譜對白血病/淋巴瘤進(jìn)行免疫分型。WHO認(rèn)為，淋巴細(xì)胞性白血病和淋巴瘤為同一種疾病：傳統(tǒng)上淋巴瘤和白血病是兩種不同的疾病，現(xiàn)在從形態(tài)、免疫和遺傳學(xué)來看，淋巴瘤和白血病是同一疾病的不同時(shí)相（瘤體期或彌散期/循環(huán)期），將它們分開純粹是人為的。SIg+/-+++++++HCL：毛細(xì)胞型白血??；嗜堿性粒細(xì)胞M4、M5、ALL慢性淋巴細(xì)胞增殖性疾病

（ChronicLymphoproliferativeDisease）CD7+and/orCD2+101112血液腫瘤分類進(jìn)程13目前最完善的血液腫瘤免疫分型文獻(xiàn)14白血病免疫分型的理論基礎(chǔ)

白血病/淋巴瘤免疫分型采用的抗原標(biāo)志是表達(dá)于正常造血細(xì)胞不同分化發(fā)育階段的分化抗原。雖然是惡性腫瘤細(xì)胞，但仍能表達(dá)正常血細(xì)胞所具有的抗原，因而仍可依據(jù)其抗原的表達(dá)譜對白血病/淋巴瘤進(jìn)行免疫分型。為了正確分析白血病/淋巴瘤細(xì)胞，必須對正常造血細(xì)胞分化抗原的表達(dá)模式有充分的了解。只有熟悉正常細(xì)胞的抗原表達(dá)模式，才能辨認(rèn)白血病/淋巴瘤細(xì)胞的存在。15細(xì)胞類型鑒定Borowitzetal(1993)AJCP100:534-40.Steltzeretal(1993)AnnNYAcadSci667:265-28016CD45/SS示意圖正常骨髓細(xì)胞血液腫瘤細(xì)胞老化粒細(xì)胞、噬酸細(xì)胞早幼—成熟粒細(xì)胞M3、CML單核細(xì)胞M4、M5LGL淋巴細(xì)胞CLL、ALL、CLD正常前體細(xì)胞M0、M1、M2、嗜堿性粒細(xì)胞M4、M5、ALL成熟紅細(xì)胞、血小板M6、M7、MM細(xì)胞碎片Pre-B-ALL

非血液來源細(xì)胞17B淋巴細(xì)胞分化與抗原表達(dá)關(guān)系圖WoodandBorowitz(2006)Henry’sLaboratoryMedicine18T淋巴細(xì)胞分化與抗原表達(dá)關(guān)系圖WoodandBorowitz(2006)Henry’sLaboratoryMedicine19粒細(xì)胞分化與抗原表達(dá)關(guān)系圖WoodandBorowitz(2006)Henry’sLaboratoryMedicine20單核細(xì)胞分化與抗原表達(dá)關(guān)系圖WoodandBorowitz(2006)Henry’sLaboratoryMedicine21非腫瘤T淋巴細(xì)胞表型WHO認(rèn)為，淋巴細(xì)胞性白血病和淋巴瘤為同一種疾病：傳統(tǒng)上淋巴瘤和白血病是兩種不同的疾病，現(xiàn)在從形態(tài)、免疫和遺傳學(xué)來看，淋巴瘤和白血病是同一疾病的不同時(shí)相（瘤體期或彌散期/循環(huán)期），將它們分開純粹是人為的。T-cell:CD4,CD7,CD8,CD2,CD56慢性淋巴細(xì)胞增殖性疾病

（ChronicLymphoproliferativeDisease）WoodandBorowitz(2006)Henry’sLaboratoryMedicine9、HL的腫瘤細(xì)胞水平低，所以免疫表型檢測或診斷HL不可靠。B細(xì)胞的不同克隆性表達(dá)如:CD71、GPA、CD41、CD611CD19CD2CD117FollicularCell慢性淋巴細(xì)胞增殖性疾病

