離體小腸平滑肌的生理特性

離體小腸平滑肌的生理特性第一頁，共十五頁，編輯于2023年，星期一[目的]通過觀察化學(xué)物質(zhì)、溫度變化對離體小腸平滑肌收縮的影響，使學(xué)生掌握離體小腸平滑肌收縮的記錄方法，加深對平滑肌某些基本特性的理解。[原理]平滑肌除具有肌肉的一般生理特性外，還具有自動節(jié)律性收縮的特性，并且受腸壁內(nèi)神經(jīng)叢與外來植物性神經(jīng)的支配。離體腸段雖然失去外來神經(jīng)的支配，但腸壁神經(jīng)叢仍存在，在適宜的條件下，仍能保持平滑肌收縮的特性及腸壁神經(jīng)叢的作用。離體小腸實驗不僅在理論上可以證明平滑肌的生理特性，而且還可用來研究各種因素對平滑肌的影響。第二頁，共十五頁，編輯于2023年，星期一[方法與步驟]一、實驗準(zhǔn)備

1.恒溫平滑肌浴槽裝置向中央標(biāo)本槽內(nèi)加入臺氏液至浴槽高度的2/3處。外部容器為水浴鍋加自來水。啟開電源，恒溫工作點定在38℃。第三頁，共十五頁，編輯于2023年，星期一2.標(biāo)本制備向兔耳緣靜脈注射空氣(或用木棒猛擊兔的后腦部)使其致死，背位固定于手術(shù)臺上，腹部剪毛后，沿正中線切開皮膚和腹壁，找到胃，以胃幽門與十二指腸交界處為起點,快速沿腸緣剪去腸系膜，然后再剪取20～30cm長的十二指腸，置于4℃左右的臺氏液中輕輕漂洗，可用注射器向腸腔內(nèi)注入臺氏液沖洗腸腔內(nèi)壁，并置于4～6℃臺氏液中備用。第四頁，共十五頁，編輯于2023年，星期一3.儀器連接實驗時將腸管剪成2～3cm的腸段，用棉線結(jié)扎腸段兩端，將一端結(jié)扎線連于浴槽內(nèi)的標(biāo)本固定鉤上，另一端連于張力換能器，適當(dāng)調(diào)節(jié)換能器的高度，使其與標(biāo)本之間松緊度合適。此相連的線必需垂直，并且不能與浴槽壁接觸，避免摩擦。用塑料管將充滿氣體的球膽或增氧泵與浴槽底部的通氣管相連，調(diào)節(jié)塑料管上的螺旋夾，讓通氣管的氣泡一個一個的溢出，為臺氏液供氧。將張力換能器輸入端與系統(tǒng)的通道相連，進(jìn)入生物機(jī)能實驗系統(tǒng)，選擇對應(yīng)通道項目為張力。第五頁，共十五頁，編輯于2023年，星期一二、實驗項目1.觀察、記錄38℃臺氏液中的腸段節(jié)律性收縮曲線。2.觀察、記錄25℃臺氏液中的腸段節(jié)律性收縮曲線。3.待中央標(biāo)本槽內(nèi)的臺氏液的溫度穩(wěn)定在38℃后，加1:10000腎上腺素1～2滴于中央標(biāo)本槽中，觀察腸段收縮曲線的改變。在觀察到明顯的作用后，用預(yù)先準(zhǔn)備好的新鮮38℃臺氏液沖洗三次。4.待腸段活動恢復(fù)正常后，再加1:10000乙酰膽堿1～2滴于中央標(biāo)本槽中，觀察腸段收縮曲線的改變，作用出現(xiàn)后同上法沖洗腸段。第六頁，共十五頁，編輯于2023年，星期一5.向中央標(biāo)本槽內(nèi)加入1mol·L-1NaOH溶液1～2滴，觀察腸段收縮曲線的改變。作用出現(xiàn)后同上法沖洗腸段。6.向中央標(biāo)本槽內(nèi)加入1mol·L-1HCl溶液1～2滴，觀察腸段收縮曲線的改變。待作用出現(xiàn)后同上法沖洗腸段。7.向中央標(biāo)本槽內(nèi)加入1%CaCl2溶液2～3滴，觀察腸段收縮曲線的改變。第七頁，共十五頁，編輯于2023年，星期一[注意事項]1.實驗動物先禁食24h，于實驗前1h喂食，然后處死,取出標(biāo)本，腸運動效果更好。2.標(biāo)本安裝好后，應(yīng)在新鮮38℃臺氏液中穩(wěn)定5～10min，有收縮活動時即可開始實驗。3.注意控制溫度。加藥前，要先準(zhǔn)備好更換用的新鮮38℃臺氏液，每個實驗項目結(jié)束后，應(yīng)立即用38℃臺氏液沖洗，待腸段活動恢復(fù)正常后，再進(jìn)行下一個實驗項目。4.實驗項目中所列舉的藥物劑量為參考劑量，若效果不明顯，可以增補(bǔ)劑量，但要防止一次性加藥過量。第八頁，共十五頁，編輯于2023年，星期一結(jié)果與分析第九頁，共十五頁，編輯于2023年，星期一一、低溫對離體腸肌活動的影響離體腸肌收縮減弱。溫度降低，腸肌細(xì)胞興奮型降低，代謝相關(guān)酶活性降低，腸肌代謝水平降低，腸肌收縮減弱。第十頁，共十五頁，編輯于2023年，星期一二、滴加腎上腺素離體腸肌收縮減弱。腎上腺素可與腸肌細(xì)胞膜上腎上腺素能受體（α、β型）結(jié)合，一方面可使Ca2+、K+外流增加，細(xì)胞膜電位發(fā)生超極化，興奮性降低；另一方面可促進(jìn)肌膜和肌漿網(wǎng)膜上鈣泵活動加強(qiáng)，使肌漿內(nèi)Ca2+濃度降低，肌張力減弱。第十一頁，共十五頁，編輯于2023年，星期一三、滴加乙酰膽堿離體腸肌收縮加強(qiáng)。乙酰膽堿可與腸肌細(xì)胞膜上M型受體結(jié)合，使肌膜上Ca2+通道開放，Ca2+內(nèi)流，肌漿內(nèi)Ca2+濃度升高，腸肌收縮加強(qiáng)。第十二頁，共十五頁，編輯于2023年，星期一四、滴加NaOH離體腸肌收縮加強(qiáng)。H+濃度降低，促進(jìn)Ca2+通道開放，Ca2+內(nèi)流增加；促進(jìn)肌漿網(wǎng)釋放Ca2+；促進(jìn)Ca2+與肌鈣蛋白結(jié)合，最終導(dǎo)致腸肌收縮加強(qiáng)。第十三頁，共十五頁，編輯于2023年，星期一五、滴加HCl離體腸肌收縮減弱。H+濃度升高，抑制Ca2+通道開放，Ca2+內(nèi)流減少；抑制肌漿網(wǎng)釋放Ca2+；抑制Ca2+與肌鈣蛋白結(jié)合，最終導(dǎo)致腸肌收縮減弱。第十四頁，共十五頁，編輯于2023年，星期一六、滴加Ca