型別檢測(cè)-oweroin-幻燈片

HPV檢測(cè)在宮頸癌

診治中的應(yīng)用胡飛紅在2003年，香港天后級(jí)藝人，梅艷芳身患癌癥，在她剛剛過(guò)完40歲生日后離開(kāi)人世宮頸癌與HPV關(guān)系豪森，德國(guó)人，2008年10月諾貝爾獎(jiǎng)獲得者研究了人乳頭狀瘤病毒與宮頸癌的關(guān)系HPV型別與宮頸病變HPV病毒通過(guò)皮膚表面的微小創(chuàng)口侵入更多的HPV病毒侵入到創(chuàng)口周圍組織并進(jìn)入上皮細(xì)胞病毒復(fù)制HPV檢測(cè)在宮頸癌診治中的臨床意義

CIN治療后，宮頸癌手術(shù)后的隨訪篩查宮頸癌高發(fā)人群：協(xié)助診斷早期宮頸癌和癌前病變：科學(xué)研究指導(dǎo)（疫苗）

常用HPV檢測(cè)方法的分析1.細(xì)胞學(xué)檢查2.組織學(xué)檢查3感染組織中HPV蛋白的檢測(cè)；3HPV感染的血清學(xué)檢查5.HPV基因組檢測(cè).1.細(xì)胞學(xué)檢查傳統(tǒng)巴氏涂片（CV）液基薄層細(xì)胞學(xué)技術(shù)(TCT)2.組織左學(xué)檢胃查（肉眼食觀察踩。陰絡(luò)道鏡壩觀察嚴(yán)。組望織檢肥查）3.感染璃組織朝中HP既V蛋白豈的檢樓測(cè)4.HP睡V感染悶的血篇清學(xué)紀(jì)檢查檢測(cè)友人體懂血清騾中是蓮否存樣在有揚(yáng)針對(duì)HP滔V產(chǎn)生備的抗池體，熔通過(guò)雹免疫檢學(xué)方鹿法進(jìn)畝行檢觀測(cè)。檢測(cè)肅人體咽血清賺中是拿否存宇在有鬧針對(duì)HP說(shuō)V產(chǎn)生避的抗艙體，報(bào)通過(guò)黎免疫待學(xué)方息法進(jìn)莊行檢逢測(cè)。HP小V基因跌檢測(cè)5.HP叼V基因熊組檢辟測(cè)1.基于PC拳R靶向壓擴(kuò)增2.基于PC朗R產(chǎn)物遠(yuǎn)分析,雜交這分析型特異PCR用型特異PCR引物-設(shè)計(jì)成能特定擴(kuò)增單個(gè)HPV基因型。一個(gè)PCR反應(yīng)僅能檢測(cè)一種型別通用引物PCR依據(jù)不同HPV亞型用共同保守序列的特點(diǎn)合成通用引物，對(duì)HPV廣譜擴(kuò)增E6，E7特異引物陽(yáng)性率遠(yuǎn)高于用L1區(qū)通用引物實(shí)時(shí)熒光定量PCR普通PCR的基礎(chǔ)上增添了熒光探針，，常用通用引物，僅多定量功能。目前兩通用探針可檢測(cè)40多種型別。1?；w于PC嗎R靶向殃擴(kuò)增（1）直接測(cè)序法對(duì)PCR產(chǎn)物的一對(duì)引物間序列進(jìn)行測(cè)序?qū)崿F(xiàn)HPV型別，避免了雜交固有的交叉反應(yīng)。特別對(duì)少見(jiàn)型和新型別作用大，但多重感染影響測(cè)序準(zhǔn)確度，病毒載量少者易被忽略。（2）限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性分析選擇合適的限制性核酸內(nèi)切酶，據(jù)特定酶切電泳條帶模式判斷型別?？蓹z測(cè)具體型別，但對(duì)特異性要求高，非特異性性條帶可致酶切后分型不準(zhǔn)確。2.基于PC遲R產(chǎn)物糠分析（1）雜交捕獲法雜交捕獲(hybridcapturesystem，HCS)實(shí)驗(yàn)是美國(guó)Digene公司新發(fā)展的一種檢測(cè)HPVDNA的技術(shù)，其原理是利用對(duì)抗體捕獲信號(hào)的放大和化學(xué)發(fā)光信號(hào)的檢測(cè)。敏感性好，重復(fù)性高，不存在交叉雜交問(wèn)題。（2）反向雜交法有線性平行雜交，點(diǎn)雜交，反向線性雜交。常用于HPV型別分布的統(tǒng)計(jì)研究中。（3）以聚笨乙稀磁鐵珠為載體的多重HPV分型方法雜交載體是磁珠，通用引物行廣譜擴(kuò)增，加入變性劑，產(chǎn)物解為單鏈，與磁珠上型別特異性探針雜交反應(yīng)。2.基于PC碗R產(chǎn)物適雜交似分析（4）基糧因芯償片技雁術(shù)雜交陪捕獲吳法雜交筆捕獲謙一代碑（HC拉-Ⅰ)試驗(yàn)算可檢殃測(cè)9種高著危型HP扁V垮,包括16、18、31、33、35、45、51、52和56。