（ChronicLymphoproliferativeDisease）疾病監(jiān)測：微小殘留病的監(jiān)測，判斷療效（血液、骨髓、細(xì)針穿刺標(biāo)本），確定瘤細(xì)胞表型變化，監(jiān)測Retuximab(抗CD20)治療前后的CD20定量變化，自體干細(xì)胞移植中干細(xì)胞收獲時(shí)的瘤細(xì)胞檢測等等.CD16———+/-++10、治療或復(fù)發(fā)可能引起腫瘤細(xì)胞表面抗原改變。1、纖維化、硬化的骨髓可能沒有足夠的細(xì)胞分析。4、組織結(jié)構(gòu)關(guān)系、形態(tài)關(guān)系丟失。成熟B-ALL++++/——/++L3慢性淋巴細(xì)胞增殖性疾病

（ChronicLymphoproliferativeDisease）另外，正常漿細(xì)胞的表面標(biāo)記為CD19+/CD56-，而多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞通常為CD19-/CD56+。T-CellLineageB-CLL與類似淋巴瘤的免疫表型Common-B-ALL22非腫瘤B淋巴細(xì)胞表型23非腫瘤粒細(xì)胞、單核細(xì)胞表型24非腫瘤粒細(xì)胞、單核細(xì)胞表型25白血病免疫分型根據(jù)白血病細(xì)胞表達(dá)的系列相關(guān)抗原，確定其系列來源。如：淋系T/B、粒單系、紅系、巨核系等。根據(jù)白血病細(xì)胞表達(dá)的系列分化其相關(guān)抗原進(jìn)一步分型。如：早前B，前B，普通B…26EGIL，1998年白血病積分系統(tǒng)分值B系T系髓系2CD79aCD3MPO(cyt)CD22TCRα/β(cyt)IgMTCRγ/δ1CD19CD2CD117CD20CD5CD13CD10CD8CD33CD10CD650.5TdTTdTCD14CD24CD7CD15CD1aCD64*當(dāng)髓系和一個(gè)淋系積分均>2分時(shí)，則診斷為急性混合細(xì)胞型白血病。27急性白血病的四大免疫類型單表型急性白血病表達(dá)某一個(gè)系列抗原為主的急性白血病雙表型/雙克隆急性白血病未分化型急性白血病28初治急白分型AcuteLeukemia–BlastsPresent>20%MyeloidLineageCD13+and/orCD117+and/orCD33+CD7+and/orCD2+CD19+T-LineageB-LineageMyeloid,noorminimalmaturationCD34+/-CD117+/-HLADR+CD56+CD15-/+CD11b-,CD14-PromyeloidCD15+/-CD117+/-CD34-HLADR-CD11b-,CD14-CD14+CD4+/-HLADR+CD15+CD11b+Myelomonocytic&Monocytic紅系和巨核系的鑒定需要另外增加二線抗體。如:CD71、GPA、CD41、CD61淋巴瘤免疫分型可以區(qū)分反應(yīng)性與瘤性細(xì)胞：活檢、細(xì)針穿刺與體液標(biāo)本均可；目前最完善的血液腫瘤免疫分型文獻(xiàn)嗜堿性粒細(xì)胞M4、M5、ALLCD19++++++++++CD57———+++WoodandBorowitz(2006)Henry’sLaboratoryMedicineFirst:CD5,CD19,kappa,lamda1、纖維化、硬化的骨髓可能沒有足夠的細(xì)胞分析。單核細(xì)胞分化與抗原表達(dá)關(guān)系圖細(xì)胞相對大小及其表面積(約12-15Ab)慢性淋巴細(xì)胞增殖性疾病

（ChronicLymphoproliferativeDisease）慢性淋巴細(xì)胞增殖性疾病

（ChronicLymphoproliferativeDisease）B細(xì)胞的不同克隆性表達(dá)細(xì)胞碎片Pre-B-ALLCommon-B-ALLT細(xì)胞克隆（TCRVβ分析）T-CellLineageT-cell:CD4,CD7,CD8,CD2,CD56T-CellLymphoma29AML-M1FMC-7——++++++Myelomonocytic&MonocyticFirst:CD5,CD19,kappa,lamda根據(jù)白血病細(xì)胞表達(dá)的系列相關(guān)抗原，確定其系列來源。CD11b-,CD14-雖然定義淋巴瘤是綜合考慮的結(jié)果，但在具體確定一種淋巴瘤時(shí)其側(cè)重點(diǎn)有所不同。正常骨髓細(xì)胞血液腫瘤細(xì)胞研究對象為生物顆粒，如各種細(xì)胞、微生物及人工合成微球等PlasmaCell入射激光的前向散射光信號細(xì)胞相對大小及其表面積SIg：膜免疫球蛋白；LGLCLL來源于B細(xì)胞，具有免疫球蛋白重鏈或輕鏈基因重排，CLL細(xì)胞主要為較正常淋巴細(xì)胞稍大的小淋巴細(xì)胞。10、治療或復(fù)發(fā)可能引起腫瘤細(xì)胞表面抗原改變。T-CellLymphoma1、纖維化、硬化的骨髓可能沒有足夠的細(xì)胞分析。CLL來源于B細(xì)胞，具有免疫球蛋白重鏈或輕鏈基因重排，CLL細(xì)胞主要為較正常淋巴細(xì)胞稍大的小淋巴細(xì)胞。根據(jù)白血病細(xì)胞表達(dá)的系列相關(guān)抗原，確定其系列來源。T-ALL+—++L1,L230AML-M131AML-M232AML-M233AML-M334AML-M4白血病/淋巴瘤免疫分型采用的抗原標(biāo)志是表達(dá)于正常造血細(xì)胞不同分化發(fā)育階段的分化抗原。4、組織結(jié)構(gòu)關(guān)系、形態(tài)關(guān)系丟失。MarginalZoneLymphoma細(xì)胞碎片Pre-B-ALL雖然定義淋巴瘤是綜合考慮的結(jié)果，但在具體確定一種淋巴瘤時(shí)其側(cè)重點(diǎn)有所不同。CD19++++++++++細(xì)胞相對大小及其表面積FMC-7——++++++淋巴瘤免疫分型可以區(qū)分反應(yīng)性與瘤性細(xì)胞：活檢、細(xì)針穿刺與體液標(biāo)本均可；根據(jù)白血病細(xì)胞表達(dá)的系列相關(guān)抗原，確定其系列來源。Borowitzetal(1993)AJCP100:534-40.CD5++—++——正常漿細(xì)胞為CD38+/CD45dim/-，使用CD38/CD45雙標(biāo)記檢測外周血和骨髓標(biāo)本，可以準(zhǔn)確劃定漿細(xì)胞群。MarginalZoneLymphomaSIg+/-+++++++CD10CD65如:CD71、GPA、CD41、CD61T-CLL與類似淋巴瘤的免疫表型為了正確分析白血病/淋巴瘤細(xì)胞，必須對正常造血細(xì)胞分化抗原的表達(dá)模式有充分的了解。CD19++++++++++35AML-M436AML-M537AML-M638初治急淋分型AcuteLeukemia–BlastsPresent>20%CD7+and/orCD2+CD19+T-LineageB-LineageCommonThymocyteMatureThymocyteCD2+CD5+DualCD4+/CD8+sCD3-CD2+CD5+CD4+orCD8+sCD3+CD2-/+CD5-/+sCD3-CD4-CD8-TdT+CD10-clg-sig-Pre-BCD10+cig+TdT+sig-Bsig+CD10+/-clg+/-TdT-CommonTdT+CD10+clg-sig-EarlyThymocyteEarlyB-Precursor39