所姓用的身反應(yīng)涌載體燒是試預(yù)管；雜交光捕獲片二代婆試驗(yàn)(H婆C－Ⅱ)原來(lái)麗的試欣管法亦改為96孔平御板法角，能顆同時(shí)萌檢測(cè)13種高合危型HP鑒V崖(1捎6、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59和68時(shí))。雜交倦捕獲咐法捕獲職雜交觸法（通過(guò)星對(duì)病構(gòu)毒DN餃A解鏈,雜交暮捕獲,光信甜號(hào)放攔大獲樸取結(jié)榮果）基本眼實(shí)驗(yàn)壓步驟婚如下兔：1.樣本DN害A雙鏈池被釋挖放并達(dá)分解循為核策苷酸憲單鏈;2.攜DN扁A單鏈謝與RN鄙A探針葛結(jié)合腿為RN江A－DN培A雜交姻體;3.特異究性抗辯體將RN辟A－DN父A雜交魯體固章定在膚試管蘇壁或許微孔凝壁上;4.結(jié)合兔有堿杠性磷吊酸酶確的多燭個(gè)第閥二抗捕體與RN盲A－DN槽A雜交壞體結(jié)蒼合,使信撒號(hào)放油大;5.堿性駛磷酸青酶使攪酶底芒物發(fā)懸光,判讀容光的守強(qiáng)弱?？纱_短定堿布性磷亂酸酶?jìng)蔚暮z量,從而禍確定RN尖A－DN槐A雜交劃體的斯含量。HC摧II唯一進(jìn)通過(guò)FD頌A批準(zhǔn)購(gòu)可在繼臨床費(fèi)使用醋的HP妖V技術(shù)DN停A裂解閱→RN或A-獅DN資A雜交巷→勵(lì)抗體方捕獲剖→芒化學(xué)孝發(fā)光礦→屬計(jì)算括機(jī)判猾讀新發(fā)日展的冒一項(xiàng)用診斷軟技術(shù)絲式，在HP殖V分型井中用漁寡核乒苷酸卵原位顛合成辭法，琴原理圍是將漂疾病盾的特禍征性右基因泳片段賢或致標(biāo)病病賓原體餅片段房誠(chéng)固定挖芯片昆上，獲制成僑診斷臂芯片廢，提炭取患頭者樣單本中促核酸慈行標(biāo)劉記作舍探針墾，利乞用探雪針與胡芯片軟雜交訪，掃謝描雜碰交結(jié)姑果，辣判斷隨基因摔型分挎型是誕否被蕩感染僻，可緊診斷HP每V潛在鐮感染貌，行池早期級(jí)預(yù)防基因午芯片透技術(shù)HP菌V基因魚(yú)芯片消檢測(cè)敏感性高、特異性強(qiáng)、檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠檢測(cè)靈敏度是PCR方法的100倍針對(duì)性強(qiáng)：對(duì)樣品中的HPV-DNA直接進(jìn)行檢測(cè)。檢出HPV的潛伏期感染，克服了血清學(xué)及免疫組化檢測(cè)法對(duì)潛伏感染會(huì)產(chǎn)生漏檢的缺點(diǎn)（實(shí)現(xiàn)對(duì)疾病的早期快速診斷）操作簡(jiǎn)單：通過(guò)1次雜交檢測(cè)不僅可以判斷待檢樣品中是否存在HPV感染，而且可以鑒定出是哪種型別的HPV感染同時(shí)檢測(cè)多種HPV型別，對(duì)多重HPV.感染的判斷一目了然，克服了其他HPV.檢測(cè)方法難以判斷混合感染或操作煩瑣的缺點(diǎn)?？偨Y(jié)梨?？傊?，目換前的HP削V分型弟檢測(cè)更技術(shù)恭主要銷基于鴿聚合肢酶鏈順?lè)磻?yīng)坑。HP灑V特定翅型別增在宮觸頸疾恢病發(fā)掉展中心的重兩要作羞用，狐考慮進(jìn)到HP共V型譜愛(ài)的多呼樣性臟和多沸重性HP瞎V聯(lián)合扁感染疫的高沸發(fā)率稠，準(zhǔn)巡壽確的HP償V檢測(cè)餐顯得胳尤為陪重要紡。不刺斷尋辟求更哀準(zhǔn)確轉(zhuǎn)，快柳速有匯效的匙檢測(cè)黨技術(shù)過(guò)。注：如何迅對(duì)待HP臘V感染版？1.爺HP染V感染漂較為介常見(jiàn)2.多數(shù)HP蛛V可以聞被清爪除,“一過(guò)犧性”進(jìn)感染燈不致酬宮頸殖病變3.少數(shù)扒持續(xù)迅性感乳染會(huì)索引發(fā)疊宮頸不病變4.彼HP弊V致CI致NI、CI枕NI夫I、CI局NI舅II到浸殖潤(rùn)癌衣需要六相當(dāng)拋長(zhǎng)的矮時(shí)間拖，一遼般是8~加10年5.致宮熱頸癌華的是患高危閥型HP位V6.妨HP稠V(搞+)只說(shuō)血明是巨一種朝感染英，并骨非是蛛一種敲疾病7.沒(méi)有HP欲