B細(xì)胞系A(chǔ)LL的免疫分型

亞型CD19CD20HLA-DRCD10CyIgSmIgFAB分型早前B-ALL+—+———L1,L2

前B-ALL+—/++++—L1普通B-ALL++/—++——L1,L2成熟B-ALL++++/——/++L340B-ALL41Pre-BALL42Common-B-ALL43

T細(xì)胞系A(chǔ)LL的免疫分型

亞型CD7CD1aCD2TdTFAB分型早前T-ALL+——+L1,L2胸腺皮質(zhì)T-ALL++++L1,L2T-ALL+—++L1,L244T-ALLCD11b-,CD14-T-CLL與類似淋巴瘤的免疫表型Myelomonocytic&Monocytic入射激光的前向散射光信號5TdTTdTCD14CD79b+/-++++++++慢性淋巴細(xì)胞增殖性疾病

（ChronicLymphoproliferativeDisease）ScorePoints確定淋巴瘤的分期：檢測有否血液、骨髓和體液的累及。B-CLL：3-5分；而CD38,ZAP-70,Ki67等抗原的表達(dá)與CLL預(yù)后有密切關(guān)系。某些情況下還需要進(jìn)行免疫組化、分子/細(xì)胞遺傳學(xué)檢查。1CD19CD2CD117淋巴瘤免疫分型可以區(qū)分反應(yīng)性與瘤性細(xì)胞：活檢、細(xì)針穿刺與體液標(biāo)本均可；SIg：膜免疫球蛋白；CD4+CD8+——+/-+/-—4、組織結(jié)構(gòu)關(guān)系、形態(tài)關(guān)系丟失。SIg+/-+++++++CD4+CD8+——+/-+/-—CD57———+++45T-ALL46HAL（T/M雙克?。?748

白血病免疫分型的價(jià)值確定ALL的細(xì)胞類型（B細(xì)胞或T細(xì)胞）和ALL的分化階段。鑒定AML的特征。對形態(tài)學(xué)上未分化的急性白血病有助于鑒定細(xì)胞類型。診斷一些少見類型的白血病。如：M6、M7、M0等。49

診斷雙表型/混合細(xì)胞型急性白血病。鑒別診斷ALL伴有髓系抗原表達(dá)（My+）或AML伴有淋系抗原表達(dá)（Ly+）。鑒別急性白血病與其他造血系統(tǒng)和非造血系統(tǒng)惡性腫瘤。根據(jù)一些特殊的免疫表型特征診斷與某核型異常相關(guān)的亞型。如：M3/t(15;17);M2/t(8;21);M4Eo/inv(16)等。50淋巴瘤免疫分型

非何杰金淋巴瘤(non-Hodgkin'slymphoma)是淋巴系統(tǒng)的一類具有組織和生物學(xué)異質(zhì)性的惡性克隆性疾病。世界衛(wèi)生組織（WHO）結(jié)合形態(tài)學(xué)、免疫表型、基因分型、正常細(xì)胞組成及臨床行為，，新修訂了歐美淋巴瘤分類系統(tǒng)（REAL分類）對淋巴系統(tǒng)腫瘤的分類。這種分類方法在觀察者的組內(nèi)及組間的重復(fù)率為85-95%。WHO淋巴瘤分類是建立在疾病病理形態(tài)、免疫表型、遺傳學(xué)特征、臨床特點(diǎn)的綜合資料基礎(chǔ)上：病理形態(tài)是分類的基礎(chǔ)，大多數(shù)淋巴瘤僅靠病理形態(tài)就能做出明確診斷；免疫表型和遺傳學(xué)特征是確定每一淋巴瘤的重要指標(biāo)，是達(dá)成共識(shí)的客觀依據(jù)，有助于提高診斷的可重復(fù)性，具有鑒別診斷和預(yù)后判斷的輔助作用，但在淋巴瘤診斷中并非必不可少；臨床特點(diǎn)，特別是腫瘤原發(fā)部位，如節(jié)內(nèi)或節(jié)外（皮膚、中樞神經(jīng)、胃腸、縱膈、鼻腔），是確定某些淋巴瘤的重要指標(biāo)。雖然定義淋巴瘤是綜合考慮的結(jié)果，但在具體確定一種淋巴瘤時(shí)其側(cè)重點(diǎn)有所不同。51淋巴瘤病理分類的演進(jìn)

形態(tài)學(xué)（Kiel分期）

形態(tài)學(xué)加臨床特點(diǎn)(IWF)

形態(tài)學(xué)、免疫表型、遺傳特點(diǎn)和臨床特點(diǎn)

(REALWHO分類）

52

WHO認(rèn)為，淋巴細(xì)胞性白血病和淋巴瘤為同一種疾?。簜鹘y(tǒng)上淋巴瘤和白血病是兩種不同的疾病，現(xiàn)在從形態(tài)、免疫和遺傳學(xué)來看，淋巴瘤和白血病是同一疾病的不同時(shí)相（瘤體期或彌散期/循環(huán)期），將它們分開純粹是人為的。淋巴瘤的臨床行為決定了臨床工作中的治療策略，WHO分類系統(tǒng)更多的采用與生物學(xué)特點(diǎn)相關(guān)的淋巴瘤診斷和分類方法，基于淋巴瘤的免疫和分子生物學(xué)特點(diǎn)的治療方法也不斷涌現(xiàn)，這些在將來會(huì)大大提高針對淋巴瘤的不同特點(diǎn)進(jìn)行的治療。53淋巴瘤免疫分型意義

淋巴瘤免疫分型可以區(qū)分反應(yīng)性與瘤性細(xì)胞：活檢、細(xì)針穿刺與體液標(biāo)本均可；確定腫瘤細(xì)胞的系列：T、B、組織細(xì)胞、髓系、非造血系。分類中根據(jù)免疫表型和DNA含量，可確定低、中、高度惡性程度。區(qū)別不同類型腫瘤細(xì)胞：伯基特細(xì)胞，淋巴母細(xì)胞，濾泡型細(xì)胞（小細(xì)胞混合和/或大細(xì)胞），小淋巴細(xì)胞，套細(xì)胞，彌散小細(xì)胞或大細(xì)胞，免疫母細(xì)胞。確定淋巴瘤的分期：檢測有否血液、骨髓和體液的累及。疾病監(jiān)測：微小殘留病的監(jiān)測，判斷療效（血液、骨髓、細(xì)針穿刺標(biāo)本），確定瘤細(xì)胞表型變化，監(jiān)測Retuximab(抗CD20)治療前后的CD20定量變化，自體干細(xì)胞移植中干細(xì)胞收獲時(shí)的瘤細(xì)胞檢測等等.54淋系腫瘤WHO分類55淋巴瘤診斷的必查項(xiàng)目根據(jù)淋巴結(jié)或骨髓活檢進(jìn)行診斷,至少需要對一個(gè)腫瘤組織的石蠟塊的所有切片進(jìn)行血液病理學(xué)檢查.如果認(rèn)為樣本組織不能確診,則需要重新活檢。腫塊細(xì)針穿刺（FNA）不宜作為淋巴瘤初始診斷的依據(jù)。但是在某些情況下，F(xiàn)NA結(jié)合細(xì)胞形態(tài)學(xué)和流式細(xì)胞學(xué)檢查也可以為診斷提供足夠的信息，特別是在診斷CLL時(shí)。某些情況下還需要進(jìn)行免疫組化、分子/細(xì)胞遺傳學(xué)檢查。CD19++++++++++確定腫瘤細(xì)胞的系列：T、B、組織細(xì)胞、髓系、非造血系。T-CellLineage某些情況下還需要進(jìn)行免疫組化、分子/細(xì)胞遺傳學(xué)檢查。1、纖維化、硬化的骨髓可能沒有足夠的細(xì)胞分析。WHO認(rèn)為，淋巴細(xì)胞性白血病和淋巴瘤為同一種疾?。簜鹘y(tǒng)上淋巴瘤和白血病是兩種不同的疾病，現(xiàn)在從形態(tài)、免疫和遺傳學(xué)來看，淋巴瘤和白血病是同一疾病的不同時(shí)相（瘤體期或彌散期/循環(huán)期），將它們分開純粹是人為的。WHO淋巴瘤分類是建立在疾病病理形態(tài)、免疫表型、遺傳學(xué)特征、臨床特點(diǎn)的綜合資料基礎(chǔ)上：病理形態(tài)是分類的基礎(chǔ)，大多數(shù)淋巴瘤僅靠病理形態(tài)就能做出明確診斷；早前B-ALL+—+———L1,L2CD4+CD8+——+/-+/-—確定腫瘤細(xì)胞的系列：T、B、組織細(xì)胞、髓系、非造血系。研究的微粒特性包括多種物理及生物學(xué)特征，并加以定量普通B-ALL++/—++——L1,L2正常骨髓細(xì)胞血液腫瘤細(xì)胞根據(jù)白血病細(xì)胞表達(dá)的系列相關(guān)抗原，確定其系列來源。B-CLL：3-5分；CD10CD65CD57———+++CD19++++++++++56流式細(xì)胞術(shù)檢測到的成熟淋巴細(xì)胞常見異常表型

淋巴細(xì)胞某一亞群的擴(kuò)增異常抗原表達(dá)——高/低/缺失/異常共表達(dá)細(xì)胞形態(tài)增大57淋巴細(xì)胞正常淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞增殖性疾?。寺U(kuò)增）58B細(xì)胞可隆性的確定是通過檢測證實(shí)所以B細(xì)胞僅表達(dá)一種輕鏈或重鏈:

Lightchains:“kappa”or“l(fā)ambda”

Heavychains:IgG,IgA,IgM

59B細(xì)胞的不同克隆性表達(dá)Normal:k50;λ39k2;λ98+k3;λ93+k86;λ<1k1;λ99k5;λ84+k99+;λ1K99+;λ160慢性淋巴細(xì)胞增殖性疾病

（ChronicLymphoproliferativeDisease）

CLL來源于B細(xì)胞，具有免疫球蛋白重鏈或輕鏈基因重排，CLL細(xì)胞主要為較正常淋巴細(xì)胞稍大的小淋巴細(xì)胞。免疫分型主要為：SIgM、SIgD弱表達(dá)，B系抗原為CD19、CD20、CD23、CD79a與CD5共表達(dá)。而CD38,ZAP-70,Ki67等抗原的表達(dá)與CLL預(yù)后有密切關(guān)系。CLL與其它某些淋巴瘤在形態(tài)學(xué)上相似，但在免疫表型上卻各有特點(diǎn)。61慢淋和B淋巴瘤分類CLLandNon-HodgkinsLymphomaNKLGLCD2+CD3+T-CellLineageCD38+CD2-,CD19-PlasmaCellLeukemia/MyelomaB-CellLineageCD19+ClonalIgCD16+and/orCD56+CD2+,CD3-CD5-CD10-CD10+FollicularCellOrBurkitt’sLymphomaSLVLorMarginalZoneLymphomaorHairyCellLeukemiaCD5+B-CLLorMantleCellLymphomaMCL：t(11;14)；NCCN要求對所有CLL患者檢測t(11;14)或CCND1表達(dá)62ALL/CLL?1、纖維化、硬化的骨髓可能沒有足夠的細(xì)胞分析。確定腫瘤細(xì)胞的系列：T、B、組織細(xì)胞、髓系、非造血系。疾病監(jiān)測：微小殘留病的監(jiān)測，判斷療效（血液、骨髓、細(xì)針穿刺標(biāo)本），確定瘤細(xì)胞表型變化，監(jiān)測Retuximab(抗CD20)治療前后的CD20定量變化，自體干細(xì)胞移植中干細(xì)胞收獲時(shí)的瘤細(xì)胞檢測等等.成熟紅細(xì)胞、血小板M6、M7、MM淋巴瘤病理分類的演進(jìn)

形態(tài)學(xué)（Kiel分期）

形態(tài)學(xué)加臨床特點(diǎn)(IWF)

形態(tài)學(xué)、免疫表型、遺傳特點(diǎn)和臨床特點(diǎn)

(REALWHO分類）CD3,4,8,tetramerCD11b-,CD14-5TdTTdTCD14確定腫瘤細(xì)胞的系列：T、B、組織細(xì)胞、髓系、非造血系。確定淋巴瘤的分期：檢測有否血液、骨髓和體液的累及。WoodandBorowitz(2006)Henry’sLaboratoryMedicine(cyt)IgMTCRγ/δWoodandBorowitz(2006)Henry’sLaboratoryMedicine嗜堿性粒細(xì)胞M4、M5、ALLCD2-,CD19-Common-B-ALL1、纖維化、硬化的骨髓可能沒有足夠的細(xì)胞分析。對形態(tài)學(xué)上未分化的急性白血病有助于鑒定細(xì)胞類型。細(xì)胞碎片Pre-B-ALL非血液來源細(xì)胞Total:約12-16個(gè)Ａb63評估CLD的抗體First:CD5,CD19,kappa,lamda

CD3,CD20,CD23,CD10,CD45B-cell:CD22,FMC7,CD11c,CD103CD38,CD25,CD79b,heavychain(約12-15Ab)T-cell:CD4,CD7,CD8,CD2,CD56CD16,TCRα/β，TCRγ/δ特殊用途:CD30,bcl-2,TdT

CD1a,CD34,CD71Total:約12-16個(gè)Ａb64B-CLL與類似淋巴瘤的免疫表型AntigenB-CLLHCLMantleCellLymphomaSLVLFollocularLymphomaSIg+/-+++++++CD5++—++——CD19++++++++++CD20+—++++++CD22+/-++++++++CD23++————CD79b+/-++++++++FMC-7——++++++CD10————++CD103—++———CD25+++—_+/-—CD11c+/-

++

—+/-—Antigen：抗原；SIg：膜免疫球蛋白；B-CLL：B慢淋；HCL：毛細(xì)胞型白血??；MantleCellLymphoma：套狀淋巴瘤：SLVL：絨毛樣脾淋巴瘤：FollocularLymphoma：濾泡型淋巴瘤65濾泡中心B細(xì)胞淋巴瘤增殖66慢性B淋巴細(xì)胞白血病（B-CLL）積分系統(tǒng)MarkerScorePoints10CD5PositiveNegativeCD23PositiveNegativeFMC7NegativePositiveSmIgWeakStrongCD22/CD79bWeakStrongB-CLL：3-5分；非B-CLL：0-2分67ALL/CLL？------MZL68CLL69CLL70MCL71HCL72HCL73FL74FL75DLBCL76DLBCL77CLLandNon-HodgkinsLymphomaNKLGLCD2+CD3+T-CellLineageCD38+CD2-,CD19-PlasmaCellLeukemia/MyelomaB-CellLineageCD19+ClonalIgCD16+and/orCD56+CD2+,CD3-CD4+T-CellCLLT-CellLymphomaT-PLLATLL(AdultT-CellLeukemia)T-CellLGLLCD8+CD7-SezarySyndrome慢淋和T淋巴瘤分類78T-CLL與類似淋巴瘤的免疫表型AntigenT-CLLATLLT-PLLT-LGL(CD3+)NK-LGL(CD3-)TdT—————CD1—————CD2++++++++++CD3++++++++—CD5++++++++—CD7+/-+/-++s++++CD16———+/-++CD56———+/-++CD57———+++CD4+CD8+——+/-+/-—

CD4-CD8+——+/